凝血試劑應(yīng)用手冊20104

1、PT 凝血酶原時(shí)間一、 名稱：PT凝血酶原時(shí)間。二、 原理：在受檢血漿中加入過量的因子 III（人胎盤的浸出液）和 Ca2+，使凝血酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槟福笳呤估w維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白，血漿凝固所需要的時(shí)間即為PT。它是外源性凝血系統(tǒng)常用篩選試驗(yàn)之一。三、 試劑：Thromborel S 試劑，為人胎盤浸出液和 Ca2+的混合試劑，試劑說明書中包含本試劑用在不同型號(hào)、不同方法學(xué)的儀器上的國際敏感度指數(shù)（ISI）。試劑溶解 時(shí)分別按包裝用 10ML 或 4.0ML 的蒸餾水復(fù)溶。四、 儀器品牌：日本進(jìn)口SYSMEX公司的CA550、CA1500、CA7000型全自動(dòng)血凝儀。五、 操作步驟：SYSME

2、X 的 CA 系列血凝儀采用的是散射光比濁，百分比檢測，監(jiān)測樣品凝集開始到凝集完全的散射光強(qiáng)度的變化，50%凝集時(shí)所對應(yīng)的時(shí)間即為凝血 酶原時(shí)間。1、 將 PT 的試劑按照說明溶解好以后，放到確定的位置上。2、 將樣本離心準(zhǔn)備好以后，放到樣本架上，樣本架放到自動(dòng)進(jìn)樣器上。3、 在屏幕上進(jìn)入 WORK LIST 菜單，設(shè)好 ID 號(hào)，及要檢測的項(xiàng)目，一切準(zhǔn)備好便可 按 START 開始。六、 參考值： PT9-13 秒七、 臨床意義：PT 延長：先天性見于因子 II、V、VII、X 缺乏和無（或）低纖維蛋白原血癥；獲 得性見于彌散性血管內(nèi)凝血、原發(fā)性纖溶癥、維生素 K 缺乏癥、肝臟疾??；血循 環(huán)

3、中有抗凝物質(zhì)，如肝素、FDP、以及抗因子 II、V、VII、X 的抗體存在等情況。 PT 縮短：見于因子 V 增多癥、口服避孕藥、高凝狀態(tài)和血栓性疾病等。 口服抗凝劑的監(jiān)測：凝血酶原時(shí)間是監(jiān)測口服抗凝劑的常用指標(biāo)，中國人 INR 在1.52.5 用藥較為安全和有效。八、 標(biāo)本制備：9 份靜脈血加一份 3.8g/dl(109mmol/L)枸櫞酸鈉抗凝，立即混勻，3000r/min×15min，血漿可在 15-25保存 4 小時(shí)，在-20至少可以保存 24 小時(shí)。九、 注意事項(xiàng)：試劑溶解后，可在 15放置 8 小時(shí)，2-8可保存 5 天。復(fù)溶要充分，溶解后的試劑最好不要在低溫冷凍保存。十

4、、 編寫者：VASTEC公司血栓止血臨床應(yīng)有技術(shù)專員 陳中超十一、 參考文獻(xiàn)：1 SYSMEX CA-1500 ,SERVICEMANUAL2 曾照芳，翟箋才，臨床檢驗(yàn)儀器學(xué)，北京：人民衛(wèi)生出版社，20013 姚泰，生理學(xué)（第六版），北京：人民衛(wèi)生出版社，20034 趙桂芝，臨床檢驗(yàn)學(xué)，成都：四川科學(xué)技術(shù)出版社，19975 陸永綏，李清華，張偉明，臨床檢驗(yàn)自動(dòng)化儀器分析標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，浙江：浙江大學(xué)出版社，2006十二、 科室主任：APTT 部分凝血活酶時(shí)間一、 名稱：APTT部分凝血活酶時(shí)間。二、 原理：在 37下，以鞣花酸為激活劑活化凝血因子 XII 和 XI，以腦磷脂（部分凝血活酶）代替血

5、小板提供凝血的催化表面，在 Ca2+的參與下，觀察貧血小板血漿凝固所需要的時(shí)間。APTT 測定是內(nèi)源性凝血系統(tǒng)較為敏感、簡便和常用的篩選試驗(yàn)。三、 試劑：Actin 試劑（鞣花酸做為激活劑，磷脂為兔腦粉），及 CaCl2 試劑，試劑為 液體不需復(fù)溶。2-8可保存到效期。四、 儀器品牌：日本進(jìn)口SYSMEX公司的CA550、CA1500、CA7000型全自動(dòng)血凝儀。五、 操作步驟：SYSMEX 的 CA血凝儀采用的是散射光比濁，百分比檢測，監(jiān)測 樣品凝集開始到凝集完全的散射光強(qiáng)度的變化，50%凝集時(shí)所對應(yīng)的時(shí)間即為凝血酶原時(shí)間。a) 將 APTT 的試劑和 CaCl2 放到確定的位置上。b) 將

6、樣本離心準(zhǔn)備好以后，放到樣本架上，樣本架放到自動(dòng)進(jìn)樣器上。c) 在屏幕上進(jìn)入 WORK LIST 菜單，設(shè)好 ID 號(hào)，及要檢測的項(xiàng)目，一切準(zhǔn)備好便可 按 START 開始。六、 參考值： APTT 20-40 秒七、 臨床意義： a)APTT 延長：1、 因子 VIII、IX 和 XI 血漿中水平減低，如血友病 A、B 及凝血因子 XI 缺乏癥；因子 VIII 減少還見于部分血管性血友病患者；2、 嚴(yán)重的凝血酶原、因子 V、因子 X 和纖維蛋白原缺乏，如肝臟疾病、阻塞性黃疸、 新生兒出血癥、腸道滅菌綜合癥、吸收不良綜合征、口服抗凝劑、應(yīng)用肝素以及纖 維蛋白原缺乏血癥等；3、 纖溶活性增強(qiáng)，如

7、繼發(fā)性、原發(fā)性纖溶亢進(jìn)及循環(huán)血液中有纖維蛋白（原）降解產(chǎn) 物（FDP）;4、 血循環(huán)中有抗凝物質(zhì)，如抗因子 VIII 或 IX 抗體，狼瘡抗凝物質(zhì)等。b)APTT 縮短：1、 高凝狀態(tài)，如彌散性血管內(nèi)凝血的高凝期、促凝物質(zhì)進(jìn)入血流以及凝血因子的活性增高等；2、 血栓性疾病，如心肌梗死、不穩(wěn)定性心絞痛、腦血管病變、糖尿病伴血管病變、肺 梗死、深靜脈血栓形成、妊娠高血壓綜合征和腎病綜合征以及嚴(yán)重的灼傷等。八、 標(biāo)本制備：9 份靜脈血加一份 3.8g/dl(109mmol/L)枸櫞酸鈉抗凝，立即混勻，3000r/min×15min，血漿可在 15-25保存 4 小時(shí)，在-20至少可以保存

8、24 小時(shí)。九、 注意事項(xiàng)：APTT 試劑為液體試劑無需復(fù)溶，需要在 2-8下保存，切勿凍存。十、 編寫者：VASTEC公司血栓止血臨床應(yīng)有技術(shù)專員 陳中超十一、 參考文獻(xiàn)：1 SYSMEX CA-1500 ,SERVICEMANUAL2 曾照芳，翟箋才，臨床檢驗(yàn)儀器學(xué)，北京：人民衛(wèi)生出版社，20013 姚泰，生理學(xué)（第六版），北京：人民衛(wèi)生出版社，20034 陸永綏，李清華，張偉明，臨床檢驗(yàn)自動(dòng)化儀器分析標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，浙江：浙江大學(xué)出版社，2006十二、 科室主任：FBG 纖維蛋白原測定一、 名稱：FBG纖維蛋白測定。二、 原理：采用 Clauss 凝固法原理，根據(jù)纖維蛋白原與凝血酶作用最終

9、形成纖維蛋白的原理。以國際標(biāo)準(zhǔn)品為參比血漿制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，用過量的凝血酶來測定血漿凝固 時(shí)間，所得凝固時(shí)間與血漿中纖維蛋白原濃度呈負(fù)相關(guān)，從而得到纖維蛋白原的含 量。三、 試劑：Thrombin 試劑（凝血酶凍干品），1ml 的蒸餾水復(fù)溶。Owens Buffer 緩沖液，注意試劑是否結(jié)晶會(huì)影響結(jié)果。四、 儀器品牌：日本進(jìn)口SYSMEX公司的CA550、CA1500、CA7000型全自動(dòng)血凝儀。五、 操作步驟：SYSMEX 的 CA 系列血凝儀采用的是散色光比濁，百分比檢測，監(jiān)測樣品凝集完全的散射光強(qiáng)度的變化，50%凝集時(shí)所對應(yīng)的時(shí)間即為凝血酶時(shí)間。1.將 FBG 試劑按照說明溶解好以后，放到確

10、定的位置上。2.將樣本離心準(zhǔn)備好后，放到樣本架上，樣本架放到自動(dòng)進(jìn)樣器上。3.在屏幕上進(jìn)入 WORK LIST 菜單，設(shè)好 ID 號(hào)，以及要檢測的項(xiàng)目，一切準(zhǔn)備好后 可按 START 開始。六、 參考值： FBG：2-4g/l七、 臨床意義：FBG 含量增高：見于糖尿病及其酸中毒，動(dòng)脈粥樣硬化，急性傳染病，急性腎炎 尿毒癥，骨髓瘤，休克，外科術(shù)后及輕，度肝炎等。FBG 含量減低：見于 DIC，原發(fā)性纖溶癥，重癥肝炎，肝硬化等。八、 標(biāo)本制備：9 份靜脈血加一份 3.8g/dl(109mmol/L)枸櫞酸鈉抗凝，立即混勻，3000r/min×15min，血漿可在 15-25保存4小時(shí)，

11、在-20至少可以保存 24 小時(shí)。九、 注意事項(xiàng)：試劑溶解后，可在 15放置 10 小時(shí)，2-8可放 7 天。復(fù)溶要充分，復(fù)溶好的試劑可冷凍分裝保存十、 編寫者：VASTEC公司血栓止血臨床應(yīng)有技術(shù)專員 陳中超十一、 參考文獻(xiàn)：1 SYSMEX CA-1500 ,SERVICEMANUAL2 曾照芳，翟箋才，臨床檢驗(yàn)儀器學(xué)，北京：人民衛(wèi)生出版社，20013 姚泰，生理學(xué)（第六版），北京：人民衛(wèi)生出版社，20034 趙桂芝，臨床檢驗(yàn)學(xué)，成都：四川科學(xué)技術(shù)出版社，19975 陸永綏，李清華，張偉明，臨床檢驗(yàn)自動(dòng)化儀器分析標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，浙江：浙江大學(xué)出版社，2006十二、 科室主任：TT 凝血酶時(shí)間

12、一、 名稱：TT凝血酶時(shí)間。二、 原理：待測血漿加入標(biāo)定的凝血酶溶液，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白，測定凝固所需的時(shí)間，即為待測血漿凝血酶時(shí)間。三、 試劑：TestThrombin 試劑（凝血酶凍干品。）。試劑溶解時(shí)用 TT 特有的緩沖液以 5ml 復(fù)溶。四、 儀器品牌：日本進(jìn)口SYSMEX公司的CA550、CA1500、CA7000型全自動(dòng)血凝儀。五、 操作步驟：SYSMEX 的 CA 系列血凝儀采用的是散色光比濁，百分比檢測，監(jiān)測樣品凝集完全的散射光強(qiáng)度的變化，30%凝集時(shí)所對應(yīng)的時(shí)間即為凝血酶時(shí)間。1. 將 TT 試劑按照說明溶解好以后，放到確定的位置上。2. 將樣本離心準(zhǔn)備好后，放到樣本架

13、上，樣本架放到自動(dòng)進(jìn)樣器上。3. 在屏幕上進(jìn)入 WORK LIST 菜單，設(shè)好 ID 號(hào)，以及要檢測的項(xiàng)目，一切準(zhǔn)備好后可按 START 開始。六、 參考值： TT14-21 秒七、 臨床意義：TT 延長：見于肝素增多或類肝素物質(zhì)存在，SLE，肝病，腎病，低（無）纖維蛋白 原血癥，異常纖維蛋白原血癥，F(xiàn)DP 增多等疾病。八、 標(biāo)本制備：9 份靜脈血加一份 3.8g/dl(109mmol/L)枸櫞酸鈉抗凝，立即混勻，3000r/min×15min，血漿可在 15-25保存 4 小時(shí)，在-20至少可以保存 24 小時(shí)。九、 注意事項(xiàng)：試劑溶解后，可在 15放置 10 小時(shí)，2-8可放 7

14、 天。復(fù)溶要充分，復(fù)溶好的試劑可冷凍分裝保存。十、 編寫者：VASTEC公司血栓止血臨床應(yīng)有技術(shù)專員 陳中超十一、 參考文獻(xiàn)：1 SYSMEX CA-1500 ,SERVICEMANUAL2 曾照芳，翟箋才，臨床檢驗(yàn)儀器學(xué)，北京：人民衛(wèi)生出版社，20013 姚泰，生理學(xué)（第六版），北京：人民衛(wèi)生出版社，20034 趙桂芝，臨床檢驗(yàn)學(xué)，成都：四川科學(xué)技術(shù)出版社，19975 陸永綏，李清華，張偉明，臨床檢驗(yàn)自動(dòng)化儀器分析標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，浙江：浙江大學(xué)出版社，2006十二、 科室主任：抗凝血酶 III 檢測（ATIII）一、 名稱：抗凝血酶III測定。二、 原理：ATIII 是血液凝固的一種主要抑制劑

15、，其功能分析依賴于血漿中有肝素存在的情況下降低凝血酶活性的能力。樣本中的 ATIII 在肝素的存在下與未激活的凝血酶形成凝血酶抗凝血酶復(fù)合物。剩余的凝血酶與試劑中的底物結(jié)合，在 405nm 波長下檢 測吸光度的變化。以國際標(biāo)準(zhǔn)品為參比血漿作濃度與吸光度的曲線。所測樣本的吸光 度將會(huì)根據(jù)曲線得到樣本的濃度。三、 試劑：Thrombin Reagent6 X15ml（凝血酶試劑 用 15ml 的緩沖液復(fù)溶）Substrate Reagent6X3 ml（底物用 3ml 的去離子水復(fù)溶）uffer Solution1X100ml （緩沖液 液體用于復(fù)溶凝血酶試劑）四、 儀器品牌：日本進(jìn)口SYSMEX

16、公司的CA550、CA1500、CA7000型全自動(dòng)血凝儀。五、 操作步驟：SYSMEX 的 CA 系列血凝儀采用的是發(fā)色底物法來檢測 ATIII。1.將 AT III 試劑盒中所有試劑按照說明溶解好以后，放到確定的位置上。4. 將樣本離心準(zhǔn)備好后，放到樣本架上，樣本架放到自動(dòng)進(jìn)樣器上。5. 在屏幕上進(jìn)入 WORK LIST 菜單，設(shè)好 ID 號(hào)，以及要檢測的項(xiàng)目，一切準(zhǔn)備好 后可按 START 開始。六、 參考值： ATIII75125%七、 臨床意義：定量測定血漿中抗凝血酶（ATIII）的活性，能用于診斷ATIII合成減少或消耗增加性疾病，和監(jiān)測替代治療效果。ATIII 缺乏主要見于肝臟疾病、彌散性血管內(nèi)凝血、敗血癥、肺栓塞、腎病綜合癥、中風(fēng)及深靜脈血栓等。八、 標(biāo)本制備：9 份靜脈血加一份 3.8g/dl(109mmol/L)枸櫞酸鈉抗凝，立即混勻，3000r/min×15min，在 60 分鐘以內(nèi)分離血漿，分離血漿時(shí)用塑料吸頭、且用塑料試管儲(chǔ)存血漿。分析血漿標(biāo)本在 2 小時(shí)內(nèi)完成；另外，冰凍保存，融化使用等。九、 注意事項(xiàng)：凝血酶試劑溶解后，使用時(shí)在 15-25-孵育 30 分鐘。凝血酶試劑復(fù)溶后在原始瓶中可冰凍 5 次，底物可冰凍 10 次。緩沖液 2-8可保存 6 個(gè)月。2-8凝血酶穩(wěn)