任務(wù)六細(xì)菌的生化試驗(yàn)

1、綜合實(shí)訓(xùn)一綜合實(shí)訓(xùn)一 大腸桿菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷大腸桿菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷任務(wù)六任務(wù)六 細(xì)菌的生化試驗(yàn)細(xì)菌的生化試驗(yàn)綜合實(shí)訓(xùn)一 大腸桿菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷-細(xì)菌的生化試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo) 利用糖發(fā)酵、MR、H2S實(shí)驗(yàn)對(duì)分離到的細(xì)菌進(jìn)行生化鑒定。綜合實(shí)訓(xùn)一 大腸桿菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷-細(xì)菌的生化試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)器材實(shí)驗(yàn)器材 恒溫培養(yǎng)箱 大腸桿菌純培養(yǎng)物 微量糖發(fā)酵管、MR培養(yǎng)基、三糖鐵試管斜面 接種針、酒精燈、MR試劑、膠頭滴管等。 綜合實(shí)訓(xùn)一 大腸桿菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷-細(xì)菌的生化試驗(yàn)細(xì)菌的生化鑒定細(xì)菌的生化鑒定-糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)原理：有些細(xì)菌能分解糖產(chǎn)酸，從而使指示劑變有些細(xì)菌能分解糖產(chǎn)酸，從而使指示劑變色。色。培

2、養(yǎng)基：微量糖發(fā)酵管微量糖發(fā)酵管操作步驟：將細(xì)菌純培養(yǎng)物無菌操作接種于糖發(fā)將細(xì)菌純培養(yǎng)物無菌操作接種于糖發(fā)酵培養(yǎng)基中，于酵培養(yǎng)基中，于3737培養(yǎng)培養(yǎng)181824h24h。綜合實(shí)訓(xùn)一 大腸桿菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷-細(xì)菌的生化試驗(yàn)糖發(fā)酵試驗(yàn)結(jié)果判定方法糖發(fā)酵試驗(yàn)結(jié)果判定方法 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)結(jié)果及現(xiàn)象：分解某糖產(chǎn)酸分解某糖產(chǎn)酸( () )：培：培養(yǎng)基變?yōu)辄S色養(yǎng)基變?yōu)辄S色分解某糖有的產(chǎn)酸產(chǎn)氣分解某糖有的產(chǎn)酸產(chǎn)氣()()：培養(yǎng)基變?yōu)辄S色，：培養(yǎng)基變?yōu)辄S色，且內(nèi)有氣泡且內(nèi)有氣泡不發(fā)酵某糖不發(fā)酵某糖( () )：培養(yǎng)：培養(yǎng)基仍為紫色?；詾樽仙?。接種前接種后+ 綜合實(shí)訓(xùn)一 大腸桿菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷-細(xì)菌的生化試

3、驗(yàn)細(xì)菌的生化鑒定細(xì)菌的生化鑒定-MR實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)原理原理：有些細(xì)菌能分解葡萄糖糖產(chǎn)生大量酸，從：有些細(xì)菌能分解葡萄糖糖產(chǎn)生大量酸，從而使指示劑變色，甲基紅指示劑的變色范圍是而使指示劑變色，甲基紅指示劑的變色范圍是PH4.4-6.2PH4.4-6.2。培養(yǎng)基培養(yǎng)基：葡萄糖蛋白胨水：葡萄糖蛋白胨水操作步驟操作步驟：取菌接種于葡萄糖蛋白胨水中，置：取菌接種于葡萄糖蛋白胨水中，置3737溫箱培養(yǎng)溫箱培養(yǎng)242448h48h。綜合實(shí)訓(xùn)一 大腸桿菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷-細(xì)菌的生化試驗(yàn)MR結(jié)果判定方法結(jié)果判定方法 結(jié)果觀察：培養(yǎng)培養(yǎng)48h后，向后，向MR培養(yǎng)基內(nèi)滴加甲基紅試培養(yǎng)基內(nèi)滴加甲基紅試劑，立即觀察結(jié)果劑，立即

4、觀察結(jié)果 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及現(xiàn)象：液體呈紅色者為陽性液體呈紅色者為陽性黃色者為陰性黃色者為陰性橙色者為可疑。橙色者為可疑。+接接種種前前綜合實(shí)訓(xùn)一 大腸桿菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷-細(xì)菌的生化試驗(yàn)細(xì)菌的生化鑒定細(xì)菌的生化鑒定-H2S實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)原理：有些細(xì)菌能分解含硫有些細(xì)菌能分解含硫AAAA產(chǎn)生產(chǎn)生H2S， H2S可與可與培養(yǎng)基中的培養(yǎng)基中的FeFe2 2SO4SO4反應(yīng)，生成黑色沉淀反應(yīng)，生成黑色沉淀FeSFeS。培養(yǎng)基：三糖鐵試管斜面三糖鐵試管斜面操作步驟：用接種針取菌穿刺于含有硫酸亞鐵的用接種針取菌穿刺于含有硫酸亞鐵的瓊脂培養(yǎng)基中，瓊脂培養(yǎng)基中，3737培養(yǎng)培養(yǎng)1824h h綜合實(shí)訓(xùn)一 大腸桿菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷-細(xì)菌的生化試驗(yàn)H2S實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定方法實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定方法1. 培養(yǎng)基變黑色者為陽性2. 培養(yǎng)基未變黑色者為陰性+接接種種前前綜合實(shí)訓(xùn)一 大腸桿菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷-細(xì)菌的生化試驗(yàn)大腸桿菌的生化特性大腸桿菌的生化特性MR：+葡萄糖：葡萄糖： 乳糖：乳糖： 麥芽糖：麥芽糖： 甘露醇：甘露醇： 蔗糖：蔗糖：H2S：+綜合實(shí)訓(xùn)一