動物細胞融合wose

1、動物細胞融合和單克隆抗體動物細胞融合和單克隆抗體學習目標 了解細胞融合的原理、過程和意義了解細胞融合的原理、過程和意義 理解單克隆抗體制備的過程和應用理解單克隆抗體制備的過程和應用重點難點重點難點1.1.學習重點：學習重點： 單克隆抗體的制備和應用單克隆抗體的制備和應用2.2.學習難點：學習難點： 單克隆抗體的制備過程單克隆抗體的制備過程 溫故而知新溫故而知新植物細胞雜交植物細胞雜交（馬鈴薯番茄）（馬鈴薯番茄）融合融合的原的原生質(zhì)生質(zhì)體體ABAB再再生生出出細細胞胞壁壁植物細胞的融合植物細胞的融合雜雜種種細細胞胞AB雜雜種種植植株株脫脫分分化化愈愈傷傷組組織織再再分分化化植物組織培養(yǎng)植物組織培

2、養(yǎng)原生質(zhì)體原生質(zhì)體B原生質(zhì)體原生質(zhì)體A去去 壁壁去去 壁壁人人工工誘誘導導植物細胞植物細胞A植物細胞植物細胞B三、動物細胞融合三、動物細胞融合1.1.概念：概念： 動物細胞融合也稱細胞雜交，是指動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或兩個或多個多個動物細胞結(jié)合形成動物細胞結(jié)合形成一個一個細胞的過程。細胞的過程。 融合后形成的融合后形成的單核細胞單核細胞，稱為雜交細胞。，稱為雜交細胞。2 2、基本原理：、基本原理：細胞膜的流動性細胞膜的流動性 (植物原生質(zhì)體融合植物原生質(zhì)體融合)物理法：物理法：化學法：化學法：生物法：生物法： 滅活的病毒滅活的病毒 例如：仙臺病毒例如：仙臺病毒3、誘導方式、誘導方式

3、滅活的病毒顆粒黏附于細胞表面滅活的病毒顆粒黏附于細胞表面細胞膜被病毒顆粒穿通細胞膜被病毒顆粒穿通細胞膜連接細胞膜連接細胞融合，形成雜種細胞細胞融合，形成雜種細胞（細胞膜具有一定的流動性）（細胞膜具有一定的流動性）生物法：生物法： 滅活的病毒滅活的病毒（喪失感染性、保留抗原結(jié)構）（喪失感染性、保留抗原結(jié)構）. .過程：過程：細胞膜的細胞膜的流動性流動性和和植物細胞植物細胞全能性全能性細胞膜細胞膜的流動的流動性性抗體由什么細胞產(chǎn)生？抗體由什么細胞產(chǎn)生？其化學本質(zhì)是什么？其化學本質(zhì)是什么？主要分布在哪里？主要分布在哪里？B B淋巴細胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生特異性抗體。淋巴細胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生特

4、異性抗體。動物在免疫反應過程中，體內(nèi)產(chǎn)生特異性抗體種類可達百動物在免疫反應過程中，體內(nèi)產(chǎn)生特異性抗體種類可達百萬種以上，每種抗體對特定的抗原具有特異性免疫作用。萬種以上，每種抗體對特定的抗原具有特異性免疫作用。但但每一個淋巴細胞只分泌一種特異性抗體每一個淋巴細胞只分泌一種特異性抗體。、在體外，、在體外，一個淋巴細胞是不可能無限增殖的。一個淋巴細胞是不可能無限增殖的。從從血血清清中中分分離離抗抗體體該方法制備抗體的特點：該方法制備抗體的特點： 產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差。產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差。多多種種效效應應B細細胞胞動動物物體體內(nèi)內(nèi)多多種種抗抗體體抗抗原原 自主閱讀自主閱讀P

5、52：傳統(tǒng)的抗體的生產(chǎn)方法及缺陷是什么？：傳統(tǒng)的抗體的生產(chǎn)方法及缺陷是什么？、單克隆抗體、單克隆抗體McAb（概念）（概念） 由單個由單個B B淋巴細胞經(jīng)過淋巴細胞經(jīng)過無性繁殖無性繁殖（克隆），形（克?。纬苫蛐拖嗤募毎?，這一細胞群所產(chǎn)生的成基因型相同的細胞群，這一細胞群所產(chǎn)生的化學化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體性質(zhì)單一、特異性強的抗體稱為單克隆抗體。稱為單克隆抗體。 那么，如何那么，如何大量獲得化學性質(zhì)單一、特異大量獲得化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體性強的抗體？（即？（即單克隆抗體單克隆抗體）二、單克隆抗體制備二、單克隆抗體制備一個一個B B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體淋巴細胞只分泌一種

6、特異性抗體骨髓瘤細胞（癌細胞）能無限增殖骨髓瘤細胞（癌細胞）能無限增殖雜種細胞雜種細胞動物細胞培養(yǎng)技術動物細胞培養(yǎng)技術、設計方案：、設計方案：動物細胞融合動物細胞融合單克隆單克隆抗體抗體既能產(chǎn)生特異性抗既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量繁殖體，又能大量繁殖單克隆抗體的制備思考思考討論討論1 、注射抗原的目的是什么、注射抗原的目的是什么?2 2、單克隆抗體制備時需選哪兩種細胞融合？、單克隆抗體制備時需選哪兩種細胞融合？ 誘導融合方法？誘導融合方法？3 3、考慮細胞兩兩融合會有幾種融合結(jié)果？、考慮細胞兩兩融合會有幾種融合結(jié)果？ 4 4、如何篩選出雜交瘤細胞？雜交瘤細胞有哪些特點？、如何篩選出雜交瘤細胞？

7、雜交瘤細胞有哪些特點？5 5、選出的雜交瘤細胞都能產(chǎn)生、選出的雜交瘤細胞都能產(chǎn)生所需的所需的特異性抗體嗎？特異性抗體嗎？6 6、如何、如何篩選出產(chǎn)生篩選出產(chǎn)生所需的所需的特異性抗體的雜交瘤細胞？特異性抗體的雜交瘤細胞？7 7、兩次篩選的目的各是？、兩次篩選的目的各是？8 8、如何培養(yǎng)雜交瘤細胞得到大量的單克隆抗體？、如何培養(yǎng)雜交瘤細胞得到大量的單克隆抗體？ 兩種方法的優(yōu)點？兩種方法的優(yōu)點？9、此過程運用到哪些生物學技術？、此過程運用到哪些生物學技術？動物細胞融動物細胞融合技術合技術BB 、B瘤瘤 、瘤瘤、瘤瘤 、B 、瘤瘤只有雜交瘤只有雜交瘤細胞才能活細胞才能活動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)3.3.

8、制備過程制備過程獲得產(chǎn)生相應抗體的獲得產(chǎn)生相應抗體的B淋巴細胞淋巴細胞雜交瘤細胞：雜交瘤細胞：即能迅速大量增即能迅速大量增殖，殖，又能產(chǎn)生專又能產(chǎn)生專一的抗體一的抗體能產(chǎn)生所需特定抗體能產(chǎn)生所需特定抗體的雜交瘤細胞的雜交瘤細胞培養(yǎng)條件簡單，培養(yǎng)條件簡單，無需配置培養(yǎng)液無需配置培養(yǎng)液能在短時間內(nèi)產(chǎn)能在短時間內(nèi)產(chǎn)生大量的單克隆生大量的單克隆抗體抗體能產(chǎn)生特定所需抗能產(chǎn)生特定所需抗體的雜交瘤細胞體的雜交瘤細胞雜交瘤細胞雜交瘤細胞請用箭頭把以下代表單克隆抗體制備過程步驟的請用箭頭把以下代表單克隆抗體制備過程步驟的圖解的字母按正確順序連接起來。順序是？圖解的字母按正確順序連接起來。順序是？ 4 4、單克

9、隆抗體的特點和應用、單克隆抗體的特點和應用與常規(guī)抗體相比，單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，單克隆抗體特異性強，特異性強，靈敏度高，產(chǎn)量高靈敏度高，產(chǎn)量高。應用：應用：特點：特點：可用于作為診斷試劑：有準確，高效，快速的優(yōu)點可用于作為診斷試劑：有準確，高效，快速的優(yōu)點可用于疾病治療可用于疾病治療可用于運載藥物可用于運載藥物“生物導彈生物導彈”單克隆抗體藥物單克隆抗體藥物1 1、科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，、科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜交細胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆得到雜交細胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓疤細胞融合的是（抗體，與骨髓疤細胞融合的是（ ） A.A.經(jīng)過

10、免疫的經(jīng)過免疫的B B淋巴細胞淋巴細胞 B.B.沒經(jīng)過免疫的沒經(jīng)過免疫的T T淋巴細胞淋巴細胞C.C.經(jīng)過免疫的經(jīng)過免疫的T T淋巴細胞淋巴細胞 D.D.沒經(jīng)過免疫的淋巴細胞沒經(jīng)過免疫的淋巴細胞A2.動物細胞融合的目的中最重要的是動物細胞融合的目的中最重要的是-（ ）A.克服遠緣雜交不親和克服遠緣雜交不親和 B. 制備單克隆抗體制備單克隆抗體 C.培育新品種培育新品種 D.生產(chǎn)雜種細胞生產(chǎn)雜種細胞3.動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較中，正確的是動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較中，正確的是（ ）誘導融合的方法完全相同誘導融合的方法完全相同 B.所用的技術手段基本相同所用的技術手段基本相同 C. 所采用的原理完全相同所采用的原理完全相同 D. 都能形成雜種細胞都能形成雜種細胞 AD4. 單克隆抗體制備過程中培育的雜交細胞是單克隆抗體制備過程中培育的雜交細胞是-（ ）A.由小鼠