種緩沖液配制

1、53種緩沖液配制緩沖液配制 作者: ivy3dball 發(fā)布日期: 2006-1-05 出自: 緩沖液F 乙醇醋酸銨緩沖液(pH3.7) 取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氫氧化銨溶液調(diào)節(jié)pH值至3.7，用水稀釋至1000ml，即得。 三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH8.0) 取三羥甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,攪拌溶解，并稀釋至1000ml,用6mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至8.0,即得。 三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH8.1) 取氯化鈣0.294g,加0.2mol/L三羥甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至8

2、.1，加水稀釋至100ml，即得。三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH9.0) 取三羥甲基氨基甲烷6.06g,加鹽酸賴氨酸3.65g、氯化鈉5.8g、乙二胺四醋酸二鈉0.37g，再加水溶解使成1000ml，調(diào)節(jié)pH值至9.0，即得。烏洛托品緩沖液 取烏洛托品75g，加水溶解后，加濃氨溶液4.2ml，再用水稀釋至250ml,即得。 巴比妥緩沖液(pH7.4)取巴比妥鈉4.42g,加水使溶解并稀釋至400ml，用2mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.4，濾過，即得。巴比妥緩沖液(pH8.6)取巴比妥5.52g與巴比妥鈉30.9g,加水使溶解成2000ml，即得。巴比妥氯化鈉緩沖液(pH7.8)取巴比妥鈉5.

3、05g,加氯化鈉3.7g及水適量使溶解,另取明膠0.5g加水適量，加熱溶解后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.8，再用水稀釋至500ml，即得。 甲酸鈉緩沖液(pH3.3) 取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氫氧化鈉溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀釋至200ml,調(diào)節(jié)pH值至3.253.30,即得。 鄰苯二甲酸鹽緩沖液(pH5.6) 取鄰苯二甲酸氫鉀10g，加水900ml,攪拌使溶解，用氫氧化鈉試液(必要時(shí)用稀鹽酸)調(diào)節(jié)pH值至5.6,加水稀釋至1000ml，混勻，即得。枸櫞酸鹽緩沖液 取枸櫞酸4.2g,加1mol/

4、L的20乙醇制氫氧化鈉溶液40ml使溶解,再用20乙醇稀釋至100ml，即得。 枸櫞酸鹽緩沖液(pH6.2) 取2.1枸櫞酸水溶液，用50氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至6.2，即得。 枸櫞酸磷酸氫二鈉緩沖液(pH4.0) 甲液：取枸櫞酸21g或無(wú)水枸櫞酸19.2g,加水使溶解成1000ml，置冰箱內(nèi)保存。乙液：取磷酸氫二鈉71.63g，加水使溶解成1000ml。 取上述甲液61.45ml與乙液38.55ml混合，搖勻，即得。 氨氯化銨緩沖液(pH8.0) 取氯化銨1.07g，加水使溶解成100ml，再加稀氨溶液(130)調(diào)節(jié)pH值至8.0，即得。 氨氯化銨緩沖液(pH10.0) 取氯化銨5.4g，加

5、水20ml溶解后，加濃氯溶液35ml，再加水稀釋至100ml，即得。 硼砂氯化鈣緩沖液(pH8.0) 取硼砂0.572g與氯化鈣2.94g，加水約800ml溶解后,用1mol/L鹽酸溶液約2.5ml調(diào)節(jié)pH值至8.0，加水稀釋至1000ml，即得。硼砂碳酸鈉緩沖液(pH10.811.2) 取無(wú)水碳酸鈉5.30g,加水使溶解成1000ml；另取硼砂1.91g，加水使溶解成100ml。臨用前取碳酸鈉溶液973ml 與硼砂溶液27ml，混勻，即得。 硼酸氯化鉀緩沖液(pH9.0) 取硼酸3.09g,加0.1mol/L氯化鉀溶液500ml使溶解，再加0.1mol/L氫氧化鈉溶液210ml，即得。 醋酸

6、鹽緩沖液(pH3.5) 取醋酸銨25g，加水25ml溶解后，加7mol/L鹽酸溶液38ml，用2mol/L鹽酸溶液或5mol/L氨溶液準(zhǔn)確調(diào)節(jié)pH值至3.5(電位法指示),用水稀釋至100ml,即得。 醋酸鋰鹽緩沖液(pH3.0) 取冰醋酸50ml，加水800ml混合后，用氫氧化鋰調(diào)節(jié)pH值至3.0，再加水稀釋至1000ml，即得。 醋酸醋酸鈉緩沖液(pH3.6) 取醋酸鈉5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀釋至250ml,即得。 醋酸醋酸鈉緩沖液(pH3.7)取無(wú)水醋酸鈉20g,加水300ml溶解后，加溴酚藍(lán)指示液1ml及冰醋酸6080ml，至溶液從藍(lán)色轉(zhuǎn)變?yōu)榧兙G色，再加水稀釋至1000ml

7、，即得。 醋酸醋酸鈉緩沖液(pH3.8)取2mol/L醋酸鈉溶液13ml與2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含銅1mg的硫酸銅溶液0.5ml,再加水稀釋至1000ml，即得。醋酸醋酸鈉緩沖液(pH4.5) 取醋酸鈉18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀釋至1000ml,即得。 醋酸醋酸鈉緩沖液(pH4.6) 取醋酸鈉5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至4.6，再加水稀釋至100ml，即得。 醋酸醋酸鈉緩沖液(pH6.0) 取醋酸鈉54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀釋至500ml，即得。醋酸醋酸鉀緩沖液(pH4.3) 取醋酸鉀14g，加冰醋酸20.5ml，

8、再加水稀釋至1000ml，即得。 醋酸醋酸銨緩沖液(pH4.5) 取醋酸銨7.7g，加水50ml溶解后，加冰醋酸6ml與適量的水使成100ml，即得。 醋酸醋酸銨緩沖液(pH6.0) 取醋酸銨100g，加水300ml使溶解，加冰醋酸7ml,搖勻，即得。 磷酸三乙胺緩沖液 取磷酸約4ml與三乙胺約7ml，加50甲醇稀釋至1000ml，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.2，即得。 磷酸鹽緩沖液 取磷酸二氫鈉38.0g，與磷酸氫二鈉5.04g,加水使成1000ml,即得。磷酸鹽緩沖液(pH2.0) 甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，搖勻。乙液：取磷酸氫二鈉71.63g，加水使溶解成1000ml。取上

9、述甲液72.5ml與乙液27.5ml混合，搖勻，即得。 磷酸鹽緩沖液(pH2.5) 取磷酸二氫鉀100g，加水800ml，用鹽酸調(diào)節(jié)pH至2.5,用水稀釋至1000ml。磷酸鹽緩沖液(pH5.0) 取0.2mol/L磷酸二氫鈉溶液一定量,用氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值至5.0，即得。磷酸鹽緩沖液(pH5.8) 取磷酸二氫鉀8.34g與磷酸氫二鉀0.87g,加水使溶解成1000ml，即得。 磷酸鹽緩沖液(pH6.5) 取磷酸二氫鉀0.68g,加0.1mol/L氫氧化鈉溶液15.2ml，用水稀釋至100ml，即得。 磷酸鹽緩沖液(pH6.6) 取磷酸二氫鈉1.74g、磷酸氫二鈉2.7g與氯化鈉1.7g，

10、加水使溶解成400ml，即得。 磷酸鹽緩沖液(含胰酶)(pH6.8) 取磷酸二氫鉀6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至6.8；另取胰酶10g，加水適量使溶解，將兩液混合后,加水稀釋至1000ml，即得。磷酸鹽緩沖液(pH6.8) 取0.2mol/L磷酸二氫鉀溶液250ml，加0.2mol/L氫氧化鈉溶液118ml，用水稀釋至1000ml，搖勻，即得。磷酸鹽緩沖液(pH7.0) 取磷酸二氫鉀0.68g，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液29.1ml，用水稀釋至100ml，即得。 磷酸鹽緩沖液(pH7.2) 取0.2mol/L磷酸二氫鉀溶液50ml與0.2mol/

11、L氫氧化鈉溶液35ml，加新沸過的冷水稀釋至200ml，搖勻，即得。 磷酸鹽緩沖液(pH7.3) 取磷酸氫二鈉1.9734g與磷酸二氫鉀0.2245g,加水使溶解成1000ml，調(diào)節(jié)pH值至7.3，即得。 磷酸鹽緩沖液(pH7.4) 取磷酸二氫鉀1.36g， 加0.1mol/L氫氧化鈉溶液79ml，用水稀釋至200ml，即得。 磷酸鹽緩沖液(pH7.6) 取磷酸二氫鉀27.22g，加水使溶解成1000ml，取50ml，加0.2mol/L氫氧化鈉溶液42.4ml，再加水稀釋至200ml，即得。磷酸鹽緩沖液(pH7.8) 甲液：取磷酸氫二鈉35.9g，加水溶解，并稀釋至500ml。乙液：取磷酸二氫

12、鈉2.76g，加水溶解，并稀釋至100ml。取上述甲液91.5ml與乙液8.5ml混合，搖勻，即得。 磷酸鹽緩沖液(pH7.88.0) 取磷酸氫二鉀5.59g與磷酸二氫鉀0.41g，加水使溶解成1000ml，即得。 磷酸鹽緩沖液的配制磷酸鹽是生物化學(xué)研究中使用最廣泛的一種緩沖劑，由于它們是二級(jí)解離，有二個(gè)pKa 值，所以用它們配制的緩沖液，pH 范圍最寬：NaH2PO4： pKa12.12，pKa27.21； Na2HPO4：pKa17.21，pKa212.32配酸性緩沖液：用NaH2PO4，pH14，配中性緩沖液：用混合的兩種磷酸鹽，pH68，配堿性緩沖液：用Na2HPO4，pH1012。用

13、鉀鹽比鈉鹽好，因?yàn)榈蜏貢r(shí)鈉鹽難溶，鉀鹽易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的緩沖液時(shí)，只能用磷酸鈉而不能用磷酸鉀，因?yàn)镾DS(十二烷基硫酸鈉)會(huì)與鉀鹽生成難溶的十二烷基硫酸鉀。磷酸鹽緩沖液的優(yōu)點(diǎn)為：容易配制成各種濃度的緩沖液；適用的pH 范圍寬；pH 受溫度的影響??；緩沖液稀釋后pH 變化小，如稀釋10倍后pH 的變化小于0.1。其缺點(diǎn)為：易與常見的鈣Ca2+離子、鎂Mg2+離子以及重金屬離子締合生成沉淀；會(huì)抑制某些生物化學(xué)過程，如對(duì)某些酶的催化作用會(huì)產(chǎn)生某種程度的抑制作用.  pH0.2mol/L NaH2PO4(ml)0.2mol/L Na2HPO4(ml)5.79

14、3.56.55.892.08.05.990.010.06.087.712.36.185.015.06.281.518.56.377.522.56.473.526.56.568.531.56.662.537.56.756.543.56.851.049.06.945.055.07.039.061.07.133.067.07.228.072.07.323.067.07.419.081.07.516.084.07.613.087.07.710.589.57.88.591.57.97.093.08.05.394.7Na2HPO4·2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液為85.

15、61克/升。Na2HPO4·2H2O分子量 = 358.22，0.2 mol/L溶液為71.64克/升。Na2HPO4·2H2O分子量 = 156.03，0.2 mol/L溶液為31.21克/升.試劑： NaH2PO4·2H2O      Na2HPO4·12H2O配制方法：配制時(shí)，常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，兩者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸鹽緩沖液（PB），根據(jù)需要可配制不同濃度的PB和PBS。（1）0.2mol/L的 Na2HPO4；稱取N

16、a2HPO4.12H2O 31.2g(或 NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。（2）0.2mol/L的 Na2HPO4：稱取NaHPO4.·12H2O 71.632g（或 Na2HPO4·7H2O 53.6g或 Na2HPO4·2H2O 35.6g）加重蒸水至1000ml溶解。（3）0.2mol/L pH7.4的PB的配制：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4·12H2O,充分混合即為0.2mol/L的PB（pH約為7.47.5）。若pH偏高或偏低，可通過改變二

17、者的比例來(lái)加以調(diào)整，室溫保存即可。0.2mol/L磷酸鹽緩沖液（pH5.78.0）pH    0.2mol/L NaH2PO4(ml)    0.2mol/L Na2HPO4(ml)5.7            93.5                 

18、60;      6.55.8            92.0                        8.05.9       &#

19、160;    90.0                      10.06.0            87.7           &#

20、160;          12.36.1            85.0                      15.0 6.2    

21、0;       81.5                      18.56.3            77.5        

22、0;             22.56.4            73.5                      26.56.5  &

23、#160;         68.5                      31.56.6            62.5      &

24、#160;               37.56.7            56.5                      43.56

25、.8            51.0                      49.06.9            45.0   

26、0;                  55.07.0            39.0                   

27、60;  61.07.1            33.0                      67.07.2            28.0 &

28、#160;                    72.07.3            23.0                 

29、     67.07.4            19.0                      81.07.5          

30、60; 16.0                      84.07.6            13.0              

31、60;       87.07.7            10.5                      89.5 7.8        

32、;      8.5                      91.57.9              7.0        &

33、#160;             93.08.0              5.3                      94.7六次

34、甲基四胺緩沖溶液（PH5.5）：稱取200g六次甲基四胺于500ml燒 杯中，加200ml水溶解，加70ml鹽酸（1+1），用水稀釋至1000ml01mol/LpH5。6的檸檬酸緩沖溶液，A液（0.1vmol/l檸檬酸）稱取分析純檸檬酸21。01g用蒸餾水溶解并定容至1升，B液，（0。1mol/l）檸檬酸鈉，稱取檸檬酸鈉29。41g用蒸餾水溶解并定容至1l，取A液55ml與B液145ml混勻，即為0。1mol/lpH5。6的檸檬酸緩沖溶液。01MolL PH56的檸檬酸緩沖液：A液(01MolL檸檬酸)：稱取分析純檸檬酸2101g，用蒸餾水溶解并定容至1L；B液（01MolL檸檬酸鈉）：稱取檸

35、檬酸鈉2941g用蒸餾水溶解并定容至1L；取A液55Ml與B液145Ml混勻，即為01MolL PH56的檸檬酸緩沖液標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液(均用pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖物質(zhì)配制)1.1 苯二甲酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液：c(KHC8H4O4)=0.05 mol/L(25時(shí)，pHs=4.003)。苯二甲酸氫鉀的pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖物質(zhì)，有小塑料袋和瓶裝兩種，配制方法如下：a)袋裝配制法：在250 mL(或500 mL)量瓶中(根據(jù)袋中標(biāo)準(zhǔn)緩沖物質(zhì)量，選擇量瓶大小)，按袋上的說明配制成所需的濃度。保存于聚乙烯瓶中。b)瓶裝配制法：稱取5.10 g苯二甲酸氫鉀(KHC8H4O4預(yù)先在115±5，烘23 h，于干燥器中冷卻)，

36、溶于水并稀釋至500 mL，混勻。保存于聚乙烯瓶中。1.2 0.025 mol/L磷酸二氫鉀(KH2PO4)和0.025 mol/L磷酸氫二鈉(Na2HPO4)混合標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液(25時(shí)，pHs=6.864)：磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉的pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖物質(zhì)，有小塑料袋裝(混合磷酸鹽)和瓶裝(兩種pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖物質(zhì)分別包裝)兩種。配制方法如下：a)袋裝配制法：在量瓶(根據(jù)袋上說明確定量瓶大小)中按袋上說明配制成所需濃度后，保存于聚乙烯瓶中。b)瓶裝配制法：迅速稱取3.40 g磷酸二氫鉀(KH2PO4)和3.55 g磷酸氫二鈉(Na2HPO4)(均預(yù)先在115±5烘23 h，于干燥器中冷卻)溶于蒸

37、餾水，轉(zhuǎn)入1 000 mL量瓶中，加水至標(biāo)線，混勻。1.3 0.008 695 mol/L磷酸二氫鉀(KH2PO4)和0.030 43 mol/L磷酸氫二鈉(Na2HPO4)標(biāo)準(zhǔn)混合緩沖溶液(25時(shí)，pH=7.413)：磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉兩種pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖物質(zhì)分別用瓶包裝，配制方法如下：迅速稱取1.18 g磷酸二氫鉀和4.31 g磷酸氫二鈉(均預(yù)先在115±5烘23 h，于干燥器中冷卻)，溶于水，全量移入1 000 mL量瓶中，加水至標(biāo)線，混勻。保存于聚乙烯瓶中。1.4 硼砂標(biāo)準(zhǔn)緩中溶液：c(Na2B4O7·10H2O)=0.010 mol/L(25時(shí)，pHs=9.182

38、)。硼砂的pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖物質(zhì)也有塑料袋裝和瓶裝兩種，配制方法如下：a)袋裝配制法：在500 mL量瓶中，按袋上說明配制成所需濃度后，分裝于5個(gè)100 mL聚乙烯瓶中，瓶口用石蠟熔封。b)瓶裝配制法：稱取1.91 g硼砂(預(yù)先在盛有蔗糖飽和溶液的干燥器中平衡兩晝夜)，溶于剛煮沸冷卻的蒸餾水，全量轉(zhuǎn)入500 mL量瓶中，加水至標(biāo)線，混勻。分裝于5個(gè)100 mL聚乙烯瓶中，瓶口用石蠟熔封，有效期為三個(gè)月，經(jīng)常使用的緩沖溶液，每周更換一次。各種標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液的pH值隨溫度的變化而變化。045的pH值列于表21中。27.1.3.2 飽和氯化鉀溶液：稱取40 g氯化鉀(KCl)，加100 mL水，充分?jǐn)嚢韬笫?/p>

39、于試劑瓶中(此溶液應(yīng)與氯化鉀固體共存)。表21 045標(biāo)準(zhǔn)緩沖物質(zhì)的pH值溫度，        苯二甲酸氫鉀(27.1.)        混合磷酸鹽(27.1.3.1.2)        磷酸鹽(27.1.3.1.3)        硼砂(27.1.3.1.4)0 &#

40、160;      4.006        6.981        7.534        9.4585        3.999       

41、 6.949        7.500        9.39110        3.996        6.921        7.472   

42、0;    9.33020        3.998        6.879        7.429        9.22625        4.003

43、        6.864        7.413        9.18230        4.010        6.852     

44、60;  7.400        9.14235        4.019        6.844        7.389        9.10540  

45、;      4.029        6.838        7.380        9.07245        4.042       &#

46、160;6.834        7.373        9.0421、PBS:取ZLI-9061 PBS溶于1000ml的蒸餾水中，混勻，測(cè)pH值應(yīng)在7.27.4之間，若偏離此范圍，請(qǐng)用0.1N的HCL或NaOH調(diào)整。 2、TBS：2.1 Tris緩沖液配方：（0.5 M  pH7.6）Tris（三羥甲基氨基甲烷）60.57g1N HCL約420ml雙蒸水加至1000mlTris緩沖液配制方法：    先以少量雙蒸水（300500ml）溶解Tris，加入HCl后，用HCl（1N）或NaOH（1N）將pH調(diào)至7.6， 最后雙蒸水加至1000ml。此液為儲(chǔ)備液，4冰箱中保存。2.2 TBS配方