化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù) (5)

1、關(guān)于化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)關(guān)于化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù) (5)現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第一頁，共29頁發(fā)光：發(fā)光：是指分子或原子中的電子吸收能量后，由是指分子或原子中的電子吸收能量后，由基態(tài)基態(tài)（較低能級(jí)）躍遷到（較低能級(jí)）躍遷到激發(fā)態(tài)激發(fā)態(tài)（較高能級(jí)），然（較高能級(jí)），然后再返回到基態(tài)，并釋放光子的過程。后再返回到基態(tài)，并釋放光子的過程?；鶓B(tài)基態(tài)v0激發(fā)態(tài)激發(fā)態(tài)v能量能量h.v普朗克公式，能量普朗克公式，能量=h.vh為普朗克常數(shù)，為普朗克常數(shù)，v為頻率為頻率發(fā)光發(fā)光現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二頁，共29頁發(fā)光的分類發(fā)光的分類是指發(fā)光劑（熒光素）是指發(fā)光劑（熒光素）經(jīng)短波長(zhǎng)的入射光照射經(jīng)短波長(zhǎng)的入射光照射后后，電子吸收能

2、量躍，電子吸收能量躍遷到激發(fā)態(tài)，在其回遷到激發(fā)態(tài)，在其回復(fù)至基態(tài)時(shí)，復(fù)至基態(tài)時(shí)，發(fā)射出較發(fā)射出較長(zhǎng)波長(zhǎng)的可見光長(zhǎng)波長(zhǎng)的可見光（熒光）（熒光）。是指發(fā)生在生物體內(nèi)的是指發(fā)生在生物體內(nèi)的發(fā)光現(xiàn)象發(fā)光現(xiàn)象。如螢火蟲的。如螢火蟲的發(fā)光，反應(yīng)底物為螢火發(fā)光，反應(yīng)底物為螢火蟲熒光素，在熒光素酶蟲熒光素，在熒光素酶的催化下，利用的催化下，利用ATP能能，生成激發(fā)態(tài)氧化型熒，生成激發(fā)態(tài)氧化型熒光素，它在回復(fù)基態(tài)時(shí)光素，它在回復(fù)基態(tài)時(shí)多余的能量以光子的形多余的能量以光子的形式釋放出來。式釋放出來。是指伴隨化學(xué)反應(yīng)過程是指伴隨化學(xué)反應(yīng)過程所產(chǎn)生的光的發(fā)射現(xiàn)象所產(chǎn)生的光的發(fā)射現(xiàn)象。某些物質(zhì)（發(fā)光劑）某些物質(zhì)（發(fā)光劑

3、）在化學(xué)反應(yīng)時(shí)吸收了反在化學(xué)反應(yīng)時(shí)吸收了反應(yīng)過程中的化學(xué)能，使應(yīng)過程中的化學(xué)能，使反應(yīng)的產(chǎn)物分子或中間反應(yīng)的產(chǎn)物分子或中間態(tài)分子中的電子躍遷到態(tài)分子中的電子躍遷到激發(fā)態(tài)，當(dāng)電子從激發(fā)激發(fā)態(tài)，當(dāng)電子從激發(fā)態(tài)回復(fù)到基態(tài)時(shí)，以發(fā)態(tài)回復(fù)到基態(tài)時(shí)，以發(fā)射光子的形式釋放出能射光子的形式釋放出能量的現(xiàn)象。量的現(xiàn)象。根據(jù)形成激發(fā)態(tài)分子的能量來源不同可分為根據(jù)形成激發(fā)態(tài)分子的能量來源不同可分為:現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第三頁，共29頁間接化學(xué)發(fā)光間接化學(xué)發(fā)光直接化學(xué)發(fā)光直接化學(xué)發(fā)光 A + B C* C* C + h.v A + B C* C* + D C + D* D* D + h.v 化學(xué)發(fā)光的原理化學(xué)發(fā)光的原理現(xiàn)在學(xué)

4、習(xí)的是第四頁，共29頁化學(xué)發(fā)光的分類化學(xué)發(fā)光的分類酶促化學(xué)發(fā)光：酶促化學(xué)發(fā)光： 辣根過氧化物酶辣根過氧化物酶- -魯米諾（魯米諾（HRP- -Luminol）系統(tǒng)）系統(tǒng) 堿性磷酸酶（堿性磷酸酶（ALP）系統(tǒng)）系統(tǒng) 黃嘌呤氧化酶系統(tǒng)黃嘌呤氧化酶系統(tǒng)非酶促化學(xué)發(fā)光：非酶促化學(xué)發(fā)光： 吖啶酯系統(tǒng)吖啶酯系統(tǒng) 草酸酯系統(tǒng)草酸酯系統(tǒng) 閃光（閃光（Flash）：）： 發(fā)光時(shí)間在發(fā)光時(shí)間在數(shù)秒數(shù)秒內(nèi)，如吖啶酯內(nèi)，如吖啶酯輝光（輝光（Glow）： 發(fā)光時(shí)間在發(fā)光時(shí)間在數(shù)十分鐘數(shù)十分鐘以上，如：以上，如： HRP-Luminol系統(tǒng)系統(tǒng) 二氧雜環(huán)乙烷二氧雜環(huán)乙烷APAP發(fā)光（發(fā)光（AP-AMPPD）系統(tǒng)）系統(tǒng) 黃

5、嘌呤氧化酶系統(tǒng)黃嘌呤氧化酶系統(tǒng)現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第五頁，共29頁在化學(xué)發(fā)光反應(yīng)中參與能量轉(zhuǎn)移并最終以在化學(xué)發(fā)光反應(yīng)中參與能量轉(zhuǎn)移并最終以發(fā)發(fā)射光子射光子的形式釋放能量的化合物，稱為的形式釋放能量的化合物，稱為或或?？煞譃?。可分為直接化學(xué)發(fā)光劑直接化學(xué)發(fā)光劑和和酶促反應(yīng)發(fā)光劑酶促反應(yīng)發(fā)光劑。化學(xué)發(fā)光劑化學(xué)發(fā)光劑現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第六頁，共29頁能作為能作為化學(xué)發(fā)光劑化學(xué)發(fā)光劑的條件：的條件：發(fā)光的量子發(fā)光的量子產(chǎn)率高產(chǎn)率高；它的物理它的物理-化學(xué)特性要與被標(biāo)記或測(cè)定的化學(xué)特性要與被標(biāo)記或測(cè)定的 物質(zhì)物質(zhì)相匹配相匹配；能與抗原或抗體形成能與抗原或抗體形成穩(wěn)定的偶聯(lián)結(jié)合物穩(wěn)定的偶聯(lián)結(jié)合物； 其化學(xué)發(fā)光常是其化學(xué)

6、發(fā)光常是氧化反應(yīng)氧化反應(yīng)的結(jié)果；的結(jié)果；在所使用的濃度范圍內(nèi)對(duì)生物體在所使用的濃度范圍內(nèi)對(duì)生物體沒有毒性沒有毒性。現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第七頁，共29頁 在發(fā)光免疫分析過程中在發(fā)光免疫分析過程中不不需要酶需要酶的催化作用，的催化作用，直接直接參與發(fā)光反應(yīng)，參與發(fā)光反應(yīng)，它們?cè)诨瘜W(xué)結(jié)構(gòu)上有產(chǎn)生發(fā)光的它們?cè)诨瘜W(xué)結(jié)構(gòu)上有產(chǎn)生發(fā)光的特有基團(tuán)特有基團(tuán)，可直接標(biāo)記抗原或抗體。，可直接標(biāo)記抗原或抗體。（一）直接化學(xué)發(fā)光劑（一）直接化學(xué)發(fā)光劑1. 吖啶酯吖啶酯 2. 三聯(lián)吡啶釕三聯(lián)吡啶釕現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第八頁，共29頁吖啶酯吖啶酯 在在堿性條件堿性條件下被下被H2O2氧化氧化時(shí)，發(fā)出波時(shí)，發(fā)出波長(zhǎng)為長(zhǎng)為470 nm的光，具

7、有很高的發(fā)光效率，其激的光，具有很高的發(fā)光效率，其激發(fā)態(tài)產(chǎn)物發(fā)態(tài)產(chǎn)物 是該發(fā)光反應(yīng)體系的發(fā)光是該發(fā)光反應(yīng)體系的發(fā)光體。體。 現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第九頁，共29頁利用標(biāo)記酶的催化作用，使發(fā)光劑（底物）發(fā)利用標(biāo)記酶的催化作用，使發(fā)光劑（底物）發(fā)光，這一類光，這一類需酶催化需酶催化后發(fā)光的發(fā)光劑稱為后發(fā)光的發(fā)光劑稱為。（二）（二） 酶促反應(yīng)發(fā)光劑：酶促反應(yīng)發(fā)光劑：1. 魯米諾魯米諾 2. AMPPD10現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十頁，共29頁魯米諾（魯米諾（Luminol）發(fā)光原理）發(fā)光原理辣根過氧化酶辣根過氧化酶現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十一頁，共29頁文字內(nèi)容文字內(nèi)容魯米諾（魯米諾（Luminol）增強(qiáng)發(fā)光反應(yīng)原理）增強(qiáng)發(fā)光反

8、應(yīng)原理雙負(fù)離子雙負(fù)離子鐵氰化鉀催化鐵氰化鉀催化H2O2產(chǎn)生產(chǎn)生O23-氨基氨基-鄰鄰苯二甲酸苯二甲酸（激發(fā)態(tài)）（激發(fā)態(tài)）過氧化物不穩(wěn)定，分過氧化物不穩(wěn)定，分解產(chǎn)生解產(chǎn)生N2現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十二頁，共29頁(Chemiluminescence immunoass- ay,CLIA)，是將具有是將具有高靈敏度高靈敏度的化學(xué)發(fā)光測(cè)定技術(shù)與的化學(xué)發(fā)光測(cè)定技術(shù)與高高特異性特異性的免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于各種的免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于各種抗原抗原、半抗原半抗原、抗抗體體、激素激素、酶酶、脂肪酸脂肪酸、維生素維生素和和藥物藥物等的檢測(cè)分析等的檢測(cè)分析技術(shù)。是繼技術(shù)。是繼放射免疫分析放射免疫分析、酶免疫分析酶免疫分析、

9、熒光免疫分熒光免疫分析析和和膠體時(shí)間分辨熒光免疫分析膠體時(shí)間分辨熒光免疫分析之后發(fā)展起來的一項(xiàng)新之后發(fā)展起來的一項(xiàng)新的免疫分析技術(shù)。的免疫分析技術(shù)?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析化學(xué)發(fā)光免疫分析現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十三頁，共29頁化學(xué)發(fā)光免疫化學(xué)發(fā)光免疫分析類型分析類型直接化學(xué)發(fā)光直接化學(xué)發(fā)光免疫分析免疫分析化學(xué)發(fā)光酶化學(xué)發(fā)光酶免疫分析免疫分析電化學(xué)發(fā)光電化學(xué)發(fā)光免疫分析免疫分析現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十四頁，共29頁一、直接化學(xué)發(fā)光免疫分析一、直接化學(xué)發(fā)光免疫分析用用吖啶酯吖啶酯直接標(biāo)記抗體（抗原），與待測(cè)標(biāo)本中直接標(biāo)記抗體（抗原），與待測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的抗原（抗體）發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成相應(yīng)的抗原（抗體）發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成

10、固相固相包被抗體包被抗體-待測(cè)抗原待測(cè)抗原-吖啶酯標(biāo)記抗體復(fù)合物吖啶酯標(biāo)記抗體復(fù)合物，這時(shí)只，這時(shí)只需加入需加入氧化劑（氧化劑（H2O2）和）和NaOH使成堿性環(huán)境，使成堿性環(huán)境，吖吖啶酯啶酯在不需要催化劑的情況下分解、發(fā)光在不需要催化劑的情況下分解、發(fā)光 。 由集光器和光電倍增管接收、記錄由集光器和光電倍增管接收、記錄單位時(shí)間內(nèi)所產(chǎn)單位時(shí)間內(nèi)所產(chǎn)生的光子能生的光子能，這部分光的積分與待測(cè)抗原的量成，這部分光的積分與待測(cè)抗原的量成正比，可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計(jì)算出待測(cè)抗原的含量。正比，可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計(jì)算出待測(cè)抗原的含量。現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十五頁，共29頁直接化學(xué)發(fā)光的機(jī)理直接化學(xué)發(fā)光的機(jī)理現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十

11、六頁，共29頁磁磁微粒微粒模式圖模式圖Y YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY Y特點(diǎn)特點(diǎn) 抗原和抗體結(jié)抗原和抗體結(jié)合與未合與未結(jié)合部結(jié)合部分分的的易易分離分離磁微粒技術(shù)磁微粒技術(shù)磁性納米粒子與無機(jī)或有機(jī)分子結(jié)合磁性納米粒子與無機(jī)或有機(jī)分子結(jié)合形成的可均勻分散于一定基液中具有形成的可均勻分散于一定基液中具有高度穩(wěn)定性的膠態(tài)復(fù)合材料高度穩(wěn)定性的膠態(tài)復(fù)合材料 現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十七頁，共29頁二、化學(xué)發(fā)光酶免疫分析二、化學(xué)發(fā)光酶免疫分析（

12、Chemiluminescence enzyme immunoassay，CLEIA）是用參與催化某）是用參與催化某一化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的酶如一化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的酶如辣根過氧化物酶（辣根過氧化物酶（HRP）或）或堿性磷酸酶（堿性磷酸酶（ALP）來標(biāo)記抗原或抗體，在與待測(cè)標(biāo)來標(biāo)記抗原或抗體，在與待測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的抗原（抗體）發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成本中相應(yīng)的抗原（抗體）發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成固相包固相包被抗體被抗體-待測(cè)抗原待測(cè)抗原-酶標(biāo)記抗體復(fù)合物酶標(biāo)記抗體復(fù)合物，經(jīng)洗滌后，加，經(jīng)洗滌后，加入底物（發(fā)光劑），酶催化和分解底物發(fā)光，由入底物（發(fā)光劑），酶催化和分解底物發(fā)光，由光光量子閱讀系統(tǒng)量子閱讀系統(tǒng)接收，光電

13、倍增管將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦沤邮?，光電倍增管將光信?hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)并加以放大，再把它們傳送至計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)號(hào)并加以放大，再把它們傳送至計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，計(jì)算出測(cè)定物的濃度。，計(jì)算出測(cè)定物的濃度?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十八頁，共29頁此處添加內(nèi)容此處添加內(nèi)容該分析系統(tǒng)采用該分析系統(tǒng)采用辣根過氧化物酶（辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)標(biāo)記抗體（或抗原），在與反應(yīng)體系中的待記抗體（或抗原），在與反應(yīng)體系中的待測(cè)標(biāo)本和固相載體發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成測(cè)標(biāo)本和固相載體發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成固相包被抗體固相包被抗體-待測(cè)抗原待測(cè)抗原-酶（酶（HRP）標(biāo)記抗）標(biāo)記抗體復(fù)合物體復(fù)合物，這時(shí)加入，這時(shí)加入魯米諾發(fā)光劑、魯米諾發(fā)光劑

14、、H2O2和和化學(xué)發(fā)光增強(qiáng)劑化學(xué)發(fā)光增強(qiáng)劑使產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光。使產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光。辣根過氧化物酶標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光免疫分析辣根過氧化物酶標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光免疫分析現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十九頁，共29頁辣根過氧化物酶標(biāo)記化學(xué)發(fā)光免疫分析示意圖辣根過氧化物酶標(biāo)記化學(xué)發(fā)光免疫分析示意圖 現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十頁，共29頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十一頁，共29頁化學(xué)發(fā)光免疫分析儀化學(xué)發(fā)光免疫分析儀優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)1.靈敏度高靈敏度高 ：CLIA關(guān)鍵的優(yōu)越性，其靈敏度可達(dá)關(guān)鍵的優(yōu)越性，其靈敏度可達(dá)10-16mol/L(RIA為為10-12mol/L) 。2.寬的線性動(dòng)力學(xué)范圍寬的線性動(dòng)力學(xué)范圍 ：發(fā)光強(qiáng)度在：發(fā)光強(qiáng)度在46個(gè)量級(jí)之間個(gè)量級(jí)之間與測(cè)

15、定物質(zhì)濃度間呈線性關(guān)系。與測(cè)定物質(zhì)濃度間呈線性關(guān)系。 3.光信號(hào)持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)光信號(hào)持續(xù)時(shí)間長(zhǎng) ：輝光型的：輝光型的CLIA產(chǎn)生的光信號(hào)持產(chǎn)生的光信號(hào)持續(xù)時(shí)間可達(dá)數(shù)小時(shí)甚至一天，簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作及測(cè)量。續(xù)時(shí)間可達(dá)數(shù)小時(shí)甚至一天，簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作及測(cè)量。 4.分析方法簡(jiǎn)便快速分析方法簡(jiǎn)便快速 ：絕大多數(shù)分析測(cè)定均為僅需：絕大多數(shù)分析測(cè)定均為僅需加入一種試劑（或復(fù)合試劑）的一步模式。加入一種試劑（或復(fù)合試劑）的一步模式。 5.結(jié)果穩(wěn)定、誤差小結(jié)果穩(wěn)定、誤差?。簶悠废抵苯幼约喊l(fā)光，不需：樣品系直接自己發(fā)光，不需要任何光源照射，分析結(jié)果靈敏穩(wěn)定可靠要任何光源照射，分析結(jié)果靈敏穩(wěn)定可靠6.安全性好及使用期長(zhǎng)安全

16、性好及使用期長(zhǎng) ：免除了使用放射性物質(zhì)。：免除了使用放射性物質(zhì)。 現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十二頁，共29頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十三頁，共29頁化學(xué)發(fā)光免疫分析的應(yīng)用（一）化學(xué)發(fā)光免疫分析的應(yīng)用（一） 肺結(jié)核病常以人體血清中肺結(jié)核病常以人體血清中CA125 含量為疾病標(biāo)記物，含量為疾病標(biāo)記物，Wang 等建立了等建立了CA125 的毛細(xì)管化學(xué)發(fā)光免疫分析方法的毛細(xì)管化學(xué)發(fā)光免疫分析方法，以實(shí)現(xiàn)對(duì)肺結(jié)核病的檢測(cè)。，以實(shí)現(xiàn)對(duì)肺結(jié)核病的檢測(cè)。 Knight 等采用等采用化學(xué)發(fā)光免疫夾心分析方法對(duì)梅毒病毒進(jìn)行檢測(cè)，化學(xué)發(fā)光免疫夾心分析方法對(duì)梅毒病毒進(jìn)行檢測(cè)，并與并與傳統(tǒng)的分析方法快速血漿素反應(yīng)（傳統(tǒng)的分析方法快速血

17、漿素反應(yīng)（RPR）和酶免疫分析方法（）和酶免疫分析方法（ELI SA）進(jìn)行比較，通過對(duì)多種樣品進(jìn)行檢測(cè)，并與）進(jìn)行比較，通過對(duì)多種樣品進(jìn)行檢測(cè)，并與RPR 及及ELISA分析方法分析方法結(jié)果相比有結(jié)果相比有 99.1的正確率。的正確率。 甲胎蛋白（甲胎蛋白（AFP）為腫瘤疾病標(biāo)志物，）為腫瘤疾病標(biāo)志物，Zhang 等利用磁性微粒子和包等利用磁性微粒子和包被小管建立了被小管建立了AFP 的化學(xué)發(fā)光酶免疫分析方法的化學(xué)發(fā)光酶免疫分析方法。在該方法中，。在該方法中，AFP抗抗體首先包被于兩種不同的固相載體上，如磁性微粒子和包被小管，再體首先包被于兩種不同的固相載體上，如磁性微粒子和包被小管，再分別對(duì)

18、這兩種包被模式建立的化學(xué)發(fā)光免疫分析方法進(jìn)行比較。通過分別對(duì)這兩種包被模式建立的化學(xué)發(fā)光免疫分析方法進(jìn)行比較。通過再抗體包被濃度、標(biāo)記于抗體上再抗體包被濃度、標(biāo)記于抗體上HRP 的稀釋比例、分析所需時(shí)間、化的稀釋比例、分析所需時(shí)間、化學(xué)發(fā)光動(dòng)力學(xué)等角度進(jìn)行衡量，顯示磁性微粒子具有較大的優(yōu)勢(shì)。學(xué)發(fā)光動(dòng)力學(xué)等角度進(jìn)行衡量，顯示磁性微粒子具有較大的優(yōu)勢(shì)。醫(yī)學(xué)檢測(cè)醫(yī)學(xué)檢測(cè)現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十四頁，共29頁化學(xué)發(fā)光免疫分析的應(yīng)用（二）化學(xué)發(fā)光免疫分析的應(yīng)用（二） Quan 等建立了食品中等建立了食品中伏馬菌素伏馬菌素B1 的化學(xué)發(fā)光酶免疫分析方法的化學(xué)發(fā)光酶免疫分析方法，與伏，與伏馬菌素馬菌素B1 的的

19、ELISA 方法相比，其方法靈敏度提高了方法相比，其方法靈敏度提高了10 倍。且通過樣倍。且通過樣品的添加回收率試驗(yàn)表明其有良好的回收率，其分析結(jié)果與品的添加回收率試驗(yàn)表明其有良好的回收率，其分析結(jié)果與ELISA 分分析方法與析方法與 HPLC 方法有良好的相關(guān)性。方法有良好的相關(guān)性。 Yang 等建立了食品中等建立了食品中葡萄球菌腸毒素葡萄球菌腸毒素B（SEB）的碳納米管的化學(xué)發(fā)）的碳納米管的化學(xué)發(fā)光免疫分析方法光免疫分析方法，通過將，通過將SEB 抗體吸附在碳納米管表面抗體吸附在碳納米管表面 ，然后將抗體，然后將抗體碳納米管固定在聚碳酸酯表面，再通過增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光免疫法測(cè)定碳納米管固定在聚碳

20、酸酯表面，再通過增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光免疫法測(cè)定SEB 含量。含量。 Magliulo 等建立了等建立了牛奶中黃曲霉毒素牛奶中黃曲霉毒素M1的化學(xué)發(fā)光酶免疫分析方法的化學(xué)發(fā)光酶免疫分析方法，通過將黃曲霉毒素，通過將黃曲霉毒素M牛血清白蛋白包被在聚丙烯板上，通過酶標(biāo)二牛血清白蛋白包被在聚丙烯板上，通過酶標(biāo)二抗在含有魯米諾的基板上進(jìn)行檢測(cè)?？乖诤恤斆字Z的基板上進(jìn)行檢測(cè)。 Lin 等建立了等建立了農(nóng)產(chǎn)品中黃曲霉毒素農(nóng)產(chǎn)品中黃曲霉毒素B1 的化學(xué)發(fā)光免疫分析方法的化學(xué)發(fā)光免疫分析方法。同時(shí)。同時(shí)， 將建立的分析方法與黃曲霉毒素商品化酶聯(lián)免疫試劑盒進(jìn)行了相關(guān)將建立的分析方法與黃曲霉毒素商品化酶聯(lián)免疫試劑盒進(jìn)行了

21、相關(guān)性試驗(yàn)，相關(guān)系數(shù)為性試驗(yàn)，相關(guān)系數(shù)為0.9098，顯示其有較好的應(yīng)用前景。，顯示其有較好的應(yīng)用前景。食品安全檢測(cè)食品安全檢測(cè)現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十五頁，共29頁化學(xué)發(fā)光免疫分析的應(yīng)用（三）化學(xué)發(fā)光免疫分析的應(yīng)用（三） Christian 等通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析方法建立了等通過化學(xué)發(fā)光酶免疫分析方法建立了環(huán)境內(nèi)分泌干擾物環(huán)境內(nèi)分泌干擾物炔雌醇的免疫分析方法炔雌醇的免疫分析方法，并通過建立的分析方法對(duì)表面水和污水處，并通過建立的分析方法對(duì)表面水和污水處理廠的污水中的炔雌醇進(jìn)行測(cè)定。理廠的污水中的炔雌醇進(jìn)行測(cè)定。 Pittman 等通過磁性小珠和生物素等通過磁性小珠和生物素-親和素為載體建立了親和

22、素為載體建立了水樣和土樣水樣和土樣中中2，4，6-三硝基甲苯的免疫夾心電化學(xué)發(fā)光免疫分析方法三硝基甲苯的免疫夾心電化學(xué)發(fā)光免疫分析方法。 Zhao 等通過建立等通過建立微板式磁化學(xué)發(fā)光酶免疫分析方法來對(duì)水樣中微板式磁化學(xué)發(fā)光酶免疫分析方法來對(duì)水樣中17 -雌二醇進(jìn)行檢測(cè)雌二醇進(jìn)行檢測(cè)。通過微板磁性分離器可避免前處理過程以達(dá)到高。通過微板磁性分離器可避免前處理過程以達(dá)到高通量分析，再結(jié)合高靈敏度的化學(xué)發(fā)光體系，建立了該方法。通量分析，再結(jié)合高靈敏度的化學(xué)發(fā)光體系，建立了該方法。環(huán)境科學(xué)環(huán)境科學(xué)現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十六頁，共29頁發(fā)展與展望發(fā)展與展望 具有具有選擇性好選擇性好、靈敏度高靈敏度高、分析速

23、度快分析速度快、設(shè)備簡(jiǎn)單設(shè)備簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，近年來在環(huán)境、臨床、食品、藥物檢測(cè)中得到等優(yōu)點(diǎn)，近年來在環(huán)境、臨床、食品、藥物檢測(cè)中得到了廣泛運(yùn)用。實(shí)際檢測(cè)常常需要對(duì)大量、復(fù)雜、低豐度的樣品進(jìn)行了廣泛運(yùn)用。實(shí)際檢測(cè)常常需要對(duì)大量、復(fù)雜、低豐度的樣品進(jìn)行測(cè)定，因而化學(xué)發(fā)光免疫分析法逐漸向測(cè)定，因而化學(xué)發(fā)光免疫分析法逐漸向的方向發(fā)展。的方向發(fā)展。 化學(xué)發(fā)光成像技術(shù)化學(xué)發(fā)光成像技術(shù)、化學(xué)發(fā)光免疫分析化學(xué)發(fā)光免疫分析與與分離技術(shù)分離技術(shù)的聯(lián)用，的聯(lián)用，可以使免疫分析的選擇性、靈敏度、檢測(cè)速度和檢測(cè)通量得到進(jìn)一步可以使免疫分析的選擇性、靈敏度、檢測(cè)速度和檢測(cè)通量得到進(jìn)一步提高。為了更好地適應(yīng)臨床、環(huán)境等領(lǐng)域的實(shí)際應(yīng)用，需要大力發(fā)展提高。為了更好地適應(yīng)臨床、環(huán)境等領(lǐng)域的實(shí)際應(yīng)用，需要大力發(fā)展微型化微型化、集成化集