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文檔簡介
1、中國藥科大學生物制藥工藝學期末試卷(B卷)一、填空題(每空0.5分,共30分)1多糖構(gòu)效關(guān)系研究還不夠完善,但目前的研究已表明,多糖的活性與其高級結(jié)構(gòu)、分支度及其側(cè)鏈、分子量以及多糖中的取代基有關(guān)。2、利用產(chǎn)氨短桿菌發(fā)酵法生產(chǎn)肌甘酸,第一步是用誘變育種的方法篩選缺乏SAMP合成酶的腺喋吟缺陷型菌株,在發(fā)酵培養(yǎng)基中提供亞適量的腺喋吟;另外,改變細胞膜對5-IMP的透性,選育Mn2+不敏感的變異株。3、溶質(zhì)通過色譜柱時造成的峰加寬效應(yīng)包括分子擴散、渦流擴散、流動相中傳質(zhì)阻力、固定相中傳質(zhì)阻力。4、在采用多緩沖陰離子交換劑作固定相的離子交換聚焦色譜過程中,當柱中某位點之pH值下降到蛋白質(zhì)組分PI(等
2、電點)值以下時,它因帶正電荷而下移,如果柱中有兩種蛋白組分,pI值較大(高)者會超過另一組分,移動至柱下部pH較色的位點進行聚焦(交換)。5、親和層析洗脫方法有非專一性洗脫,特殊洗脫,專一性洗脫廠6、晶體的質(zhì)量主要是指晶體的大小、形狀和純度,其中影響晶體大小的主要因素有過飽和度,溫度,攪拌速度,晶種。7、常用的吸附劑有活性炭、硅膠和白陶土等。8、在萃取過程中被提取的溶液稱為婁遮,其中欲提取的物質(zhì)稱辿,而用以進行萃取的溶劑稱為萃取劑。達到萃取平衡后,大部分溶質(zhì)轉(zhuǎn)移到萃取劑中,這種含有溶質(zhì)的萃取劑溶液稱為萃取液,而被萃取出溶質(zhì)以后的料液稱為萃余液。9、從細胞培養(yǎng)液中提取有效組分時,往往需要除去細胞
3、及蛋白質(zhì),常用的除去細胞及蛋白質(zhì)的方法有加入凝聚劑,加入絮凝劑,變性沉淀,等電點沉淀等。10、影響絮凝效果的主要因素有絮凝劑的分子量,絮凝劑的用量,溶液pH值,攪拌速度和時間。11、色譜介質(zhì)按分離機理分為反相色譜、正相色譜、離子交換色譜、凝膠過濾色譜,親和色譜。12、基因治療中常用的非病毒載體有裸露DNA、基因縫合線法、脂質(zhì)體載體和哺乳動物人工染色體。13、四環(huán)類抗生素是一類以四并苯(蔡并生)為母核的一族抗生素;鏈霉素是氨基糖昔類抗生素;紅霉素是分子內(nèi)含有14元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素;寫出青霉素的化學結(jié)構(gòu)通式14、請列舉應(yīng)用基因藥物來治療腫瘤的幾種方案:導入抑癌基因或細胞因子、自殺基因、抑制血管生
4、成、反義藥物、導入MHCI類抗原基因、導入MDRI基因等方法。二、名詞解釋(每小題3分,共30分)1、酶促半合成人胰島素:以豬胰島素為原料,利用胰蛋白酶的轉(zhuǎn)酰胺作用(1分)將豬胰島素B鏈之30位丙氨酸轉(zhuǎn)化(1分)為蘇氨酸即得人胰島素(1分)。2、親和膜:結(jié)合親和技術(shù)和膜分離技術(shù)的優(yōu)點,利用親和配基修飾的微濾膜(2分)為親和吸附介質(zhì),純化目標蛋白質(zhì)(1分)。3、全排阻:當具有一定分子量分布的高聚物溶液從柱中通過時,較大的分子完全不能進入顆粒內(nèi)部,只能從顆粒間隙流過,稱“全排阻”(2分)。其流經(jīng)體積最小,等于外水體積V0(1分)。4、類分離:將分子量極為懸殊的兩類物質(zhì)分開(2分),如蛋白質(zhì)與鹽類(
5、1分),稱作類分離或的分子量小組分離.選擇凝膠時,應(yīng)使樣品中大分子組的分子量大于其排阻限,而小分子組于滲入限。大分子的分配系數(shù)K=0,小分子的K=1。5、基因藥物:基因藥物geneticmedicine,核酸類藥物,以遺傳物質(zhì)DNA、RNA為治療物質(zhì)基礎(chǔ)的藥物(2分),如核酸疫苗、反義藥物(1分)。6、容量因子:在色譜過程中,溶質(zhì)在固定相中的總摩爾數(shù)與流動相中總摩爾數(shù)之比(2分),容量因子越大該組分的保留能力越強,越難洗脫。(1分)7、等密度離心法:在離心力作用下,不同密度的多組分顆粒在梯度介質(zhì)中“向上”或“向下”移動,(1分)當移動至其密度與介質(zhì)密度相等的位置便不再移動,形成靜止區(qū)帶,即“達
6、到”離心平衡,各組分根據(jù)密度不同而分離。(2分)8、超濾技術(shù):超過濾(簡稱超濾)是一項分子級膜分離手段,(1分)以具有一定孔徑的膜為分離介質(zhì),(1分)以壓力差為推動力將不同分子量的物質(zhì)進行選擇性分離的方法。(1分)9、超臨界流體萃?。撼R界流體(supercriticalfluid,簡稱SCF)萃取技術(shù),又稱壓力流體萃取、超臨界氣體萃取、臨界溶劑萃取等,是利用處于臨界壓力和臨界溫度以上(2分)的一些溶劑流體所具有特異增加物質(zhì)溶解能力來進行分離純化的技術(shù)。(1分)10、生物制品:生物制品(biologicalproduct)是應(yīng)用普通的或以基因工程、細胞工程、蛋白質(zhì)工程、發(fā)酵工程等生物技術(shù)獲得的
7、微生物、細胞及各種動物和人源的組織和液體等生物材料制備(2分),用于人類疾病預防、治療和診斷的藥品(1分)。三、單項選擇題(每小題1分,共20分)(從A、B、C、D四個選項中選擇一個正確答案填入空格中)1、下面表達系統(tǒng)為原核表達系統(tǒng)的是(A)A.E.coliB.畢赤酵母C.昆蟲細胞D.動物細胞、2、下列藥物哪些是基因藥物(B)A.基因工程藥物B.遺傳物質(zhì)DNA為物質(zhì)基礎(chǔ)制造的藥物C.天然生物藥物D.半合成生物藥物3、肽合成中,由于順序合成的需要,必須對暫不參加反應(yīng)的基團加以保護。在多肽的固相合成中,常用的氨保護基是(A)A.FmocB.BzC.TosD.甲醇4、蛋白質(zhì)類物質(zhì)分離純化往往是多步驟
8、的,其前期處理手段多采用下列哪類的方法。(B)A.分辨率高B.負載量大C.操作簡便D.價廉5、當向蛋白質(zhì)純?nèi)芤褐屑尤胫行喳}時,蛋白質(zhì)溶解度(C)A.增大B.減小C.先增大,后減小D.先減小,后增大6、鹽析常數(shù)Ks是生物大分子的特征常數(shù),它與下列哪種因素關(guān)系密切。(B)A.鹽濃度B.鹽種類C.溶質(zhì)濃度D介質(zhì)pH7、網(wǎng)格高聚物吸附劑吸附的弱酸性物質(zhì),一般用下列哪種溶液洗脫。(D)A.水B.高鹽C.低pHD.高pH8、用鈉型陽離子交換樹脂處理氨基酸時,吸附量很低,這是因為A.選錯樹脂B.離子競爭C.偶極排斥D.解離低9、凝膠層析中,有時小分子溶質(zhì)的Kd工匚FH P- 10 4洗篷 洗脫樹脂吸附物f
9、f E氣填寫SOD生產(chǎn)工藝中非空格(豈1-)分)溶:j:沉淀1洗7附納施 洗血液c上消水國門陽心溶解上消液L_超述與聞 祖酷液 *濃縮他濃能-一沉淀物S7-T杜層析一位:,脫拄濃縮吸附科_闔丁 erflpRs.2七脫液一廠一詼干嵇粉途干答案:A:去血紅蛋白(1分)B:乙醇(1分)C:氯仿(1分)D:丙酮(1分E:熱變性(1分)F:60-70C(1分)G洗脫(1分)3、青霉素為弱酸性抗生素,在水溶液中穩(wěn)定性較差,且其穩(wěn)定性隨溫度上升而下降,請寫出將該抗生素從發(fā)酵液中分離制備的方法,寫出選擇依據(jù)、主要工藝及操作要點:(7分)答:青霉素游離酸易溶于醇類、醍類和酯類,但在水中溶解度很小;青霉素鉀鹽則易溶于水和甲醇,難溶于有機溶媒。從濾液中提取青霉素就是利用青霉素這個性質(zhì),在不同pH條件下,用不同的溶劑反復進行萃取,從而達到提純和濃縮的目的(1分)。溶劑萃取法提取青霉素鉀成品的一般工藝路線如下(5分):I板框過婚或靛女越窟I|BA美小發(fā)除液拉洗液丁理落取液冷卻莖1口寸F過犍周1魄氏yL,加1,3BA.inPPE1,pH5.00.1(恥陛H溶注,沖水
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