血細(xì)胞分析在臨床中的應(yīng)用

1、2021/3/261n血細(xì)胞分析在臨床中 的應(yīng)用 2021/3/262血細(xì)胞分析的發(fā)展n近年來(lái),隨著科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展及計(jì)算機(jī)在血液分析儀中的廣泛應(yīng)用,各種先進(jìn)的血液分析儀逐漸普及. 2021/3/2631913 - 19981913 - 1998Model AHigh speed automatic blood cell count and cell size analyzer2021/3/264原理n血液分析儀主要是利用阻抗原理進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)的. 不同體積的血細(xì)胞,因其電 阻大小不同,而產(chǎn)生相應(yīng)大小的脈沖,分別進(jìn)入到儀器設(shè)置的不同通道2021/3/2652021/3/266CBC(全血細(xì)胞計(jì)

2、數(shù))+DIFF(WBC分類(lèi))模式下WBC計(jì)數(shù)分類(lèi)nWBC/DIFF通道對(duì)WBC計(jì)數(shù)和分類(lèi)時(shí),使用的兩個(gè)信號(hào):n細(xì)胞經(jīng)半導(dǎo)體激光激發(fā)產(chǎn)生側(cè)向熒光強(qiáng)度n側(cè)向散射光強(qiáng)度信號(hào)2021/3/267n使用的兩種試劑:n溶血素(4DL):將RBC完全溶解,同時(shí)在WBC膜表面打孔n熒光染料(4DS,聚次甲基熒光染料)通過(guò) 小孔進(jìn)入WBC內(nèi),對(duì)胞漿和胞核中的核酸物質(zhì)進(jìn)行染色2021/3/268測(cè)定n經(jīng)過(guò)核酸熒光染色后的WBC在633nm激光的照射下,產(chǎn)生側(cè)向熒光信號(hào)和側(cè)向散射光信號(hào)。n側(cè)向熒光強(qiáng)度與WBC的核酸(DNA/RNA)含量成正比,側(cè)向散射光強(qiáng)度反映了細(xì)胞內(nèi)容物的復(fù)雜程度(核的分葉,胞漿顆粒的大小,數(shù)量

3、,分布均勻程度)。2021/3/269123459鞘流技術(shù)激光計(jì)數(shù)原理示意圖鞘流技術(shù)激光計(jì)數(shù)原理示意圖1 1 流通池流通池2 2 梭頭梭頭3 3 樣本頭樣本頭4 4 鞘流頭鞘流頭5 5 透鏡透鏡6 6 吸收光吸收光7 7 低角度散射光檢測(cè)低角度散射光檢測(cè)8 8 高角度散射光檢測(cè)高角度散射光檢測(cè)9 9 光源光源8762021/3/26102021/3/26112021/3/2612Side Scatter (Internal structure) 淋巴淋巴細(xì)細(xì)胞胞 單單核核細(xì)細(xì)胞胞 嗜中性嗜中性細(xì)細(xì)胞胞 嗜酸嗜酸細(xì)細(xì)胞胞 Fluorescence (RNA ,DNA)RBC ghost 嗜堿細(xì)胞

4、嗜堿細(xì)胞2021/3/2613RBC和PLT檢測(cè)原理n全血標(biāo)本稀釋后分配到RBC/PLT計(jì)數(shù)池,鞘流技術(shù)產(chǎn)生的層流使這個(gè)電阻信號(hào)轉(zhuǎn)化為脈沖信號(hào)記錄下來(lái),脈沖的高度反映了細(xì)胞的大小,每個(gè)脈沖信號(hào)代表一個(gè)細(xì)胞,收集信號(hào)得到RBC和PLT的直方圖。2021/3/26142021/3/26152021/3/2616SLS血紅蛋白檢測(cè)方法n檢測(cè)使用的主要成份為十二烷基磺酸鈉n表面活性劑先將RBC溶解,釋放出Hb分子nHb分子中的Fe2+被氧化為Fe3+,與SLS結(jié)合形成SLS-Hb有色基團(tuán),在535nm有最大吸收峰。2021/3/2617SLS血紅蛋白檢測(cè)方法特點(diǎn)n不含氰化物,無(wú)毒具有環(huán)保性nSLS是一

5、種脂溶性試劑,可減少脂血和高WBC總數(shù)造成的濁度對(duì)血紅蛋白檢測(cè)的影響2021/3/2618數(shù)據(jù)異常信息2021/3/2619中性粒細(xì)胞增多n感染（急性細(xì)菌感染）n組織損傷（心肌梗塞 .手術(shù)）n惡性血液病n藥物使用(腎上腺素.類(lèi)固醇)n生理性增高2021/3/2620淋巴細(xì)胞增多n惡性血液病n感染(百日咳.傳單.病毒性風(fēng)疹)n應(yīng)激狀態(tài)(急性心衰.心臟梗塞.過(guò)敏反應(yīng))n自身免疫性疾病.腫瘤.吸煙2021/3/2621單核細(xì)胞增多n感染(細(xì)胞性.敗血癥)n膠原病n妊娠性WBC增多n霍奇金氏病n惡性腫瘤2021/3/2622嗜酸性細(xì)胞增多n過(guò)敏反應(yīng)(藥物.尋麻疹)n寄生蟲(chóng)病n皮膚病n纖維瘤n內(nèi)分泌病感

6、染(結(jié)核病)2021/3/2623中性粒細(xì)胞減少n嚴(yán)重的細(xì)菌感染n白血病.腫瘤骨髓轉(zhuǎn)移n藥物n血液惡液質(zhì)n過(guò)敏性休克.酒精中毒2021/3/2624淋巴細(xì)胞減少n流行性感冒.敗血病n藥物(抗腫瘤藥物.腎上腺皮質(zhì)激素)n腫瘤晚期.霍奇金氏病n膠原性疾病(系統(tǒng)性紅斑狼瘡.類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)2021/3/2625n干擾因素造成假性增高(降低)2021/3/2626WBC假性增高nPLT聚集n冷凝集n有核紅細(xì)胞n難溶紅細(xì)胞n冷球蛋白2021/3/2627PLT假性增高n紅細(xì)胞碎片n小紅細(xì)胞n冷白蛋白2021/3/2628PLT假性降低n血小板聚集n巨大血小板2021/3/2629RBC假性增高n白細(xì)胞增

7、多n巨大血小板2021/3/2630RBC假性降低n紅細(xì)胞碎片n冷凝集n小紅細(xì)胞2021/3/2631急性粒細(xì)胞白血病急性粒細(xì)胞白血病Auer小體小體2021/3/2632出現(xiàn)原始粒細(xì)胞nDIFF散點(diǎn)圖顯示:淋巴細(xì)胞.單核細(xì)胞和原始細(xì)胞區(qū)域出現(xiàn)大量散點(diǎn)且連成一片,大部分原始細(xì)胞由于異常增殖含有過(guò)多的DNA/RNA2021/3/2633出現(xiàn)異常淋巴細(xì)胞n散點(diǎn)圖顯示:有大量的異常淋巴細(xì)胞,熒光強(qiáng)度較弱而側(cè)向 散射光強(qiáng)度稍強(qiáng)2021/3/2634RBC雙峰分布n表示出現(xiàn)大小不同的兩群紅細(xì)胞2021/3/2635缺鐵性貧血診斷與鐵劑治療后缺鐵性貧血診斷與鐵劑治療后直方圖動(dòng)態(tài)變化直方圖動(dòng)態(tài)變化- -療效

8、觀察療效觀察 鐵劑治療鐵劑治療2 2周后周后鐵劑治療鐵劑治療4 4周后周后2021/3/2636特發(fā)性PLT減少性紫癲(ITP)nPLT直方圖分布上,在40fl附近出現(xiàn)一個(gè)高峰,提示有大型PLT,因此反映細(xì)胞大小的直方圖無(wú)法將PLT準(zhǔn)確檢測(cè)出來(lái),許多大的PLT被計(jì)數(shù)成RBC2021/3/2637需要鏡檢的情況2021/3/2638n、國(guó)際血液學(xué)復(fù)檢專(zhuān)家組推薦的41條自動(dòng)CBC和DC復(fù)檢規(guī)則: 1.新生兒:（1）復(fù)檢條件:首次檢測(cè)標(biāo)本;（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。 2.WBC、RBC、Hb、PLT、網(wǎng)織紅細(xì)胞（Ret）：（1）復(fù)檢條件：超出線性范圍;（2）復(fù)檢要求：稀釋標(biāo)本后重新測(cè)定。 3.WBC

9、、PLT：（1）復(fù)檢條件：低于實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)的儀器線性范圍;（2）復(fù)檢要求：按實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）進(jìn)行。 2021/3/2639n4.WBC、RBC、Hb、PLT:（1）復(fù)檢條件:無(wú)結(jié)果;（2）復(fù)檢要求:檢查標(biāo)本是否有凝塊,重測(cè)標(biāo)本,如果維持不變,用替代方法計(jì)數(shù)。 5.WBC：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果30.0 x10e9/L;（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。 6.WBC：（1）復(fù)檢條件：3天內(nèi)Delta值超限，并30.0 x10e9/L;（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。 2021/3/2640n7.PLT:（1）復(fù)檢條件:首次結(jié)果1000.0 x10e9/L;（2）復(fù)檢要求:涂片鏡檢。 8.PLT：（

10、1）復(fù)檢條件：Delta值超限的任何結(jié)果;（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。 9.Hb：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果其年齡和性別參考范圍上限20g/L;（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢,確認(rèn)標(biāo)本是否符合要求。 10.平均紅細(xì)胞體積（MCV）：（1）復(fù)檢條件：24h內(nèi)標(biāo)本的首次結(jié)果105fl（成人）；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。 2021/3/2641n11.MCV:（1）復(fù)檢條件:24小時(shí)以上的成人標(biāo)本105fl;（2）復(fù)檢要求:涂片鏡檢觀察大紅細(xì)胞相關(guān)變化,如無(wú)大紅細(xì)胞相關(guān)變化,要求重送新鮮血標(biāo)本,如無(wú)新鮮血標(biāo)本，報(bào)告中注明。 12.MCV：（1）復(fù)檢條件：24h內(nèi)標(biāo)本的Delta值超限的任何結(jié)果;（2）復(fù)檢要求

11、：確認(rèn)標(biāo)本是否符合要求。 13.平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）：（1）復(fù)檢條件：參考范圍上限20g/L;（2）復(fù)檢要求：檢查標(biāo)本是否有脂血、溶血、RBC凝集及球形紅細(xì)胞。 2021/3/2642n1622條為白細(xì)胞分類(lèi)的復(fù)檢規(guī)則: 16.無(wú)白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)（DC）結(jié)果或DC結(jié)果不全:（1）復(fù)檢條件:無(wú)條件復(fù)檢;（2）復(fù)檢要求：人工分類(lèi)和涂片鏡檢。 17.中性粒細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)（Neut）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果20.0 x10e9/L;（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。 18.淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)（Lym）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果5.0 x10e9/L（成人）或7.0 x10e9/L（1.5x10e9/

12、L（成人）或3.0 x10e9/L（2.0 x10e9/L;（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。 21.嗜堿粒細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)（Baso）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果0.5x10e9/L;（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。 2021/3/2644n22.有核紅細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)（NRBC）:（1）復(fù)檢條件:首次出現(xiàn)任何結(jié)果;（2）復(fù)檢要求:涂片鏡檢。 23條為網(wǎng)織紅細(xì)胞的復(fù)檢規(guī)則： 23.網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)（Ret）：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果0.10 x10e9/L;（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。 2021/3/2645n2441條為可以提示的復(fù)檢規(guī)則: 24.懷疑性報(bào)警不成熟粒細(xì)胞(IG)/桿狀核中性粒細(xì)胞（Band）報(bào)警提

13、示除外:（1）復(fù)檢條件:首次成人結(jié)果出現(xiàn)陽(yáng)性報(bào)警;（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。 25.懷疑性報(bào)警：（1）復(fù)檢條件：首次兒童結(jié)果出現(xiàn)陽(yáng)性報(bào)警;（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。 26.WBC結(jié)果不可靠報(bào)警：（1）復(fù)檢條件：陽(yáng)性報(bào)警;（2）復(fù)檢要求：確認(rèn)標(biāo)本是否符合要求并重測(cè)標(biāo)本,如出現(xiàn)同樣報(bào)警提示,檢查儀器,如需要，進(jìn)行人工分類(lèi)。 27.RBC碎片：（1）復(fù)檢條件：陽(yáng)性報(bào)警；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。 28.雙形RBC：（1）復(fù)檢條件：首次結(jié)果出現(xiàn)陽(yáng)性報(bào)警；（2）復(fù)檢要求：涂片鏡檢。 2021/3/2646注意事項(xiàng)n儀器為篩選試驗(yàn),不能從測(cè)定結(jié)果直接 診斷疾病n遇到異常提示時(shí)及時(shí)鏡檢n儀器定期保養(yǎng),保證日

14、常工作正常進(jìn)行2021/3/26472021/3/2648 （二）血細(xì)胞形態(tài)變化的一般規(guī)律二）血細(xì)胞形態(tài)變化的一般規(guī)律 1. 1.細(xì)胞大小及形態(tài)細(xì)胞大小及形態(tài) 大小大小: :由大到小。由大到小。2 2個(gè)例外個(gè)例外: :巨核細(xì)胞及早幼粒細(xì)巨核細(xì)胞及早幼粒細(xì)胞。胞。 形態(tài)形態(tài): :紅細(xì)胞始終圓形紅細(xì)胞始終圓形, ,粒細(xì)胞圓形或橢圓形粒細(xì)胞圓形或橢圓形, ,單單核細(xì)胞由圓形、橢圓形變?yōu)椴灰?guī)則形核細(xì)胞由圓形、橢圓形變?yōu)椴灰?guī)則形, ,巨核細(xì)胞由巨核細(xì)胞由圓形變?yōu)椴灰?guī)則形。圓形變?yōu)椴灰?guī)則形。 2.2.細(xì)胞核細(xì)胞核 大小大?。河纱蟮叫?。巨核細(xì)胞除外。：由大到小。巨核細(xì)胞除外。 核形核形：各系細(xì)胞有不同表現(xiàn)。

15、：各系細(xì)胞有不同表現(xiàn)。 核位置核位置：紅系核居中，粒、單系核偏位，淋巴：紅系核居中，粒、單系核偏位，淋巴細(xì)胞核一側(cè)著邊，僅一側(cè)有胞漿。細(xì)胞核一側(cè)著邊，僅一側(cè)有胞漿。2021/3/2649 核染色質(zhì)核染色質(zhì): :顏色由淺到深顏色由淺到深, ,染色質(zhì)由細(xì)致染色質(zhì)由細(xì)致疏松到粗糙密集疏松到粗糙密集, ,最后緊縮成塊。最后緊縮成塊。 核膜核膜: :不明顯到明顯。不明顯到明顯。 核仁核仁: :清晰、模糊、消失。清晰、模糊、消失。 3.3.細(xì)胞漿細(xì)胞漿 量量：由少到多。：由少到多。 顏色顏色：粒、紅、巨核由深藍(lán)或淺藍(lán)到：粒、紅、巨核由深藍(lán)或淺藍(lán)到淺紅淺紅; ;淋巴、單核保持淺藍(lán)或灰藍(lán)色淋巴、單核保持淺藍(lán)或

16、灰藍(lán)色; ;漿漿細(xì)胞由灰藍(lán)變?yōu)樯钏{(lán)。細(xì)胞由灰藍(lán)變?yōu)樯钏{(lán)。 顆粒顆粒：從無(wú)到有：從無(wú)到有, ,由非特異性到特異性。由非特異性到特異性。2021/3/26502021/3/26512021/3/26522021/3/2653（中幼、晚幼、桿狀核、分葉核2021/3/2654n嗜堿粒細(xì)胞（早幼、中幼、晚幼、桿狀核、分葉核）2021/3/2655n原淋（Lymphoblast）n幼淋（prolymphocyte）n淋巴（lymphocyte）n大淋巴細(xì)胞n小淋巴細(xì)胞原淋巴細(xì)胞幼淋巴細(xì)胞:大淋巴細(xì)胞小淋巴細(xì)胞2021/3/2656n原漿（plasmablast）n幼漿（proplasmacyte）n漿細(xì)

17、胞（plasmacyte）原漿細(xì)胞幼漿細(xì)胞漿細(xì)胞2021/3/2657nA.原單（monoblast）nB.幼單（promonocyte）nC.單核（monocyte）nD.吞噬（maerophage）ABC原單核細(xì)胞幼單核細(xì)胞單核細(xì)胞2021/3/2658n原巨（megakaryoblast）n幼巨（promegakaryocyte）n顆粒巨（granular megakaryocyte）n產(chǎn)板巨（thrombacytogenous megakaryocyte）n裸核（naked nucleous）原巨核細(xì)胞幼巨核細(xì)胞顆粒型巨核細(xì)胞產(chǎn)血小板型巨核細(xì)胞2021/3/2659推片推片推片、染片的

18、推片、染片的質(zhì)量質(zhì)量 2021/3/2660正常骨髓象（油鏡）2021/3/26612021/3/26622021/3/26632021/3/2664地中海貧血2021/3/2665慢性ITP骨髓象（高倍鏡）2021/3/2666幼紅細(xì)胞形態(tài)異常2021/3/2667核間橋（細(xì)胞內(nèi)）核間橋（細(xì)胞內(nèi)）2021/3/26682021/3/2669核間橋（細(xì)胞外）核間橋（細(xì)胞外）2021/3/26702021/3/2671核出芽2021/3/2672不對(duì)稱雙核2021/3/2673三核幼紅三核幼紅2021/3/2674多核幼紅、點(diǎn)彩多核幼紅、點(diǎn)彩2021/3/2675不對(duì)稱核分裂象不對(duì)稱核分裂象2021/3/2676核碎裂核碎裂2021/3/2677幼紅細(xì)胞多偽足幼紅細(xì)胞多偽足2021/3/2678核畸形2021/3/2679巨大成熟紅細(xì)胞2