手性農(nóng)藥對映異構(gòu)體的拆分及在動(dòng)物組織中的殘留分析方法

1、項(xiàng)目研究意義目的：以高效液相色譜手性固定相法建立6種手性農(nóng)藥對映異構(gòu)體的拆分及在動(dòng)物組織中的殘留分析方法，手性農(nóng)藥分別包括兩種殺蟲劑馬拉硫磷和水胺硫磷、兩種除草劑乳氟禾草靈和乙氧呋草黃及兩種殺菌劑甲霜靈和己唑醇。通過口服和注射兩種途徑對大鼠和家兔進(jìn)行手性農(nóng)藥對映體的選擇性代謝行為研究。測定排泄物包括尿液和糞便、血樣中對映體的含量及相對比值（ER值）隨時(shí)間的變化情況，最終檢測肝臟、心臟、肌肉、脂肪、腦等組織中農(nóng)藥對映體的含量及ER值并確定對映體的選擇性代謝及殘留行為，代謝產(chǎn)物通過質(zhì)譜進(jìn)行確證，探討代謝機(jī)理。研究手性農(nóng)藥對映體在動(dòng)物體內(nèi)的選擇性代謝行為能更加真實(shí)的反映相關(guān)農(nóng)藥污染對人類健康的影響，

2、為其污染治理、指導(dǎo)合理用藥、制定相關(guān)的分析方法及殘留限量等標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)，將農(nóng)藥污染等副作用對人類的影響減至最小。關(guān)鍵詞手性農(nóng)藥；代謝；選擇性；動(dòng)物（一）立項(xiàng)依據(jù)與研究內(nèi)容（4000-8000字）：1.    項(xiàng)目的立項(xiàng)依據(jù)（研究意義、國內(nèi)外研究現(xiàn)狀及分析，附主要參考文獻(xiàn)目錄。）農(nóng)藥是防治病、蟲、草、鼠害不可缺少的重要手段，為農(nóng)業(yè)的增收作出巨大貢獻(xiàn)，但是由于農(nóng)藥的大量使用，對環(huán)境造成了嚴(yán)重的污染，直接或間接地威脅了人類的健康。絕大多數(shù)農(nóng)藥是有機(jī)化合物，普遍存在著手性現(xiàn)象。在以往的研究中，通常不區(qū)分手性農(nóng)藥的對映異構(gòu)體，正因如此，對農(nóng)藥的風(fēng)險(xiǎn)評估所依據(jù)的數(shù)據(jù)是不完全真

3、實(shí)的。由于立體化學(xué)的發(fā)展,手性現(xiàn)象已引起了人們的廣泛關(guān)注，手性是指呈鏡像而不重合的關(guān)系，如同人的左右手互為鏡像但又不能重合。手性化合物中存在兩種或以上不同構(gòu)象的分子，這些分子以鏡像關(guān)系成對的存在，互稱為對映異構(gòu)體。醫(yī)藥、農(nóng)藥等研究已深入到分子立體異構(gòu)領(lǐng)域，尤其是在醫(yī)藥方面，主要表現(xiàn)在大量手性藥物單一異構(gòu)體的研究和使用上，很多手性藥物對映體的性質(zhì)已研究的比較清楚。在農(nóng)藥領(lǐng)域相關(guān)方面的研究相對滯后，手性農(nóng)藥的各種性質(zhì)通常是以外消旋體的形式加以研究的，缺乏單一對映體的詳細(xì)數(shù)據(jù)。手性農(nóng)藥對映異構(gòu)具有完全相同的化學(xué)和物理性質(zhì)，但在生物體系中可能存在截然不同的生物活性、毒性、毒理及代謝途徑等，如具有一個(gè)手

4、性中心的多蟲畏、蓋草能、敵草胺、甲霜靈等生物活性主要集中于其中的1/2對映體，而另一個(gè)對映體幾乎無效；通常生產(chǎn)的氯菊酯、速滅殺丁等只有1/4是高效體,其余3個(gè)則為低效或無效成分；氯氰菊酯、溴氰菊酯和丙烯菊酯等,僅1/8是高效體,其余的7個(gè)異構(gòu)體則相對低效或幾乎無效。在目前通常使用的農(nóng)藥中，約25具有手性，其中只有少數(shù)品種具有光學(xué)純的商品，而且主要集中于菊酯類殺蟲劑，絕大部分是以外消旋體的形式銷售和使用。投入使用的外消旋體中的低效或無效異構(gòu)體不僅不能有效地防治作物病蟲草害，浪費(fèi)人力物力，而且污染環(huán)境、降低農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量，還可能產(chǎn)生毒副作用，引起藥害，嚴(yán)重影響了人類的健康。目前，通常通過直接測定農(nóng)藥對

5、高等動(dòng)物的毒性、毒理及體內(nèi)代謝途徑等來評價(jià)對人類可能造成的影響，在這些研究中農(nóng)藥的手性特征往往被忽略，同時(shí)對映體間不同的毒性、毒理及代謝方式因而也被忽略。農(nóng)藥可以在使用過程中直接或殘留于農(nóng)產(chǎn)品、環(huán)境介質(zhì)中間接的進(jìn)入人體，由于人體內(nèi)的很多酶、蛋白等都普遍存在著手性，是一個(gè)手性環(huán)境，因此手性農(nóng)藥對映體進(jìn)入人體后可能存在著選擇性的代謝行為。這種選擇性表現(xiàn)在幾個(gè)方面，一方面，農(nóng)藥外消旋體發(fā)生了構(gòu)型轉(zhuǎn)化，原本為1：1的兩種對映異構(gòu)體，經(jīng)過代謝作用，某種對映異構(gòu)體可能占有絕對優(yōu)勢；或者，光學(xué)純異構(gòu)體可能發(fā)生外消旋化或完全轉(zhuǎn)化成另一種對映異構(gòu)體；另一方面，其中一種優(yōu)先被代謝成其它代謝產(chǎn)物，另一種則相對穩(wěn)定而

6、不被代謝或代謝較慢。目前在進(jìn)行手性農(nóng)藥的毒性毒理評價(jià)時(shí)，是將含有兩種或兩種以上對映異構(gòu)體的外消旋體農(nóng)藥當(dāng)作一種農(nóng)藥來處理，沒有考慮到對映異構(gòu)體的構(gòu)型轉(zhuǎn)化或優(yōu)先代謝的特性，因此使得傳統(tǒng)上對手性農(nóng)藥的風(fēng)險(xiǎn)評估是不可靠的，即在進(jìn)行手性農(nóng)藥的毒性毒理評價(jià)時(shí)所得的數(shù)據(jù)是不真實(shí)的。這種對映體的代謝及轉(zhuǎn)化行為使得對手性農(nóng)藥的研究變得更為復(fù)雜。研究手性農(nóng)藥對映異構(gòu)體在動(dòng)物體內(nèi)構(gòu)型轉(zhuǎn)化或優(yōu)先代謝等行為能夠更真實(shí)的反映其對人類健康的影響情況，這種影響有幾個(gè)方面的可能，第一，在以往認(rèn)為毒性大、三致作用強(qiáng)、代謝緩慢的手性農(nóng)藥中，部分手性農(nóng)藥的副面作用可能是由非活性的對映體所造成的，而真正起作用或活性更高的異構(gòu)體的副面

7、影響相對要小的多，如早期使用的DDT及其類似物。針對這種情況通過合成、生產(chǎn)及使用單一異構(gòu)體會克服以往的缺點(diǎn)。第二，非活性或活性低的對映體優(yōu)先被代謝或轉(zhuǎn)化，從而降低了副作用，這種可能是人們所希望的，而且若能探知導(dǎo)致這種優(yōu)先代謝或轉(zhuǎn)化的原因，將對指導(dǎo)手性農(nóng)藥的不對稱合成和光學(xué)純手性農(nóng)藥的生產(chǎn)具有非常重要的意義。第三，一種異構(gòu)體代謝轉(zhuǎn)化為副面作用更強(qiáng)的另一種異構(gòu)體，這種情況下其風(fēng)險(xiǎn)要比毒理毒性實(shí)驗(yàn)測得的結(jié)果高的多。但是目前有關(guān)手性農(nóng)藥的相關(guān)方面的研究還基本是空白，不能反映其對人類潛在的影響，因此進(jìn)行手性農(nóng)藥在動(dòng)物體的選擇性代謝就顯得十分重要。大量的科學(xué)試驗(yàn)表明手性醫(yī)藥在人及動(dòng)物體內(nèi)的代謝確實(shí)存在著立

8、體選擇性，如Omeprazole 在人體內(nèi)R-體比S-體更容易代謝； Carvedilol 經(jīng)選擇性代謝后在人的血漿中S-體的濃度比-R體高，人體對nisoldipine S體的代謝比R-體快8倍,相關(guān)方向的研究非常多。對手性農(nóng)藥在動(dòng)物體的選擇性代謝行為的研究非常少，只是很少數(shù)的幾篇報(bào)道，而且相關(guān)的報(bào)道主要是有機(jī)氯農(nóng)藥在動(dòng)物體及人體內(nèi)的選擇性的殘留情況，Kallenborn R 測定挪威河烏蛋中有機(jī)氯農(nóng)藥的污染，發(fā)現(xiàn)-六六六的（+）異構(gòu)體過剩；Ulrich E M研究-六六六在老鼠中的代謝并發(fā)現(xiàn)在腦、血、脂肪等組織中分別具有不同的選擇性。Tanabe S曾檢測-六六六在鯨魚體內(nèi)對映體的相對含量

9、，發(fā)現(xiàn)（+）-/（-）-異構(gòu)體比值在1.6-2.8之間，隨個(gè)體不同而不同，原因是代謝能力的差異。Wakabayashi K 研究過從老鼠肝臟中提取的谷光甘肽S轉(zhuǎn)移酶對殺冥硫磷具有立體選擇性的去甲基代謝作用而產(chǎn)生S-體的去甲基殺冥硫磷。Skopp S 研究了四種毒殺芬類似物在老鼠中的選擇性代謝，在肝臟等組織中發(fā)現(xiàn)了選擇性的代謝。關(guān)于其他手性農(nóng)藥的相關(guān)研究基本未見報(bào)道。構(gòu)成動(dòng)物體的酶、蛋白、氨基酸、多糖等都具有手性，決定了動(dòng)物體內(nèi)的手性環(huán)境。當(dāng)手性農(nóng)藥進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)必定會受到酶系等很多生物因子的影響，對映異構(gòu)體代謝等行為會發(fā)生復(fù)雜的變化。人們已認(rèn)識到農(nóng)藥及殘留農(nóng)藥的原體、代謝物對人類健康的影響，但由

10、于手性農(nóng)藥的特殊性，其對映體的選擇性的轉(zhuǎn)化及代謝行為還是一個(gè)人們比較陌生的領(lǐng)域，對映體污染還未引起普遍的關(guān)注。研究手性農(nóng)藥在動(dòng)物體內(nèi)的選擇性代謝行為具有非常重大的意義。本課題擬選擇常用的6種手性農(nóng)藥，馬拉硫磷、水胺硫磷、乳氟禾草靈、乙氧呋草黃、甲霜靈和己唑醇，首先基于高效液相色譜手性固定相法建立其對映體的手性拆分方法及在動(dòng)物組織中的殘留分析方法，進(jìn)行其在動(dòng)物體內(nèi)的選擇性代謝和殘留行為的系統(tǒng)性研究。國際上至今尚未開展手性農(nóng)藥在動(dòng)物體內(nèi)的選擇性代謝的系統(tǒng)研究，因此本項(xiàng)目的研究意義在于：（1）開展手性農(nóng)藥選擇性轉(zhuǎn)化、代謝、殘留的系統(tǒng)研究工作，填補(bǔ)這一領(lǐng)域的許多研究空白；（2）發(fā)展相關(guān)農(nóng)藥的手性分離和

11、代謝分析方法；（3）通過對手性農(nóng)藥在動(dòng)物體內(nèi)的選擇性的代謝、殘留行為研究及機(jī)理探討，對相關(guān)手性農(nóng)藥的生產(chǎn)、使用、手性農(nóng)藥法規(guī)的制定提出建設(shè)性的意見；（4）為相關(guān)手性農(nóng)藥的風(fēng)險(xiǎn)評估和污染治理提供依據(jù)，指導(dǎo)合理用藥，減少污染，降低對人類健康的影響。主要參考文獻(xiàn)1 R. M. Orlando, P. S. Bonato.Journal of Chromatography B, 2003，795：2272352 M.P. Marques , N.A.G. Santos , E.B. Coelho , et al. Journal of Chromatography B, 2001，762 ：87953

12、 F. Behn , S. Michels , S. Laer , et al. Journal of Chromatography B, 2001，755：1111174 K. Wakabayashi, M. Hizue, H. Nozaki, et al., Journal of Pesticide Science,1994, 19（4）：277-284 5 R.Kallenborn, S.Planting, J. E.Haugen, Chemosphere. 1998, 37: 2489-2499 6 S. Skopp, M. Oehme, H. Drenth, Chemsphere,

13、2002, 46: 7, 1083-10907 E. M. Ulrich, K. L. Willett, G. A. Caperell, et al.Environmental Scidence and Technology, 2001, 35: 8, 1604-1609,2、項(xiàng)目的研究內(nèi)容、研究目標(biāo),以及擬解決的關(guān)鍵問題。研究內(nèi)容（1） 基于以往對數(shù)十種手性農(nóng)藥的分離、分析基礎(chǔ)，利用高效液相色譜手性固定相法建立并優(yōu)化6種選定農(nóng)藥對映異構(gòu)體的手性分離、分析方法。（2）建立選定手性農(nóng)藥對映體殘留于動(dòng)物組織中的提取、凈化及檢測方法。（3）對試驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行飼養(yǎng)， 通過飼喂和靜脈注射兩種途徑進(jìn)行所選農(nóng)藥

14、的代謝研究，對喂養(yǎng)和注射農(nóng)藥的濃度進(jìn)行試驗(yàn)篩選。（4）測定排泄物包括尿液和糞便、血樣中對映體的含量及相對比值（ER值）隨時(shí)間的變化情況，最終檢測肝臟、心臟、肌肉、脂肪、腦等組織中農(nóng)藥對映體的含量及ER值并確定對映體間的轉(zhuǎn)化、選擇性代謝及殘留行為。（5）通過質(zhì)譜確證代謝產(chǎn)物。（6）進(jìn)行同一種動(dòng)物對不同手性農(nóng)藥及同一種手性農(nóng)藥在不同動(dòng)物中的選擇性代謝行為的系統(tǒng)研究，加以比較，探討代謝機(jī)理。研究目標(biāo)：（1） 建立所選定的6種手性農(nóng)藥對映體的分離分析方法；（2） 建立手性農(nóng)藥對映體在動(dòng)物組織中的殘留分析方法；（3） 測定手性農(nóng)藥對映異構(gòu)體在動(dòng)物體內(nèi)的變化趨勢，研究手性農(nóng)藥對映體在動(dòng)物體內(nèi)的轉(zhuǎn)化、選擇性

15、代謝及殘留行為；（4） 通過對不同的手性農(nóng)藥對映體在不同動(dòng)物體內(nèi)及不同的組織中的選擇性代謝行為差異的比較，探討選擇性轉(zhuǎn)化、代謝及殘留機(jī)理；（5） 為制定手性農(nóng)藥相關(guān)的法規(guī)提供依據(jù)，指導(dǎo)合理用藥，提高安全性，減少污染。擬解決的關(guān)鍵問題： (1) 手性農(nóng)藥光學(xué)對映體的分離。由于對映體具有相同的物理化學(xué)性質(zhì)，將其分離一直是相關(guān)研究的難題。結(jié)合以前手性農(nóng)藥的拆分基礎(chǔ)，建立選定手性農(nóng)藥的分析方法，即ER值的測定方法，是進(jìn)行手性農(nóng)藥對映體殘留行為研究的基礎(chǔ)。 (2)手性農(nóng)藥使用濃度的確定、測定樣本的收集。由于研究對象是活體的動(dòng)物，農(nóng)藥使用的濃度若太高會導(dǎo)致死亡，若太低則檢測困難；其尿液、糞便、血樣的收集相

16、對較麻煩。(3) 動(dòng)物組織中的手性農(nóng)藥的提取、凈化和檢測。本項(xiàng)目檢測殘留于動(dòng)物組織的手性農(nóng)藥要依賴于高效液相色譜法，與傳統(tǒng)主要用于殘留農(nóng)藥分析的氣相色譜法（GC）相比，對提取、凈化尤其是檢測方法的要求要高的多。(4)機(jī)理討論。3、擬采取的研究方案及可行性分析。（包括有關(guān)方法、技術(shù)路線、實(shí)驗(yàn)手段、關(guān)鍵技術(shù)等說明）（1） 在以往研究和文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，合成并優(yōu)化合適的手性固定相，利用高效液相色譜法發(fā)展建立所選手性農(nóng)藥對映體的分離分析方法；至目前為止，已用纖維素、淀粉等衍生物手性固定相直接拆分了百余種外消旋體化合物，而其中近50種化合物的拆分此前尚未見報(bào)道，我們已經(jīng)成功的拆分了20余種手性農(nóng)藥并建立了相

17、應(yīng)的分離分析方法。（2） 參考傳統(tǒng)農(nóng)藥的殘留分析方法，發(fā)展手性農(nóng)藥在動(dòng)物組織中殘留的提取、凈化方法。我們所在的實(shí)驗(yàn)室是國內(nèi)最早開展農(nóng)藥殘留研究的單位。在幾十年的相關(guān)研究中，已經(jīng)積累了大量的農(nóng)藥殘留采樣、制備、保存、提取、凈化、檢測和確證方法。本研究的重點(diǎn)分析數(shù)據(jù)是手性農(nóng)藥對映異構(gòu)體的相對比值（ER），試驗(yàn)中可通過樣本富集、高效液相色譜法檢測等手段獲得蔬菜中殘留手性農(nóng)藥的ER值。（3） 飼養(yǎng)試驗(yàn)動(dòng)物，待達(dá)到一定重量以后選擇健康狀態(tài)良好的個(gè)體進(jìn)行試驗(yàn)。參照已有的相關(guān)農(nóng)藥的毒性數(shù)據(jù)及試驗(yàn)確定用藥的濃度，對于水溶性差的農(nóng)藥輔助于乳化劑飼喂或注射。將試驗(yàn)動(dòng)物分組，喂藥的老鼠每組6只，包括兩個(gè)平行重復(fù)，每

18、個(gè)平行重復(fù)3只（考慮到通過口服方式進(jìn)入所研究的樣本中農(nóng)藥的濃度較低，將平行中3只動(dòng)物的待測組織分別合并，提高農(nóng)藥的含量），注射農(nóng)藥的老鼠和家兔每組3只，即3個(gè)平行重復(fù)，每個(gè)平行1只，這樣可以考察個(gè)體之間的差異性。飼養(yǎng)喂藥和靜脈注射都設(shè)6組試驗(yàn)動(dòng)物，同時(shí)設(shè)空白對照，喂藥后選擇適宜的6個(gè)時(shí)間間隔點(diǎn)收集待測樣本，包括尿液，糞便，血樣，肌肉，脂肪，心臟，肝臟，腦。（4） 依據(jù)建立的樣本處理方法及分析方法檢測對映體的絕對和相對含量，從而測定對映體的代謝動(dòng)態(tài)及其在各個(gè)組織中的對映體的立體選擇性，據(jù)此來進(jìn)行手性農(nóng)藥對映體在動(dòng)物體內(nèi)的轉(zhuǎn)化、選擇性代謝及其它殘留特性的研究。（5） 通過質(zhì)譜測定所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物，

19、進(jìn)行定性分析，從而探討手性農(nóng)藥的代謝機(jī)理。4、本項(xiàng)目的特色與創(chuàng)新之處。（1） 部分選定手性農(nóng)藥的對映異構(gòu)體拆分研究目前尚未見報(bào)道；（2） 手性農(nóng)藥對映體的代謝研究目前國內(nèi)外還未見有系統(tǒng)的研究，其用藥、樣品收集、樣品中手性農(nóng)藥的提取、凈化和檢測分析還未建立完善的方法；（3） 研究手性農(nóng)藥對映體在動(dòng)物體內(nèi)的轉(zhuǎn)化、選擇性代謝及選擇性的殘留行為的新穎性；（4） 動(dòng)物對手性農(nóng)藥對映體的選擇性的代謝、轉(zhuǎn)化等研究是一嶄新的領(lǐng)域，缺乏成熟的試驗(yàn)方法，許多假設(shè)、理論都需要更多的相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究來驗(yàn)證和發(fā)展。不同種手性農(nóng)藥在不同動(dòng)物體內(nèi)及不同組織中的選擇性的代謝、轉(zhuǎn)化、殘留行為的系統(tǒng)研究、差異比較、機(jī)理探討，目前在國

20、內(nèi)外尚未見報(bào)道；（5） 依據(jù)手性農(nóng)藥對映體的代謝數(shù)據(jù)，重新認(rèn)識相關(guān)農(nóng)藥的特性，提供更真實(shí)的手性農(nóng)藥毒性毒理數(shù)據(jù)以及有利于人類健康的用藥策略。5、年度研究計(jì)劃及預(yù)期研究結(jié)果。（包括擬組織的重要學(xué)術(shù)交流活動(dòng)、國際合作與交流計(jì)劃等）（1）2005年度：查閱有關(guān)資料，在以往研究和文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，發(fā)展、建立、優(yōu)化8種選定手性農(nóng)藥對映體的分離、分析方法；（2）2006年度：完成手性農(nóng)藥對映體在分析樣品中的殘留分析方法的建立，進(jìn)行6種手性農(nóng)藥對映異構(gòu)體在老鼠體內(nèi)和2種農(nóng)藥在家兔體內(nèi)的選擇性代謝及殘留行為等的研究；（3）2007年度：完成另外4種手性農(nóng)藥在家兔體內(nèi)的選擇性代謝及殘留行為等研究，比較在各個(gè)組織中對

21、映體的代謝動(dòng)態(tài)及ER值，探討代謝機(jī)理。進(jìn)行項(xiàng)目報(bào)告總結(jié)，發(fā)表相關(guān)研究論文。預(yù)期研究成果（1） 建立多種手性農(nóng)藥對映體的分離分析方法；（2） 建立手性農(nóng)藥對映體的代謝分析方法；（3） 測定手性農(nóng)藥對映體在所選動(dòng)物體內(nèi)的選擇性的轉(zhuǎn)化、代謝、殘留行為；（4） 探討手性農(nóng)藥對映體在動(dòng)物中的選擇性代謝機(jī)理；（5） 為相關(guān)手性農(nóng)藥的風(fēng)險(xiǎn)評估及其污染治理提供真實(shí)可靠的依據(jù)，為其生產(chǎn)提出建設(shè)性的意見，減少相關(guān)手性農(nóng)藥對人類健康的影響；（6） 在國內(nèi)外重要學(xué)術(shù)刊物上發(fā)表相關(guān)研究論文812篇，完成博士論文2篇，碩士論文1篇。（二）研究基礎(chǔ)與工作條件1、 工作基礎(chǔ)本項(xiàng)目申請者多年來一直從事手性化合物的分離分析及農(nóng)藥

22、殘留分析的研究工作，在以往的研究中，合成并制備了多種手性固定相，其性能以基本達(dá)到國外同類產(chǎn)品水平，利用這些自制手性柱已成功的直接拆分了百余種外消旋體化合物，而其中近50種化合物的拆分此前尚未見報(bào)道。特別是近幾年來，從事了大量的手性農(nóng)藥分離及農(nóng)藥殘留分析的工作，主持并參與了多項(xiàng)研究項(xiàng)目，這些項(xiàng)目涉及農(nóng)藥質(zhì)量控制、農(nóng)藥殘留分析等內(nèi)容。申請者在近5年內(nèi)發(fā)表相關(guān)研究論文60余篇。 項(xiàng)目申請者所在的中國農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院設(shè)有農(nóng)藥學(xué)科點(diǎn)，本學(xué)科點(diǎn)1988年被評為國家級重點(diǎn)學(xué)科，1996年被列入“211工程”重點(diǎn)建設(shè)學(xué)科，2002年再次被評為國家級重點(diǎn)學(xué)科。本專業(yè)擁有“農(nóng)藥化學(xué)及農(nóng)藥使用技術(shù)農(nóng)業(yè)部重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室

23、”，為本項(xiàng)目的完成提供了強(qiáng)有力的保障。農(nóng)藥分析與環(huán)境毒理教研室?guī)资陙硪恢睆氖罗r(nóng)藥殘留分析的研究工作，多年來承擔(dān)了與農(nóng)藥殘留分析有關(guān)的國家自然基金項(xiàng)目、國際合作項(xiàng)目以及橫向開發(fā)項(xiàng)目數(shù)十項(xiàng)，發(fā)表相關(guān)研究論文百余篇。多年的研究工作使得本教研室在農(nóng)藥殘留分析方面積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)。這些農(nóng)藥殘留分析工作既涉及到了環(huán)境（如土壤、水、大氣）中的農(nóng)藥殘留分析，也涉及動(dòng)植物等農(nóng)產(chǎn)品（如蔬菜、水果、糧食、肉、脂肪等）中的農(nóng)藥殘留分析。 本項(xiàng)目的參加者均為本室的工作人員，多年從事手性農(nóng)藥分析及農(nóng)藥殘留分析的工作，這是本項(xiàng)目能夠順利實(shí)施的重要保證。手性農(nóng)藥對映體在動(dòng)物體內(nèi)的選擇性代謝行為研究立項(xiàng)依據(jù)手性農(nóng)藥對映體具有

24、幾乎相同的物理化學(xué)性質(zhì)，但生物活性、毒性、毒理及代謝方式等往往差別較大。目前在進(jìn)行手性農(nóng)藥的毒性毒理評價(jià)時(shí)，是將含有兩種或兩種以上對映異構(gòu)體的外消旋體農(nóng)藥當(dāng)作一種農(nóng)藥來處理，沒有考慮到對映異構(gòu)體的構(gòu)型轉(zhuǎn)化或優(yōu)先代謝的特性，因此使得傳統(tǒng)上對手性農(nóng)藥的風(fēng)險(xiǎn)評估是不可靠的，即在進(jìn)行手性農(nóng)藥的毒性毒理評價(jià)時(shí)所得的數(shù)據(jù)是不真實(shí)的。對映體的選擇性代謝及轉(zhuǎn)化行為使得以往手性農(nóng)藥的研究數(shù)據(jù)不能反映其對人類潛在的影響，因此進(jìn)行手性農(nóng)藥在動(dòng)物體的選擇性代謝具有重要意義。研究內(nèi)容n 以高效液相色譜手性固定相法建立8種手性農(nóng)藥對映異構(gòu)體的拆分方法n 手性農(nóng)藥分別包括兩種殺蟲劑馬拉硫磷和水胺硫磷、三種除草劑乳氟禾草靈、

25、吡氟禾草靈和乙氧呋草黃及三種殺菌劑甲霜靈、三唑酮和己唑醇。n 建立選定手性農(nóng)藥對映體殘留于動(dòng)物組織中的提取、凈化及檢測方法n 飼養(yǎng)試驗(yàn)動(dòng)物，通過飼喂和靜脈注射兩種途徑進(jìn)行所選農(nóng)藥的代謝研究，對喂養(yǎng)和注射農(nóng)藥的濃度進(jìn)行試驗(yàn)篩選。n 進(jìn)行同一種動(dòng)物對不同手性農(nóng)藥及同一種手性農(nóng)藥在不同動(dòng)物中的選擇性代謝行為的系統(tǒng)研究。n 測定排泄物包括尿液和糞便、血樣中對映體的含量及相對比值（ER值）隨時(shí)間的變化情況，最終檢測肝臟、心臟、肌肉、脂肪、腦等組織中農(nóng)藥對映體的含量及ER值并確定對映體間的轉(zhuǎn)化、選擇性代謝及殘留行為。n 通過質(zhì)譜確證代謝產(chǎn)物，探討代謝機(jī)理。n 通過各個(gè)組織中ER值的比較，確定選擇性代謝產(chǎn)生的部位，探討