氧化苦參堿的提取

1、實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一 氧化苦參堿的提取、氧化苦參堿的提取、 分離和鑒定分離和鑒定2007-12-20有機(jī)溶劑易燃易爆，注意防火。有機(jī)溶劑易燃易爆，注意防火。濃酸濃堿具有強(qiáng)烈腐蝕性、玻璃儀器易碎，加強(qiáng)濃酸濃堿具有強(qiáng)烈腐蝕性、玻璃儀器易碎，加強(qiáng)自我保護(hù)意識(shí)，注意安全。自我保護(hù)意識(shí)，注意安全。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前請(qǐng)檢查自己的實(shí)驗(yàn)儀器，如有破損請(qǐng)實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前請(qǐng)檢查自己的實(shí)驗(yàn)儀器，如有破損請(qǐng)?jiān)趯?shí)驗(yàn)開(kāi)始的前在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始的前1515分鐘內(nèi)向老師說(shuō)明。分鐘內(nèi)向老師說(shuō)明。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，請(qǐng)清掃各自的實(shí)驗(yàn)臺(tái)、實(shí)驗(yàn)儀器，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，請(qǐng)清掃各自的實(shí)驗(yàn)臺(tái)、實(shí)驗(yàn)儀器，并在老師檢查簽字后方可離開(kāi)。并在老師檢查簽字后方可離開(kāi)。安全事項(xiàng)安全事項(xiàng) 實(shí)驗(yàn)完

2、畢值日生負(fù)責(zé)清掃，按期完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。實(shí)驗(yàn)完畢值日生負(fù)責(zé)清掃，按期完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。嚴(yán)禁在試驗(yàn)期間大聲喧嘩、嬉戲打鬧！嚴(yán)禁在試驗(yàn)期間大聲喧嘩、嬉戲打鬧！實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握滲漉法的原理、操作與影響因素；掌握滲漉法的原理、操作與影響因素；掌握用離子交換樹(shù)脂法提取分離生物堿的原理和方法；掌握用離子交換樹(shù)脂法提取分離生物堿的原理和方法；掌握連續(xù)回流提取法的原理、特點(diǎn)及儀器的使用方法；掌握連續(xù)回流提取法的原理、特點(diǎn)及儀器的使用方法；學(xué)習(xí)粗提物的純化方法；學(xué)習(xí)粗提物的純化方法；進(jìn)一步理解對(duì)粗品進(jìn)行鑒識(shí)的意義及方法。進(jìn)一步理解對(duì)粗品進(jìn)行鑒識(shí)的意義及方法。 實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 ALK + H+/H2O ALKH+

3、RSO3-H+ + ALKH+ RSO3-ALKH+ + H+離子交換樹(shù)脂用離子交換樹(shù)脂用NH4OH堿化后，反應(yīng)如下：堿化后，反應(yīng)如下： RSO3-ALKH+ + NH4+OH- RSO3-NH4+ + ALK(游離生物堿游離生物堿) + H2O苦參簡(jiǎn)介苦參簡(jiǎn)介 中藥苦參是豆科植物苦中藥苦參是豆科植物苦參參（Sophora flavescens Ait）的干燥根，有清熱燥濕、殺的干燥根，有清熱燥濕、殺蟲(chóng)、利尿之功效。蟲(chóng)、利尿之功效。 苦參中主要含生物堿和黃酮類(lèi)成分。藥理實(shí)驗(yàn)證苦參中主要含生物堿和黃酮類(lèi)成分。藥理實(shí)驗(yàn)證明總生物堿有抗心律失常及抗癌活性等?？鄥⒅兄饕骺偵飰A有抗心律失常及抗癌活性

4、等?？鄥⒅兄饕?生物堿有：苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿。生物堿有：苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿。 實(shí)驗(yàn)一：氧化苦參堿的提取實(shí)驗(yàn)一：氧化苦參堿的提取苦參根（苦參根（150g）藥渣藥渣（棄去）（棄去）酸水液酸水液置琺瑯缸中，用置琺瑯缸中，用0.2%的鹽酸溶液（的鹽酸溶液（v/v）250ml充分浸潤(rùn)，放充分浸潤(rùn)，放置置20min，然后再用，然后再用0.2%的鹽酸溶液的鹽酸溶液750ml，以，以68ml/min 的速度進(jìn)行滲漉，滲漉液直接進(jìn)入交換樹(shù)脂柱。的速度進(jìn)行滲漉，滲漉液直接進(jìn)入交換樹(shù)脂柱。通過(guò)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱（通過(guò)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱（60ml），以），以68ml/min的的速度進(jìn)行交換，測(cè)定交換液的速

5、度進(jìn)行交換，測(cè)定交換液的PH值值（0,1,2,3,5,10,15,20,30,60 分鐘）。待酸水液全部分鐘）。待酸水液全部交換完畢后，將樹(shù)脂倒入燒杯中，水洗至澄明，抽干放置交換完畢后，將樹(shù)脂倒入燒杯中，水洗至澄明，抽干放置于培養(yǎng)皿中，室溫風(fēng)干。于培養(yǎng)皿中，室溫風(fēng)干。風(fēng)干后的樹(shù)脂風(fēng)干后的樹(shù)脂滲漉滲漉- -交換裝置圖交換裝置圖生物堿的定性試驗(yàn)生物堿的定性試驗(yàn) 取滲漉液取滲漉液1 ml1 ml，加硅鎢酸試劑數(shù)滴，產(chǎn)生淡黃色，加硅鎢酸試劑數(shù)滴，產(chǎn)生淡黃色取滲漉液取滲漉液1 ml1 ml，加碘碘化鉀試劑數(shù)滴，產(chǎn)生棕褐色，加碘碘化鉀試劑數(shù)滴，產(chǎn)生棕褐色取滲漉液取滲漉液1 ml1 ml，加碘化鉍鉀試劑數(shù)滴

6、，產(chǎn)生棕紅色，加碘化鉍鉀試劑數(shù)滴，產(chǎn)生棕紅色滲漉筒底部，放一塊脫脂棉（先用水濕潤(rùn)）然后滲漉筒底部，放一塊脫脂棉（先用水濕潤(rùn)）然后將潤(rùn)濕過(guò)的藥料分次加入，分層填壓，頂部蓋一將潤(rùn)濕過(guò)的藥料分次加入，分層填壓，頂部蓋一張濾紙壓上潔凈的鵝卵石。張濾紙壓上潔凈的鵝卵石。樹(shù)脂柱底部先墊入適量脫脂棉，然后適當(dāng)打開(kāi)柱樹(shù)脂柱底部先墊入適量脫脂棉，然后適當(dāng)打開(kāi)柱底部的螺旋夾，將樹(shù)脂與水混懸后倒入柱中。在底部的螺旋夾，將樹(shù)脂與水混懸后倒入柱中。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，樹(shù)脂柱中液面應(yīng)高于樹(shù)脂面，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，樹(shù)脂柱中液面應(yīng)高于樹(shù)脂面，防止氣泡進(jìn)入樹(shù)脂中，影響交換效果。防止氣泡進(jìn)入樹(shù)脂中，影響交換效果。樹(shù)脂抽干時(shí)用兩層濾紙

7、。樹(shù)脂抽干時(shí)用兩層濾紙。注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) 用繩子將實(shí)驗(yàn)臺(tái)上部分捆住，防止傾倒。用繩子將實(shí)驗(yàn)臺(tái)上部分捆住，防止傾倒。玻璃柱墊上棉花，再用鐵夾夾住。玻璃柱墊上棉花，再用鐵夾夾住。注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) 實(shí)驗(yàn)二：氧化苦參堿的純化實(shí)驗(yàn)二：氧化苦參堿的純化風(fēng)干后的樹(shù)脂風(fēng)干后的樹(shù)脂樹(shù)脂樹(shù)脂（放入回收盆中）（放入回收盆中）氯仿溶液氯仿溶液用用NH4OH 810ml堿化，悶置堿化，悶置20ml后，揮盡多后，揮盡多余氨氣，將樹(shù)脂裝入干燥的沙氏提取器中，用余氨氣，將樹(shù)脂裝入干燥的沙氏提取器中，用150ml氯仿回流提取氯仿回流提取1.5小時(shí)，取出樹(shù)脂筒。小時(shí)，取出樹(shù)脂筒。母液母液（回收）（回收）結(jié)晶結(jié)晶（供鑒定用）（供鑒

8、定用）回收至盡干，加回收至盡干，加6ml丙酮轉(zhuǎn)移至干燥的丙酮轉(zhuǎn)移至干燥的50ml錐形瓶中，加乙醚錐形瓶中，加乙醚6ml，再加入，再加入2.5g無(wú)水無(wú)水Na2SO4，振搖，振搖10min，過(guò)濾，置，過(guò)濾，置50ml干干燥的錐形瓶中，加蓋放置。燥的錐形瓶中，加蓋放置。沙氏提取裝置圖沙氏提取裝置圖請(qǐng)?jiān)趯?shí)驗(yàn)樓外揮散氨氣。請(qǐng)?jiān)趯?shí)驗(yàn)樓外揮散氨氣。沙氏提取前縫制紙筒，裝入樹(shù)脂后少量用脫脂棉沙氏提取前縫制紙筒，裝入樹(shù)脂后少量用脫脂棉覆蓋，然后將紙筒裝入沙氏提取器。覆蓋，然后將紙筒裝入沙氏提取器。提取后樹(shù)脂回收。提取后樹(shù)脂回收。實(shí)驗(yàn)前先洗凈實(shí)驗(yàn)前先洗凈2 2個(gè)個(gè)50ml50ml錐形瓶，置于烘箱中烘干。錐形瓶，置

9、于烘箱中烘干。沙氏提取器使用前、后都不能用水洗滌。沙氏提取器使用前、后都不能用水洗滌。注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) 實(shí)驗(yàn)三：氧化苦參堿的鑒定實(shí)驗(yàn)三：氧化苦參堿的鑒定 制備制備Al2O3薄層板（薄層板（3塊），點(diǎn)樣（樣品、對(duì)照品），塊），點(diǎn)樣（樣品、對(duì)照品），飽和，展開(kāi)（飽和，展開(kāi)（3種溶劑系統(tǒng)），顯色。種溶劑系統(tǒng)），顯色。鑒定鑒定 原理：吸附層析原理：吸附層析TLC薄層層析條件薄層層析條件: :吸附劑吸附劑：Al203（中性）（中性）展開(kāi)劑展開(kāi)劑： a.CHCl3-MeOH（8:2） b.CHCl3-EtOH （13:1） c.CHCl3-丙酮（丙酮（8:4）樣樣 品品：氧化苦參堿/丙酮液標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)品：氧化苦參堿/丙酮液顯色劑顯色劑：碘化鉍鉀 制備制備TLCTLC飽和飽和展開(kāi)展開(kāi)顯色顯色制備制備TLCTLC時(shí)，時(shí)，Al2O3用量適中，鋪制時(shí)用力均勻。用量適中，鋪制時(shí)用力均勻。TLCTLC展開(kāi)前先將展開(kāi)前先將TLCTLC放入展開(kāi)槽飽和放入展開(kāi)槽飽和, ,可以改善展開(kāi)效果?？梢愿纳普归_(kāi)效果。顯色時(shí)，可以將顯色時(shí)，可以將TLCTLC倒置，噴壺不能離倒置，噴壺不能離TLCTLC太近。太近。TLCTLC展開(kāi)