實(shí)驗(yàn)ABO血型鑒定

1、1實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn) ABO血型鑒定血型鑒定 效價(jià)測(cè)定效價(jià)測(cè)定 親和力實(shí)驗(yàn)親和力實(shí)驗(yàn)2一、ABO血型鑒定ABO血型抗體系IgM型，分子大，能在生理鹽水介質(zhì)中與相應(yīng)的抗原結(jié)合而發(fā)生凝集反應(yīng)。做ABO血型鑒定時(shí)，應(yīng)該以標(biāo)準(zhǔn)抗體鑒定紅細(xì)胞上的抗原，同時(shí)以標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞鑒定血清中的抗體，兩者符合才能做出正確判斷。3（一）正定型用已知IgM類特異性血型抗體與被檢測(cè)紅細(xì)胞在鹽水介質(zhì)中反應(yīng)，若出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，表明被檢測(cè)紅細(xì)胞膜上有相應(yīng)抗原，從而判斷血型。4采集靜脈血制備5%的被檢測(cè)紅細(xì)胞生理鹽水懸液玻片法試管法觀察結(jié)果，有無(wú)凝集或者溶血（顯微鏡）5抗抗A抗抗B血型血型+-A-+B-O+AB6（二）反定型用已知的標(biāo)準(zhǔn)A、B、

2、O型紅細(xì)胞與被檢測(cè)血清反應(yīng)，若被檢測(cè)血清與已知型別的標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集，則證明被測(cè)定紅血清中存在與該紅細(xì)胞抗原相對(duì)應(yīng)的抗體，反之則沒(méi)有。7分離血清分別加5%的三種標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞生理鹽水懸液1d，觀察有無(wú)凝集或者溶血（顯微鏡）。8A型紅細(xì)胞型紅細(xì)胞B型紅細(xì)胞型紅細(xì)胞O型紅細(xì)胞型紅細(xì)胞血型血型-+-A+-B+-O-AB9嚴(yán)格標(biāo)記，防止混淆。觀察時(shí)，應(yīng)該先肉眼觀察，不確定則用顯微鏡低倍鏡觀察有無(wú)凝集。防止出現(xiàn)冷凝集或者某些疾病干擾引起的假凝集。10二、血型抗體效價(jià)測(cè)定效價(jià)是指血清中含某種抗體的濃度，將被檢測(cè)抗血清做倍比稀釋后，加入一定量的抗原紅細(xì)胞，觀察凝集程度，以最大稀釋倍數(shù)能與相應(yīng)紅細(xì)胞抗原發(fā)生凝集

3、的試管稀釋倍數(shù)之倒數(shù)定為效價(jià)。1110支小試管，每管加0.1ml生理鹽水，再第1管中加入0.1ml血清，混勻后吸取0.1ml到第2管，以此類推，做倍比稀釋。稀釋倍數(shù)為1：2，1：4，1：8等。加相應(yīng)的2%的紅細(xì)胞生理鹽水懸液0.1ml，混勻，最終稀釋倍數(shù)為1：4，1；8，1；16等等。15min后離心后觀察結(jié)果，先觀察上層有無(wú)溶血，再輕輕渾勻觀察。以出現(xiàn)凝集的最高稀釋倍數(shù)的倒數(shù)定為該抗體效價(jià)。12一般抗A、抗B效價(jià)在1：128以上。13三、親和力實(shí)驗(yàn)親和力是指血清中的抗體與相應(yīng)紅細(xì)胞抗原發(fā)生凝集的速度和強(qiáng)度。被檢測(cè)血清0.05ml 于玻片上，再吸取10%相應(yīng)紅細(xì)胞生理鹽水懸液0.1ml 于被測(cè)定血清的近旁，用玻片混合