CE 07毛細(xì)管凝膠電泳

1、Capillary Gel Electrophoresis毛細(xì)管凝膠電泳nCITPnCZEnCIEF nCGE nCECCapillary Gel Electrophoresisn根據(jù)帶電組分的大小分離n毛細(xì)管的表面電荷少n分離介質(zhì) 交聯(lián)聚丙烯酰胺 線性聚丙烯酰胺其它可更換的水溶性聚合物n適用于淌度相近而大小不同的組分DNAProteins-SDS complexOgston ModelRepatation ModelCH2=CHC=ONHCH2NHCH2=CHC=OCH2=CHCONH2丙烯酰胺量(a)甲叉雙丙烯酰胺(b)PA凝膠的濃度T和CT單體和交聯(lián)劑的百分濃度C交聯(lián)劑的量a 丙烯酰胺量

2、（g）b甲叉雙丙烯酰胺的量（g）m緩沖溶液的體積（ml）%100%100babCmbaT聚丙烯酰胺凝膠毛細(xì)管柱的制備方法聚丙烯酰胺凝膠毛細(xì)管柱的制備方法檢測(cè)窗口制備檢測(cè)窗口制備內(nèi)壁修飾內(nèi)壁修飾 120C熱空氣吹，室溫氨氣沖洗2h，后503甲基丙烯酰氧丙基三甲氧基硅烷（3methacryloxypropyl-trimethoxysilane)充滿一晝夜后，用甲醇和水沖洗緩沖溶液制備緩沖溶液制備 1.1g Tris和 0.01g EDTA溶于100 ml 7M尿素溶液，用NaH2PO4調(diào)至pH 8.6單體溶液制備單體溶液制備 29g 丙烯酰胺和1g N甲叉雙丙烯酰胺溶解在100ml 緩沖溶液中催化

3、劑制備催化劑制備 0.2g 過(guò)硫酸銨溶于2ml 緩沖溶液中凝膠溶液制備凝膠溶液制備 10ml 單體溶液加入到30ml緩沖溶液中，甲4ul 催化劑溶液，2.5 ul 四甲基乙二胺（TEMED）預(yù)聚合45分鐘1.1.灌注聚合灌注聚合 上述凝膠溶液注入毛細(xì)管到無(wú)氣泡，將兩端浸入緩沖溶液中聚合數(shù)小時(shí)。親水高分子聚合物無(wú)膠篩分體系Mobility of dsDNA and the choice of gel concentration凝膠的濃度ssDNAConcentration of HPMC on the separation of dsDNA ladderA-0.1%， B-0.3%， C-0.7%電場(chǎng)強(qiáng)度ssDNA 高效分離塔板數(shù)達(dá)3千萬(wàn)！EB and dsDNAssDNASanger 鏈中止法擴(kuò)增測(cè)序HV supplyCapillaryGlass slideDetectionwindowITO thermostatPCR vialFractureChip PCR online with chip CEDenaturing of protein before SDS-C-PAGEDenature condition: 1% SDS, 2% beta-mercaptoethanol 30min at 90C.SDS CGE of prote