何宣鵬-答辯PPT(定稿)201101020132

1、姓名：何宣鵬專業(yè)：化學(xué)學(xué)號：201101020132指導(dǎo)教師：吳娜（講師）草果GC-MS指紋圖譜研究目 錄 實驗研究的主要內(nèi)容實驗研究的主要內(nèi)容結(jié)論結(jié)論Click to add title in here 2344Click to add title in here 論文研究背景及意義論文研究背景及意義1參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn)5研究內(nèi)容及技術(shù)路線研究內(nèi)容及技術(shù)路線13 結(jié)果與討論結(jié)果與討論1論文研究背景及意義論文研究背景及意義 草果為姜科豆蔻屬多年生草本植物，全株有辛香味。目前，研究者對草果的研究主要集中在基源植物、栽培技術(shù)研究、生藥材鑒定、中藥化學(xué)成分、炮制的研究、藥理作用、臨床用藥、生理功能研究

2、等方面，對草果GC-MS指紋圖譜研究的文章很很少報道。 論文通過對HS-GC-MS條件優(yōu)化，對草果不同部位（果、殼、仁、莖、葉、芽）揮發(fā)性成分進(jìn)行測定，同時建立草果不同部位、不同產(chǎn)地（紅河、楚雄、麗江、大理、玉溪、文山）、不同炮制方法（炒制、鹽制、姜制、凈制、醋制）的揮發(fā)性GC-MS指紋圖譜，采用“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)2004A版”軟件對指紋圖譜進(jìn)行相似度計算，采用SPSS 19.0軟件對指紋圖譜進(jìn)行聚類分析、主成分分析，為草果的快速鑒別、品質(zhì)的評價、質(zhì)量的控制、生產(chǎn)工藝提供參考。2實驗研究的主要內(nèi)容實驗研究的主要內(nèi)容 凈制：除去外殼，搓散，篩去膜質(zhì)的假種皮。炒制：取原藥材放入鍋內(nèi)，

3、用文火炒至外表黑褐，發(fā)泡，有香氣時取出，放冷，篩去灰屑，用時搗碎。鹽制：每草果100Kg，用食鹽2Kg。姜制：每草果仁100Kg，用生姜10Kg或干姜3Kg。醋制：醋煮。 草果的炮制國樣品預(yù)處理 將草果不同部位（殼、仁、果、莖、葉、芽）、不同產(chǎn)地（紅河、楚雄、麗江、大理、文山、玉溪）、不同炮制方法（凈制、炒制、鹽制、姜制、醋制）的草果于萬能中藥粉碎機(jī)中粉碎，過100目中藥篩，并儲存在密封袋中，貼上標(biāo)簽。草果的莖、葉、芽放入放入電熱鼓風(fēng)干燥箱中，于50下烘60h，再粉碎。2實驗研究的主要內(nèi)容實驗研究的主要內(nèi)容 準(zhǔn)確稱取三份1.00g的草果干粉樣品，其中兩份置于50mL的具塞三角燒瓶中，加入15.

4、00mL正己烷溶劑，超聲處理30min，超聲功率：200W，過濾，加5.00mL的正己烷洗滌殘渣，過濾，合并濾液，取適量體積的溶液分別加入直接進(jìn)樣瓶和頂空進(jìn)樣瓶；另一份草果干粉樣品直接加入頂空進(jìn)樣瓶，待測。 樣品的制備國儀器條件 GC條件：柱箱溫度80；進(jìn)樣口溫度220；分流比20:1；柱流量1.0ml/min；載氣：He（純度99.999%氣相毛細(xì)管色譜柱HP-FFAP（30m0.250mm0.25um）；程序升溫：初始溫度80，保持3min，以6/min升至180，保持2min；總運行時21.67min。MS條件：離子源溫度200；接口溫度220；檢測器電壓0.88KV；溶劑延遲時間2mi

5、n實驗流程圖實驗流程圖3結(jié)果與討論結(jié)果與討論3.1草果GC-MS條件選擇不同分流比對草果超聲提取直接進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的GC-MS圖譜 注：從下往上分流比分別為不分流、10:1、20:1、50:1不同分流比對草果超聲提取直接進(jìn)樣揮發(fā) 性成分影響的時間、信號三維圖譜分流比選擇3結(jié)果與討論結(jié)果與討論3.1草果GC-MS條件選擇不不同柱流量對草果超聲提取直接進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的GC-MS圖譜 注：從下往上柱流量分別為0.5、1.0、1.5不同分流比對草果超聲提取直接進(jìn)樣揮發(fā) 性成分影響的時間、信號三維圖譜 柱流量比較3結(jié)果與討論結(jié)果與討論3.1草果GC-MS條件選擇不同色譜柱對草果超聲提取直接進(jìn)樣揮

6、發(fā)性成分影響的GC-MS圖譜注：從下往上色譜柱分別為Rtx-5MS、DB-1701、HP-FFAP不同色譜柱對草果超聲提取直接進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的時間、信號三維圖譜色譜柱的優(yōu)化3結(jié)果與討論結(jié)果與討論3.2 HS條件選擇不同振蕩溫度對草果超聲提取頂空進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的GC-MS圖譜注：從下往上振蕩溫度分別為120、130、140、150不同振蕩溫度對草果超聲提取頂空進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的時間、信號三維圖譜超聲提取頂空進(jìn)樣振蕩溫度選擇3結(jié)果與討論結(jié)果與討論3.2 HS條件選擇不同振蕩時間對草果超聲提取頂空進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的GC-MS圖譜注：從下往上振蕩時間分別為10min、15min、20min

7、、25min不同振蕩時間對草果超聲提取頂空進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的時間、信號三維圖譜超聲提取頂空進(jìn)樣振蕩時間選擇3結(jié)果與討論結(jié)果與討論3.2 HS條件選擇不同振蕩溫度對草果干粉頂空進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的GC-MS圖譜注：從下往上振蕩溫度分別為80、100、120、150不同振蕩溫度對草果干粉頂空進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的時間、信號三維圖譜干粉頂空進(jìn)樣振蕩溫度選擇3結(jié)果與討論結(jié)果與討論3.2 HS條件選擇不同振蕩時間對草果干粉頂空進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的GC-MS圖譜 注：從下往上振蕩時間分別為10min、15min、20min不同振蕩時間對草果干粉頂空進(jìn)樣揮發(fā)性成分影響的時間、信號三維圖譜干粉頂空進(jìn)樣振蕩時間

8、選擇3結(jié)果與討論結(jié)果與討論3.3 提取和進(jìn)樣方式的優(yōu)化不同提取進(jìn)樣方式對草果揮發(fā)性成分影響的GC-MS圖譜注：從下往上提取進(jìn)樣方式分別為超聲提取直接進(jìn)樣、超聲提取頂空進(jìn)樣、干粉頂空進(jìn)樣不同提取進(jìn)樣方式對草果揮發(fā)性成分影響的時間、信號三維圖譜提取進(jìn)樣方式的優(yōu)化優(yōu)化結(jié)果優(yōu)化結(jié)果 基線平穩(wěn)、出峰較多、峰形對稱、重疊峰少、雜峰少、峰形高大。 優(yōu)化方式國優(yōu)化結(jié)果 GC-MS的優(yōu)化條件為：分流比為20:1、柱流量為1.0ml/min、色譜柱為HP-FFAP；草果超聲提取頂空進(jìn)樣的振蕩溫度為140，振蕩時間為20min；草果干粉頂空進(jìn)樣振蕩溫度為150，振蕩時間為10min；草果的最佳提取進(jìn)樣方式為：干粉頂

9、空進(jìn)樣。結(jié)果與討論結(jié)果與討論國揮發(fā)性成分 草果不同部位共鑒定出86個化合物，草果的果中鑒定出43個化合物，無特征化合物；草果果殼中鑒定出55個化合物，有7個是特征化合物；草果果仁中鑒定出44個化合物，有5個是特征化合物；草果的莖中鑒定出35個化合物，有4個是特征化合物；草果的葉中鑒定出50個化合物，有13個為特征化合物；草果芽中鑒定出31個化合物，無特征化合物；草果的果、殼、仁、莖、葉、芽中都含有的化合物有13個，這13個化合物中，又以1,8-桉葉素（1,8-cineole）含量最大，含量都在4.00%以上。結(jié)果與討論結(jié)果與討論揮發(fā)性成分測定結(jié)果（局部）指紋圖譜建立指紋圖譜建立相似度計算結(jié)果相

10、似度計算結(jié)果不同部不同部位位果果殼殼仁仁莖莖葉葉芽芽R R果果1.0001.0000.8910.8910.5510.5510.6170.6170.5500.5500.3180.3180.8840.884殼殼0.8910.8911.0001.0000.5020.5020.7900.7900.6970.6970.4260.4260.8720.872仁仁0.5510.5510.5020.5021.0001.0000.4120.4120.4780.4780.2560.2560.8430.843莖莖0.6170.6170.7900.7900.4120.4121.0001.0000.6320.6320.3

11、730.3730.6850.685葉葉0.5500.5500.6970.6970.4780.4780.6320.6321.0001.0000.4470.4470.7070.707芽芽0.3180.3180.4260.4260.2560.2560.3730.3730.4470.4471.0001.0000.4080.408R R0.8840.8840.8720.8720.8430.8430.6850.6850.7070.7070.4080.4081.0001.000產(chǎn)地產(chǎn)地紅河紅河楚雄楚雄麗江麗江大理大理玉溪玉溪文山文山R R紅河紅河1.0001.0000.8640.8640.7220.7220

12、.5500.5500.8050.8050.7780.7780.9240.924楚雄楚雄0.8640.8641.0001.0000.7200.7200.6260.6260.9180.9180.9320.9320.9580.958麗江麗江0.7220.7220.7200.7201.0001.0000.4330.4330.7000.7000.6000.6000.8250.825大理大理0.5500.5500.6260.6260.4330.4331.0001.0000.6180.6180.6650.6650.6980.698玉溪玉溪0.8050.8050.9180.9180.7000.7000.618

13、0.6181.0001.0000.9070.9070.9310.931文山文山0.7780.7780.9320.9320.6000.6000.6650.6650.9070.9071.0001.0000.9050.905R R0.9240.9240.9580.9580.8250.8250.6980.6980.9310.9310.9050.9051.0001.000炮制炮制方法方法凈制凈制炒制炒制鹽制鹽制姜制姜制醋制醋制R R凈制凈制1.0001.0000.8450.8450.9570.9570.8770.8770.8720.8720.9600.960炒制炒制0.8450.8451.0001.00

14、00.8500.8500.9920.9920.7280.7280.9440.944鹽制鹽制0.9570.9570.8500.8501.0001.0000.8940.8940.8570.8570.9640.964姜制姜制0.8770.8770.9920.9920.8940.8941.0001.0000.7590.7590.9660.966醋制醋制0.8720.8720.7280.7280.8570.8570.7590.7591.0001.0000.8830.883R R0.9600.9600.9440.9440.9640.9640.9660.9660.8830.8831.0001.000相似度分

15、布曲面圖相似度分布曲面圖聚類分析樹狀圖聚類分析樹狀圖主成分碎石圖主成分碎石圖主成分三維投影圖主成分三維投影圖4結(jié)論結(jié)論 草果不同部位樣品差異大，分布不穩(wěn)定；不同產(chǎn)地的草果揮發(fā)性成分和含量雖然有差異，但是分布比較穩(wěn)定；不同炮制方法的草果揮發(fā)性成分很相近，而且樣品分布很穩(wěn)定，說明草果通過炮制后藥性很穩(wěn)定。 相似度評價結(jié)果國聚類、主成分分析結(jié)果 聚類分析結(jié)果：草果果不同部位樣品可以分為2類；草果不同產(chǎn)地樣品可以分為2類；草果不同炮制方法樣品可以分為3類。主成分分析結(jié)果：草果不同部位樣品共提取了3個主成分；草果不同部位共有化學(xué)成分共提取了4個主成分；草果不同產(chǎn)地樣品共提取了3個主成分；草果不同炮制方法

16、樣品共提取了3個主成分。參考文獻(xiàn)1 1孟大威，李偉，王鵬君等.草果香氣成分研究J.中國實驗方劑學(xué)雜志.2012，28 (6):703-707.2 Sta rkenmann C , Mayenzet F, Brauchli R. Structure elucidation of a pungent compound in black cardamom:A momumtsao-ko Crevost et Lemarie( Zing iberaceae) J. J Ag ric Food Chem,2007, 55(26) :10902- 109071.3吳惠勤，黃曉蘭，黃芳等. 草果揮發(fā)油的氣相色

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