生物化學(xué)實驗參考答案

1、1生物化學(xué)實驗I總復(fù)習(xí)思考題部分是自己做的，部分是百度的，各位看官如果要借鑒請酌情考慮，后果自負(fù)。江湖游子1請掌握下列生物化學(xué)實驗常用儀器的正確操作使用方法，并能回答以下問題：（1 ）離心機使用時為什么要平衡？普通離心機與高速離心機在平衡時有什么不同要求？平衡是為了讓轉(zhuǎn)動物體重心正好在轉(zhuǎn)軸上，如果不在，會對轉(zhuǎn)軸產(chǎn)生很大作用力，有時整臺機器會跟著晃 動。這對機器損耗很大。轉(zhuǎn)速越高的離心機不光重量很重，使用時還要特別放平衡，就連離心管里面的試 液都要放置等量，離心管還要對稱放入轉(zhuǎn)子試管孔內(nèi)，以確保轉(zhuǎn)子平衡運行，而且在調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速時，還要使 用分段升速法。（2）為什么用高速組織搗碎機進行動、植物組織搗碎

2、時，需采用間歇式方式進行操作？ 為了防止產(chǎn)熱過高，破壞組織內(nèi)的蛋白質(zhì)。防止蛋白變性。用真空泵進行減壓抽濾時，為什么要連接緩沖瓶？ 防止負(fù)壓產(chǎn)生，引起水泵里的水或油泵里的油倒吸，進入濾瓶中，污染濾液。2.為什么肝糖元只能從剛宰殺的動物肝臟中獲取？在提取肝糖元過程中，三氯乙酸、95%乙醇各起什么作用？糖元水解產(chǎn)物中如果存在提取中殘留蛋白質(zhì)時，在用班氏試劑檢測水解產(chǎn)物，有什么影響！動物死亡后，體內(nèi)的細(xì)胞還能存活一段時間，由于進行細(xì)胞呼吸作用，肝細(xì)胞會消耗肝糖元，所以必須用新鮮的肝臟細(xì)胞。三氯乙酸是固定作用（蛋白質(zhì)能被三氯乙酸沉淀）；乙醇：糖元不溶于乙醇，可以提取糖元。班氏試劑使用時需要加熱，而加熱會

3、時殘留的蛋白質(zhì)變性水解，對最終測得的水解產(chǎn)物顏色可能有 影響。（水解的產(chǎn)生的氨氣結(jié)合銅離子，是銅離子的氧化性失去，導(dǎo)致生產(chǎn)絳藍色沉淀，實驗將失?。?.請闡述分光光度儀的主要部件及其功能；闡述紫外與可見光的光波長范圍；在紫外與可見光范圍內(nèi)測定 物質(zhì)吸光度時，對光源與吸收池有何要求？光電管的功能是什么？為什么說光電管是分光光度儀最脆弱和 最易損的部件？ 光源（鎢燈）：發(fā)光。單色器：把混合光波分解為單一波長光的裝置。吸收池：盛放待測流體（液體、氣體）試樣的容器。該容器應(yīng)具有兩面互相平行、透光且有精確厚度的平 面。它藉助機械操作能把待測試樣間斷或連續(xù)地送到光路中，以便吸收測量的輻射（光）通量。檢測器：

4、將單色器分出的光信號進行光電轉(zhuǎn)換，電信號在工作站顯示成出峰。測量裝置：通過測得的電流表記錄器數(shù)字示值讀書單元的數(shù)據(jù)來繪制吸收曲線。紫外光：200 至 350nm可見光波長:350 至 760nm紫外測定：其應(yīng)用波長范圍為 200400nm 的紫外光做光源，在低于 350nm 的紫外光區(qū)工作時，必須采用 石英池或熔凝石英池?？梢姽鉁y定：用波長為 400850nm 的可見光作光源，可以用玻璃池石英池熔凝池。 光電管的功能：光電轉(zhuǎn)換，將光信號轉(zhuǎn)化成電信號。光電管容易產(chǎn)生光電管疲勞：所以不測定時必須將試樣室蓋蓋好，使光路切斷，以延長光電管的使用壽命。4. 請闡述 Beer-Lamber 定律，并用該定

5、律闡述分光光度儀工作原理？用分光光度儀定制某物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線時， 需將 0D2值測定范圍確定在 0.20.8 區(qū)域內(nèi)，為什么？(這題沒找到答案，自己寫的)朗伯(Lambert)定律闡述為：光被透明介質(zhì)吸收的比例與入射光的強度無關(guān)；在光程上每等厚層介質(zhì)吸收相 同比例值的光。比爾(Beer)定律闡述為：光被吸收的量正比于光程中產(chǎn)生光吸收的分子數(shù)目。log( lo/l)= & Cl (1 4)式中 Io 和 I 分別為入射光及通過樣品后的透射光強度；log (Io/I)稱為吸光度(ab sorbanee)舊稱光密度(optical density) ; C 為樣品濃度；I 為光程；&為光

6、被吸收的比例系數(shù)。當(dāng)濃度采用摩爾濃度時，&為摩爾吸收系數(shù)。它與吸收物質(zhì)的性質(zhì)及入射光的波長入有關(guān)。工作原理：通過測得的吸光度，帶入Beer-Lamber 定律，可以求得該物質(zhì)的濃度；通過確定該物質(zhì)的最大吸收波長，可以確定該物質(zhì)的種類。OD 值小于 0.2 時，底物濃度低，誤差大；OD 值大于 1 時，線性關(guān)系不好，所以取 0.2 到 0.8.5. 可以用來進行分析測定用的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)具備哪些特性？普通性，純度高(工業(yè)純，化學(xué)成分單一，分析純，光譜純，食品純)，理化性質(zhì)穩(wěn)定，含量準(zhǔn)確，雜質(zhì)無影響。6. 請闡述移液管與比色皿的正確清洗方法和放置方法；闡述移液管取樣與比色皿加樣的正確操作方式和操

7、作注意事項。移液管：移液管清洗要根據(jù)吸取液體的性質(zhì)選用不同的清洗劑，有機液體可用丙酮、乙醇溶液，無機試劑 可用洗滌劑。應(yīng)反復(fù)清洗數(shù)次，再用蒸餾水清洗干凈，自然涼干。標(biāo)志：內(nèi)壁不掛水珠。干凈的移液管應(yīng) 置于干凈的一夜管架上，先豎著放，等水分干后橫著放。比色皿：用鉻酸侵泡一段時間后，將鉻酸倒回試劑瓶，再用清水沖洗比色皿。 使用時，要讓光穿過透光面，測定完畢放到盒里時要讓磨砂面向上，清洗后放置時，倒置于濾紙上。移液管取樣：根據(jù)所移溶液的體積和要求選擇合適規(guī)格的移液管使用，在滴定分析中準(zhǔn)確移取溶液一般使 用移液管，反應(yīng)需控制試液加入量時一般使用吸量管。檢查移液管的管口和尖嘴有無破損，若有破損則不 能使

8、用；1、使用前：使用移液管，首先要看一下移液管標(biāo)記、準(zhǔn)確度等級、刻度標(biāo)線位置等。使用移液管前， 應(yīng)先用鉻酸洗液潤洗，以除去管內(nèi)壁的油污。然后用自來水沖洗殘留的洗液，再用蒸餾水洗凈。洗凈后的 移液管內(nèi)壁應(yīng)不掛水珠。移取溶液前，應(yīng)先用濾紙將移液管末端內(nèi)外的水吸干，然后用欲移取的溶液涮洗 管壁 2 至 3 次，以確保所移取溶液的濃度不變。2、吸液： 搖勻待吸溶液，將待吸溶液倒一小部分于一洗凈并干燥的小燒杯中，用濾紙將清洗過的移液管尖端內(nèi)外的水分吸干，并插入小燒杯中吸取溶液，當(dāng)吸至移液管容量的 1/3 時，立即用右手食指按住管口，取出，橫持并轉(zhuǎn)動移液管，使溶液流遍全管內(nèi)壁，將溶液從下端尖口處排入廢液杯

9、內(nèi)。如此操作，潤洗了 3-4 次后即可吸取溶液。將用待吸液潤洗過的移液管插入待吸液面下12em 處用吸耳球按上述操作方法吸取溶液(注意移液管插入溶液不能太深， 并要邊吸邊往下插入，始終保持此深度)。當(dāng)管內(nèi)液面上升至標(biāo)線以上約12em 處時，迅速用右手食指堵住管口(此時若溶液下落至標(biāo)線以下，應(yīng)重新吸取)，將移液管提出待吸液面，并使管尖端接觸待吸液容器內(nèi)壁片刻后提起，用濾紙擦干移液管或吸量管下端粘附的少量溶液。(在移動移液管或吸量管時，應(yīng)將移液管或吸量管保持垂直，不能傾斜)3、調(diào)節(jié)液面：左手另取一干凈小燒杯，將移液管管尖緊靠小燒杯內(nèi)壁，小燒杯保持傾斜，使移液管保持垂直，刻度線和視線保持水平(左手不

10、能接觸移液管)。稍稍松開食指(可微微轉(zhuǎn)動移液管或吸量管)，使 管內(nèi)溶液慢慢從下口流出，液面將至刻度線時，按緊右手食指，停頓片刻，再按上法將溶液的彎月面底線 放至與標(biāo)線上緣相切為止，立即用食指壓緊管口。將尖口處緊靠燒杯內(nèi)壁，向燒杯口移動少許，去掉尖口 處的液滴。將移液管或吸量管小心移至承接溶液的容器中。4、放出溶液：將移液管或吸量管直立，接受器傾斜，管下端緊靠接受器內(nèi)壁，放開食指，讓溶液沿 接受器內(nèi)壁3流下，管內(nèi)溶液流完后，保持放液狀態(tài)停留 15s，將移液管或吸量管尖端在接受器靠點處靠壁前 后小距離滑動幾下（或?qū)⒁埔汗芗舛丝拷邮芷鲀?nèi)壁旋轉(zhuǎn)一周），移走移液管（殘留在管尖內(nèi)壁處的少量溶液，不可用外力

11、強使其流出，因校準(zhǔn)移液管或吸量管時，已考慮了尖端內(nèi)壁處保留溶液的體積。除在管身上標(biāo) 有“吹”字的，可用吸耳球吹出，不允許保留）。5洗凈移液管，放置在移液管架上。注意事項：1移液管（吸量管）不應(yīng)在烘箱中烘干。2移液管（吸量管）不能移取太熱或太冷的溶液。3同一實驗中應(yīng)盡可能使用同一支移液管。4移液管提出液面后，應(yīng)用濾紙將沾在移液管外壁的液體擦掉；5看刻度時，應(yīng)將移液管的刻度與眼睛平行，以最下面的彎月面為準(zhǔn)。6移液管在使用完畢后，應(yīng)立即用自來水及蒸餾水沖洗干凈，置于移液管架上。7移液管和容量瓶常配合使用，因此在使用前常作兩者的相對體積校準(zhǔn)。8在使用吸量管時，為了減少測量誤差，每次都應(yīng)從最上面刻度（0

12、 刻度）處為起始點，往下放出所需體積的溶液，而不是需要多少體積就吸取多少體積。比色皿加樣：手持干凈的比色皿粗糙面，將裝有溶液的試劑瓶口緊靠比色皿內(nèi)部，緩緩倒出液體，液 體大約占全部的三分之二時，停止倒入，試劑瓶口緊靠比色皿口微提防止溶液倒出。并用吸水紙擦干。注意事項：1、拿取比色皿時，只能用手指接觸兩側(cè)的毛玻璃，避免接觸光學(xué)面。同時注意輕拿輕放，防止外力對比色皿的影響，產(chǎn)生應(yīng)力后破損。2、凡含有腐蝕玻璃的物質(zhì)的溶液，不得長期盛放在比色皿中。3、不能將比色皿放在火焰或電爐上進行加熱或干燥箱內(nèi)烘烤；。4、當(dāng)發(fā)現(xiàn)比色皿里面被污染后，應(yīng)用無水乙醇清洗，及時擦拭干凈。5、不得將比色皿的透光面與硬物或臟物

13、接觸。盛裝溶液時，高度為比色皿的 2/3 處即可，光學(xué)面如有殘液可先用濾紙輕輕吸附，然后再用鏡頭紙或絲綢擦拭。7. 請闡述 黑體”與 參比”在分光光度儀校正中的作用，以及正確的校正操作方法；（以 7200 型可見光分光光度儀，用 DNS 法測定還原糖為例，說明如何進行黑體”與 參比”的校正操作？）黑體校正作用：完全擋住光線，使透光度調(diào)零。黑體校正：調(diào)到T 檔，使透光率為 0%。參比校正作用：消除 DNS 的顏色對測定的影響。參比校正：調(diào)到A 或 T 檔校正都可，A 檔調(diào) 0%， T 檔調(diào)100%。8. 請闡述用分光光度法測定物質(zhì)含量的基本操作步驟；并請闡述兩表一圖”的含義。1接通電源，打開儀器

14、開關(guān)，掀開樣品室暗箱，預(yù)熱十分鐘。2將靈敏度開關(guān)調(diào)至“ 1”檔（若零點調(diào)節(jié)器調(diào)不到零時，需選用較高檔）3根據(jù)所需要測定的波長選擇波長范圍檔4將空白液及待測液分別導(dǎo)入比色杯 3/ 4 處，用擦鏡紙擦干凈外幣，放入樣品室，將空白管對準(zhǔn)光路。5在暗箱蓋開啟狀態(tài)下調(diào)節(jié)零點調(diào)節(jié)器，是讀數(shù)盤指針指向“0 ”處。6蓋上暗箱蓋調(diào)節(jié)“ 100”調(diào)節(jié)器，是空白管的 T=100，指針穩(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿分別讀出測定管的光 密度值，并記錄。7比色完畢，關(guān)上電源，取出比色皿洗凈，樣品室用軟布或軟紙擦干凈。兩表一圖：一表為標(biāo)準(zhǔn)品吸光度隨濃度變化的關(guān)系，一表為待測樣吸光度隨濃度變化的關(guān)系。在最大吸收 波長下，吸4光度從

15、0.2 到 0.8 對應(yīng)的濃度范圍換算出線性回歸方程，為測定該物質(zhì)含量提供理論依據(jù)。9.用分光光度儀定制標(biāo)準(zhǔn)曲線時，需用一對比色皿，一只用于盛參比液，另一只用于盛不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶 液，在使用時，這兩只比色皿之間需要進行校正嗎？為什么？如何校正？需要，每測定一次不同濃度的待測液后都需要從新校正。防止每次微小的系統(tǒng)誤差和光線溫度等對儀器的影響。每測定一次待測溶液后，先拉到黑體位置，調(diào)節(jié)透光度為0:;再拉到參比液位置，將吸光度調(diào)為 0.10什么叫物質(zhì)的特征吸收波長？用分光光度法定制實測物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線時，如何確定被測物質(zhì)的特征吸收 波長？特征吸收波長：吸光度最大時所對應(yīng)的波長。將待測液在不同的波長下測量

16、，做出波長與吸光度的曲線。曲線峰值所對應(yīng)的波長即為物質(zhì)最大吸收波長。11.用微機繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，確定回歸方程、判斷線性關(guān)系好壞時，需用到三個統(tǒng)計學(xué)函數(shù)。請寫出這三個 函數(shù)的完整表達式。不會12. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制有哪幾大要素？（曲線名稱、縱橫坐標(biāo)軸的名稱及單位、正方型網(wǎng)格線、圖例、標(biāo)準(zhǔn) 曲線與實驗各散點的平滑連線）13. 需借助顯色反應(yīng)來進行標(biāo)準(zhǔn)曲線定制時，顯色反應(yīng)試劑與標(biāo)準(zhǔn)品用量上應(yīng)注意什么關(guān)系？ 顯色試劑遠遠過量14. 通過測定樣品待測液 OD 值，由標(biāo)準(zhǔn)曲線對應(yīng)的回歸方程計算待測液顯色濃度時，樣品待測液OD 值測定的大小值應(yīng)控制在什么范圍內(nèi)？0.2 到 0.815. 正確理解樣品待測液顯色濃

17、度、樣品待測液濃度與樣品實際濃度三個基本概念，理解三者之間的關(guān)系。以實驗講義中，F(xiàn)olin 酚測定人體血清蛋白含量為例，說明人體血清蛋白顯色濃度是如何測定的，它與血清蛋白待測液濃度以及血清蛋白實際濃度三者存在什么關(guān)系。先用標(biāo)準(zhǔn)品做出標(biāo)準(zhǔn)曲線，并測得人體血清蛋白的吸光度值，取平均后再代入所制定的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，即 可計算出人體血清蛋白的顯色濃度。關(guān)系：待測大于顯色大于實質(zhì)。16. 在中性脂肪的皂化實驗中，為什么用 NaOH-C2H5OH 液作皂化劑而不用 NaOH-H2。溶液作皂化劑？脂肪在水中的溶解度遠小于乙醇中的溶解度。用 NaOH-H2O 溶液作皂化劑會導(dǎo)致脂肪溶解度過小而引起水解效率過低。

18、17. 請闡述中性脂肪水解反應(yīng)有哪三個主要途徑？其對應(yīng)的生成物是什么？請闡述加酶洗衣粉的洗滌原理 及洗滌時的水溫要求。酸水解，堿水解，脂肪酶水解。產(chǎn)物：甘油，脂肪酸鈉。酶是生物催化劑，可以催化油脂分解并快速溶解，使洗滌效果更好。酶的催化作用受溫度的影響，在最適溫度下，酶的反應(yīng)速率最高。18. 請闡述蛋白質(zhì)雙縮脲反應(yīng)的原理，雙縮脲反應(yīng)的應(yīng)用；為什么用尿素進行雙縮脲反應(yīng)必需用干燥試管 才能得到正確的反應(yīng)結(jié)果？書 92 頁19.請闡述茚三酮反應(yīng)的反應(yīng)原理及其應(yīng)用。書 93 頁520. 請闡述蛋白質(zhì) 鹽析”與中性有機溶劑沉淀蛋白質(zhì)”反應(yīng)原理；這兩類沉淀反應(yīng)有何應(yīng)用？鹽析：用大量中性鹽使蛋白質(zhì)從其膠體溶

19、液中析出的過程為蛋白質(zhì)的鹽析作用。應(yīng)用：分級分離，提純蛋 白質(zhì)。中性有機溶劑：有機溶劑有強合水作用，使蛋白質(zhì)分子脫水，破壞蛋白質(zhì)的水化層，降低其在水溶液中的 穩(wěn)定性，而形成沉淀。應(yīng)用：提純蛋白質(zhì)。21. 在蛋白質(zhì)不可逆沉淀反應(yīng)實驗中，多次涉及到蛋白質(zhì)遇到沉淀劑后，沉淀不增加反而消失的現(xiàn)象，這 一現(xiàn)象統(tǒng)稱為“假溶”現(xiàn)象，蛋白質(zhì)的“假溶”與“復(fù)溶”兩者之間有什么本質(zhì)上的不同？并請解釋以下“假溶”現(xiàn)象：假溶指蛋白質(zhì)已變性后，因溶液或酸或堿而帶同種電荷，使蛋白質(zhì)分子間產(chǎn)生排斥，從而溶解。復(fù)溶指蛋白質(zhì)因溶液酸堿度，輕金屬離子等一起溶解度降低的現(xiàn)像，在消除這些因素后，蛋白質(zhì)能回到原 樣從而復(fù)溶。此過程蛋白

20、質(zhì)未變性。（1）在重金屬鹽沉淀蛋白質(zhì)實驗中，加入過量的硫酸銅或過量的乙酸鉛后，沉淀消失現(xiàn)象？過量的硫酸銅（醋酸鉛）中的銅（鉛）離子會吸附在蛋白質(zhì)表面從而使蛋白質(zhì)帶電而是蛋白質(zhì)分子間相互 排斥，最終發(fā)生假溶現(xiàn)象。（2）在海倫壓環(huán)”試驗中；請解釋用濃硫酸與濃鹽酸進行海倫壓環(huán)試驗振蕩后，沉淀消失現(xiàn)象？ 濃硫酸和濃鹽酸中含有大量的氫離子，氫離子吸附在蛋白質(zhì)表面使蛋白質(zhì)帶電，也能發(fā)生假溶現(xiàn)象。22請闡述用透析試驗驗證蛋白質(zhì)可逆”與不可逆沉淀反應(yīng)”的實驗設(shè)計原理。書 101。透析法：透析袋能使小分子運動出去，而大分子蛋白質(zhì)不能。若果透析后蛋白質(zhì)復(fù)性則為可逆沉 淀，未復(fù)性則為不可逆。23請闡述酸、堿、鹽的存

21、在對加熱變性蛋白質(zhì)沉淀反應(yīng)有何影響。要求能對加熱變性沉淀蛋白質(zhì)實驗中涉及到的每個實驗現(xiàn)象作出正確的理論解釋。沉淀一一溶解，解釋：參照假溶現(xiàn)象。24請闡述電泳基本概念，常用電泳方法的分類及其應(yīng)用。書 32.25請闡述全血，血漿與血清基本概念。略26請闡述人體血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳原理，通過人體血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳，可以將人體血清蛋白分為哪幾類？分離測定各血清蛋白相對百分含量對于醫(yī)學(xué)臨床診斷疾病有何指導(dǎo)意義？書 13127. 為什么人體血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳適宜在pH=8.6 的弱堿性緩沖液中進行電泳分離，而不適宜在弱酸性緩沖液中電泳？書 131 頁，實驗原理第二段。28.請闡述在電泳實驗

22、中，電場強度、電泳緩沖溶液pH、 緩沖溶液的離子強度對被分離物質(zhì)有何影響？電場強度：電泳速度緩沖液 PH :蛋白質(zhì)帶電多少，從而影響電泳速度。緩沖液離子強度：溶液的離子強度電泳液中的離子濃度增加時會引起質(zhì)點遷移率的降低。其原因是帶電質(zhì)6點吸引相反符合的離子聚集其周圍，形成一個與運動質(zhì)點符合相反的離子氛（ionic atmosphere），離子氛不僅降低質(zhì)點的帶電量，同時增加質(zhì)點前移的阻力，甚至使其不能泳動。然而離子濃度過低，會降低緩沖液 的總濃度及緩沖容量，不易維持溶液的pH 值，影響質(zhì)點的帶電量，改變泳動速度。離子的這種障礙效應(yīng)與其濃度和價數(shù)相關(guān)?？捎秒x子強度I 表示。29在電泳中 虹吸現(xiàn)象

23、”是如何發(fā)生的？虹吸現(xiàn)象”對電泳有何影響？如何在電泳實驗操作中盡量避免虹吸現(xiàn)象”發(fā)生？虹吸現(xiàn)象是液態(tài)分子間引力與位差能造成的。（如薄膜的干濕程度不同，點樣時操作不精確，電泳時薄膜未平衡等）影響：在某區(qū)域發(fā)生虹吸現(xiàn)象會使這里電泳時蛋白質(zhì)分子在電場中運動速度改變，從而時薄膜上的蛋白質(zhì) 分布不均勻準(zhǔn)確，影響測量結(jié)果。挑選薄膜是一定要挑光滑，質(zhì)地均勻，無斑點，能迅速潤濕的。點樣精確均勻，并且架空式不能使薄膜接 觸桌面。電泳之前一定要平衡。30. 列表詳盡闡述在血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳實驗操作中，下列試劑及器材的作用：（1）三層濾紙（作鹽橋）；（2）厚型載玻片（架空，使薄膜點樣懸空）；（3） pH8.6

24、 的電泳緩沖液（時蛋白質(zhì)帶同種電荷）；（4） 10B 氨基黑染色液（固定染色蛋白質(zhì)）；（5）冰乙酸-乙醇漂洗液（洗去薄膜上不含蛋白質(zhì)的染料）（6）0.4moL/L 的 NaOH 溶液（洗去蛋白質(zhì)上的染料）？31. 請闡述 Folin 酚法定制蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的原理；對比雙縮脲定制蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線原理和方法，列表從標(biāo) 準(zhǔn)品的使用濃度，測定范圍，反應(yīng)靈敏度，標(biāo)準(zhǔn)品的用量，線性關(guān)系的好壞比較兩種測定蛋白質(zhì)方法的優(yōu)、 缺點。（略）32.請闡述考馬斯亮藍 G250 染色法定制蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的原理；對比Folin 酚定制蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線原理和方法，列表從標(biāo)準(zhǔn)品的使用濃度，測定范圍，反應(yīng)靈敏度，標(biāo)準(zhǔn)品的用量，線性

25、關(guān)系的好壞比較兩種測定 蛋白質(zhì)方法的優(yōu)、缺點。（略）33請從檢測方法的原理與應(yīng)用范圍著手分析，為什么分別采用Folin 酚法和雙縮脲法測定“蛋白胨”這種微生物培養(yǎng)基質(zhì)中蛋白含量時，其測定出的蛋白含量檢測結(jié)果會大相徑庭，相差甚遠？ 從測定特點去分析，一個能測定水解蛋白，一個不能。相關(guān)資料：蛋白胨是有機化合物。蛋白胨是將肉、酪素或明膠用酸或蛋白酶水解后干燥而成的外觀呈淡黃 色的粉劑，具有肉香的特殊氣息。蛋白質(zhì)經(jīng)酸、堿或蛋白酶分解后也可形成蛋白胨。在胃內(nèi)蛋白質(zhì)的初步 消化產(chǎn)物之一就是蛋白胨。蛋白胨富含有機氮化合物，也含有一些維生素和糖類。它可以作為微生物培養(yǎng)基的主要原料，在抗生素、醫(yī)藥工業(yè)、發(fā)酵工業(yè)、生化制品及微生物學(xué)科研等領(lǐng)域中的用量均很大，可以 用來治療消化道疾??；不同的生物體需要特定的氨基酸和多肽，因此存在著各種蛋白胨，一般來說，用于蛋白胨生產(chǎn)的蛋白包括動物蛋白（酪蛋白、肉類）和植物蛋白（豆類）等兩種。34在考馬斯亮藍 G250 染色法定制蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線實驗準(zhǔn)備中，考馬斯亮藍G250