中國海洋大學(xué)生物化學(xué)B真題00-09答案

1、2007年一、填空1、醇 多羥基酸 類甾醇 2、磷酸戊糖途徑 3、雙縮尿反應(yīng) 4、10.925、40 60 6、肌球蛋白 肌動蛋白 7、3.6 0.54 氫鍵 折疊片 轉(zhuǎn)角（凸起） 8、磷酸化 9、四氫葉酸（及氨基苯甲酸PABA競爭性結(jié)合二氫葉酸合成酶） 10、亞麻酸 11、糖異生作用 12、低 高 13、32 106 14、DNA聚合酶 引物15、DNA RNA 蛋白質(zhì)二、判斷1、肽鏈中CN、CC可以自由旋轉(zhuǎn)，其他鍵均不可以2、20種氨基酸及茚三酮反應(yīng)除Pro為黃色，其余呈紫色3、一般來說，蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)決定空間構(gòu)象5、胰蛋白酶專一的水解Lys，Arg等堿性氨基酸羰基側(cè)鏈肽，胰凝乳蛋白酶專

2、一的水解Phe，Tyr等芳香氨基酸羰基側(cè)鏈6、血紅蛋白對氧的結(jié)合具有協(xié)同效應(yīng)，使其再氧分壓很低時能有效的釋放氧，氧分壓高時能快速的結(jié)合氧7、乙烯的作用是降低植物生長速度，催促果實早熟8、維生素B1即硫胺素，常以硫胺素焦磷酸輔酶形式存在，常是脫羧酶的輔酶9、人體必須的氨基酸主要有Val Trp Thr Ile Met Phe Lys等10、蔗糖由葡萄糖和果糖構(gòu)成，麥芽糖由葡萄糖構(gòu)成，乳糖由半乳糖和葡萄糖構(gòu)成（）11、別構(gòu)酶一般都是寡聚酶，通過次級鍵由多個亞基構(gòu)成（所有別構(gòu)酶都是寡聚酶）12、米氏常數(shù)是酶的特征常數(shù)，每個酶都有以個特定的Km值，隨測定的底物、反應(yīng)的溫度、pH及離子強度而改變13、競

3、爭性抑制Km變大，Vmax不變；非競爭性抑制Km不變，Vmax變??；反競爭性抑制Km、Vmax都變小14、核酶是一類具有催化活性的核酸，他的動力學(xué)方程符合米氏方程15、DNA分子變性時其紫外吸收迅速增加（對于純樣品，只要讀出260nm處的A值就可以算出含量。通常以A值為1相當(dāng)于50ug/mL雙鏈DNA或40ug/mL單鏈DNA或RNA）16、核酸中的稀有堿基（大多都是甲基化堿基）大多出現(xiàn)于tRNA中17、生物膜上的脂質(zhì)主要是磷脂（還有膽固醇和糖脂）18、膜蛋白（膜內(nèi)在蛋白和膜周邊蛋白不跨膜）跨膜區(qū)的二級結(jié)構(gòu)一般是螺旋（以單一螺旋跨膜、以多段螺旋跨膜、以蛋白質(zhì)分子末端片段插膜、通過共價鍵結(jié)合的脂

4、插膜錨定在膜上）19、糖異生途徑不是糖酵解途徑的簡單逆反應(yīng)過程，其中有3步迂回措施：（1）丙酮酸【丙酮酸羧化酶、ATP】草酰乙酸【磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶、GTP】磷酸烯醇式丙酮酸；（2）果糖1，6二磷酸【果糖1，6二磷酸酶】果糖6磷酸；（3）葡萄糖6磷酸【葡萄糖6磷酸酶】葡萄糖。生成一分子葡萄糖，消耗4ATP和2GTP。20、葡萄糖激酶對葡萄糖專一性強，己糖激酶專一性不強21、輔酶NADH主要是通過呼吸鏈提供ATP分子，而NADPH在還原性生物合成中提供還原力（提供氫離子）22、解偶聯(lián)劑（2，4二硝基苯酚【DNP】、三氟甲氧基苯腙羰基氰化物【FCCP】）可以破壞氧化磷酸化的偶聯(lián)，電子傳遞產(chǎn)生的

5、能量將以熱量的形式釋放;氧化磷酸化抑制劑：抑制氧的利用和抑制ATP的形成，寡霉素對利用氧的抑制可以被解偶聯(lián)劑解除;離子載體抑制劑（除氫離子）：增加線粒體內(nèi)膜對一價陽離子的通透性破壞氧化磷酸23、線粒體內(nèi)膜對氫離子、氯離子、鉀離子、氫氧根離子都是不通透的24、脂肪酸的氧化降解是從分子的羧基端開始的，氧化使中、長鏈脂肪酸末端甲基氧化轉(zhuǎn)變?yōu)槎然幔铀倭酥舅岬难趸?，氧化即脂肪酸羥化酶催化位羥基化，主要在于植烷酸的分解，缺少氧化會造成植烷酸的積聚25、層析系統(tǒng)的理論塔板數(shù)越高，系統(tǒng)的分離能力越好26、原核生物肽鏈合成時首先由甲酰蛋氨酰tRNA（tRNAfMeti）進入核糖體P位點識別啟動密碼子AU

6、G27、中心法則即遺傳信息從DNA傳到RNA，再傳到蛋白質(zhì)，一旦傳給蛋白質(zhì)就不再轉(zhuǎn)移29、在原核生物中，轉(zhuǎn)錄和翻譯是同時進行的30、限制性內(nèi)切酶是能識別特定核苷酸序列的核酸內(nèi)切酶三、選擇1、Pro 2、尿素或鹽酸胍（巰基乙醇能打開二硫鍵） 3、D：20種氨基酸，除組氨酸外，在生理PH（7左右）下都沒有明顯的緩沖容量 4、色氨酸：堿水解多數(shù)氨基酸都遭到破壞，但色氨酸是穩(wěn)定的。酸水解較好，但色氨酸遭到破壞羥基氨基酸小部分水解，天冬酰胺和谷氨酰胺的酰胺基被水解 5、及氧結(jié)合時是3價，去氧后是2價 6、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、彈性蛋白酶、凝血酶、纖溶酶 7、B：凝膠過濾層析是根據(jù)分子大小分離的技術(shù) 8

7、、Edman降解法用于N末端分析，苯異硫氰酸酯（PITC）法 9、競爭性抑制（丙二酸和琥珀酸結(jié)構(gòu)類似） 10、B型：DNA的構(gòu)型有：A、B（C、D、E）、Z 11、核糖體 12、A：酶活力大小即酶含量多少，酶比活力代表酶的純度=總活力U/總蛋白mg 13、k：維生素K是凝血酶原和其他蛋白質(zhì)中谷氨酸殘基羧化作用的輔因子 14、去污劑：膜周邊蛋白通過靜電力和非共價鍵及其他膜蛋白相互作用連接在膜上。膜內(nèi)在蛋白主要考疏水力及膜脂相結(jié)合。去污劑如SDS：十二烷基硫酸鈉，可蛋白質(zhì)中的氫鍵和疏水作用 15、NAD+：一般來說，細胞的有機成分比代謝總產(chǎn)物的還原程度高，生物合成是一個還原性的反映過程16、解偶聯(lián)

8、劑 17、DNA聚合酶：DNA聚合酶是切除和修復(fù)，DNA聚合酶是修復(fù)，DNA聚合酶是復(fù)制 18、限制性內(nèi)切酶 19、級聯(lián)放大效應(yīng)五、簡單題1、超二級結(jié)構(gòu)：若干相鄰二級結(jié)構(gòu)元件組合在一起，彼此相互作用，形成種類不多的、有規(guī)則的二級結(jié)構(gòu)組合或二級結(jié)構(gòu)串，在多種蛋白質(zhì)中充當(dāng)三級結(jié)構(gòu)的構(gòu)件，稱為超二級結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)域：多肽鏈在二級結(jié)構(gòu)或超二級結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上形成的三級結(jié)構(gòu)的局部折疊區(qū)，他是相對獨立的緊密球狀實體，稱為結(jié)構(gòu)域模體：具有特殊功能的超二級結(jié)構(gòu)，是二個或三個二級結(jié)構(gòu)的肽段在空間上接近形成的具有特殊功能的超二級結(jié)構(gòu)亞基：有些蛋白質(zhì)是由兩條或多條多肽鏈構(gòu)成，其中每條多肽鏈稱為亞基或亞單位2、（1）別構(gòu)調(diào)控：

9、酶分子的非催化部位及某些化合物可逆的非共價結(jié)合后發(fā)生構(gòu)想的改變，進而改變酶活性狀態(tài)，稱為酶的別構(gòu)調(diào)節(jié)。別構(gòu)酶一般都是寡聚蛋白，通過次級鍵由多亞基組成，在別構(gòu)酶分子上有和底物結(jié)合和催化底物的活性部位，也有和調(diào)節(jié)物或效應(yīng)物結(jié)合的調(diào)節(jié)部位。調(diào)節(jié)部位和活性部位雖然在空間上是分開的，但這兩個部位可以相互影響，通過構(gòu)想的變化產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)，實現(xiàn)對酶活的調(diào)控（2）酶原的激活：體內(nèi)合成出的蛋白質(zhì)，有時不具有活性，經(jīng)過蛋白水解酶專一作用后，構(gòu)想發(fā)生變化，形成酶的活性部位，變成活性蛋白，活性蛋白是酶，這個前體就稱為酶原，該活化過程是不可逆的，通過專一蛋白水解酶作用，使原來酶原無活性的構(gòu)想變成了有活性的構(gòu)想，實現(xiàn)了對

10、酶的調(diào)控（3）可逆的共價修飾：這種調(diào)控作用通過共價調(diào)節(jié)酶進行。共價調(diào)節(jié)酶通過其他酶對其多肽鏈上的某些基團進行可逆的共價修飾，改變酶的構(gòu)像，使處于活性及非活性的互變狀態(tài)，實現(xiàn)多酶活的調(diào)控，這種調(diào)控方式最普遍的就是磷酸化作用3、（1）化學(xué)偶聯(lián)假說：此假說認(rèn)為在電子傳遞過程中產(chǎn)生一種活潑的高能共價中間物，它隨后裂解驅(qū)動氧化磷酸化作用，在糖酵解中可以看到這種情況：甘油醛3磷酸被NAD+氧化釋放的能量形成甘油酸1，3二磷酸，這就是一個具有高能磷酸基團的?；姿峄?，但是在氧化磷酸化作用中一直未能找到任何一種活潑的高能中間產(chǎn)物（2）構(gòu)想偶聯(lián)假說：這種假說認(rèn)為在電子沿電子傳遞鏈傳遞使線粒體內(nèi)膜蛋白質(zhì)組分發(fā)生

11、了構(gòu)象變化，形成高能形式，這種高能形式通過ATP的合成而恢復(fù)其原來的構(gòu)象。這一假說和化學(xué)偶聯(lián)假說一樣，至今未能找到有力的實驗證據(jù)4、（1）復(fù)制：DNA復(fù)制采取半保留復(fù)制的方式DNA聚合酶是一種模板指導(dǎo)的酶并且需要有引物鏈的存在DNA聚合酶有校對、修復(fù)功能（2）轉(zhuǎn)錄：轉(zhuǎn)錄過程RNA聚合酶要以一條DNA鏈為模板，受DNA的指導(dǎo)轉(zhuǎn)錄后對RNA的加工可以消除一定的錯誤（3）翻譯：發(fā)生在tRNA上的校正突變，產(chǎn)生校正tRNA密碼子的簡并性和變偶性，密碼的編排具有放錯功能翻譯過程要以mRNA為模板氨酰tRNA合成酶能夠糾正?；e誤5、（1）糖及蛋白質(zhì)：糖分解代謝過程中產(chǎn)生的丙酮酸經(jīng)TCA循環(huán)轉(zhuǎn)變?yōu)椴蒗Ｒ宜?/p>

12、、酮戊二酸等可用于合成各種氨基酸的碳鏈結(jié)構(gòu)，經(jīng)氨基化或轉(zhuǎn)氨基后即生成相應(yīng)的氨基酸，另外糖分解產(chǎn)生的能量也可供氨基酸合成蛋白質(zhì)用蛋白質(zhì)分解為氨基酸脫氨基后形成酮戊二酸、丙酮酸、草酰乙酸、琥珀酸經(jīng)TCA循環(huán)和糖異生途徑可形成葡萄糖和糖原（2）脂和蛋白質(zhì)：脂類分子中的甘油可以經(jīng)丙酮酸轉(zhuǎn)變?yōu)椴蒗Ｒ宜帷⑼於徇M而變?yōu)榘被?。而脂肪酸氧化產(chǎn)生的乙酰輔酶A在動物體內(nèi)由于沒有乙醛酸循環(huán)不易被利用合成氨基酸，一般都經(jīng)TCA循環(huán)被氧化產(chǎn)能蛋白質(zhì)分解產(chǎn)生的生酮氨基酸可形成乙酰乙酸，從而合成脂肪，而生糖氨基酸可通過丙酮酸變?yōu)楦视?，也可形成乙酰輔酶A，經(jīng)丙二酰合成脂肪(3)糖和脂：糖經(jīng)酵解生成二羥丙酮磷酸和丙酮酸，前

13、者合成甘油，后者可以再形成乙酰輔酶A，經(jīng)丙二酰形成脂肪酸脂肪分解產(chǎn)生的甘油可轉(zhuǎn)變?yōu)槎u丙酮磷酸，從而生成糖，而脂肪酸氧化產(chǎn)生的乙酰輔酶A由于再動物體內(nèi)酶有乙醛酸循環(huán)，一般都經(jīng)TCA循環(huán)氧化成二氧化碳和水，生糖的機會很少2006年一、 填空1、7脫氫膽甾醇 促進鈣、磷的吸收和骨骼的發(fā)育 2、16% 凱氏定氮法 3、脲酶 4、二氫葉酸合成酶 5、螺旋 折疊片 轉(zhuǎn)角 6、丙酮 乙酰乙酸 D羥丁酸 7、10序列（Pribnow框，有助于DNA雙鏈的解開） 35序列（識別區(qū)，提供RNA聚合酶識別的信號） 8、53外切酶 聚合酶 9、8 8 4 檸檬酸循環(huán)（氧化每一輪回產(chǎn)生一個NADP(2.5ATP)，一

14、個FADH2(1.5ATP)，一個H+和一個乙酰輔酶A（10ATP）二、判斷1、二硫鍵對蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)有穩(wěn)定作用，它的位置屬于三級結(jié)構(gòu)（某些二硫鍵是生物活性所必須的，另一些二硫鍵則不是生物活性所必需的，再絕大多數(shù)情況下，二硫鍵再多肽鏈的轉(zhuǎn)角附近形成的）2、競爭性抑制使酶對底物的Km值增大3、堿性氨基酸的等電點及PH之間的關(guān)系為：PI>PH>7， 酸性氨基酸的等電點及PH之間的關(guān)系為：PI<PH<74、硫辛酸是一種酰基載體，存在于丙酮酸脫氫酶和酮戊二酸脫氫酶5、限制性內(nèi)切酶是能識別特定核苷酸序列的核酸內(nèi)切酶6、糖異生途徑不是糖酵解途徑的簡單逆反應(yīng)7、排阻層析（凝膠過濾層

15、析）是根據(jù)分子大小進行分離的技術(shù)，不同大小的分子受到的排阻不同，最終按照分子大小從小到大的順序流出8、端粒酶實際是一種反轉(zhuǎn)錄酶，它以RNA為模板來合成DNA的端粒結(jié)構(gòu)（真核生物線性染色體的兩個末端具有端粒結(jié)構(gòu)富含G，功能是穩(wěn)定染色體末端結(jié)構(gòu)，防止染色體間末端連接，并可以補償滯后鏈5末端在消除RNA引物后造成的空缺，端粒酶的存在使端粒保持一定的長度）9、肌紅蛋白和血紅蛋白又相似的三級結(jié)構(gòu)，但共價結(jié)構(gòu)不相似，動力學(xué)常數(shù)也不同10、構(gòu)成生物膜的脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、糖類在膜兩側(cè)的分布都是不均勻的四、名詞解釋1、PI：氨基酸凈電荷為0時的PH稱為等電點，即PI2、蛋白聚糖：是一類特殊的糖蛋白，由一條或多條糖胺

16、聚糖和一個核心蛋白共價連接而成3、生酮氨基酸：分解過程中能產(chǎn)生乙酰乙酰輔酶A的氨基酸，可通過乙酰乙酰輔酶A變?yōu)橐阴Ｒ宜岷土u丁酸，這些氨基酸稱為生酮基酸（生糖氨基酸：凡能形成丙酮酸、酮戊二酸、琥珀酸、草酰乙酸的氨基酸都稱為生糖氨基酸）4、酶活力單位：一定條件下，一定時間內(nèi)將一定量的底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物所需的酶量（比活力：每mg蛋白質(zhì)所含的酶活力單位數(shù)）5、PCR：聚合酶鏈反應(yīng)，是體外酶促擴增DNA的一種應(yīng)用廣泛的生物技術(shù)，又稱無細胞分子克隆法6、SDS-PAGE：十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳，再聚丙烯酰胺凝膠系統(tǒng)中加入陰離子去污劑十二烷基硫酸鈉和少量巰基乙醇，用于測定蛋白質(zhì)分子量的方法7、氧化磷酸

17、化：伴隨電子經(jīng)電子傳遞鏈傳遞到氧，ADP被磷酸化形成ATP的酶促過程即是氧化磷酸化作用8、蛋白質(zhì)組：指細胞內(nèi)基因組表達的所有蛋白質(zhì)9、一碳單位：具有一個碳原子的基團稱為一碳單位10、崗崎片段：DNA復(fù)制時，35走向的鏈短期內(nèi)首先合成較短的DNA片段，接著出現(xiàn)較大的分子，這些較短的DNA片段稱為崗崎片段11、別構(gòu)效應(yīng)：多亞基蛋白一般具有多個結(jié)合部位，結(jié)合再蛋白質(zhì)分子的特定部位上的配體對該分子的其他部位產(chǎn)生的影響稱為別構(gòu)效應(yīng)12、G蛋白：全名GTP結(jié)合蛋白，它既及GTP結(jié)合，也及GDP結(jié)合，是一類信號傳遞蛋白13、Na+-K+ATP酶：是一個跨膜的Na+-K+泵，即通過水解ATP提供的能量主動向外

18、運輸Na+，而向內(nèi)運輸K+ 14、Motif：是具有特殊功能的超二級結(jié)構(gòu)，是二個或三個具有二級結(jié)構(gòu)的肽段，再空間上相互接近形成的一個具有特殊功能的超二級結(jié)構(gòu)15、質(zhì)粒：染色體外自主復(fù)制的遺傳因子，多為共價閉環(huán)的DNA分子五、問答題1、（1）前處理：分離純化某中蛋白質(zhì)，首先要把蛋白質(zhì)從原來的組織或細胞中以溶解的狀態(tài)釋放出來，并保持原來的天然狀態(tài)，不丟失生物活性就。對于豬肝應(yīng)先剔除結(jié)締組織和脂肪組織，再用電動搗碎機等設(shè)備對豬肝進行細胞破碎，再選擇適當(dāng)?shù)木彌_液把SOD酶提取出來，細胞破碎等不溶物用離心或過濾的方法除去（2）粗分級分離：當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)提取液獲得后，選用一套釋放的方法，將所需蛋白質(zhì)及其他雜質(zhì)分

19、離開。對于SOD酶可以選用鹽析、等電點沉淀和有機溶劑分級分離法等。（3）細分級分離：也就是樣品的進一步純化。對于SOD酶可選用層析法進行純化（4）結(jié)晶：是蛋白質(zhì)分離純化的最后步驟，盡管結(jié)晶并不能保證蛋白質(zhì)一定是均一的，但只有某種蛋白質(zhì)再溶液中的數(shù)量占有優(yōu)勢時才能形成結(jié)晶，結(jié)晶過程本身也伴隨這一定程度的純化。對于細分級分離后得到的SOD酶可以進行結(jié)晶。2、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能之間具有高度的統(tǒng)一性和適應(yīng)性，二者密切相關(guān)。在絲氨酸蛋白酶中胰凝乳蛋白酶的結(jié)構(gòu)是個典型。它的結(jié)構(gòu)是以個緊密球狀實體，活性中心位于酶分子表面凹陷的小口袋中，這個溝較深，說明了胰凝乳蛋白酶對芳香族和其他大的疏水性側(cè)鏈的專一性的功能

20、，在活性中心中His57及Ser195相臨近，Asp102的羰基也在其附近，這3個殘基形成了催化三聯(lián)體，這種結(jié)構(gòu)構(gòu)成了酶的催化活性。在催化過程中，專一性側(cè)鏈進入酶的口袋，然后通過酸堿催化和共價催化完成催化作用。正是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能之間的這種統(tǒng)一性和適應(yīng)性，才是胰凝乳蛋白酶巧妙的完成了它的催化作用，可見蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的密切相關(guān)。3、（1）化學(xué)偶聯(lián)假說：見2007（2）構(gòu)象偶聯(lián)假說：見2007（3）化學(xué)滲透假說：這種假說認(rèn)為電子傳遞釋放出的自由能和ATP合成是及一種跨線粒體內(nèi)膜的質(zhì)子梯度相偶聯(lián)，也就是電子傳遞的自由能驅(qū)動氫離子從線粒體基質(zhì)跨過內(nèi)膜進入到間隙，從而形成跨線粒體內(nèi)膜的氫離子電化學(xué)梯度

21、，這個梯度的電化學(xué)勢驅(qū)動ATP的合成，這種假說可以解釋很多關(guān)鍵現(xiàn)象：氧化磷酸化作用的進行需要封閉的線粒體內(nèi)膜線粒體內(nèi)膜對氫離子、氫氧根離子、鉀離子、氯離子等離子都是不通透的破壞氫離子濃度梯度的形成都必然破壞氧化磷酸化作用的進行線粒體電子傳遞所形成的電子流能夠?qū)潆x子從線粒體內(nèi)膜逐出到線粒體間隙大量實驗表明膜表面不僅能滯留大量質(zhì)子，而且在一定條件下，質(zhì)子能沿膜表面迅速轉(zhuǎn)移，其速度超過在大量水相中的速度4、乳糖操縱子包括啟動子、操縱基因和三個結(jié)構(gòu)基因（分別編碼分解乳糖所需要的3種酶），乳糖操縱子的操縱基因lacO不編碼任何蛋白質(zhì)，它是另一位點上調(diào)節(jié)基因lacI所編碼的阻遏蛋白的結(jié)合部位，阻遏蛋白是

22、一種變構(gòu)蛋白，當(dāng)細胞中有乳糖或其他誘導(dǎo)物的情況下阻遏蛋白便和他們結(jié)合，結(jié)果使阻遏蛋白的構(gòu)象發(fā)生了改變而不能結(jié)合到lacO上，于是轉(zhuǎn)錄便得以進行，從而使吸收和分解乳糖的酶被誘導(dǎo)產(chǎn)生。如果細胞中沒有乳糖或其他誘導(dǎo)物則阻遏蛋白就結(jié)合在lacO上，阻止了結(jié)合在啟動子P上的RNA聚合酶向前移動，使轉(zhuǎn)錄不能進行5、（1）關(guān)鍵調(diào)控步驟：在糖酵解中：葡萄糖在己糖激酶作用下生成葡萄糖6磷酸果糖6磷酸在磷酸果糖激酶作用下生成果糖1，6二磷酸磷酸烯醇式丙酮酸在丙酮酸激酶作用下生成丙酮酸其中第步是主要的TCA循環(huán)中：草酰乙酸和乙酰輔酶A在檸檬酸合酶作用下縮合形成檸檬酸異檸檬酸在異檸檬酸脫氫酶的作用下形成酮戊二酸酮戊二

23、酸在酮戊二酸脫氫酶作用下生成琥珀酰輔酶A其中第步是主要的(2) 氧化還原步驟：甘油醛3磷酸在甘油醛3磷酸脫氫酶作用下氧化成1，3二磷酸甘油酸(NADH)異檸檬酸在異檸檬酸脫氫酶的作用下形成酮戊二酸(NADH)酮戊二酸在酮戊二酸脫氫酶作用下生成琥珀酰輔酶A(NADH)琥珀酸在琥珀酸脫氫酶作用下形成延胡索酸（FADH2）蘋果酸在蘋果酸脫氫酶作用下生成草酰乙酸（NADH）丙酮酸在丙酮酸脫氫酶作用下生成乙酰輔酶A（NADH）(3)ATP數(shù)目：底物水平的磷酸化作用：在糖酵解起始階段先消耗了2分子ATP用于底物的磷酸化，然后形成的1，3二磷酸甘油酸和磷酸烯醇式丙酮酸，分別可以形成3磷酸甘油酸和丙酮酸，并各

24、產(chǎn)生1分子ATP，這樣1分子葡萄糖糖酵解就在底物水平的磷酸化作用上凈形成了2分子ATP。在TCA循環(huán)中琥珀酰輔酶A轉(zhuǎn)變?yōu)殓晁嵝纬闪?分子GTP（相當(dāng)于ATP），1分子葡萄糖就生成了2個GTP氧化磷酸化作用：如上1分子葡萄套共產(chǎn)生10分子NADH和2分子FADH2，共生成ATP為2.5*10+1.5*2=28個1分子葡萄糖有氧氧化共產(chǎn)生ATP28+4=32個2005年一、 填空1、 1，4糖苷鍵：糖原磷酸化酶（a活、b）：只能催化1，4糖苷鍵磷酸解，發(fā)生在碳和氧之間，形成葡萄糖1磷酸，需要輔助因子：磷酸吡哆醛（PLP，氨基轉(zhuǎn)移作用中也是一個重要的輔助因子）糖原脫支酶：催化1，6糖苷鍵水解，產(chǎn)生

25、葡萄糖磷酸葡萄糖變位酶：需要少量葡萄糖1，6二磷酸的存在才能充分發(fā)揮活性UDP葡萄糖焦磷酸化酶：催化葡萄糖1磷酸及UTP生成UDP葡萄糖（UDPG），葡萄糖形成UDPG的重要生物學(xué)意義就在于它使葡萄糖變?yōu)楦顫姷幕罨问教窃厦福翰荒軓?開始合成，需要引物：生糖原蛋白（糖原素），它具有自動催化功能，可催化8個UDPG連續(xù)以1，4糖苷鍵連接，形成糖原分子的核心，在此基礎(chǔ)上糖原合酶在進行合成，糖原分子的延長及否取決于糖原合酶及生糖原蛋白的相互作用，糖原合酶一旦脫離生糖原蛋白，就不在進行合成糖原分支酶：從非還原末端約7個葡萄糖殘基（至少已經(jīng)有11個殘基了）處斷開1，4糖苷鍵，轉(zhuǎn)移到同一或其他糖原分子

26、靠內(nèi)部的某個葡萄糖殘基上，形成1，6糖苷鍵，糖原分支增加了糖原的可溶性，還增加了非還原末端的數(shù)目，從而大大提高了糖原的分解、合成效率2、細胞溶膠 果糖6磷酸形成果糖1，6二磷酸 線粒體 草酰乙酸及乙酰輔酶A縮合成檸檬酸 琥珀酰輔酶A轉(zhuǎn)化成琥珀酸生成GTP3、Vmax·S/(Km+S) 增大：Km的物理意義，Km是當(dāng)酶反應(yīng)速率達到最大反應(yīng)一半時的底物濃度，單位是mol/L。1/Km可以近似的表示酶對底物親和力的大小，大大、小小4、丙酮酸 酮戊二酸 5、帽子（3端有多聚腺苷酸尾巴） 6、丙氨酸 核內(nèi)不均一RNA ribozyme 聚丙烯酰胺凝膠電泳二、名詞解釋1、福林酚反應(yīng)：福林酚試劑定

27、量的及Cu+反應(yīng)，Cu+是由蛋白質(zhì)的易氧化成分還原Cu2+產(chǎn)生的2、無規(guī)則卷曲：或稱卷曲，它泛指那些不能被歸入明確的二級結(jié)構(gòu)的多肽區(qū)段3、鹽溶：低濃度時，中性鹽可以增加蛋白質(zhì)的溶解度，這種現(xiàn)象稱為鹽溶（鹽析：當(dāng)溶液離子強度增加到一定數(shù)值時，蛋白質(zhì)的溶解度開始下降，當(dāng)離子強度增加到足夠高時，蛋白質(zhì)可以從溶液中沉淀出來，這種現(xiàn)象稱為鹽析）、4、ZDNA：是DNA的一種構(gòu)象，是一種左手螺旋的、細長的5、比活力：每mg蛋白質(zhì)所含的酶活力單位數(shù)，即總活力U/總蛋白mg6、Cori循環(huán)：激烈運動時，糖酵解作用產(chǎn)生的NADH的速度超過氧化呼吸鏈再形成NAD+的能力，這時肌肉中酵解過程形成的丙酮酸由乳酸脫氫酶

28、轉(zhuǎn)變?yōu)槿樗崾筃AD+再生，乳酸擴散到血液并隨血液進入肝細胞，再通過糖異生作用轉(zhuǎn)變?yōu)槠咸烟牵只氐窖褐?，這個循環(huán)稱為可立氏循環(huán)：肌肉酵解產(chǎn)生丙酮酸變?yōu)槿樗?，同時再生NAD+，乳酸隨血液進入肝臟，糖異生形成葡萄糖，再進入血液的過程稱為可立氏循環(huán)7、丙氨酸葡萄糖循環(huán)：肌肉氨基轉(zhuǎn)移酶可以催化丙酮酸形成丙氨酸，后者隨血液進入肝細胞經(jīng)轉(zhuǎn)氨基作用產(chǎn)生丙酮酸，又可用于糖異生作用，生成的葡萄糖又回到肌肉，又降解為丙酮酸，此循環(huán)稱葡萄糖丙氨酸循環(huán)（起著把氨運入肝臟的作用）8、外顯子：真核生物的基因通常都是斷裂的，保留再成熟RNA中的編碼序列稱為外顯子（插入的非編碼序列稱為內(nèi)含子）9、rRNA：核糖體RNA，構(gòu)成

29、核糖體，是蛋白質(zhì)的裝配者10、終止子：（DNA）11、HIV：人類免疫缺損病毒，它是一類逆轉(zhuǎn)錄病毒，侵入人體引起人類免疫缺陷綜合癥，即艾滋病12、脂質(zhì)體：利用類脂經(jīng)超聲波、機械攪拌等處理形成雙脂層小囊泡，將DNA包裹再內(nèi)即為脂質(zhì)體（它及細胞膜融合使DNA進入細胞的方法為脂質(zhì)體法）13、乙醛酸循環(huán)：這個循環(huán)通過一些列反應(yīng)最終產(chǎn)生乙醛酸，再動物體內(nèi)不存在，只存在于植物和微生物中，主要內(nèi)容是通過乙醛酸途徑使乙酰輔酶A轉(zhuǎn)變?yōu)椴蒗Ｒ宜釓亩M入檸檬酸，其全部反應(yīng)可以看做是2個乙酰輔酶A分子合成1分子草酰乙酸14、反義鏈：15、拓?fù)洚悩?gòu)酶：引起拓?fù)洚悩?gòu)反應(yīng)的酶稱為拓?fù)洚悩?gòu)酶16、滯后鏈：DNA復(fù)制中，一條模

30、板鏈?zhǔn)?3走向的，在其上DNA以53方向合成，但是及復(fù)制叉移動的方向正好相反，所以隨著復(fù)制叉的移動，形成許多不連續(xù)的片段，最后連成一條完整的DNA鏈，該鏈稱為滯后鏈（DNA復(fù)制中，一條模板鏈?zhǔn)?5走向的，在其上DNA能以53方向連續(xù)合成，稱為前導(dǎo)鏈）17、一碳單位：具有一個碳原子的基團稱為一碳單位18、磷酸戊糖途徑：在細胞溶膠內(nèi)進行的從磷酸化六碳糖形成五碳糖并產(chǎn)生還原力（NADPH）的循環(huán)過程19、別構(gòu)酶：酶分子的非催化部位及某些化合物可逆的非共價結(jié)合后發(fā)生構(gòu)象的改變，進而改變酶活性狀態(tài)，稱為酶的別構(gòu)調(diào)節(jié)，具有這種調(diào)節(jié)作用的酶稱為別構(gòu)酶20、脂多糖：脂多糖是革蘭氏陰性細菌細胞壁的特有結(jié)構(gòu)成分，

31、構(gòu)成外膜外表面的主要物質(zhì)，并賦予這類細胞以親水表面三、簡答題1、（1）合成：酮體的合成主要是肝臟的功能，在肝臟線粒體中，決定乙酰輔酶A去向的是草酰乙酸，在草酰乙酸濃度十分低時，乙酰輔酶A進入TCA循環(huán)的量也隨之變少，從而有利于酮體的合成，同時肝臟中脂肪酸的氧化仍保持繼續(xù)。在基質(zhì)中先由乙酰輔酶A合成乙酰乙酸，之后乙酰乙酸可在D羥丁酸脫氫酶作用下生成D羥丁酸，也可自動脫羧生成丙酮。（2）分解及生理意義：在肝外組織中D羥丁酸被D羥丁酸脫氫酶催化生成乙酰乙酸，進而形成2分子乙酰輔酶A進行供能（3）增加及其影響：嚴(yán)重饑餓或未經(jīng)治療的糖尿病人體內(nèi)可產(chǎn)生大量的乙酰乙酸，其原因是饑餓狀態(tài)和胰島素過低都會耗盡體

32、內(nèi)糖的貯存。肝外組織不能自血液中獲取充分的葡萄糖，為了獲得能量，肝中的葡萄糖異生作用就會加速，肝和肌肉中的脂肪酸氧化也同樣加速，同時帶動蛋白質(zhì)的分解。脂肪酸氧化加速產(chǎn)生大量的乙酰輔酶A,糖異生作用使草酰乙酸供應(yīng)耗盡，而后者又是乙酰輔酶A進入TCA循環(huán)所必需的，在此種情況下乙酰輔酶A不能正常的進入檸檬酸循環(huán)，而轉(zhuǎn)向生成酮體的方向，造成：血液中出現(xiàn)大量丙酮，它是又毒的血液中出現(xiàn)乙酰乙酸和D羥丁酸，使血液PH降低，以至發(fā)生酸中毒以上血液或尿中酮體過高都可導(dǎo)致昏迷，甚至死亡2、（1）結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)：完整的線粒體內(nèi)膜NADHQ還原酶、輔酶Q、琥珀酸Q還原酶、細胞色素還原酶、細胞色素氧化酶等電子傳遞有關(guān)的酶AT

33、P合酶（2）假說：見以上2張卷子3、（1）前處理：分離純化某中蛋白質(zhì)，首先要把蛋白質(zhì)從原來的組織或細胞中以溶解的狀態(tài)釋放出來，并保持原來的天然狀態(tài)，不丟失生物活性，為此，動物材料應(yīng)先剔除結(jié)締組織和脂肪組織，種子材料應(yīng)先去殼去皮，油料種子最好先用低沸點的有機溶劑脫脂，然后根據(jù)情況不同，選用適當(dāng)?shù)姆椒▽⒔M織和細胞破碎。動物組織和細胞可用電動搗碎機等設(shè)備進行破碎，。植物組織和細胞一般需要用石英砂或玻璃粉和適當(dāng)?shù)奶崛∫阂黄鹧心サ姆椒ㄆ扑榛蛴美w維素酶處理。細菌細胞的破碎常用超聲波震蕩等方法。組織和細胞破碎以后，再選擇適當(dāng)?shù)木彌_液把所要的蛋白質(zhì)提取出來，細胞破碎等不溶物用離心或過濾的方法除去。（2）粗分級

34、分離：當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)提取液獲得后，選用一套釋放的方法，將所需蛋白質(zhì)及其他雜質(zhì)分離開。一般這一級分級分離用鹽析、等電點沉淀和有機溶劑分級分離法等，這些方法的優(yōu)點是簡便，處理量大。有些蛋白質(zhì)提取液大，又不適合用沉淀或鹽析法濃縮，則可采用超過濾、凝膠過濾等方法（3）細分級分離：也就是樣品的進一步純化。進一步純化一般使用層析法包括凝膠過濾，離子交換層析，吸附層析以及親和層析等。用于細分級分離的方法一般規(guī)模較小，但分辨率高（4）結(jié)晶：是蛋白質(zhì)分離純化的最后步驟，盡管結(jié)晶并不能保證蛋白質(zhì)一定是均一的，但只有某種蛋白質(zhì)再溶液中的數(shù)量占有優(yōu)勢時才能形成結(jié)晶，結(jié)晶過程本身也伴隨這一定程度的純化。4、（1）兩條途徑的發(fā)

35、生場所不同，脂肪酸合成發(fā)生于細胞溶膠，降解發(fā)生于線粒體（2）兩條途徑都有一中間體及載體連接，脂肪酸合成中載體為ACP，降解中為輔酶A（3）兩條途徑中有4步反應(yīng)從化學(xué)上看一條途徑的4步反應(yīng)是另一條途徑4步反應(yīng)的逆反應(yīng)，脂肪酸合成中是：縮合、還原、脫水、還原;脂肪酸降解中是：氧化、水合、氧化、裂解（4）兩條途徑都具有轉(zhuǎn)運機制將線粒體和細胞溶膠溝通起來，在脂肪酸合成中有三羧酸轉(zhuǎn)運機制，在脂肪酸降解中有肉堿載體系統(tǒng)（5）兩條途徑都以脂肪酸的逐次、輪番的變化為特色，在脂肪酸合成中，脂肪鏈獲取2碳單元而延伸，脂肪酸降解中則是使乙酰輔酶A形式的2碳單元離去，以實現(xiàn)脂肪鏈的縮短（6）脂肪酸合成時，是從分子甲基

36、端開始到羧基為止，而脂肪酸降解中則是相反的（7）羥酯基中間體在脂肪酸合成中是D型，在脂肪酸降解中是L型（8）脂肪酸合成由還原途徑構(gòu)成，需要有NADPH參及，脂肪酸降解則由氧化途徑構(gòu)成，需要有FAD和NAD+參及（9）兩條途徑，每一輪都可以延伸或除去2個碳原子單元（10）動物體中，脂肪酸合成用的酶全都設(shè)在單一多肽鏈上，此多肽鏈?zhǔn)侵舅岷厦傅囊徊糠郑舅峤到庵忻甘且院畏N形式聚合在一起還未弄清5、（1）運輸：多肽合成后每一需要運輸?shù)亩嚯亩己幸欢伟被嵝蛄?，稱為信號肽序列，引導(dǎo)多肽至不同的轉(zhuǎn)運系統(tǒng)。真核細胞中，當(dāng)某一多肽的N端剛開始合成不久，這種多肽的去向就已經(jīng)被決定。一部分核糖體以游離狀態(tài)停留停

37、留在胞漿中，它們只合成供裝配線粒體及葉綠體膜的蛋白質(zhì)，另一部分核糖體，受新合成的多肽N端上的信號肽控制進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相結(jié)合的核糖體主要合成溶酶體蛋白、分泌到細胞外的蛋白和構(gòu)成質(zhì)膜骨架的蛋白。結(jié)合在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體合成的多肽經(jīng)多肽移位后，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)小腔中被修飾，主要包括N端信號肽的切除、二硫鍵的形成、使線形多肽呈現(xiàn)一定的空間結(jié)構(gòu)和糖基化作用，通過短時間在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)加工后，分泌蛋白形成被膜包裹的小泡，轉(zhuǎn)運至高爾基體，在高爾基體對糖蛋白上的寡聚糖核做進以步修飾及調(diào)整，并將各類多肽分類運送到溶酶體、分泌粒和質(zhì)膜等目的地2004年一、 填空題1、GE HPLC snRNA PCR ( ) ( )

38、亮氨酸 5脫氧鳥苷 核磁共振 超氧化物歧化酶2、甘油3磷酸 蘋果酸天冬氨酸NADH的電子在甘油3磷酸脫氫酶作用下轉(zhuǎn)移到二羥丙酮磷酸形成甘油3磷酸，后者可以輕易的線粒體內(nèi)膜，在線粒體內(nèi)在甘油3磷酸脫氫酶作用下使FAD還原成FADH2，實現(xiàn)NADH的轉(zhuǎn)移NADH的電子由蘋果酸脫氫酶傳遞給草酰乙酸使后者變?yōu)樘O果酸，后者經(jīng)過蘋果酸酮戊二酸載體進入線粒體內(nèi)膜，被氧化成草酰乙酸，并生成NADH，草酰乙酸通過轉(zhuǎn)氨基作用轉(zhuǎn)變?yōu)樘於彼?，再通過谷氨酸天冬氨酸載體轉(zhuǎn)移到細胞溶膠，隨后轉(zhuǎn)氨基又變?yōu)椴蒗Ｒ宜?、40 4、磷酸果糖激酶 檸檬酸合酶 硫解酶二、判斷題1、所有蛋白質(zhì)的翻譯開始于甲硫氨酸的參及2、絲氨酸是一種

39、帶電荷的極性R基氨基酸3、基團轉(zhuǎn)移是一種主動運輸（動物體小腸和腎細胞中葡萄糖的運輸是伴隨著Na+一起進入細胞的，這種運輸稱為協(xié)同運輸）4、米氏常數(shù)可以表示酶對不同底物的親和性5、20種氨基酸基本都是L型的6、RNA在堿性條件下比DNA更容易被降解（RNA的磷酸酯鍵易被堿水解，DNA的磷酸酯鍵則不易被堿水解，DNA一般對堿穩(wěn)定;酸水解中，糖苷鍵比磷酸酯鍵更易水解，嘌呤對酸不穩(wěn)定）7、肼解法是目前測定氨基酸C端殘基最重要的方法（PITC法最初用于N末端分析，后來發(fā)展為Edman降解法，用于氨基酸序列的測定）8、糖原分解過程中斷裂1，6糖苷鍵的酶是糖原脫支酶9、尿素循環(huán)（urea cycle）的過程

40、，生成一分子尿素需消耗4個高能磷酸鍵，3個ATP水解為2個ADP和一個AMP線粒體中：尿素的第一個N原子獲?。篘H3和HCO3在線粒體的氨甲酰磷酸合成酶作用下消耗一分子ATP，生成氨甲酰磷酸（細胞溶膠中的氨甲酰磷酸合成酶由嘧啶生物合成的任務(wù)）氨甲酰磷酸在鳥氨酸轉(zhuǎn)氨甲酰酶的作用下消耗一分子ATP將氨甲?；D(zhuǎn)移到鳥氨酸上形成瓜氨酸細胞溶膠：尿素的第二個N原子獲?。汗习彼嵩诰辩晁岷铣擅傅淖饔孟录疤於彼岱磻?yīng)，消耗ATP成AMP，生成精氨琥珀酸精氨琥珀酸在精氨琥珀酸（裂解）酶作用下脫下延胡索酸生成精氨酸精氨酸在精氨酸酶的作用下水解生成尿素和鳥氨酸總結(jié)：循環(huán)中使用了4個高能磷酸鍵（3個ATP水解為2

41、個ADP和1個AMP），尿素中的C來自HCO3，N一個來自于氨，一個來自于天冬氨酸10、引起SARS的冠狀病毒是一種負(fù)鏈RNA病毒？三、選擇題1、谷氨酸（谷氨酸和氨基丁酸均是神經(jīng)遞質(zhì)，后者GABA）2、G+C的含量越高（G及C之間有3個氫鍵所以G+C多的DNA更穩(wěn)定，Tm越高，Tm可以作為衡量DNA均一性的標(biāo)準(zhǔn)，可以推算出DNA堿基的百分組成XG+C=(Tm69.3)*2.44）3、3（P/O比是生成ATP于消耗氧的關(guān)系，NADH為2.5 FADH2，一分子羥丁酸可生成2分子乙酰輔酶A，還產(chǎn)生了一分子NADH）4、線粒體 5、葡萄糖6磷酸酶（葡萄糖6磷酸酶存在于肝及腎，腦和肌肉中均無此酶，它將

42、葡萄糖6磷酸水解為葡萄糖，用于維持血糖水平）6、動物眼球突出、心搏加快、基礎(chǔ)代謝增高、消瘦、神經(jīng)系統(tǒng)興奮性提高、神經(jīng)過敏（甲狀腺激素總的表現(xiàn)是增強機體新陳代謝，引起耗氧量及產(chǎn)熱量的增加，并促進智力和機體發(fā)育） 7、 8、誘導(dǎo)表達 9、2 10、D：hnRNA為核內(nèi)不均一RNA，又稱類似DNA的RNA（DRNA），hnRNA轉(zhuǎn)變成mRNA的加工過程包括：（1）5端形成帽子結(jié)構(gòu)（2）在3端加上多聚腺苷酸尾巴（3）通過拼接除去內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄來的序列（4）鏈內(nèi)部核苷被甲基化。內(nèi)含子：斷裂基因中經(jīng)轉(zhuǎn)錄被拼接除去的序列稱為內(nèi)含子11、蚜腸霉素 12、 13、丙氨酸、酪氨酸 14、12.5 15、尿酸（鳥嘌呤、

43、腺嘌呤次黃嘌呤、黃嘌呤。次黃嘌呤黃嘌呤。黃嘌呤尿酸） 16、肝臟中缺少L古洛糖酸內(nèi)酯氧化酶四、名詞解釋1、蛋白聚體：2、酸值（價）：中和1g油脂中的游離脂肪酸所需的KOH的mg數(shù)（碘值：100g油脂鹵化時所能吸收的碘的克數(shù)。皂化值（價）：造化1g油脂所需的KOH的mg數(shù)）3、核酶：具有催化活性的RNA稱為核酶4、轉(zhuǎn)換數(shù)：當(dāng)酶被底物飽和時每秒每個酶分子轉(zhuǎn)換底物的分子數(shù)，這個常數(shù)叫做轉(zhuǎn)換數(shù)（TN）5、HDNA：一種分子內(nèi)折疊形成的三股螺旋的DNA，其中胞嘧啶發(fā)生了H+化6、Cori循環(huán)：見2005年名詞解釋7、崗崎片段：見2006年名詞解釋8、中心法則：即遺傳信息從DNA傳到RNA，再傳到蛋白質(zhì)，

44、一旦傳給蛋白質(zhì)就不再轉(zhuǎn)移9、化學(xué)滲透假說：見2006年簡答10、別構(gòu)酶：見2005年名詞解釋五、問答題1、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能之間具有高度的統(tǒng)一性和適應(yīng)性，二者密切相關(guān)。（1）血紅蛋白是具有四級結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，它共有4個亞基，每個亞基都含一個血紅素，血紅素是處在多肽鏈的包圍之中，血紅蛋白及氧結(jié)合就是通過血紅素中的鐵原子及氧進行可逆的結(jié)合來實現(xiàn)的。由于4個亞基間靠8個鹽鍵連接，使得亞基彼此靠近，從而維持其穩(wěn)定的構(gòu)象。但此種構(gòu)象的約束不利于血紅蛋白及氧的結(jié)合，故血紅蛋白及氧的結(jié)合能力比單個亞基還弱。當(dāng)一個亞基及氧結(jié)合后，引起亞基間鹽鍵的斷裂，血紅蛋白的四級結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化，結(jié)果導(dǎo)致其他亞基的氧結(jié)合點暴露

45、，增大了其他亞基及氧的親和力，促進了它們及氧的結(jié)合。隨著鹽鍵的全部斷裂，整個血紅蛋白變?yōu)檠鹾涎t蛋白，這是氧及血紅蛋白結(jié)合的協(xié)同效應(yīng)。由此可見蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能之間具有高度的統(tǒng)一性和適應(yīng)性，二者密切相關(guān)。（2）肌紅蛋白由一條多肽鏈和血紅素構(gòu)成，血紅素位于肌紅蛋白的疏水空穴內(nèi)，肌紅蛋白和氧的結(jié)合就是通過血紅素中的鐵原子及氧可逆的結(jié)合來實現(xiàn)的。這種可逆結(jié)合需要多肽鏈結(jié)構(gòu)的微環(huán)境提供幫助，再血紅蛋白中也是如此：固定血紅素基保護血紅素鐵免遭氧化為氧分子提供一個合適的結(jié)合部位。由此可見蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的密切關(guān)系2、（1）DNA聚合酶：切除引物（崗崎片段的RNA引物）和修復(fù)（2）DNA聚合酶：修復(fù)（3）D

46、NA聚合酶：復(fù)制（4）拓?fù)洚悩?gòu)酶：在DNA中引入或消除超螺旋（拓?fù)洚悩?gòu)酶：連續(xù)的引入負(fù)超螺旋，消除復(fù)制叉前進帶來的扭曲張力，促進雙鏈解開）（5）HU蛋白：促進雙鏈DNA彎曲（6）SSB：單鏈結(jié)合蛋白，保護單鏈，防止恢復(fù)雙鏈（7）Dna A蛋白：識別起始位點，形成起始復(fù)合物（8）Dna B蛋白：解開DNA雙鏈（9）Dna C蛋白：幫助Dna B結(jié)合于起點（10）引物合成酶（Dna G）：合成RNA引物3、見2005年簡答4、（1）底物專一性：酶對底物的專一性包括結(jié)構(gòu)專一性和立體異構(gòu)專一性，作用機制是誘導(dǎo)契合假說，即當(dāng)酶分子及底物分子接近時，酶蛋白受到底物分子的誘導(dǎo)，其構(gòu)象發(fā)生有利于底物結(jié)合的變化

47、，酶及底物再此基礎(chǔ)上互補契合進行反應(yīng)。（2）反應(yīng)高效率：使酶催化高效的因素主要有：鄰近效應(yīng)及定向效應(yīng)：鄰近效應(yīng)指酶及底物結(jié)合形成中間復(fù)合物以后，使底物和底物之間，酶的催化基團及底物之間結(jié)合于同一分子而使有效濃度得以極大升高，從而使反應(yīng)速度大大增加的一種效應(yīng)；定向效應(yīng)：指反應(yīng)物的反應(yīng)基團之間和酶的催化基團及底物的反應(yīng)基團之間的正確取位產(chǎn)生的效應(yīng)。酸堿催化：酸堿催化是通過瞬時的向反應(yīng)物提供質(zhì)子或從反應(yīng)物接受質(zhì)子以穩(wěn)定過渡態(tài)，加速反應(yīng)的一類催化機制共價催化：共價催化又稱親核催化或親電子催化，在催化時，親核催化劑或親電子催化劑能分別放出或汲取電子并作用于底物的缺電子中心或負(fù)電中心，迅速形成不穩(wěn)定的共價

48、中間復(fù)合物，降低反應(yīng)活化能，使反應(yīng)加速金屬離子催化：金屬離子主要通過3種途徑參及催化：a、通過結(jié)合底物為反應(yīng)定向b、通過可逆的調(diào)節(jié)金屬離子的氧化態(tài)調(diào)節(jié)氧化還原反應(yīng)c、通過靜電穩(wěn)定或屏蔽負(fù)電荷多元催化和協(xié)同效應(yīng)：酶催化反應(yīng)中，常常是幾個基元反應(yīng)配合在一起共同起作用，這種多元催化協(xié)同作用的結(jié)果，是使酶反應(yīng)加速的一個因素活性部位微環(huán)境：活性部位一般位于酶分子疏水環(huán)境的裂縫中，這種環(huán)境中底物分子及催化基團之間多用比在極性環(huán)境中強的多，大大有利于酶的催化作用。5、（1）原理：將不同來源的DNA放在試管里，經(jīng)熱變性后，慢慢冷卻，讓其復(fù)性。若這些DNA之間在某些區(qū)域有相同的序列 ，復(fù)性時，會形成雜交DNA分

49、子。（2）將DNA樣品經(jīng)限制性內(nèi)切酶降解后，用瓊脂糖凝膠電泳進行分離。將膠浸泡在堿溶液中使DNA變性，然后將變性DNA轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上，在80焙烤4到6小時，使DNA牢固的吸附在硝酸纖維素膜上，然后及放射性同位素標(biāo)記的變性DNA探針進行雜交，雜交須在較高的鹽濃度及適當(dāng)?shù)臏囟认逻M行數(shù)小時或十余小時，然后通過洗滌，除去未雜交上的標(biāo)記物，將硝酸纖維素膜烘干后進行放射自顯影6、人體內(nèi)脂肪酸是很難轉(zhuǎn)變?yōu)槠咸烟堑?。因為脂肪酸通過氧化生成乙酰輔酶A，在植物體內(nèi)可以通過乙醛酸循環(huán)轉(zhuǎn)變?yōu)槿人嵫h(huán)中的有機酸，如草酰乙酸，然后生成丙酮酸，糖異生形成葡萄糖，而在動物體內(nèi)，由于沒有乙醛酸循環(huán)，乙酰輔酶A一般都是經(jīng)

50、三羧酸循環(huán)氧化生成二氧化碳和水，生糖的機會很少2003年一、 填空題1、1.5 2.5 2、A位點 P位點 3、脲 4、苯丙氨酸（Phe） 酪氨酸（Tyr）5、天冬酰胺 絲氨酸 蘇氨酸 6、糖類（一類非抗體的蛋白質(zhì)或糖蛋白，它能專一的及細胞表面的糖類非共價結(jié)合，并具有凝集細胞和沉淀聚糖和復(fù)合糖的作用） 7、己糖激酶 磷酸果糖激酶 丙酮酸激酶 檸檬酸合酶 異檸檬酸脫氫酶 酮戊二酸脫氫酶 8、2nm 0.34nm 10 A、C、D、E、Z 9、2 25 32二、判斷題1、氨基酸及茚三酮反應(yīng)均生成顏色反應(yīng)，是鑒定氨基酸的特征反應(yīng)2、二硫鍵對于穩(wěn)定蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)具有重要的作用，二硫鍵的位置屬于三級結(jié)

51、構(gòu)范疇3、所有的酶蛋白都是球狀蛋白（X？）4、將某種氨基酸溶于水所得溶液PH為9，則該氨基酸的等電點大于95、限制性內(nèi)切酶是能識別特定核苷酸序列的核酸內(nèi)切酶6、維生素B12的分子結(jié)構(gòu)中含有鈷元素7、競爭性抑制使酶對底物的Km變大8、構(gòu)成生物膜的脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、糖類在膜兩側(cè)的分布都是不均勻的9、真核生物成熟的mRNA有帽子和尾巴結(jié)構(gòu)10、若DNA雙鏈之一股是pGpTpGpGpApC,則其互補鏈?zhǔn)莗CpApCpCpTpG11、在大腸桿菌中轉(zhuǎn)錄和翻譯幾乎是同時進行的12、脂雙層膜對一些小分子，如水分子以及各種離子是允許自由通過的（X）13、DNA復(fù)制時，崗崎片段的合成需要RNA引物14、操縱子模型是由

52、Monod和Jacob兩位科學(xué)家提出的15、Southern blot、Nothern blot、Western blot分別是DNA、RNA和蛋白質(zhì)進行印記轉(zhuǎn)移的技術(shù)四、名詞解釋1、等電點：氨基酸凈電荷為0時的PH稱為等電點，即PI2、雙螺旋結(jié)構(gòu)：3、核酶：具有催化活性的RNA稱為核酶4、Tm值：把加熱變性使DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)失去一半時的溫度稱為該DNA的熔點或熔解溫度，即Tm5、操縱子：指細菌基因表達核調(diào)控單位，它包括結(jié)構(gòu)基因、調(diào)節(jié)基因和由調(diào)節(jié)基因產(chǎn)物所識別的控制序列6、Pribnow box：大腸桿菌RNA合成時，起點上游約10處有6bp的保守序列TATAAT，稱為Pribnow 框，即

53、Pribnow box，又稱10序列7、排阻層析：（凝膠過濾層析）是根據(jù)分子大小進行分離的技術(shù)，不同大小的分子受到的排阻不同，最終按照分子大小從小到大的順序流出8、崗崎片段：見2006年名詞解釋9、協(xié)同效應(yīng)：10、級聯(lián)放大效應(yīng)：機體調(diào)節(jié)代謝過程中，少量的物質(zhì)，到最后卻引起了極強烈的效應(yīng)，反應(yīng)過程中各個信號放大了數(shù)百萬倍，這種作用稱為級聯(lián)放大效應(yīng)11、酵解途徑：無氧條件下，葡萄糖進行分解，形成2分子丙酮酸并提供能量，這一個過程為糖酵解作用，即酵解途徑12、電子傳遞鏈：電子從NADH到O2的傳遞所經(jīng)過的途徑形象的稱為電子傳遞鏈，或稱呼吸鏈13、脂質(zhì)體：見2005年名詞解釋14、第二信使：激素調(diào)節(jié)過

54、程中，cAMP起著信息的傳遞和放大作用，激素這樣作用方式稱為第二信使學(xué)說，cAMP即為第二信使15、端粒酶：是一種反轉(zhuǎn)錄酶，它以RNA為模板來合成DNA的端粒結(jié)構(gòu)五、問答題1、乳糖操縱子包括啟動子、操縱基因和三個結(jié)構(gòu)基因（分別編碼分解乳糖所需要的3種酶），乳糖操縱子的操縱基因lacO不編碼任何蛋白質(zhì)，它是另一位點上調(diào)節(jié)基因lacI所編碼的阻遏蛋白的結(jié)合部位，阻遏蛋白是一種變構(gòu)蛋白，當(dāng)細胞中有乳糖或其他誘導(dǎo)物的情況下阻遏蛋白便和他們結(jié)合，結(jié)果使阻遏蛋白的構(gòu)象發(fā)生了改變而不能結(jié)合到lacO上，于是轉(zhuǎn)錄便得以進行，從而使吸收和分解乳糖的酶被誘導(dǎo)產(chǎn)生。如果細胞中沒有乳糖或其他誘導(dǎo)物則阻遏蛋白就結(jié)合在l

55、acO上，阻止了結(jié)合在啟動子P上的RNA聚合酶向前移動，使轉(zhuǎn)錄不能進行2、（1）糖先在細胞溶膠中經(jīng)糖酵解途徑轉(zhuǎn)化為丙酮酸，隨后丙酮酸進入線粒體脫氫形成乙酰輔酶A，經(jīng)過三羧酸循環(huán)徹底氧生成二氧化碳和水。另外，糖酵解產(chǎn)生的丙酮酸還可在無氧條件下轉(zhuǎn)化為乳酸。（2）脂肪在體內(nèi)先轉(zhuǎn)變?yōu)橹舅?，然后活化稱脂酰輔酶A，進入線粒體進行氧化生成乙酰輔酶A，進入三羧酸循環(huán)（3）蛋白質(zhì)水解為氨基酸后經(jīng)過轉(zhuǎn)氨基、脫氨基作用，N經(jīng)尿素循環(huán)最后形成尿素排除體外，而碳骨架則以各種形式進入三羧酸循環(huán)（4）相互聯(lián)系：A、糖及蛋白質(zhì)：糖分解代謝過程中產(chǎn)生的丙酮酸經(jīng)TCA循環(huán)轉(zhuǎn)變?yōu)椴蒗Ｒ宜?、酮戊二酸等可用于合成各種氨基酸的碳鏈結(jié)構(gòu)，經(jīng)氨基化活轉(zhuǎn)氨基后即生成相應(yīng)的氨基酸，另外糖分解產(chǎn)生的能量也可供氨基酸合成蛋白質(zhì)用蛋白質(zhì)分解為氨基酸脫氨基后形成酮戊二酸、丙酮酸、草酰乙酸、琥珀酸可形成葡萄糖和糖原B、脂和蛋白質(zhì)：脂類分子中的甘油可以經(jīng)丙酮酸轉(zhuǎn)變?yōu)椴蒗Ｒ宜?、酮戊二酸進而變?yōu)榘被?。而脂肪酸氧化產(chǎn)生的乙酰輔