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文檔簡介

1、1.(2016江蘇卷.9)下列有關細胞工程的敘述,正確的是A.PEG是促細胞融合劑,可直接誘導植物細胞融合B.用原生質體制備人工種子,要防止細胞破裂C.骨髓瘤細胞經(jīng)免疫處理,可直接獲得單克隆抗體D.核移植克隆的動物,其線粒體DNA來自供卵母體【答案】D【考點定位】細胞融合,人工種子,單克隆抗體,核移植【名師點睛】此題是對細胞工程的考查,解答本題的關鍵在于理解動植物細胞融合的區(qū)別,表現(xiàn)在誘導因素和融合過程的區(qū)別;同時理解制備人工種子的過程,理解原生質體的應用范疇;對于單克隆抗體的制備過程要重視;弄清楚核移植的過程是正確D項的關鍵。2.(2016江蘇卷.11)印度沙漠貓是一種珍惜貓科動物,通過胚胎

2、工程技術,可以讓家貓代孕而繁育,主要步驟如圖所示。下列相關敘述正確的是對印度沙漠貓進行催情處理超數(shù)排卵收集精液產(chǎn)下印度沙漠貓幼仔早期胚胎培養(yǎng) 步驟甲步驟乙A. 步驟甲、乙分別是指精子獲能、胚胎分離B. 誘導超數(shù)排卵所注射的激素只能作用于特定細胞C. 受精卵發(fā)育成早期胚胎所需營養(yǎng)主要來源于營養(yǎng)液D. 步驟甲使用的培養(yǎng)液和早期胚胎培養(yǎng)液成分基本相同【答案】B【解析】步驟甲、乙分別指受精作用、胚胎移植,A錯誤;誘導超數(shù)排卵所注射的激素是促性腺激素,只能作用于性腺,B正確;受精卵發(fā)育成早期胚胎所需營養(yǎng)主要來自受精卵,C錯誤;受精過程使用的培養(yǎng)液是獲能溶液或專用的受精溶液,與早期胚胎培養(yǎng)液有區(qū)別,D錯誤

3、。【考點定位】體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植【名師點睛】此題是對胚胎工程的考查,解答本題的關鍵在于理解試管動物培養(yǎng)的過程,理解超數(shù)排卵的激素作用特點,理解早期胚胎培養(yǎng)的營養(yǎng)物質來源,區(qū)別幾種不同培養(yǎng)液的成分:動物細胞培養(yǎng)液、植物組織培養(yǎng)基成分、體外受精培養(yǎng)液、早期胚胎培養(yǎng)液,是解題的關鍵。3.(2015·江蘇卷.3)下列關于動物細胞工程和胚胎工程的敘述,正確的是( )A. 乳腺細胞比乳腺癌細胞更容易進行離體培養(yǎng)B. 細胞核移植主要在同種動物、同種組織的細胞之間進行C. 采用胚胎分割技術產(chǎn)生同卵多胚的數(shù)量是有限的D. 培養(yǎng)早期胚胎的培養(yǎng)液中含維生素、激素等多種能源物質【答案】C【考點

4、定位】動物細胞培養(yǎng)、核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎分割等【名師點睛】本題綜合考查了動物細胞工程和胚胎工程的相關知識,意在檢測學生對相關知識的理解和記憶能力。由于現(xiàn)代生物科技專題的知識都是學生在中學期間無法直接觀察到和直接操作實驗的知識,所以學生學習只能依靠自己想象的理解和識記相關的考點知識才能完成相應試題。4.(2015·廣東卷.25)圖9為培育轉基因山羊生產(chǎn)人-酪蛋白的流程圖下列敘述正確的是( )A. 過程所用的人-酪蛋白基因可從人cDNA文庫中獲得B. 過程可選用囊胚期或原腸胚期的胚胎進行移植C. 過程可使用胚胎分割技術擴大轉基因山羊群體D. 過程人-酪蛋白基因在細胞質內進行轉錄、翻

5、譯【答案】AC【解析】由圖可知,過程表示基因表達載體的構建;目的基因的獲得方法很多,從人C-DNA文庫中獲取就是其中之一,A正確;過程表示胚胎移植,山羊的胚胎移植應在囊胚期以前,B錯誤;胚胎分割可以得到多個遺傳性狀相同的個體,在過程中可以應用,C正確;真核生物的基因的表達的轉錄過程發(fā)生在細胞核,翻譯過程發(fā)生在細胞質,D錯誤。【考點定位】基因工程和胚胎工程?!久麕燑c睛】本題考查基因工程和胚胎工程,意在考查考生的實驗探究能力和獲取信息能力。5.( 2015·四川卷.2)精子內的頂體由溶酶體特化而來。精卵識別后,頂體膜與精子細胞膜融合,釋放溶酶體酶使卵子外層形成孔洞,以利于精卵融合形成受精

6、卵。下列敘述正確的是()A頂體內儲存的溶酶體酶是在精子的溶酶體中合成的B精子游向卵子所需的能量來自線粒體和細胞質基質C頂體膜和精子細胞膜融合體現(xiàn)生物膜的選擇透過性D受精卵中的遺傳物質一半來自父方另一半來自母方【答案】B【考點定位】本題主要是考查細胞的結構與功能,同時涉及精子的結構與功能、受精過程中遺傳物質的來源以及膜的結構特點?!久麕燑c睛】本題以受精作用的過程為知識背景,綜合考查了動物細胞中ATP的產(chǎn)生部位、生物膜的結構特點、遺傳物質的分配等多個知識點,巧妙地將必修與選修模塊的對應內容有機結合到一起,這應該是當今甚至今后高考命題的主要趨勢。6.(2015·天津卷.6)2015年2月3

7、日,英國議會下院通過一項歷史性法案,允許以醫(yī)學手段培育“三親嬰兒”。三親嬰兒的培育過程可選用如下技術路線。據(jù)圖分析,下列敘述錯誤的是( )A、該技術可避免母親的線粒體遺傳病基因傳遞給后代B、捐獻者攜帶的紅綠色盲基因不能遺傳給三親嬰兒C、三親嬰兒的染色體全部來自母親提供的細胞核D、三親嬰兒的培育還需要早期環(huán)胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術【答案】C【解析】受體母親提供細胞核,供體提供去核卵母細胞,這樣就可避免受體母親的線粒體遺傳物質(線粒體中的致病基因)傳遞給子代;A正確。紅綠色盲屬于核基因控制的遺傳病,而由圖示可知捐獻者提供的是去核的卵細胞,因此不會把其攜帶的紅綠色盲基因傳遞給三親嬰兒;B正確。由圖示可

8、知三親嬰兒的的染色體來自于母親和父親;C錯誤。由圖示可知三親嬰兒的獲得運用了動物細胞培養(yǎng)、核移植技術,體外受精形成早期胚胎需要進行早期胚胎培養(yǎng)等;D正確?!究键c定位】本題考查核移植技術、動物細胞培養(yǎng)、體外受精和早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植及細胞質遺傳和核基因遺傳等知識?!久麕燑c睛】考生需要了解細胞質基因的遺傳與細胞核基因的遺傳的不同點,然后再結合圖示做出具體判斷。圖示信息告訴同學們這三親分別是母親、捐獻者、父親,母親提供細胞核,捐獻者提供去核卵母細胞,父親提供精子??忌€需要知道染色體存在于細胞核中,因此結合圖示即可做出正確的推斷:三親嬰兒的染色體來自于母親和父親。由此可知本題很好的考查了考生的識記

9、能力、分析能力。7.(2015·北京卷.5)在應用農(nóng)桿菌侵染植物葉片獲得轉基因植株的常規(guī)實驗步驟中,不需要的是( )A.用攜帶目的基因的農(nóng)桿菌侵染植物細胞B.用選擇培養(yǎng)基篩法導入目的基因的細胞C.用聚乙二醇誘導轉基因細胞的原生物質融合D.用適當比例的生長素和細胞分裂素誘導愈傷組織生芽【答案】C【考點定位】基因工程操作程序和植物細胞工程【名師點睛】解決本題必須明確土壤農(nóng)桿菌轉化法培育轉基因植株的程序有:獲取目的基因 目的基因與Ti質粒結合形成重組質粒 將重組質粒導入土壤農(nóng)桿菌 用土壤農(nóng)桿菌感染植物細胞 檢測是否導入目的基因并鑒定是否成功表達 通過植物組織培養(yǎng)技術培養(yǎng) 獲得轉基因植株。8

10、.( 2015·重慶卷.6)下列有關人胰島素基因表達載體的敘述,正確的是()A表達載體中的胰島素基因可通過人肝細胞mRNA反轉錄獲得B表達載體的復制和胰島素基因的表達均啟動于復制原(起)點C借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細胞篩選出來D啟動子和終止密碼子均在胰島素基因的轉錄中起作用【答案】C【解析】人肝細胞中胰島素基因不表達,因而不存在胰島素mRNA;A錯誤。復制原點是基因表達載體復制的起點,而胰島素基因表達的起點是啟動子;B錯誤。借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細胞篩選出來;C正確。啟動子與RNA聚合酶結合啟動轉錄過程,終止密碼子是翻譯的終止信號;D錯誤。【考點定位

11、】本題主要是考查利用基因工程改造生物體性狀的操作要點?!久麕燑c睛】基因工程誤區(qū)警示:(1)一般情況下,用同一種限制酶切割質粒和含有目的基因的片段,但有時可用兩種限制酶分別切割質粒和目的基因,這樣可避免質粒和質粒之間、目的基因和目的基因之間的連接。(2)目的基因進入受體細胞內,并且在受體細胞內維持穩(wěn)定和表達的過程,稱為轉化。轉化的實質是目的基因整合到受體細胞染色體基因組中。(3)標記基因的作用篩選、檢測目的基因是否導入受體細胞,常見的有抗生素抗性基因、發(fā)光基因(表達產(chǎn)物為帶顏色的物質)等。(4)受體細胞常用植物受精卵或體細胞(經(jīng)組織培養(yǎng))、動物受精卵(一般不用體細胞)、微生物(大腸桿菌、酵母菌)

12、等。要合成糖蛋白、有生物活性的胰島素則必須用真核生物酵母菌(需內質網(wǎng)、高爾基體的加工、分泌);一般不用支原體,原因是它營寄生生活;一定不能用哺乳動物成熟的紅細胞,原因是它無細胞核,不能合成蛋白質。(5)基因表達載體中,啟動子(DNA片段)起始密碼子(RNA);終止子(DNA片段)終止密碼子(RNA)?;虮磉_載體的構建是最核心、最關鍵的一步,在體外進行。9.(2014·江蘇卷.23)下列關于基因工程技術的敘述,錯誤的是( )A. 切割質粒的限制性核酸內切酶均特異性地識別6 個核苷酸序列B. PCR 反應中溫度的周期性改變是為了 DNA 聚合酶催化不同的反應C. 載體質粒通常采用抗生素

13、合成基因作為篩選標記基因D. 抗蟲基因即使成功地插入到植物細胞染色體上也未必能正常表達【答案】ABC【考點定位】基因工程技術的相關知識?!久麕燑c睛】本題意在考查考生能理解所學知識的要點,把握知識間的內在聯(lián)系,形成知識的網(wǎng)絡結構的能力。10.(2014·重慶卷.2) 生物技術安全性和倫理問題是社會關注的熱點。下列敘述,錯誤的是( )A應嚴格選擇轉基因植物的目的基因,避免產(chǎn)生對人類有害的物質B當今社會的普遍觀點是禁止克隆人的實驗,但不反對治療性克隆C反對設計試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術選擇性設計嬰兒D生物武器是用微生物、毒素、干擾素及重組致病菌等來形成殺傷力【答案】D【解析】在轉基

14、因過程中,避免基因污染和對人類的影響,必須嚴格選擇目的基因,A正確;我國不反對治療性克隆,堅決反對生殖性克隆,B正確;反對設計試管嬰兒原因之一防止選擇性設計嬰兒,違背倫理道德,C正確;生物武器是指有意識的利用微生物、毒素、昆蟲侵襲敵人的軍隊、人口、農(nóng)作物或者牲畜等目標,以達到戰(zhàn)爭目的的一類武器,干擾素為淋巴因子,非生物武器,D錯誤?!究键c定位】生物技術安全性和倫理問題的相關知識?!久麕燑c睛】本題意在考查考生關注對科學、技術和社會發(fā)展有重大影響和意義的生物學新進展以及生物科學發(fā)展史上的重要事件的能力。11.(2014·江蘇卷.19) 杜泊羊以其生長速度快、肉質好等優(yōu)點,被稱為“鉆石級冶

15、肉用綿羊。 科研工作者通過胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下圖所示,相關敘述正確的是( )A. 為了獲得更多的卵母細胞,需用雌激素對雌性杜泊羊進行處理B. 從卵巢中采集的卵母細胞可直接與獲能的精子進行體外受精C. 為避免代孕綿羊對植入胚胎產(chǎn)生排斥反應,應注射免疫抑制劑D. 為了進一步擴大繁殖規(guī)模,可通過胚胎分割技術獲得同卵雙胎【答案】D【考點定位】胚胎工程?!久麕燑c睛】本題意在考查考生理論聯(lián)系實際,綜合運用所學知識解決自然界和社會生活中的一些生物學問題的能力。12.(2014·江蘇卷.2) 下列關于蛙胚胎發(fā)育過程的敘述,正確的是( )A. 通過細胞分裂不斷增加細胞數(shù)量,并在一定時期發(fā)生

16、細胞分化B. 胚胎發(fā)育過程中細胞不斷分裂,但不發(fā)生凋亡C. 隨著細胞分裂次數(shù)的增加,蛙胚的有機物總量不斷增加D. 發(fā)育過程中蛙胚從環(huán)境中獲得的氧氣和營養(yǎng)物質逐漸增加【答案】A【解析】胚胎發(fā)育過程中通過細胞分裂不斷增加其數(shù)量,囊胚期開始發(fā)生細胞分化;細胞凋亡是細胞正常的生命活動,胚胎發(fā)育過程中發(fā)生細胞凋亡;發(fā)育過程中,隨著分裂次數(shù)的增加,蛙胚從環(huán)境中獲得氧氣,但營養(yǎng)物質來自蛙胚,總量逐漸減少,種類逐漸增加?!究键c定位】胚胎發(fā)育?!久麕燑c睛】本題意在考查考生理解所學知識的要點,把握知識間的內在聯(lián)系,形成知識的網(wǎng)絡結構的能力。13.(2014·北京卷.5)在25實驗條件下可順利完成的是(

17、)A.光合色素的提取和分離 B.用斐林(本尼迪特)試劑鑒定還原糖C.大鼠神經(jīng)細胞的培養(yǎng) D.制備用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基【答案】A【解析】光合色素的提取和分離在適宜溫度都可以提取,溫度變化對其影響不大,故A正確。用斐林(本尼迪特)試劑鑒定還原糖要在水浴加熱(5065)完成,故B錯。大鼠神經(jīng)細胞的培養(yǎng)要在其適宜溫度38培養(yǎng)才能促進細胞分裂,故C錯。植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基要高溫滅菌,故D錯?!究键c定位】色素提取和分離、還原糖的鑒定、動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)基的制備的教材實驗?!久麕燑c睛】本題意在考查考生能獨立完成“生物知識內容表”所列的生物實驗,包括理解實驗目的、原理、方法和操作步驟,掌握相關

18、的操作技能,并能將這些實驗涉及的方法和技能進行綜合運用能力。14.(2014·重慶卷.4)題4圖是利用基因工程培育抗蟲植物的示意圖。以下相關敘述,正確的是( )A的構建需要限制性核酸內切酶和DNA聚合酶參與B侵染植物細胞后,重組Ti質粒整合到的染色體上C的染色體上若含抗蟲基因,則就表現(xiàn)出抗蟲性狀D只要表現(xiàn)出抗蟲性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異【答案】D【考點定位】基因工程?!久麕燑c睛】本題意在考查考生能運用所學知識與觀點,通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理,做出合理的判斷或得出正確的結論的能力。15.(2014·浙江卷.3)下列關于動物細胞培養(yǎng)的敘述,正

19、確的是( )A連續(xù)細胞系的細胞大多具有二倍體核型B某些癌細胞在合適的條件下能逆轉為正常細胞C由多個祖細胞培養(yǎng)成的細胞群為一個克隆D未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細胞系細胞具有相同的性狀【答案】B【試題解析】連續(xù)細胞系的細胞一般都經(jīng)歷了多次培養(yǎng),其二倍體核型發(fā)生了改變,A錯誤。細胞癌變是原癌基因和抑癌基因突變引起的;基因基因突變具有不定向的特點,如果癌細胞在合適的條件下發(fā)生基因突變,有可能使突變后的原癌基因或抑癌基因變成正常的基因,使細胞失去癌細胞的特點,B正確。一個克隆是指1個細胞經(jīng)培養(yǎng)形成的細胞群,多個祖細胞培養(yǎng)成的細胞群不是一個克隆,C錯誤。未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細胞系是由多個能無限增殖細胞增殖得到的,無限增

20、殖的細胞遺傳物質發(fā)生了改變,這種改變可能是不相同的,不一定具有相同的性狀,D錯誤。【考點定位】動物細胞培養(yǎng)及癌細胞?!久麕燑c睛】本題意在考查學生將理論與生物學事實聯(lián)系的能力。16.(2014·天津卷.4) 為達到相應的目的,必須通過分子檢測的是( )A攜帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選B產(chǎn)生抗人白細胞介素-8抗體的雜交瘤細胞的篩選C轉基因抗蟲棉植株抗蟲效果的鑒定D21三體綜合征的診斷【答案】B【考點定位】分子水平、個體水平上的鑒定方法?!久麕燑c睛】請同學們注意審題:“必須”。即只能用分子檢測的方法來達到目的。本題意在考查考生對知識的識記及理解應用能力。17.(2014·廣東卷.

21、25)利用基因工程技術生產(chǎn)羧酸酯酶(CarE)制劑的流程如圖14所示,下列敘述正確的是( )A、過程需使用逆轉錄酶B、過程需使用解旋酶和PCR獲取目的基因C、過程使用的感受態(tài)細胞可用NaCl溶液制備D、過程可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導入受體細胞【答案】AD【考點定位】基因工程?!久麕燑c睛】本題意在考查考生能理解所學知識的要點。18.(2016江蘇卷.33)(9分)下表是幾種限制酶識別序列及其切割位點,圖1、圖2中標注了相關限制酶的酶切位點,其中切割位點相同的酶不重復標注。請回答下列問題:(1)用圖中質粒和目的基因構建重組質粒,應選用_兩種限制酶切割,酶切后的載體和目的基因片段,通過

22、_酶作用后獲得重組質粒。為了擴增重組質粒,需將其轉入處于_態(tài)的大腸桿菌。(2)為了篩選出轉入了重組質粒的大腸桿菌,應在篩選平板培養(yǎng)基中添加_,平板上長出的菌落,常用PCR鑒定,所用的引物組成為圖2中_。(3)若BamH I酶切的DNA末端與Bcl I酶切的DNA末端連接,連接部位的6個堿基對序列為 ,對于該部位,這兩種酶 (填“都能”、“都不能”或“只有一種能”)切開。(4)若用Sau3A I切圖1質粒最多可能獲得 種大小不同的DNA片段?!敬鸢浮浚?)BclI和Hind 連接 感受 (2)四環(huán)素 引物甲和引物丙(3) 都不能 (4)7【解析】(1)選擇的限制酶應在目的基因兩端存在識別位點,但

23、BamH I可能使質粒中啟動子丟失,因此只能選BclI和Hind。酶切后的載體和目的基因片段,通過DNA連接酶酶作用后獲得重組質粒。為了擴增重組質粒,需將其轉入處于感受態(tài)的大腸桿菌。【考點定位】基因工程,限制酶,連接酶,重組質?!久麕燑c睛】此題是對基因工程的考查,解答本題的關鍵在于理解重組質粒中標記基因的作用,在插入目的基因時不能破壞標記基因,故選擇限制酶須注意;PCR擴增基因時,兩種引物結合的部位相反,延伸的方向相反;限制酶具有特異性,不同的限制酶識別不同的序列,判斷某種限制酶能否切割某片段,應根據(jù)該片段中是否含有限制酶的識別序列。19.(2016課標1卷.40)某一質粒載體如圖所示,外源D

24、NA插入到Ampr或Tetr中會導致相應的基因失活(Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,Tetr表示四環(huán)素抗性基因)。有人將此質粒載體用BamHI酶切后,與用BamHI酶切獲得的目的基因混合,加入DNA連接酶進行連接反應,用得到的混合物直接轉化大腸桿菌,結果大腸桿菌有的未被轉化,有的被轉化。被轉化的大腸桿菌有三種,分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質粒載體、含有插入了目的基因的重組質粒的大腸桿菌?;卮鹣铝袉栴}: (1)質粒載體作為基因工程的工具,應具備的基本條件有_(答出兩點即可)。而作為基因表達載體,除滿足上述基本條件外,還需具有啟動子和終止子。(2)如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選,在上述四種大

25、腸桿菌細胞中,未被轉化的和僅含有環(huán)狀目的基因的細胞是不能區(qū)分的,其原因是_;并且_和_的細胞也是不能區(qū)分的,其原因是_。在上述篩選的基礎上,若要篩選含有插入了目的基因的重組質粒的大腸桿菌的單菌落,還需使用含有是_的固體培養(yǎng)基。(3)基因工程中,某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體,其DNA復制所需的原料來自于_【答案】(1)能夠自我復制、具有標記基因、具有一個至多個限制酶切割位點(答出兩點即可)(2)二者均不含氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上都不能生長 含有質粒載體 含有插入了目的基因的重組質粒(或答含有重組質粒) 二者都含氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均能生長 四環(huán)素 (3)受體細胞【考點定位】

26、基因工程【名師點睛】本題以圖文結合的形式,綜合考查學生對基因工程技術的熟記和理解能力。解決此類問題的關鍵是,熟記并理解相關的基礎知識、形成知識網(wǎng)絡,從題圖中挖掘出隱含的信息,據(jù)此結合每個問題情境進行圖文轉換、實現(xiàn)對知識的整合和遷移。20.(2016新課標卷.40)圖(a)中的三個DNA片段上依次表示出了EcoR I、BamH I和Sau3A I三種限制性內切酶的識別序列與切割位點,圖(b)為某種表達載體示意圖(載體上的EcoR I、Sau3A I的切點是唯一的)。根據(jù)基因工程的有關知識,回答下列問題:(1)經(jīng)BamH I酶切割得到的目的基因可以與上述表達載體被_酶切后的產(chǎn)物連接,理由是_。(2

27、)若某人利用圖(b)所示的表達載體獲得了甲、乙、丙三種含有目的基因的重組子,如圖(c)所示。這三種重組子中,不能在宿主細胞中表達目的基因產(chǎn)物的有_,不能表達的原因是_。(3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有_和_,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是_?!敬鸢浮浚?)Sau3A 兩種梅切割后產(chǎn)生的片段具有相同的黏性末端(2)甲和丙 甲中目的基因插入在啟動子的上游,丙中目的基因插入在終止子的下游,兩者目的基因均不能轉錄(3)E·coliDNA連接酶 T4DNA連接酶 T4DNA連接酶【考點定位】基因工程的原理及技術【名師點睛】1確定限制酶的種類(1)根據(jù)目的基因兩

28、端的限制酶切點確定限制酶的種類應選擇切點位于目的基因兩端的限制酶,如圖甲可選擇Pst。不能選擇切點位于目的基因內部的限制酶,如圖甲不能選擇Sma。為避免目的基因和質粒的自身環(huán)化和隨意連接,也可使用不同的限制酶切割目的基因和質粒,如圖甲也可選擇用Pst和EcoR兩種限制酶(但要確保質粒上也有這兩種酶的切點)。(2)根據(jù)質粒的特點確定限制酶的種類所選限制酶要與切割目的基因的限制酶相一致,以確保具有相同的黏性末端。質粒作為載體必須具備標記基因等,所以所選擇的限制酶盡量不要破壞這些結構,如圖乙中限制酶Sma會破壞標記基因;如果所選酶的切點不止一個,則切割重組后可能丟失某些片段,若丟失的片段含復制起點區(qū)

29、,則切割重組后的片段進入受體細胞后不能自主復制。2基因表達載體中啟動子、終止子的來源(1)如果目的基因是從自然界中已有的物種中分離出來的,在構建基因表達載體時,不需要在質粒上目的基因的前后端接上特定的啟動子、終止子,因為目的基因中已含有啟動子、終止子。(2)如果目的基因是通過人工方法合成的,或通過cDNA文庫獲得的,則目的基因是不含啟動子和終止子的。若只將基因的編碼序列導入受體生物中,目的基因沒有啟動子、終止子,是無法轉錄的,因此,在構建基因表達載體時,需要在與質粒結合之前,在目的基因的前后端接上特定的啟動子、終止子。21.(2016天津卷.7) (12分)人血清白蛋白(HSA) 具有重要的醫(yī)

30、用價值,只能從血漿中制備。下圖是以基因工程技術獲取重組HSA(rHSA)的兩條途徑。(1)獲取HSA基因,首先需采集人的血液,提取_合成總cDNA,然后以cDNA為模板,采用PCR技術擴增HSA基因。下圖中箭頭表示一條引物結合模板的位置及擴增方向,請用箭頭在方框內標出標出另一條引物的位置及擴增方向。 (2)啟動子通常具有物種及組織特異性,構建在水稻胚乳細胞內特異表達rHSA的載體,需要選擇的啟動子是_(填寫字母,單選)。A.人血細胞啟動子 B.水稻胚乳細胞啟動子 C.大腸桿菌啟動子 D.農(nóng)桿菌啟動子 (3)利用農(nóng)桿菌轉化水稻受體細胞的過程中,需添加酚類物質,其目的是_。(4)人體合成的初始HS

31、A多肽,需要經(jīng)過膜系統(tǒng)加工形成正確的空間結構才能有活性。與途徑II相比,選擇途徑I獲取rHSA的優(yōu)勢是_。(5)為證明rHSA具有醫(yī)用價值,須確認rHSA與_的生物學功能一致。【答案】(12分)(1)總RNA (或mRNA)(2)B(3)吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細胞,有利于目的基因成功轉化(4)水稻是真核生物,具有膜系統(tǒng),能對初始rHSA多肽進行高效加工(5)HAS(2)根據(jù)啟動子通常具有物種及組織特異性,在水稻胚乳細胞內特異表達rHSA,需選擇水稻胚乳細胞啟動子。(3)農(nóng)桿菌轉化水稻受體細胞的過程中,酚類物質可以吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細胞,有利于目的基因的轉移。(4)水稻是真核生物,具有膜系統(tǒng)

32、,能對初始rHSA多肽進行高效加工,而大腸桿菌是原核生物,細胞中不具有膜結構的細胞器。(5)為證明rHSA具有醫(yī)用價值,須確認rHSA與天然的HSA生物學功能一致。【考點定位】本題考查基因工程相關內容?!久麕燑c睛】本題結合生產(chǎn)rHSA的實例考查目的基因的獲取、基因表達載體的構建、轉化方法、受體細胞的選擇、目的基因的檢測與鑒定。屬于容易題。解題關鍵是明確PCR技術的原理,明確兩條引物結合位置和合成子鏈的方向相反。22.(2016新課標2卷.40)生物選修3:現(xiàn)代生物科技專題(15分)下圖表示通過核移植等技術獲得某種克隆哺乳動物(二倍體)的流程?;卮鹣铝袉栴}:(1)圖中A表示正常細胞核,染色體數(shù)為

33、2n,則其性染色體的組成可為_。過程表示去除細胞核,該過程一般要在卵母細胞培養(yǎng)至適當時期再進行,去核時常采用_的方法。代表的過程是_。(2)經(jīng)過多次傳代后,供體細胞中_的穩(wěn)定性會降低,因此,選材時必須關注傳代次數(shù)。(3)若獲得的克隆動物與供體動物性狀不完全相同,從遺傳物質的角度分析其原因是_。(4)與克隆羊“多莉(利)”培養(yǎng)成功一樣,其他克隆動物的成功獲得也證明了_?!敬鸢浮浚?5分)(1)XX或XY 顯微操作(去核法) 胚胎移植(2)遺傳物質 (3)卵母細胞的細胞質中的遺傳物質會對克隆動物的形狀產(chǎn)生影響(4)已經(jīng)分化的動物體細胞核具有全能性。 (3)克隆動物的細胞核基因來自供體,因此大部分性

34、狀與供體相同,但細胞質基因來源于受體(或提供卵母細胞的個體),即卵母細胞的細胞質中的遺傳物質會對克隆動物的形狀產(chǎn)生影響,這就決定了克隆動物的性狀與供體不完全相同。(4)克隆動物的培育采用的是核移植技術,核移植技術的原理是:已經(jīng)分化的動物體細胞核具有全能性?!究键c定位】核移植技術、動物細胞培養(yǎng)技術、胚胎移植【名師點睛】本題以“獲得某種克隆哺乳動物(二倍體)的流程圖”為情境,綜合考查學生對核移植技術、動物細胞培養(yǎng)技術、胚胎移植的熟記和理解能力。解決此類問題的關鍵是,熟記并理解相關的基礎知識、形成知識網(wǎng)絡,“讀懂”流程圖中的每個箭頭的含義,據(jù)此結合每個問題情境進行圖文轉換、實現(xiàn)對知識的整合和遷移。2

35、3.(2016海南卷.31)基因工程又稱為DNA重組技術,回答相關問題:(1)在基因工程中,獲取目的基因主要有兩大途徑,即_和從_中分離。(2)利用某植物的成熟葉片為材料,同時構建cDNA文庫和基因組文庫,兩個文庫相比,cDNA文庫中含有的基因數(shù)目比基因組文庫中的少,其原因是_。(3)在基因表達載體中,啟動子是_聚合酶識別并結合的部位。若采用原核生物作為基因表達載體的受體細胞,最常用的原核生物是_。(4)將目的基因通過基因槍法導入植物細胞時,常用的攜帶目的基因的金屬顆粒有_和_顆粒?!敬鸢浮浚?5分)(1)人工合成 生物材料(每空2分,共4分,其他合理答案可酌情給分)(2)cDNA文庫中只含有

36、葉細胞已轉錄(或已表達)的基因,而基因組文庫中含有該植物的全部基因(5分,其他合理答案可酌情給分)(3)RNA(2分) 大腸桿菌(或答細菌)(2分)(4)金粉 鎢粉(每空1分,共2分)(3)在基因表達載體中,啟動子是RNA聚合酶識別并結合的部位。采用原核生物作為基因表達載體的受體細胞,由于易于培養(yǎng),最常選用大腸桿菌(或細菌)。(4)將目的基因通過基因槍法導入植物細胞時,常用的攜帶目的基因的金屬顆粒有金粉 和鎢粉顆粒?!究键c定位】基因工程【名師點睛】(1)目的基因的獲取有從基因文庫中獲取和人工合成兩類方法。(2)基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因。(3)目的基因導入植物細胞常用農(nóng)

37、桿菌轉化法;導入動物細胞常用顯微注射技術,導入微生物細胞常用感受態(tài)細胞法。24.(2016上海卷.九)回答下列有關遺傳信息傳遞與表達的問題。在圖27所示的質粒PZHZ11(總長為3.6kb,1kb=1000對堿基因)中,lacZ基因編碼-半乳糖苷酶,后者催化生成的化合物能將白色的大腸桿菌染成藍色。68.若先用限制酶BamHI切開pZHZ11,然后滅活BamHI酶,再加DNA連接酶進行連接,最后將連接物導入足夠數(shù)量的大腸桿菌細胞中,則含3.1kb質粒的細胞顏色為;含3.6kb質粒的細胞顏色為。69.若將兩端分別用限制酶BamHI和BglHI切開的單個目的基因片段置換pZHZ11中0.5kb的Ba

38、mHI酶切片段,形成4.9kb的重組質粒,則目的基因長度為kb。70.上述4.9kb的重組質粒有兩種形式,若用BamHI和EcoRI聯(lián)合酶切其中一種,只能獲得1.7kb和3.2kb兩種DNA片段;那么聯(lián)合酶切同等長度的另一種重組質粒,則可獲得kb和kb兩種DNA片段。71.若將人的染色體DNA片段先導入大腸桿菌細胞中克隆并鑒定目的基因,然后再將獲得的目的基因轉入植物細胞中表達,最后將產(chǎn)物的藥物蛋白注入小鼠體內觀察其生物功能是否發(fā)揮,那么上述過程屬于。A.人類基因工程 B.動物基因工程 C.植物基因工程 D.微生物基因工程【答案】68.白色白色和藍色/白色或藍色69.1.870.1.43.571

39、.C【考點定位】本題主要考查基因工程。【名師點睛】本題考查限制酶和DNA連接酶的使用,屬于較難題。解答本題的關鍵是明確DNA連接酶在進行連接時,插入的片段可能有正反兩種插入方式。本題68題第二空、70題容易發(fā)生錯誤,錯因在于未能考慮到上述情況。25.(2015·天津卷.8)纖維素分子不能進入酵母細胞,為了使酵母菌能夠利用環(huán)境中的纖維素為原料生產(chǎn)酒精,構建了含3種不同基因片段的重組質粒,下面是酵母菌轉化及纖維素酶在工程菌內合成與運輸?shù)氖疽鈭D。據(jù)圖回答:(1)本研究構建重組質粒時看選用四種限制酶,其識別序列如下圖,為防止酶切片段的自身環(huán)接,可選用的限制酶組合是_或_A. B. C. D.

40、(2) 設置菌株為對照,是為了驗證_不攜帶纖維素酶基因。(3) 纖維素酶基因的表達包括_和_過程,與菌株相比,在菌株、中參與纖維素酶合成和分泌的細胞器還有_。(4)在以纖維素為唯一C源的培養(yǎng)基上分別培養(yǎng)菌株、,菌株_不能存活,原因是_。(5)酵母菌生產(chǎn)酒精的細胞部位是_,產(chǎn)生酒精時細胞的呼吸方式是_,在利用纖維素生產(chǎn)酒精時,菌株更具有優(yōu)勢,因為導入的中重組質粒含有_。使分泌的纖維素酶固定于細胞壁,減少因培養(yǎng)液更新二造成的酶的流失,提高酶的利用率。【答案】(1)B (或C) C (或B) (2)質粒DNA和酵母菌基因組(3) 轉錄 翻譯 內質網(wǎng)、高爾基體(4) II 缺少信號肽編碼序列,合成的纖

41、維素酶不能分泌到胞外,細胞無可利用的碳源(5)細胞質基質 無氧呼吸 A基因片段【考點定位】本題考查基因工程中限制酶的相關知識,實驗設計的分析、基因表達、微生物的篩選、細胞呼吸等知識?!久麕燑c睛】解決本題首選要求考生需具備的知識儲備有:限制酶作用特點,實驗設計的原則,基因表達所包含的轉錄和翻譯過程,細胞器的功能,篩選特定微生物的依據(jù),細胞呼吸的相關知識;其次進行實驗分析要從單一變量入手,例如(2);然后還要結合圖中信息入手進行分析。即在一道大題中有些是考查知識的識記和應用,有些考查的是依據(jù)獲取的信息進行分析,做出合理的推斷,這就要求考生牢記課本基礎知識,平時加強信息題的訓練,提高獲取信息、利用信

42、息進行分析、推理判斷的能力,在高考中才能知道從何入手作答。26.(2015·江蘇卷.32)(9 分)胰島素 A、B 鏈分別表達法是生產(chǎn)胰島素的方法之一。 圖 1 是該方法所用的基因表達載體,圖2 表示利用大腸桿菌作為工程菌生產(chǎn)人胰島素的基本流程(融合蛋白A、B 分別表示-半乳糖苷酶與胰島素 A、B鏈融合的蛋白)。 請回答下列問題:(1)圖1 基因表達載體中沒有標注出來的基本結構是 。(2)圖1 中啟動子是 酶識別和結合的部位,有了它才能啟動目的基因的表達;氨芐青霉素抗性基因的作用是 。(3)構建基因表達載體時必需的工具酶有 。(4)茁-半乳糖苷酶與胰島素A 鏈或B 鏈融合表達,可將胰

43、島素肽鏈上蛋白酶的切割位點隱藏在內部,其意義在于 。(5)溴化氰能切斷肽鏈中甲硫氨酸羧基端的肽鍵,用溴化氰處理相應的融合蛋白能獲得完整的 A 鏈或 B 鏈,且-半乳糖苷酶被切成多個肽段,這是因為 。(6)根據(jù)圖2 中胰島素的結構,請推測每個胰島素分子中所含游離氨基的數(shù)量。 你的推測結果是 ,理由是 ?!敬鸢浮浚?)終止子 (2)RNA聚合 作為標記基因,將含有重組質粒的大腸桿菌篩選出來 (3)限制酶和DNA連接酶 (4)防止胰島素的A、B鏈被菌體內蛋白酶降解 (5)-半乳糖苷酶中含多個甲硫氨酸,而胰島素A、B鏈中不含甲硫氨酸 (6)至少2個 兩條肽鏈的一端各有一個游離的氨基,氨基酸的R基中可能

44、還含有游離的氨基DNA連接酶。 (4)將胰島素肽鏈上蛋白酶的切割位點隱藏在內部,可防止胰島素的A、B鏈被菌體內蛋白酶降解。(5)由于-半乳糖苷酶中含多個甲硫氨酸,而胰島素A、B鏈中不含甲硫氨酸,所以用溴化氰處理相應的融合蛋白,可獲得完整的A鏈或B鏈,-半乳糖苷酶被切成多個肽段。 (6)胰島素共有兩條肽鏈,每條肽鏈的一端各有一個游離的氨基,而氨基酸的R基中可能還含有游離的氨基,所以每個胰島素分子中至少含有2個游離的氨基?!究键c定位】基因工程【名師點睛】本題主要考查了基因工程的操作工具和基本步驟中相關知識,一方面需要學生識別圖解,另一方面需要學生們對相關知識的系統(tǒng)理解。由于基因工程的名詞概念多,易

45、混淆,所以建議在平時的學習中應以基因工程的基本步驟為主線,把各種涉及的方法及其大致過程以及應用的操作工具應做全面的總結、概括,以便在解題時能快速有效地提取相關知識。27.(2015·福建卷.33)【生物-現(xiàn)代生物科技專題】(10分)GDNF是一種神經(jīng)營養(yǎng)因子。對損傷的神經(jīng)細胞具有營養(yǎng)和保護作用。研究人員構建了含GDNF基因的表達載體(如圖1所示),并導入到大鼠神經(jīng)干細胞中,用于干細胞基因治療的研究。請回答:(1)在分離和培養(yǎng)大鼠神經(jīng)干細胞的過程中,使用胰蛋白酶的目的是 。(2)構建含GDNF基因的表達載體時,需選擇圖1中的 限制酶進行酶切。(3)經(jīng)酶切后的載體和GDNF基因進行連接,

46、連接產(chǎn)物經(jīng)篩選得到的載體主要有三種:單個載體自連、GDNF基因與載體正向連接、GDNF基因與載體反向連接(如圖1所示)。為鑒定這3種連接方式,選擇HpaI酶和BamHI酶對篩選的載體進行雙酶切,并對酶切后的DNA片段進行電泳分析,結果如圖2所示。圖中第 泳道顯示所鑒定的載體是正向連接的。(4)將正向連接的表達載體導入神經(jīng)干細胞后,為了檢測GDNF基因是否成功表達,可用相應的 與提取的蛋白質雜交。當培養(yǎng)的神經(jīng)干細胞達到一定的密度時,需進行 培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細胞,用于神經(jīng)干細胞移植治療實驗?!敬鸢浮浚?)使細胞分散開 (2)XhoI (3) (4)抗體 傳代【考點定位】基因工程和動物細胞培養(yǎng)【

47、名師點睛】選修內容的理論測試重點在相關生物工程的理論基礎和操作流程,一般題目要求難度不大,以記憶為主,記憶以操作流程為主干輔以理論基礎。解決本題的關鍵除了記住相應的基礎知識外,還要求學生能讀懂題圖中每部分的含義。28.(2015·海南卷.31)【生物選修3:現(xiàn)代生物科技專題】(15分)在體內,人胰島素基因表達可合成出一條稱為前胰島素原的肽鏈,此肽鏈在內質網(wǎng)中經(jīng)酶甲切割掉氨基端一段短肽后成為胰島素原,進入高爾基體的胰島素原經(jīng)酶乙切割去除中間片段C后,產(chǎn)生A、B兩條肽鏈,再經(jīng)酶丙作用生成由51個氨基酸殘基組成的胰島素。目前,利用基因工程技術可大量生產(chǎn)胰島素?;卮鹣铝袉栴}:(1)人體內合成

48、前胰島素原的細胞是,合成胰高血糖素的細胞是。(2)可根據(jù)胰島素原的氨基酸序列,設計并合成編碼胰島素原的序列,用該序列與質粒表達載體構建胰島素原基因重組表達載體。再經(jīng)過細菌轉化、篩選及鑒定,即可建立能穩(wěn)定合成的基因工程菌。(3)用胰島素原抗體檢測該工程菌的培養(yǎng)物時,培養(yǎng)液無抗原抗體反應,菌體有抗原抗體反應,則用該工程菌進行工業(yè)發(fā)酵時,應從中分離、純化胰島素原。胰島素原經(jīng)酶處理便可轉變?yōu)橐葝u素?!敬鸢浮浚?)胰島B細胞 胰島A細胞 (2)DNA(序列) 胰島素原 (3)菌體【解析】(1)由題意可知,前胰島素原在細胞內經(jīng)加工后成為胰島素,人體合成胰島素的細胞是胰島B細胞,所以合成前胰島素原的細胞也是

49、胰島B細胞;合成胰高血糖素的細胞是胰島A細胞。(2)根據(jù)胰島素原的氨基酸序列,可設計并合成編碼胰島素原的DNA序列(即目的基因);用該序列與質粒表達載體構建胰島素原基因重組表達載體,再經(jīng)過細菌轉化、篩選及鑒定,即可建立能穩(wěn)定合成人胰島素原的基因工程菌。(3)根據(jù)題意,培養(yǎng)液無抗原抗體反應,菌體有抗原抗體反應,所以用該工程菌進行工業(yè)發(fā)酵時,應從菌體中分離、純化胰島素原,經(jīng)酶處理便可轉變?yōu)橐葝u素?!究键c定位】蛋白質合成與加工、基因工程、發(fā)酵工程【名師點睛】本題通過簡單的題干信息考查胰島素合成與加工、基因工程、發(fā)酵工程等相關知識,旨在檢測學生對分泌蛋白合成與加工、基因工程、發(fā)酵工程等相關知識的理解能

50、力。分泌蛋白合成與加工、基因工程的操作步驟等知識熟練理解是解決本題的關鍵。29.( 2015·四川卷.9)(11分)將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因導入棉花細胞中,可獲得抗棉鈴蟲的轉基因棉,其過程如下圖所示(注:農(nóng)桿菌中Ti質拉上只有TDNA片段能轉移到植物細胞中)。(1)過程需用同種酶對含Bt基因的DNA和Ti質粒進行酶切。為將過程獲得的含重組質粒的農(nóng)桿菌篩選出來,應使用培養(yǎng)基。(2)過程中將棉花細胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng),旨在讓進入棉花細胞;除盡農(nóng)桿菌后,還須轉接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng),目的是。(3)若過程僅獲得大量的根,則應在培養(yǎng)基中增加以獲得芽;部分接種在無激素培養(yǎng)基上的芽

51、也能長根,原因是。(4)檢驗轉基因棉的抗蟲性狀,常用方法是。種植轉基因抗蟲棉能減少的使用,以減輕環(huán)境污染?!敬鸢浮浚?)限制性核酸內切選擇(2)TDNA篩選獲得TDNA片段的植物細胞(3)細胞分裂素濃度頂芽端合成的生長素向基部運輸,促進根的分化(4)投放棉鈴蟲農(nóng)藥【考點定位】本題主要是考查基因工程與細胞工程的原理與相關操作,涉及培養(yǎng)基的功能及使用等知識點?!久麕燑c睛】基因工程操作要點提示:(1)基因表達載體的構建是實施基因工程的第二步即,也是基因工程的核心。(2)對于植物來說,受體細胞可以是受精卵或體細胞,但常用體細胞。(3)對于動物來說,受體細胞一般是受精卵。受精卵作為受體細胞具有體積大、易

52、操作、經(jīng)培養(yǎng)可直接表達性狀的優(yōu)點。而動物體細胞的全能性受限。選擇培養(yǎng)基的運用主要依據(jù)的是質粒上的標記基因。30.( 2015·重慶卷.7)(10分)2014年埃博拉病在非洲蔓延,我國派出醫(yī)療隊首次在境外組建醫(yī)院,幫助治療埃博拉疫情。(1)研究表明,埃博拉病毒侵入機體后,通過靶向感染、破壞吞噬細胞等,使其不能暴露病毒的,以致感染信息不能呈遞給,阻止正常激活細胞免疫和體液免疫應答過程,導致機體對該病毒的免疫功能下降。因此,病毒在體內快速增殖、致病。(2)對志愿者接種埃博拉試驗疫苗后,機體免疫系統(tǒng)能產(chǎn)生相應抗體,還能產(chǎn)生的免疫細胞有。(3)用埃博拉病毒的某種蛋白免疫小鼠,通過技術獲得雜交瘤

53、細胞,用于生產(chǎn)單克隆抗體治療該病?!敬鸢浮浚?)特有抗原或抗原肽MHCT細胞特異性(2)記憶細胞、效應T細胞(3)細胞融合或細胞雜交【考點定位】本題主要是考查機體的細胞免疫與體液免疫,涉及細胞工程中單克隆抗體的制備等相關知識點?!久麕燑c睛】體液免疫與細胞免疫的判斷方法:(1)根據(jù)免疫的結果:如果免疫引起靶細胞裂解并釋放其中隱藏的抗原,則為細胞免疫;如果兩種成分結合,形成沉淀或細胞集團,則為體液免疫。(2)根據(jù)抗原的種類:如果抗原只進入體液,則為體液免疫;如果抗原進入組織細胞內,則為細胞免疫。31.( 2015·重慶卷.8)(20分)某課題組為解決本地種奶牛產(chǎn)奶量低的問題,引進了含高產(chǎn)奶基因但對本地適應性差的純種公牛。(1)擬進行如下雜交:A(具高產(chǎn)奶基因的純種)×B(具適宜本地生長基因的純種)C選擇B作為母本,原因之一是胚胎能在母體內正常。若C中的母牛表現(xiàn)為適宜本地生長,但產(chǎn)奶量并未提高,說明高產(chǎn)奶是性狀。為獲得產(chǎn)奶量高且適宜本地生長的母牛,根據(jù)現(xiàn)有類型,最佳雜交組合是,后代中出現(xiàn)

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