消毒及滅菌效果監(jiān)測方法簡介

1、消毒與滅菌效果監(jiān)測方法簡介 在消毒與滅菌效果監(jiān)測方法中，研究最多、應用較普遍的為壓力蒸汽、電離輻射與環(huán)氧乙烷三大滅菌技術滅菌效果的監(jiān)測方法。對紫外線與其它化學消毒劑消毒效果的監(jiān)測方法也有研究與應用。除電離輻射外，其它方法消毒與滅菌效果的監(jiān)測，在醫(yī)院中較常見。方法可歸納為4類： 1.儀表監(jiān)測 2.化學監(jiān)測 3.生物監(jiān)測 4.程序監(jiān)測1 儀表監(jiān)測 通過儀表測定有關參數(shù)，間接了解是否可達到消毒或滅菌的要求。1.1 常用儀表溫度計(留點溫度計)壓力計(負壓壓力計)濕度計壓力、溫度、時間自動記錄儀紫外線強度計電離輻射強度計電離輻射劑量儀乙醇水溶液比重計水中臭氧檢測儀1.2 注意事項 (1) 用前應校正或

2、定期校正 (2) 布放于有代表性部位 2 化學監(jiān)測 根據(jù)化學物質的物理化學變化，測知殺菌因子的劑量，間接判斷是否達到消毒或滅菌的效果。2.1 監(jiān)測對象 壓力蒸汽滅菌 干熱滅菌 紫外線強度 電離輻射劑量 化學消毒劑2.2 指示材料2.2.1 壓力蒸汽滅菌常用指示材料 化學指示膠帶(簽) 化學指示卡(管) 綜合性化學指示劑 (移動式化學指示劑) 化學指示試紙 BD試驗指示圖2.2.2 干熱滅菌常用指示材料 化學指示劑 移動式化學指示劑2.2.3 化學消毒劑常用指示材料 環(huán)氧乙烷指示卡 蒸汽-甲醛氣體滅菌化學指示劑 空氣臭氧濃度檢測儀(管) 消毒劑濃度試紙 戊二醛濃度監(jiān)測卡(管)2.2.4 其它指示

3、材料 紫外線強度指示卡 電離輻射指示劑2.3 監(jiān)測方法2.3.1 壓力蒸汽滅菌監(jiān)測 硫磺管、苯甲酸管不能用 BD試驗每天一次，用30cm25cm 2528cm布巾包 每包外用膠帶、內放卡美國醫(yī)療器械改進協(xié)會規(guī)定： 每包外用膠帶、內放卡 每天第一次用預真空壓力蒸 汽滅菌器時，BD試驗2.3.2 干熱或消毒劑氣體滅菌監(jiān)測 將化學指示劑放于包中央 布放于最難達到滅菌的部位 (或消毒器內各層中央與四角)2.3.3 紫外線強度監(jiān)測 開燈照5 min后無異常 置卡于燈中央下方垂直1 m處 照射1 min 避免日光直射到卡2.3.4 消毒液濃度監(jiān)測 試紙浸濕后0.51.0 min比色 3 生物監(jiān)測 在監(jiān)測滅

4、菌效果時，用菌的存活與否直接證明是否達到要求。在監(jiān)測消毒效果時，用測定對菌的殺滅率判斷是否達到要求。 3.1 基本要求 滅菌 用菌片(5105 5106cfu/片） 消毒 用菌片或菌懸液(菌藥混合液 中含菌量5105 5106cfu/ml) 不同滅菌方法的效果監(jiān)測，應采用不同的菌種，并對其抗力有一定要求。 滅 菌 生 物 D值 存活時間 殺滅時間 方 法 指示劑 (min) (min) (min)壓力蒸汽 嗜熱脂肪桿菌 (1210.5飽 滅菌 (ATCC 7953)芽胞 和蒸汽條件下) 1.31.9 3.9 19.0干熱滅菌 枯草桿菌黑色變種 (1605 (ATCC 9372) 芽胞 條件下)

5、 1.31.9 3.9 19.0環(huán)氧乙烷 枯草桿菌黑色變種 (EO 600mg/L30mg/L,54 滅菌 (ATCC 9372) 芽胞 2,RH60% 10%條件下) 2.55.8 7.5 58.03.2 監(jiān)測方法3.2.1 壓力蒸汽滅菌監(jiān)測 單片菌片裝于牛皮紙袋中 放入標準測試包(30cm30cm25cm) 中央或最難透汽處(2片/包)，同時 放化學指示卡 置于滅菌器近排氣口處(上方) 滅菌后，接種于溴甲酚紫蛋白胨培養(yǎng) 液中，56培養(yǎng)7 d(24 h初步看) 設陰性、陽性對照 美國醫(yī)療器械改進協(xié)會規(guī)定生物指示劑應在下列情況下使用: (1)新滅菌器裝置后檢查 (2)滅菌器大修后驗收 (3)常

6、規(guī)監(jiān)測 每周(最好每天)1次 (4)滅菌人體移植器材(待培養(yǎng)結果陰性后， 器材才可使用) (5)周期性質量檢測美國所用標準測試包分兩種： 吸水手術巾包 混裝包吸水手術巾包： 含16條吸水手術巾，外包以雙層布 23cm23cm15cm(1.5 kg) 生物指示劑放于8與9條手術巾間中央 同時放化學指示卡于其側 混裝包：含棉布手術衣3件以上，吸水手術巾12條，30個紗布方，5個紗布卷，一條手術大單，外以布包兩層。 30cm30cm50cm(4.55.5kg) 生物指示劑放于包中央 同時將化學指示卡放于其上方或下方隔一手術巾處3.2.2 干熱或消毒劑氣體滅菌監(jiān)測干熱 菌片裝入無菌試管(1片/管) 布

7、于消毒器內各層對角線內、外角(2管/點)消毒劑 菌片裝入布(紙)袋 布于器內各層最難達到滅菌處(或中央與 四角)的物品中間滅菌后，接種于營養(yǎng)肉湯中(消毒劑需含中和劑)， 37培養(yǎng)7 d(3 d初步看)設陰性、陽性對照3.2.3 物品(手)表面消毒效果監(jiān)測物品、手表面可染試驗菌或用其含自然菌(1)物理因子或消毒劑氣體： 菌片放入無菌平皿中(2片/皿)，小型染菌物品 直接布放 消毒器每層布放2份(內、外)5份(中央、四角)(2)消毒液： 平皿或適當容器盛消毒液 菌片或小型染菌物品(手)浸泡消毒液中 對大型染菌物品表面噴消毒液 消毒后，對菌片或涂抹采樣作活菌計數(shù) 設陽性(不消毒)、陰性對照采樣、活菌

8、計數(shù)： 菌片投入含10 ml采樣液試管中 物品、手在采樣部位用棉拭往返涂擦2次， 將棉拭頭放入含10 ml采樣液試管中 振打試管以洗脫菌 取洗脫液培養(yǎng)48 h 計數(shù)菌落數(shù) 計算殺滅率3.2.4 空氣(自然菌)消毒效果監(jiān)測消毒前、后分別用平板沉降15 min采樣37培養(yǎng)48 h平板直徑9 cm，距地面1.5 m布于中央、四角(30 m2布中央與對角線二角)有條件者可用FA-1型多級撞擊式采樣器3.2.5 監(jiān)測消毒液微生物污染取消毒液1.0 ml加入含9.0 ml相應中和劑試管中混勻取0.2 ml涂抹平板或0.5 ml傾注瓊脂混勻20培養(yǎng)7 d：霉菌37培養(yǎng)72 h：細菌總數(shù)細菌總數(shù)(cfu/ml

9、)=平板菌落數(shù)20(或50)3.3 注意事項(1)檢測化學消毒劑效果要用中和劑 消毒 加于采樣液中 滅菌 加于培養(yǎng)基中(2)復方中和劑應注意成分間拮抗(3)中和劑應經(jīng)試驗證明合適 附表 XXX中和劑試驗結果組 別 平均菌數(shù)(cfu/ml)消毒劑+菌液(片) 0 4.5 0.5消毒劑+菌液(片)+中和劑 20 0.5 4.5中和劑+菌液(片) 204 000(中和劑+消毒劑)+菌液(片) 168 000正常菌液(片)對照 202 000未接種菌培養(yǎng)基對照 0（接種平皿0.5 ml，結果為3次試驗平均）4 程序監(jiān)測 依消毒或滅菌處理程序，作回顧性或前瞻性監(jiān)測。 回顧性 據(jù)儀表的自動記錄或工作人員的現(xiàn)場記