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文檔簡介
1、第二講微生物的培養(yǎng)與應用微生物的培養(yǎng)與應用NO.1雙基落實 系統(tǒng)化問題化NO.3NO.2考點突破 題點化重點化演練提能 真題集訓驗能力NO.3演練提能 課下檢測查缺漏雙基落實 系統(tǒng)化問題化NONO.1基礎知識系統(tǒng)化基本技能問題化編號編號成分成分(NH4)2SO4KH2PO4FeSO4CaCl2H2O含量含量0.4 g4.0 g0.5 g0.5 g100 mL考點突破 題點化重點化NONO.2考點一考點一培養(yǎng)基及微生物的純化培養(yǎng)技術培養(yǎng)基及微生物的純化培養(yǎng)技術解析解析返回返回解析解析返回返回重難點撥伊紅伊紅美藍培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌美藍培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌(菌落呈黑色菌落呈黑色)鑒別培鑒別培養(yǎng)
2、基養(yǎng)基培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物石油是唯一碳源時,可以抑制不能利用石油的微生物石油是唯一碳源時,可以抑制不能利用石油的微生物的生長,使能夠利用石油的微生物生存,達到分離能的生長,使能夠利用石油的微生物生存,達到分離能消除石油污染的微生物的目的消除石油污染的微生物的目的不添加氮源的培養(yǎng)基用于分離固氮微生物不添加氮源的培養(yǎng)基用于分離固氮微生物以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基用于分離分解尿素的細以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基用于分離分解尿素的細菌菌培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽用于分離得到金黃色葡萄培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽用于分離得到金黃色葡萄球菌球
3、菌培養(yǎng)基中加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌培養(yǎng)基中加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌選擇培選擇培養(yǎng)基養(yǎng)基實例實例類型類型解析解析返回返回重難點撥應用范圍應用范圍常用方法常用方法結果結果條件條件培養(yǎng)基及容器培養(yǎng)基及容器高壓蒸汽高壓蒸汽滅菌法滅菌法玻璃器皿、玻璃器皿、金屬用具金屬用具干熱滅菌法干熱滅菌法接種工具接種工具灼燒滅菌法灼燒滅菌法殺死物體內(nèi)殺死物體內(nèi)外所有的微外所有的微生物,包括生物,包括芽孢和孢子芽孢和孢子強烈的強烈的理化因理化因素素滅滅菌菌用酒精擦拭雙手,用酒精擦拭雙手,用氯氣消毒水源用氯氣消毒水源化學藥劑化學藥劑消毒法消毒法不耐高溫的液體不耐高溫的液體巴氏消毒法巴氏消毒法日常用品日常用品煮
4、沸消毒法煮沸消毒法僅殺死物體僅殺死物體表面或內(nèi)部表面或內(nèi)部的部分微生的部分微生物物較為溫較為溫和的物和的物理或化理或化學方法學方法消消毒毒管號管號123456苯酚濃度苯酚濃度(mg/L)1重難點撥稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法平板劃線法平板劃線法比較項目比較項目操作復雜,需要涂布多個平板操作復雜,需要涂布多個平板不能對微生物計數(shù)不能對微生物計數(shù)缺點缺點既可以獲得單細胞菌落,又能既可以獲得單細胞菌落,又能對微生物計數(shù)對微生物計數(shù)可以根據(jù)菌落的特點可以根據(jù)菌落的特點獲得某種微生物的單獲得某種微生物的單細胞菌落細胞菌落優(yōu)點優(yōu)點適用于厭氧菌和兼性厭氧菌適用于厭氧菌和兼性厭氧菌適用于好氧菌適用于好氧菌適用
5、范圍適用范圍從適宜稀釋度的平板上的菌落從適宜稀釋度的平板上的菌落中挑取菌體中挑取菌體在具有顯著的菌落特在具有顯著的菌落特征的區(qū)域菌落中挑取征的區(qū)域菌落中挑取菌體菌體菌體獲取菌體獲取稀釋度要足夠高,為確保實驗稀釋度要足夠高,為確保實驗成功可以增加稀釋度的范圍成功可以增加稀釋度的范圍每次劃線前后均需灼每次劃線前后均需灼燒接種環(huán)燒接種環(huán)注意事項注意事項一系列的梯度稀釋一系列的梯度稀釋涂布平板法操作涂布平板法操作接種環(huán)在固體平板培接種環(huán)在固體平板培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線養(yǎng)基表面連續(xù)劃線關鍵操作關鍵操作解析解析返回返回重難點撥不能區(qū)分死菌與活菌不能區(qū)分死菌與活菌缺點缺點用計數(shù)板計數(shù)用計數(shù)板計數(shù)方法方法利用特定
6、細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板,在顯微利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板,在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量原理原理設置重復組,增強實驗的說服力與準確性。同時設置重復組,增強實驗的說服力與準確性。同時為了保證結果準確,一般選擇菌落數(shù)在為了保證結果準確,一般選擇菌落數(shù)在30300的的平板進行計數(shù)平板進行計數(shù)操作操作每克樣品中的菌株數(shù)每克樣品中的菌株數(shù)(CV)M,其中,其中,C代表代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù),某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù),V代表涂代表涂布平板時所用的稀釋液的體積布平板時所用的稀釋液的體積(mL),M代表稀釋代表稀釋倍數(shù)倍數(shù)計算計
7、算公式公式當樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一當樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的一個活菌,通過個菌落,來源于樣品稀釋液中的一個活菌,通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù),就能推測出樣品中大約含統(tǒng)計平板上的菌落數(shù),就能推測出樣品中大約含有多少活菌有多少活菌原理原理酵母膏酵母膏無機鹽無機鹽淀粉淀粉纖維素粉纖維素粉瓊脂瓊脂CR溶液溶液水水培養(yǎng)基甲培養(yǎng)基甲培養(yǎng)基乙培養(yǎng)基乙重難點撥利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特征,然后篩選目的微生物特征,然后篩選目的微生物鑒定鑒定培養(yǎng)法培養(yǎng)法利用選擇培養(yǎng)基對微生物進行選擇培養(yǎng),直接利用選擇培
8、養(yǎng)基對微生物進行選擇培養(yǎng),直接獲得目的微生物獲得目的微生物選擇選擇培養(yǎng)法培養(yǎng)法利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固體利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固體平板培養(yǎng)基表面,直接根據(jù)微生物菌落的特征平板培養(yǎng)基表面,直接根據(jù)微生物菌落的特征利用單菌落挑取的方法獲得目的微生物利用單菌落挑取的方法獲得目的微生物單菌落單菌落挑取法挑取法如利用剛果紅染色法,根據(jù)培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維如利用剛果紅染色法,根據(jù)培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈來篩選分解纖維素的微素分解菌為中心的透明圈來篩選分解纖維素的微生物生物染色染色鑒別法鑒別法如培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,培養(yǎng)某種微生物后,如培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,培養(yǎng)某種微生物后,培養(yǎng)基變紅說明該種微生物能夠分解尿素培養(yǎng)基變紅說明該種微生物能夠分解尿素指示劑指示劑鑒別法鑒別法根據(jù)微生物在固體平板培養(yǎng)基表面形成的菌落的根據(jù)微生
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