國(guó)產(chǎn)鹽酸西替利嗪片的人體藥代動(dòng)力學(xué)及相對(duì)生物利用度

1、國(guó)產(chǎn)鹽酸西替利嗪片的人體藥代動(dòng)力學(xué)及相對(duì)生物利用度             摘要目的：研究國(guó)產(chǎn)鹽酸西替利嗪片的人體藥代動(dòng)力學(xué)和相對(duì)生物利用度。方法：選擇8名男性健康志愿者，采用反相高效液相色譜法，以紫外229 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)，測(cè)定了單劑量(10 mg)口服國(guó)產(chǎn)鹽酸西替利嗪片和進(jìn)口鹽酸西替利嗪片在人體內(nèi)的西替利嗪濃度。結(jié)果：鹽酸西替利嗪的體內(nèi)動(dòng)態(tài)過程呈一級(jí)吸收的二房室開放模型，國(guó)產(chǎn)片和進(jìn)口片的cmax分別為（316.71±39.66）和（314.8

2、0±31.79） ng/ml，tmax分別為（0.72±0.09 ）和（0.72±0.09） h，t1/2分別為（10.71±3.06）和（9.95±2.41） h，AUC0分別為（2 728.52±356.06）和（2 753.01±360.33） ng*h/ml。結(jié)論：國(guó)產(chǎn)鹽酸西替利嗪片劑的相對(duì)生物利用度為（99.50±8.89）；選擇cmax和AUC0進(jìn)行三因素方差分析與雙單側(cè) t檢驗(yàn)，結(jié)果表明國(guó)產(chǎn)片和進(jìn)口片兩種制劑具有生物等效性

3、。 關(guān)鍵詞：鹽酸西替利嗪；藥代動(dòng)力學(xué)；生物利用度西替利嗪(cetirizine)是第一代抗組胺藥物羥嗪的活性羧酸衍生物，分子結(jié)構(gòu)中的兩性離子特征使其無(wú)明顯的中樞抑制作用，臨床主要用于防治過敏性鼻炎、慢性特發(fā)性蕁麻疹、過敏性哮喘和特異性皮炎等疾病1,2。目前，有關(guān)鹽酸西替利嗪臨床藥代動(dòng)力學(xué)資料，國(guó)外學(xué)者已進(jìn)行了眾多的研究，涉及新生兒、幼兒、兒童、青年、老年及一些臨床病例等不同群體37。國(guó)內(nèi)江蘇連云港制藥廠首先研制了鹽酸西替利嗪片，為了評(píng)價(jià)國(guó)產(chǎn)鹽酸西替利嗪片在健康人體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)和生物利用度，本研究建立了血漿中西替利嗪的反相離子對(duì)高效液相色譜（RP-IP-HPLC）測(cè)定新方法, 并對(duì)國(guó)

4、產(chǎn)鹽酸西替利嗪片(CET)和進(jìn)口鹽酸西替利嗪片(Zyrtec，仙特敏，ZYR)進(jìn)行了藥代動(dòng)力學(xué)和相對(duì)生物利用度研究，以三因素方差分析和雙單側(cè)t檢驗(yàn)評(píng)價(jià)兩種制劑的生物等效性，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1材料和方法1.1儀器與試藥Waters高效液相色譜儀：Waters 510泵，Waters 486紫外檢測(cè)器，Maxima 820色譜工作站。Rheodyne 7125型六通進(jìn)樣閥，配以50 l定量管。鹽酸西替利嗪標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品與CET片(規(guī)格10 mg/片,批號(hào)960520)均由江蘇連云港制藥廠提供；ZYR包衣片(規(guī)格10 mg/片

5、,批號(hào)96A26/A)由比利時(shí)UCB公司生產(chǎn)。乙腈、磷酸、磷酸二氫鈉、枸櫞酸鈉、乙酸乙酯、三乙胺、十二烷基硫酸鈉（SDS）等實(shí)驗(yàn)試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純，水為重蒸餾水。1.2色譜分離條件分析柱為Waters Nava-Pak C18(150 mm×3.9 mm ID,4 m)色譜柱；流動(dòng)相為乙腈磷酸二氫鈉(0.02 mol/L)三乙胺(50500.15, pH 3.15)，內(nèi)含SDS 0.007 mol/L；流速 1.0 ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng) 229

6、 nm；柱溫25。1.3血漿樣品預(yù)處理精密吸取血漿樣品0.5 ml，置于10 ml具塞離心管中，加入pH 5.5枸櫞酸鈉緩沖液0.5 ml和乙酸乙酯5 ml，渦旋振蕩 2 min，3 500 r/min離心5 min。分取乙酸乙酯層4 ml，置于另一10 ml具塞離心管中，加1.7磷酸溶液100 l反提，3 500 r/min離心5 min后，吸取磷酸溶液50 l進(jìn)樣分析。1.4體內(nèi)分析方法學(xué)評(píng)價(jià)取健康人空白血漿共6

7、份，精密添加鹽酸西替利嗪標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品一定量，配制成10.0，25.0，50.0，100.0，200.0，400.0 ng/ml的鹽酸西替利嗪標(biāo)準(zhǔn)血漿樣品系列。按血漿樣品預(yù)處理步驟和RP-HPLC測(cè)定方法進(jìn)行操作，以測(cè)得的血漿中西替利嗪峰高（Y）為縱坐標(biāo)，相應(yīng)的濃度(c)為橫坐標(biāo)，其回歸方程為：Y= 89.28 + 18.53 c， r=0.9998（n=5）。以信噪比S/N>2計(jì)，血漿樣品中西替利嗪最低檢測(cè)濃度為2.5ng/ml，最低檢測(cè)限為 0.5 ng。選擇25.0，100.0和400.0 ng/

8、ml 低、中、高3種不同濃度的鹽酸西替利嗪標(biāo)準(zhǔn)血漿樣品以考察體內(nèi)分析方法的回收率和精密度，結(jié)果鹽酸西替利嗪標(biāo)準(zhǔn)血漿樣品萃取回收率>70 ,方法回收率>95；日內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）<4.6(n=5)，日間RSD<7.2(n=5)。1.5研究對(duì)象與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)男性健康志愿者8名，平均年齡（22.88±0.83）歲， 平均體質(zhì)量（68.19±4.96） kg。所有志愿者經(jīng)肝腎功能、血尿常規(guī)及心電圖檢查均正常，且精神良好；受試前1個(gè)月內(nèi)未服用任何藥物，禁忌煙酒。健康志愿者明了本試驗(yàn)的目的與要求，均簽署知情同意書，并上報(bào)上

9、海長(zhǎng)海醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)備案。采用隨機(jī)交叉試驗(yàn)，將8名健康志愿者隨機(jī)分為兩組，受試前隔夜禁食12 h，次日早晨空腹分別口服10 mg CET片和10 mg ZYR片，200 ml溫開水送服。于服藥后0.25，0.5，0.75，1.0，2.0，4.0，6.0，10.0，16.0，24.0，36.0 h從其左 (右) 肘靜脈采血約 3 ml，血樣置于肝素抗凝管中,2 500 r/min離心5 min后分取血漿，置-20冰箱保存待測(cè)。兩次試驗(yàn)的間隔周期為2周

10、。1.6數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析西替利嗪血藥濃度-時(shí)間曲線下面積（AUC）值由梯形法計(jì)算，其中AUC036由體內(nèi)血漿樣品中西替利嗪實(shí)測(cè)值計(jì)算，AUC36根據(jù)消除相尾部 lnc-t直線斜率k值和36 h點(diǎn)西替利嗪血漿濃度計(jì)算。以ZYR片的AUC0為參照，求算CET片的相對(duì)生物利用度。選擇NDST 5.0統(tǒng)計(jì)分析程序，對(duì)主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)cmax 和AUC0進(jìn)行三因素方差分析和雙單側(cè)t檢驗(yàn)（顯著性水平=0.05）。2結(jié)果2.1色譜行為與典型譜圖在本研究建立的血漿樣品色譜分離條件下，西替利嗪的保留時(shí)間約為5.3 min， 相應(yīng)的理論塔板數(shù)每米約6

11、 400。 圖1為空白血漿和實(shí)測(cè)血漿樣品的典型色譜分離譜圖，顯然西替利嗪與血漿中的內(nèi)源性物質(zhì)之間達(dá)到了良好的分離，其色譜峰位處沒有其他雜質(zhì)的干擾。圖1血漿樣品中西替利嗪的RP-HPLC分離譜圖Fig 1RP-HPLC chromatograms after a single oraldose of 10 mg cetirizine hydrochloride tabletA：Blank plasma；B：Volunteer plasma

12、2.2人體藥代動(dòng)力學(xué)8名健康志愿者單劑量口服10 mg CET片和10 mg ZYR片后體內(nèi)西替利嗪平均血藥濃度-時(shí)間曲線見圖2。結(jié)果顯示鹽酸西替利嗪在健康人體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)過程呈一級(jí)吸收的二房室開放模型，其中CET片和ZYR片的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)見表1。圖2單劑量口服10 mg鹽酸西替利嗪片后體內(nèi)平均血藥濃度-時(shí)間曲線Fig 2Mean plasma concentration-time curve aftera single oral dose of&

13、#160;10 mg cetirizine hydrochloride tablet: CET tablet；: ZYR tablet；（n=8）表1單劑量口服CET片與ZYR片后的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)Tab 1Pharmacokinetic parameters after a singleoral dose of CET tablet and ZYR tablet （n=8,±s

14、）Parameter          CET tablet     ZYR tablet Ka (t/h-1)        4.18±3.10      5.26±3.58K10 (t/h-1)   

15、60;   0.18±0.06      0.17±0.05 t1/2ka (t/h)      0.27±0.18      0.18±0.09 t1/2 (t/h)       1.10±1.10  

16、60;   1.00±1.09 t1/2 (t/h)       10.71±3.06     9.95±2.41 tmax (t/h)        0.72±0.09      0.72±0.09 cmax

17、 (B/ng*ml-1) 316.71±39.66   314.80±31.79 AUC0 (A/ng*h*ml-1)   2 728.52±356.06 2 753.01±360.33 2.3相對(duì)生物利用度與生物等效性評(píng)價(jià)8名健康志愿者單劑量口服10 mg CET片和10 mg ZYR片后體內(nèi)西替利嗪AUC0及相對(duì)生物利用度比較結(jié)果列于表2，其中平均相對(duì)生物利用度為（99.5

18、0±8.89）。應(yīng)用新藥統(tǒng)計(jì)程序 NDST 5.0 對(duì)口服CET片和ZYR片后的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)lncmax 和lnAUC0進(jìn)行三因素方差分析, 結(jié)果表明試驗(yàn)制劑間及交叉周期間無(wú)顯著性差異(P>0.05)，僅健康個(gè)體間存在差異；進(jìn)一步進(jìn)行雙單側(cè)t檢驗(yàn)，結(jié)果判定CET片和ZYR片具有生物等效性。 表2單劑量口服CET片與ZYR片10 mg后的AUC比較與相對(duì)生物利用度計(jì)算Tab 2AUC comparison and relative bioavailabil

19、ity aftera single oral dose of 10 mg CET tablet and ZYR tabletNo.         CET tablet        ZYR tablet       R

20、elativebioavail                 No.     Period  AUC0     Period   AUC0    -ability(%)      

21、;         (A/ng*h*ml-1)        (A/ng*h*ml-1) A       1       2 801.65    2       

22、;2 603.01      107.63 B       1       2 602.00    2       3 021.99      86.10 C  

23、;     1       2 625.30    2       2 521.28       104.13 D       1      

24、; 2 569.60    2       2 787.53      92.18 E       2       3 561.62    1     

25、;  3 493.68      1 01.94 F       2       2 569.92    1       2 732.12      9

26、0;4.06 G       2       2 396.47    1       2 478.54      96.69 H       2   

27、    2 701.62    1       2 385.89      113.23 ±                     

28、60;                   99.50 s                            

29、60;             8.89 3討論目前，文獻(xiàn)報(bào)道鹽酸西替利嗪的體內(nèi)分析方法主要為HPLC法、氣相色譜（GC）法和高效薄層色譜法68。本實(shí)驗(yàn)借鑒文獻(xiàn)6中離子對(duì)技術(shù)，以常用的SDS替代相對(duì)稀少的癸烷磺酸鈉作為離子對(duì)試劑,同時(shí)考慮到西替利嗪分子結(jié)構(gòu)中叔氨基團(tuán)易與固定相表面殘留的硅醇基產(chǎn)生離子交換作用，選擇三乙胺競(jìng)爭(zhēng)抑制或掩蔽游離硅醇基的活性，有利于堿性藥物峰形對(duì)稱并縮短保留時(shí)間。血漿樣品預(yù)處理采用乙酸乙酯正提和稀磷酸反提兩步操作,在保證萃取回收率的

30、前提下,使體內(nèi)樣品提取物色譜分離干擾減少,并在強(qiáng)洗脫流動(dòng)相條件下使血漿樣品中微量西替利嗪組分快速出峰,極大地提高了檢測(cè)靈敏度。本實(shí)驗(yàn)所需血樣僅為0.5 ml,但最低檢測(cè)濃度與文獻(xiàn)6相當(dāng),且為GC體內(nèi)分析方法7最低檢測(cè)濃度的1/5。Desager等4曾對(duì)成人單劑量口服20 mg西替利嗪水溶液和兒童單劑量口服5 mg西替利嗪水溶液后的藥代動(dòng)力學(xué)過程進(jìn)行了研究，其中成人體內(nèi)西替利嗪tmax為（0.62±0.22） h，t1/2為（8.6±2.1） h；而兒童體內(nèi)西替利嗪tmax相對(duì)延長(zhǎng)，可達(dá)（1.07±0.45）h

31、60;(P<0.01),t1/2顯著縮短，僅為（4.91±0.60） h (P<0.001)。本文研究結(jié)果表明，8名男性健康志愿者單劑量口服10 mg鹽酸西替利嗪片后的體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)呈現(xiàn)一級(jí)吸收的二房室開放模型，tmax和t1/2與文獻(xiàn)報(bào)道的成人鹽酸西替利嗪體內(nèi)過程基本一致4，5。CET片和ZYR片的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)cmax和AUC0經(jīng)三因素方差分析和雙單側(cè)t檢驗(yàn)均無(wú)顯著性差異，且CET片的相對(duì)生物利用度為（99.50±8.89）。 作者簡(jiǎn)介：范國(guó)榮（1966-），男（漢族），博士，主管藥師范國(guó)榮（第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)海醫(yī)院藥

32、學(xué)部，上海 200003）李珍（第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)海醫(yī)院藥學(xué)部，上海 200003）胡晉紅（第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)海醫(yī)院藥學(xué)部，上海 200003）石晶（第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)海醫(yī)院藥學(xué)部，上海 200003）沈意翔（第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)海醫(yī)院藥學(xué)部，上海 200003）宋洪杰（第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)海醫(yī)院藥學(xué)部，上海 200003）王卓（第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)海醫(yī)院藥學(xué)部，上海 200003）參考文獻(xiàn)1Campoli-Richards DM,Buckley MMT,Fitton A. Cetirizine: a&#

33、160;review of its pharmacological properties and clinical potential in allergic rhinitis, pollen-induced asthma,and chronic urticariaJ. Drugs,1990,40（5）:762-781.2Pagliara A，Testa B，Carrupt PA, et al.&

34、#160;Molecular properties and pharmacokinetic behavior of cetirizine，a zwitterionic H1-receptor antagonistJ. J Med Chem，1998,41（6）:853-863.3Spicak V，Dab I，Hulhoven R，et al. Pharmacokinetics and pharmacodyn

35、amics of cetirizine in infants and toddlersJ. Clin Pharmacol Ther，1997，61（3）：325-330.4Desager JP, Dab I, Horsmans Y, et al. A pharmacokinetic evaluation of the second-generation H1-receptor antagonist cetirizine in very young childrenJ. Cl