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文檔簡介
1、第40講微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用一、單項選擇題(每題給出的四個選項中,只有一個選項是最符合題目要求的)1下列關(guān)于滅菌和消毒的理解,正確的是()A滅菌是指殺死環(huán)境中的原核生物B消毒可以殺死微生物細(xì)胞和全部芽孢C常用的消毒方法有煮沸法、巴氏消毒法、紫外線法和化學(xué)藥物法D常用的滅菌方法有加熱法、紫外線法、化學(xué)藥品法答案C解析滅菌是指殺死環(huán)境中的一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子,A錯誤;消毒可以殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物細(xì)胞,但是不能殺死芽孢,B錯誤;常用的消毒方法有煮沸法、巴氏消毒法、紫外線法和化學(xué)藥物法等,C正確;常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌,D錯誤。2(2019·上海高三月
2、考)下列依次表示倒平板、接種的位置,以及劃線法接種的路徑示意圖,其中錯誤的是()答案D解析倒平板時,用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋,防止空氣中的雜菌污染,A正確;接種時,左手將培養(yǎng)皿打開一條縫隙,右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),B正確;劃線時,從第二次劃線開始,每次劃線都要從上一次劃線的末端開始,讓菌種來源于上一次劃線末端,這樣才能使菌種逐漸稀釋,C正確,D錯誤。3有關(guān)平板劃線操作的說法正確的是()A使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿,操作過程中不再滅菌B打開含菌種的試管需通過火焰滅菌,取出菌種后需馬上塞上棉塞C將沾
3、有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線即可D該方法常用于微生物的分離純化答案D解析接種環(huán)在使用過程中需要多次滅菌,第一次滅菌是為了殺死其他微生物,每次劃線結(jié)束后需要滅菌是為了殺死上次殘留的菌種,A錯誤;打開含菌種的試管需要通過火焰滅菌,接種后還需要通過火焰滅菌再塞上棉塞,B錯誤;將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線,還需蓋上培養(yǎng)皿蓋,防止空氣中雜菌混入,C錯誤。4如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計數(shù)”實驗中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析正確的是()A3號試管的稀釋倍數(shù)為103倍B5號試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×109個C5號試管中稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)得
4、到的菌落平均數(shù)恰為4號試管的10倍D該方法和平板劃線法都可對微生物進(jìn)行準(zhǔn)確計數(shù)答案B解析3號試管的稀釋倍數(shù)為104倍,A錯誤;5號試管進(jìn)行稀釋涂布平板法計數(shù)的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為(168175167)÷3×106×101.7×109個,B正確;5號試管中稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng),稀釋倍數(shù)是4號的十分之一,如果稀釋倍數(shù)適當(dāng),得到的菌落平均數(shù)可能是5號的10倍,C錯誤;平板劃線法不能對微生物進(jìn)行計數(shù),稀釋涂布平板得到的菌落可能存在兩個或多個細(xì)菌細(xì)胞長成一個菌落,使該實驗方法統(tǒng)計得到的結(jié)果往往會比實際活菌數(shù)目要低,D錯誤。5下列有關(guān)微生物篩選或鑒別的敘述,錯
5、誤的是()A在培養(yǎng)基中加入抗生素能夠篩選出具有相應(yīng)抗性的菌株B尿素分解菌能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘笔狗蛹t指示劑變紅C纖維素分解菌通過分解剛果紅染料使菌落周圍出現(xiàn)透明圈D在含有碳酸鈣的培養(yǎng)基上生長的乳酸菌菌落周圍會出現(xiàn)“溶鈣圈”答案C解析在培養(yǎng)基中加入抗生素,具有抗性的菌株存活,A正確;尿素分解菌能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘?,從而使酚紅指示劑變紅,B正確;纖維素分解菌可以產(chǎn)生纖維素酶將纖維素分解為葡萄糖,而在纖維素分解菌的菌落周圍,由于缺少纖維素而出現(xiàn)透明圈,C錯誤;在含有碳酸鈣的培養(yǎng)基上生長的乳酸菌菌落周圍,由于乳酸菌產(chǎn)酸與碳酸鈣反應(yīng),會出現(xiàn)透明圈,D正確。6篩選是分離和培養(yǎng)微生物新類型常用的手段,下列有關(guān)技術(shù)
6、中不能篩選成功的是()A在全營養(yǎng)的LB培養(yǎng)基(普通培養(yǎng)基)中,篩選大腸桿菌B在尿素固體培養(yǎng)基中,篩選能夠分解尿素的微生物C用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基,篩選能分解纖維素的微生物D在培養(yǎng)基中加入不同濃度的氯化鈉,篩選抗鹽突變體的微生物答案A解析在全營養(yǎng)的LB培養(yǎng)基中,幾乎所有細(xì)菌都能生長,不能篩選出大腸桿菌,A錯誤;在尿素固體培養(yǎng)基中,只有能分解尿素的微生物才能生長,不能分解尿素的微生物因缺乏氮源不能生長,因此尿素固體培養(yǎng)基能夠篩選分解尿素的微生物,B正確;在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中,只有能分解纖維素的微生物才能生長,不能分解纖維素的微生物因缺乏碳源不能生長,因此用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基
7、,能篩選分解纖維素的微生物,C正確。7(2019·北京高三期末)黑茶是以肉食為主的中國邊疆游牧民族的主要飲品。在一系列微生物的作用下,黑茶會產(chǎn)生一種對人體非常有益的金黃色顆?!敖鸹ā?。研究人員對“金花”中的微生物進(jìn)行了分離和鑒定,過程如圖。下列說法不正確的是()A向“金花”樣品中加入蒸餾水制成樣品懸液B可根據(jù)菌落特征對菌種進(jìn)行初步鑒定C涂布平板上長出的菌落可通過劃線進(jìn)一步純化D可通過基因組測序?qū)N進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定答案A解析向“金花”樣品中加入無菌水制成樣品懸液,A錯誤;可根據(jù)菌落特征對菌種進(jìn)行初步鑒定,B正確;涂布平板上長出的菌落可通過劃線進(jìn)一步純化,C正確;可通過基因組測序?qū)N進(jìn)行
8、準(zhǔn)確鑒定,D正確。二、不定項選擇題(每題給出的四個選項中,有的只有一個選項符合題目要求,有的有多個選項符合題目要求)8下列關(guān)于菌種計數(shù)方法的敘述正確的是()A當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時,能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落B應(yīng)該選取培養(yǎng)基表面菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為有效數(shù)據(jù)C為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般采用密度較大的平板進(jìn)行計數(shù)D在某一濃度下涂布三個平板,且菌落在30300之間,以它們的平均值作為統(tǒng)計結(jié)果答案ABD解析當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面一個活菌會形成一個菌落,A正確;應(yīng)該選取培養(yǎng)基表面菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為有效數(shù)據(jù),B正確;為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選取菌落數(shù)在30300之間的平板進(jìn)行計數(shù),C錯誤
9、;在某一濃度下涂布三個平板,若三個平板統(tǒng)計的菌落數(shù)差別不大,且菌落數(shù)都在30300之間,則應(yīng)以它們的平均值作為統(tǒng)計結(jié)果以減小實驗誤差,D正確。9下列就“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)”實驗的有關(guān)敘述,不正確的是()A經(jīng)高壓蒸汽滅菌的培養(yǎng)基在倒平板和接種后培養(yǎng)時平板均要倒置B培養(yǎng)基中可添加KH2PO4、Na2HPO4以提供無機(jī)鹽并作為緩沖劑C在相同培養(yǎng)條件下,未接種的培養(yǎng)基表面無菌落生長說明培養(yǎng)基沒有雜菌污染D倒平板和接種過程需在無菌條件下操作,應(yīng)對實驗用具進(jìn)行消毒處理答案D解析經(jīng)高壓蒸汽滅菌的培養(yǎng)基在倒平板和接種后培養(yǎng)時平板均要倒置,以防止雜菌污染等,A正確;細(xì)菌的生長繁殖需要無機(jī)鹽作為營養(yǎng)
10、物質(zhì),培養(yǎng)基中添加KH2PO4、Na2HPO4可提供無機(jī)鹽同時也可以作為緩沖劑,B正確;在相同培養(yǎng)條件下,未接種的培養(yǎng)基表面無菌落生長說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染,C正確;在無菌操作過程中,應(yīng)對實驗用具進(jìn)行滅菌處理,D錯誤。10(2019·北京高考)篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基。接種培養(yǎng)后,若細(xì)菌能分解淀粉,培養(yǎng)平板經(jīng)稀碘液處理,會出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈(如圖),實驗結(jié)果見下表。菌種菌落直徑:C(mm)透明圈直徑:H(mm)H/C細(xì)菌5.111.22.2細(xì)菌8.113.01.6有關(guān)本實驗的敘述,錯誤的是()A培養(yǎng)基除淀粉外還含有氮源等其他營養(yǎng)物質(zhì)B篩選分解淀粉的細(xì)菌時,
11、菌液應(yīng)稀釋后涂布C以上兩種細(xì)菌均不能將淀粉酶分泌至細(xì)胞外DH/C值反映了兩種細(xì)菌分解淀粉能力的差異答案C解析微生物的培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽等,A正確;篩選分解淀粉的細(xì)菌時,實驗流程為取樣梯度稀釋樣品涂布到鑒別分解淀粉的細(xì)菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落,B正確;由題意可知,淀粉被分解后經(jīng)稀碘液處理才能出現(xiàn)透明圈,淀粉分解需要淀粉酶的催化,圖中兩種細(xì)菌都出現(xiàn)了以菌落為中心的透明圈,說明以上兩種細(xì)菌均能將淀粉酶分泌到細(xì)胞外來發(fā)揮作用,C錯誤;透明圈是細(xì)菌分解淀粉得到的,H表示透明圈直徑,C表示菌落直徑,因此H/C值可以反映兩種細(xì)菌分解淀粉能力的差異,即H/C值越大,細(xì)菌分解淀粉的能
12、力越強(qiáng),D正確。三、非選擇題11(2019·全國卷)已知一種有機(jī)物X(僅含有C、H兩種元素)不易降解,會造成環(huán)境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細(xì)菌(目標(biāo)菌)。號培養(yǎng)基:在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入X(5 g/L)。號培養(yǎng)基:氯化鈉(5 g/L),硝酸銨(3 g/L),其他無機(jī)鹽(適量),X(15 g/L)。號培養(yǎng)基:氯化鈉(5 g/L),硝酸銨(3 g/L),其他無機(jī)鹽(適量),X(45 g/L)?;卮鹣铝袉栴}。(1)在號培養(yǎng)基中,為微生物提供氮源的是_。、號培養(yǎng)基中為微生物提供碳源的有機(jī)物是_。(2)若將土壤懸浮液接種在號液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)一段時間后,不能降解X的細(xì)
13、菌比例會_,其原因是_。(3)號培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基,若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標(biāo)菌并對菌落進(jìn)行計數(shù),接種時,應(yīng)采用的方法是_。(4)假設(shè)從號培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細(xì)菌,且該菌能將X代謝為丙酮酸,則在有氧條件下,丙酮酸可為該菌的生長提供_和_。答案(1)牛肉膏、蛋白胨X(2)下降不能降解X的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X的細(xì)菌能夠增殖(3)稀釋涂布平板法(4)能量合成其他物質(zhì)的原料解析(1)號培養(yǎng)基中含有牛肉膏、蛋白胨和有機(jī)物X等,其中X僅含有C、H兩種元素,故為微生物提供氮源的是牛肉膏、蛋白胨。、號培養(yǎng)基中除無機(jī)鹽外,還含有有機(jī)物X,故為微生物提供碳源的有機(jī)物是X。(2
14、)因號液體培養(yǎng)基中只有X含有碳元素,故培養(yǎng)一段時間后,不能降解X的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X的細(xì)菌能夠增殖,故不能降解X的細(xì)菌比例會下降。(3)對微生物分離的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法,但其中只有稀釋涂布平板法能夠計數(shù)。(4)能高效降解X的細(xì)菌能將X代謝為丙酮酸,丙酮酸在有氧條件下被降解時能釋放出大量能量,故丙酮酸可為該細(xì)菌的生長提供能量。丙酮酸代謝過程中的中間產(chǎn)物還可以為該細(xì)菌中其他物質(zhì)的合成提供原料。12(2019·湖北八校二模)為了調(diào)查某學(xué)校附近河流的水質(zhì)狀況,該學(xué)校生物興趣小組測定了河流水樣中的細(xì)菌含量,并進(jìn)行了細(xì)菌的分離等工作?;卮鹣铝袉栴}:(1)如圖,該
15、小組采用的是_分離水樣中的細(xì)菌。操作時,接種環(huán)通過_滅菌,在第二次及以后的操作時,總是從上一次的末端開始,這樣做的目的是_。(2)該實驗組將接種好的培養(yǎng)皿在恒溫箱中培養(yǎng)時倒置,其目的是_;在培養(yǎng)基上產(chǎn)生的單個菌落在生態(tài)學(xué)中可以被稱為_。(3)根據(jù)培養(yǎng)皿上菌落的平均數(shù)可以計算河水中該細(xì)菌的密度,但計算的數(shù)據(jù)要比實際活菌的數(shù)目少,原因是_。除了上述的活菌計數(shù)法外,_也是測定微生物數(shù)量的常用方法。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng),另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。分析其原因是:_。答案(1)平板劃線法灼燒將聚集的菌體逐步稀釋
16、以便獲得單個菌落(2)防止形成的冷凝水滴落在培養(yǎng)基上產(chǎn)生雜菌污染種群(3)當(dāng)兩個或者多個細(xì)胞連在一起時平板上觀察到的是一個菌落顯微鏡直接計數(shù)(4)振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液的溶解氧的含量,同時可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率解析(1)從圖中可明顯看到三個劃線區(qū)域,這說明該小組采用的是平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。接種環(huán)是金屬制品,可灼燒滅菌。在第二次及以后的操作時,總是從上一次的末端開始,這樣做的目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落。(2)將接種好的培養(yǎng)皿在恒溫箱中培養(yǎng)時倒置,其目的是防止形成的冷凝水滴落在培養(yǎng)基上產(chǎn)生雜菌污染。種群是生活在同一區(qū)域的同種生物全部個體的總和,因此在
17、培養(yǎng)基上產(chǎn)生的單個菌落在生態(tài)學(xué)中可以被稱為種群。(4)振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快的原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液的溶解氧的含量,同時可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。13(2019·全國卷)物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物,會污染土壤。W在培養(yǎng)基中達(dá)到一定量時培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細(xì)菌(目標(biāo)菌)?;卮鹣铝袉栴}。(1)要從土壤中分離目標(biāo)菌,所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應(yīng)該是_。(2)在從土壤中分離目標(biāo)菌的過程中,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細(xì)菌都能生長并形成菌落(如圖所示)。如果要得到目標(biāo)菌,應(yīng)該選擇_菌落進(jìn)一步純化,選擇的依據(jù)是_。(3)土壤中
18、的某些微生物可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?。若要設(shè)計實驗進(jìn)一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?,請簡要寫出實驗思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論,即_。(4)該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌,使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶(酶E)。為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異,該小組擬進(jìn)行如下實驗,請完善相關(guān)內(nèi)容。在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上,A處滴加含有酶E的緩沖液,B處滴加含有相同濃度天然酶的緩沖液,C處滴加_,三處滴加量相同。一段時間后,測量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈,說明_;若A、B處形成的透明圈直徑大小相近,說明_。答案(1)W(2)乙乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈,說明乙菌能降解W(3)將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上,若細(xì)菌能生長,則說明該細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?4)緩沖液緩沖液不能降解W酶E與天然酶降解W的能力相近解析(1)物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物,要分離能夠降解物質(zhì)W的細(xì)菌,需用以物質(zhì)W為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。(2)由題圖可知
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