藥物雜質(zhì)檢查

1、第三章第三章 藥物的雜質(zhì)檢查藥物的雜質(zhì)檢查基本內(nèi)容基本內(nèi)容概述概述一般雜質(zhì)的檢查方法一般雜質(zhì)的檢查方法特殊雜質(zhì)的檢查方法特殊雜質(zhì)的檢查方法基本要求基本要求 一、一、掌握掌握一般雜質(zhì)檢查的原理、方法和計(jì)算。一般雜質(zhì)檢查的原理、方法和計(jì)算。 二、二、熟悉熟悉特殊雜質(zhì)檢查的方法和原理。特殊雜質(zhì)檢查的方法和原理。 三、了解熱重分析在藥物分析中的應(yīng)用。三、了解熱重分析在藥物分析中的應(yīng)用。一、藥物純度的概念與要求一、藥物純度的概念與要求第一節(jié)第一節(jié) 概述概述1.1.藥物純度的概念：藥物純度的概念： 藥物的純度是指藥物的純凈程度。藥物的純度是指藥物的純凈程度。 對(duì)藥物純度的認(rèn)識(shí)是在防治疾病的實(shí)踐中積累起來(lái)的

2、對(duì)藥物純度的認(rèn)識(shí)是在防治疾病的實(shí)踐中積累起來(lái)的如：阿司匹林中除了水楊酸外，還存如：阿司匹林中除了水楊酸外，還存在乙酰水楊酸酐等水楊酸的衍生物，在乙酰水楊酸酐等水楊酸的衍生物，具有具有致敏致敏作用。作用。2.2.對(duì)藥物純度的要求隨著臨床應(yīng)用的實(shí)踐對(duì)藥物純度的要求隨著臨床應(yīng)用的實(shí)踐和分析測(cè)試技術(shù)的發(fā)展，在不斷改進(jìn)，和分析測(cè)試技術(shù)的發(fā)展，在不斷改進(jìn)，使之更加完善使之更加完善。如：度冷?。ㄈ纾憾壤涠。ǎ?9481948年收入年收入BPBP，19701970年經(jīng)年經(jīng)GCGC分離鑒定出分離鑒定出兩種無(wú)效異構(gòu)體兩種無(wú)效異構(gòu)體（）和（和（），有時(shí)高達(dá)），有時(shí)高達(dá)20%20%30%30%。3.3.雜質(zhì)雜質(zhì)：藥物

3、中存在的無(wú)治療作用的、影響藥物：藥物中存在的無(wú)治療作用的、影響藥物穩(wěn)定性和療效、甚至對(duì)人體健康有害的物質(zhì)穩(wěn)定性和療效、甚至對(duì)人體健康有害的物質(zhì)。4.4.藥物純度的評(píng)價(jià)：藥物純度的評(píng)價(jià)： 應(yīng)把藥物的性狀、理化常數(shù)、雜質(zhì)檢查、含應(yīng)把藥物的性狀、理化常數(shù)、雜質(zhì)檢查、含量測(cè)定等作為一個(gè)有聯(lián)系的整體來(lái)評(píng)價(jià)藥物的量測(cè)定等作為一個(gè)有聯(lián)系的整體來(lái)評(píng)價(jià)藥物的純度。純度。5.5.與試劑的純度不同與試劑的純度不同，不能用化學(xué)試劑的規(guī)格代，不能用化學(xué)試劑的規(guī)格代替藥品標(biāo)準(zhǔn)，更不能將化學(xué)試劑當(dāng)作藥品直接用替藥品標(biāo)準(zhǔn)，更不能將化學(xué)試劑當(dāng)作藥品直接用于臨床。于臨床。如：試劑規(guī)格的如：試劑規(guī)格的BaSO4,BaSO4,允許存

4、在可溶性鋇鹽允許存在可溶性鋇鹽; ;藥品中不允許：可藥品中不允許：可導(dǎo)致醫(yī)療事故導(dǎo)致醫(yī)療事故1 1雜質(zhì)的雜質(zhì)的來(lái)源來(lái)源 生產(chǎn)過(guò)程生產(chǎn)過(guò)程中引入中引入 貯藏過(guò)程貯藏過(guò)程中產(chǎn)生中產(chǎn)生二、雜質(zhì)的來(lái)源二、雜質(zhì)的來(lái)源(C6H10O5)x +H2OH+(C6H10O5)y C12H22O112C6H12O6H2O, H+淀粉糊精麥芽糖葡萄糖（生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生）（生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生） 酸度：酸度：水解試劑帶入水解試劑帶入 乙醇中不溶物：乙醇中不溶物：水解中間體水解中間體( (糊精糊精) ) SO SO3 32-2-：產(chǎn)品用產(chǎn)品用H H2 2SOSO3 3漂白漂白 可溶性淀粉：可溶性淀粉：水解不完全水解不完全A +

5、 B C D + E原料原料中間產(chǎn)物中間產(chǎn)物副產(chǎn)物副產(chǎn)物產(chǎn)品產(chǎn)品試劑試劑溶劑溶劑催化劑催化劑金屬容器、管道、裝置金屬容器、管道、裝置異構(gòu)體異構(gòu)體多晶型多晶型制劑時(shí)的輔料制劑時(shí)的輔料貯藏過(guò)程中產(chǎn)生：貯藏過(guò)程中產(chǎn)生：外界條件影響：日光、空氣、溫度、濕度、外界條件影響：日光、空氣、溫度、濕度、 微生物等引起藥物產(chǎn)生微生物等引起藥物產(chǎn)生例例： 麻醉乙醚麻醉乙醚 O醛及有毒的醛及有毒的過(guò)氧化物過(guò)氧化物2 2雜質(zhì)的種類(lèi)雜質(zhì)的種類(lèi)（1 1）雜質(zhì)的來(lái)源分類(lèi)）雜質(zhì)的來(lái)源分類(lèi) 一般雜質(zhì)一般雜質(zhì) 特殊雜質(zhì)特殊雜質(zhì)一般雜質(zhì)一般雜質(zhì): :在自然界分布比較廣泛在自然界分布比較廣泛, ,在多種藥物的生在多種藥物的生產(chǎn)或貯存

6、過(guò)程中容易引入的雜質(zhì)。產(chǎn)或貯存過(guò)程中容易引入的雜質(zhì)。如：如：pHpH值、溶液澄清度、氯化物、硫酸鹽、重金屬等值、溶液澄清度、氯化物、硫酸鹽、重金屬等特殊雜質(zhì)特殊雜質(zhì)：在有關(guān)藥物的生產(chǎn)和貯存過(guò)程中，因：在有關(guān)藥物的生產(chǎn)和貯存過(guò)程中，因其生產(chǎn)工藝或藥物本身的性質(zhì)可能引入的雜質(zhì)。其生產(chǎn)工藝或藥物本身的性質(zhì)可能引入的雜質(zhì)。（2 2）雜質(zhì)的理化性質(zhì)分類(lèi)）雜質(zhì)的理化性質(zhì)分類(lèi) 無(wú)機(jī)雜質(zhì)無(wú)機(jī)雜質(zhì) 有機(jī)雜質(zhì)有機(jī)雜質(zhì) 殘留溶劑殘留溶劑（3 3）雜質(zhì)的毒性分類(lèi)）雜質(zhì)的毒性分類(lèi) 毒性雜質(zhì)毒性雜質(zhì) 普通雜質(zhì)普通雜質(zhì)三、雜質(zhì)的限量檢查三、雜質(zhì)的限量檢查在不對(duì)人體有害、不影響療效的情況下，允許藥物中在不對(duì)人體有害、不影響療

7、效的情況下，允許藥物中存在一定量的雜質(zhì)。存在一定量的雜質(zhì)。1.1.雜質(zhì)限量：雜質(zhì)限量：藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量。藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量。表示方法表示方法(g/g)(g/g)：或或ppmppm（百萬(wàn)分率（百萬(wàn)分率,10,10-6-6）2.2.限量檢查：限量檢查：藥物中雜質(zhì)的檢查，一般不要求測(cè)定其含量，而只是藥物中雜質(zhì)的檢查，一般不要求測(cè)定其含量，而只是檢查雜質(zhì)的量是否超過(guò)限量。檢查雜質(zhì)的量是否超過(guò)限量。雜質(zhì)限量檢查方法：對(duì)照法雜質(zhì)限量檢查方法：對(duì)照法合格合格不合格不合格 供試液供試液 供試液供試液 對(duì)照液對(duì)照液 相同條件相同條件 現(xiàn)象現(xiàn)象 現(xiàn)象現(xiàn)象 下反應(yīng)下反應(yīng) 比較比較 供試液供試液 對(duì)

8、照液對(duì)照液 對(duì)照液對(duì)照液 現(xiàn)象現(xiàn)象 現(xiàn)象現(xiàn)象 NaClNaCl對(duì)照液對(duì)照液葡萄糖葡萄糖 稀硝酸稀硝酸10ml 硝酸銀硝酸銀1ml 稀硝酸稀硝酸10ml 硝酸銀硝酸銀1ml對(duì)照液濁度對(duì)照液濁度 供試液濁度供試液濁度合格合格雜質(zhì)限量的計(jì)算：雜質(zhì)限量的計(jì)算：雜質(zhì)限量雜質(zhì)限量=雜質(zhì)最大允許量供試品量雜質(zhì)最大允許量供試品量100 =標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積 100 供試品量供試品量 即即 L = CV / S 100%式中：式中： L 雜質(zhì)的限度（雜質(zhì)的限度（%） C 對(duì)照液濃度對(duì)照液濃度 （ g/ml） V 對(duì)照液的加入體積（對(duì)照液的加入體積（ml) S 供試品的量供試

9、品的量(g) 注意注意: 單位統(tǒng)一單位統(tǒng)一例：例：對(duì)乙酰氨基酚中氯化物的檢查：對(duì)乙酰氨基酚中氯化物的檢查： 樣品樣品2.0g 2.0g 溶于溶于100ml100ml水中，取水中，取25ml25ml檢查檢查ClCl- -，與標(biāo)準(zhǔn)，與標(biāo)準(zhǔn)NaClNaCl溶液溶液(10g/ml) 5ml(10g/ml) 5ml對(duì)照液對(duì)照液相比，不得更深。相比，不得更深。 C= 10g/ml V=5.0ml S= 25 2.0 100=0.5g6105.010100%0.01%0.5L一氯化物一氯化物檢查法檢查法： 1. 1.原理：原理： 供試液：供試液：AgAg+Cl+ClAgClAgCl（白色混濁）（白色混濁）

10、對(duì)照液：標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液對(duì)照液：標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液 第二節(jié)第二節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法一般雜質(zhì)的檢查方法比濁比濁2.2.條件條件：硝酸酸性條件（稀硝酸硝酸酸性條件（稀硝酸10ml10ml）反應(yīng)試劑：硝酸銀試液反應(yīng)試劑：硝酸銀試液 1.0ml1.0ml雜質(zhì)對(duì)照：雜質(zhì)對(duì)照：NaCl(10NaCl(10g/ml)g/ml)靈敏度范圍：靈敏度范圍： 50-80 50-80 g/50mlg/50ml 討論：選擇稀硝酸反應(yīng)條件的意義。討論：選擇稀硝酸反應(yīng)條件的意義。3.3.討論討論u比濁方法：同置黑色背景下，從上至下觀察。比濁方法：同置黑色背景下，從上至下觀察。u氯化物適宜濃度：氯化物適宜濃度：50-80g/50

11、ml50-80g/50ml。 u硝酸酸性：作用。硝酸酸性：作用。u避光。避光。u供試液若不澄清，需經(jīng)濾過(guò)處理。供試液若不澄清，需經(jīng)濾過(guò)處理。u供試液若有色，需經(jīng)處理后方可檢查。供試液若有色，需經(jīng)處理后方可檢查。 供試品有色：供試品有色： （1 1）內(nèi)消色法內(nèi)消色法，按中國(guó)藥典附錄規(guī)定的方法處理。，按中國(guó)藥典附錄規(guī)定的方法處理。供試品供試品+ + AgNOAgNO3 3放置放置1010minmin過(guò)濾過(guò)濾澄清溶液澄清溶液+ +標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)NaClNaCl+ +水水對(duì)照溶液對(duì)照溶液供試品供試品+ + AgNOAgNO3 3+ +水水供試品溶液供試品溶液暗處放置暗處放置5 5minmin后比較后比較（2

12、 2）外消色法外消色法：如高錳酸鉀中氯化物的檢查，：如高錳酸鉀中氯化物的檢查， 可先加乙醇適量，使其還原褪色后再依法檢查?？上燃右掖歼m量，使其還原褪色后再依法檢查。二、硫酸鹽二、硫酸鹽檢查法檢查法 1. 1.原理：原理：供試液：供試液：SOSO2 2 BaBa2 2 BaSOBaSO（白色混濁）（白色混濁）對(duì)照液：標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液對(duì)照液：標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液2.2.方法方法mlml240稀鹽酸水供試品mlml240稀鹽酸水標(biāo)準(zhǔn)液后比較搖勻水10505%252mlmlBaCl比濁比濁3.3.討論討論u比濁方法：同置黑色背景下，從上至下觀察。比濁方法：同置黑色背景下，從上至下觀察。u硫酸鹽適宜比濁濃度：硫

13、酸鹽適宜比濁濃度：100-500g/50ml100-500g/50ml。u鹽酸酸性。鹽酸酸性。u供試液如不澄清，需濾過(guò)。供試液如不澄清，需濾過(guò)。u供試液若有色，可采用內(nèi)消色法處理。供試液若有色，可采用內(nèi)消色法處理。 三鐵鹽檢查法三鐵鹽檢查法 ( (一）硫氰酸鹽法一）硫氰酸鹽法 1.1.原理：原理：供試液：供試液：FeFe3 3 6SCN6SCNFe(SCN)Fe(SCN)6 6 3 3（紅色）（紅色）對(duì)照液：標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液對(duì)照液：標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液比色比色2.2.方法方法: :ml25水供試品ml25水標(biāo)準(zhǔn)液，搖勻比較水硫氰酸銨水mlmlml5035330mgml504過(guò)硫酸銨稀鹽酸3.3.討論討論u比色

14、方法：白色背景下，從側(cè)面觀察。比色方法：白色背景下，從側(cè)面觀察。u鹽酸酸性作用。鹽酸酸性作用。u過(guò)硫酸銨的作用。過(guò)硫酸銨的作用。uFeFe3 3的適宜比色范圍：的適宜比色范圍：1010- -50g/50ml50g/50ml。u色調(diào)不一致時(shí)或所呈硫氰酸鐵的顏色較淺不便比色調(diào)不一致時(shí)或所呈硫氰酸鐵的顏色較淺不便比較時(shí)：可分別移入分液漏斗中，加正丁醇或異戊醇較時(shí)：可分別移入分液漏斗中，加正丁醇或異戊醇提取，分別取醇層比色。提取，分別取醇層比色。 (二）巰基醋酸法（二）巰基醋酸法（BP ） 原理原理：巰基醋酸還原：巰基醋酸還原Fe3+為為Fe2+，在氨堿性試液中與，在氨堿性試液中與 Fe 2 +作用生

15、成紅色配位離子。作用生成紅色配位離子。 2Fe3+ + 2HSCH2COOH 2Fe2+ + SCH2COOH + 2H+ SCH2COOH Fe2+ + 2HSCH2COOH Fe(SCH2COOH)2 + 2H+ Fe(SCH2COOH)2 Fe(SCH2COOH)2 2- + 2H2O 2OH-四、重金屬檢查法四、重金屬檢查法 重金屬是指在實(shí)驗(yàn)條件下重金屬是指在實(shí)驗(yàn)條件下與硫代乙酰胺與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色或硫化鈉作用顯色的金屬雜質(zhì)，如銀、鉛、的金屬雜質(zhì)，如銀、鉛、汞、銅、鎘、錫、銻、鉍等，由于藥品生產(chǎn)汞、銅、鎘、錫、銻、鉍等，由于藥品生產(chǎn)過(guò)程中遇到鉛的機(jī)會(huì)比較多，鉛在體內(nèi)又易過(guò)程中

16、遇到鉛的機(jī)會(huì)比較多，鉛在體內(nèi)又易積蓄中毒，故檢查時(shí)以積蓄中毒，故檢查時(shí)以鉛鉛作為代表。作為代表。 第一法第一法( (硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法) ) 用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物 1.1.原理：原理： 供試液：供試液：CHCH3 3CSNHCSNH2 2 + H + H2 2O CHO CH3 3CONHCONH2 2 + H + H2 2S S H H2 2S + PbS + Pb2 2 PbS+ 2HPbS+ 2H（黃棕黑黃棕黑） 對(duì)照液：標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液對(duì)照液：標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液ml25規(guī)定方法供試品mlmlpH2525 . 3規(guī)定溶劑醋酸鹽緩沖液標(biāo)準(zhǔn)液后比較搖勻，硫代乙酰胺

17、 22ml5 . 3pH比色比色2.2.方法：方法：3.3.討論討論u 同置白色背景下，從上至下觀察。同置白色背景下，從上至下觀察。u pH3.5pH3.5醋酸鹽緩沖液。醋酸鹽緩沖液。u PbPb2 2適宜比色范圍：適宜比色范圍：10-20g/25ml10-20g/25ml。u 供試液有色時(shí)供試液有色時(shí), ,需預(yù)先處理。需預(yù)先處理。u 供試品有微量供試品有微量FeFe3+3+: :在弱酸性溶液中氧化硫化氫析出在弱酸性溶液中氧化硫化氫析出S S產(chǎn)生混濁影響比色，可加產(chǎn)生混濁影響比色，可加VcVc或鹽酸羥胺使或鹽酸羥胺使FeFe3+3+還原成還原成FeFe2+2+再檢查。再檢查。 第二法：熾灼后的

18、第二法：熾灼后的硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法 用于在水、稀酸、乙醇中難溶，或含芳環(huán)、雜環(huán)用于在水、稀酸、乙醇中難溶，或含芳環(huán)、雜環(huán) （能與重金屬離子形成配位化合物）的有機(jī)藥物（能與重金屬離子形成配位化合物）的有機(jī)藥物 1. 1.原理：原理：C-MC-M熾灼破壞后熾灼破壞后MnMn第一法檢查第一法檢查 2.2.方法：方法：500500600600熾灼熾灼 第三法：硫化鈉法第三法：硫化鈉法 用于難溶于稀酸但能溶解于堿性水溶液的藥物用于難溶于稀酸但能溶解于堿性水溶液的藥物 （磺胺類(lèi)、巴比妥類(lèi)）（磺胺類(lèi)、巴比妥類(lèi)） 供試液：供試液：PbPb2 2NaNa2 2S SPbSPbSNaNa（灰黑色）（灰黑色）

19、 對(duì)照液：標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液對(duì)照液：標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液 第四法第四法(微孔濾膜法微孔濾膜法)： 用于重金屬限量低（含用于重金屬限量低（含2-5g2-5g重金屬）的藥物。重金屬）的藥物。2010 2010 版版中國(guó)藥典中國(guó)藥典已不收載。已不收載。比色比色 五砷鹽檢查法五砷鹽檢查法 （一）古蔡氏法：古蔡氏法： 1.1.原理：原理：金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫，金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫，氫與藥物中微量砷鹽反應(yīng)，生成具揮發(fā)性的氫與藥物中微量砷鹽反應(yīng)，生成具揮發(fā)性的砷化氫氣體，遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃至棕色的砷化氫氣體，遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃至棕色的砷斑，與一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液在同樣條件下生砷斑，與一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液在同樣條件下生

20、成的砷斑比較，顏色不得更深。成的砷斑比較，顏色不得更深。 -3432333AsOAsHHOAsAs砷斑 2HgBr棕黃 Ag 吡啶 DDCAg-紅色膠態(tài) Zn+HCl古蔡氏法古蔡氏法:SbH3+HgBr2SbH2(HgBr)+HBr 銻斑銻斑供試品、供試品、HCl、Zn、KI、SnCl2Pb(Ac)2棉棉HgBr2試紙?jiān)嚰埞挪淌戏▋x器裝置圖古蔡氏法儀器裝置圖KIKI和酸性和酸性SnClSnCl2 2的作用：的作用： AsO43- + 2I- +2H+ AsO33- + I2 + H2O AsO43- + Sn2+ + 2H+ AsO33- + Sn4+ H2O I2 + Sn2+ 2I- +

21、Sn4+ 4I- + Zn2+ ZnI42-AsO43-AsO33-AsH3慢快 KI SnCl2將五價(jià)砷還原為三將五價(jià)砷還原為三價(jià)砷，價(jià)砷，加快反應(yīng)速度加快反應(yīng)速度53抑制銻化氫的生成抑制銻化氫的生成促進(jìn)促進(jìn)AsHAsH3 3的生成的生成形成形成Zn-Sn齊，去極化齊，去極化 Pb(AC)Pb(AC)2 2棉棉的作用：的作用： 消除鋅粒和供試品中可能含有的少量的消除鋅粒和供試品中可能含有的少量的硫化物硫化物的影響。的影響。 S S2-2- + 2H + 2H+ + H H2 2S S H H2 2S + HgBrS + HgBr2 2 2HBr + HgS 2HBr + HgS （汞斑）（汞

22、斑） H H2 2S + Pb(Ac)S + Pb(Ac)2 2 PbS + 2HAcPbS + 2HAc 2.2.供試品處理供試品處理（1 1）供試品為）供試品為S S2-2-,SO,SO3 32-2-, S, S2 2O O3 32-2-等等: : 因在酸中生成因在酸中生成H H2 2S,S, SO SO2 2, ,與與HgBrHgBr作用生成作用生成HgSHgS或或HgHg，干擾砷斑檢查。，干擾砷斑檢查。 用用硝酸氧化硝酸氧化成硫酸鹽可消除。成硫酸鹽可消除。（2 2）供試品為）供試品為FeFe3+3+ ，能消耗，能消耗KIKI，SnClSnCl2 2 ，可，可先加足量先加足量 SnClS

23、nCl2 2。（3 3）環(huán)狀環(huán)狀結(jié)構(gòu)有機(jī)藥物，先結(jié)構(gòu)有機(jī)藥物，先有機(jī)破壞有機(jī)破壞（4 4）含銻含銻藥物，改用藥物，改用白田道夫白田道夫（Betterdorff Betterdorff ）法）法 2As3+ + 3SnCl2 + 6HCl 2As+ 3SnCl4 + 6H+膠態(tài)、棕褐色膠態(tài)、棕褐色 （二）二乙基二硫代氨基甲酸銀法（二）二乙基二硫代氨基甲酸銀法 （silver diethyl dithio carbamate) （Ag-DDCAg-DDC法法） 1.1.原理：原理： 供試液：供試液：AsHAsH3 3+ 6Ag+ 6Ag（DDCDDC）AgAg （紅色膠態(tài)）（紅色膠態(tài)） 對(duì)照液：標(biāo)

24、準(zhǔn)砷溶液對(duì)照液：標(biāo)準(zhǔn)砷溶液 比色或測(cè)定AAg(DDC)Ag(DDC)的的 吡啶溶液吡啶溶液 儀器裝置儀器裝置 小結(jié)小結(jié) 六、溶液顏色檢查法六、溶液顏色檢查法 控制藥物中控制藥物中有色雜質(zhì)有色雜質(zhì)的含量的含量 1. 1. 目視比色法目視比色法5 5種色調(diào)種色調(diào)1010種色號(hào)種色號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液標(biāo)準(zhǔn)比色液標(biāo)準(zhǔn)貯備液標(biāo)準(zhǔn)貯備液比色原液比色原液K2Cr2O7CoCl2CuSO42. 分光光度法分光光度法 有色雜質(zhì)對(duì)光有吸收，通過(guò)測(cè)定吸收度可控制其限量有色雜質(zhì)對(duì)光有吸收，通過(guò)測(cè)定吸收度可控制其限量3. 色差計(jì)法色差計(jì)法 通過(guò)比較供試品、標(biāo)準(zhǔn)比色液與水之間的色差值通過(guò)比較供試品、標(biāo)準(zhǔn)比色液與水之間的色差值黃綠

25、、黃黃綠、黃橙黃橙黃,橙紅橙紅棕紅棕紅 七、易炭化物檢查法七、易炭化物檢查法 檢查藥物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量檢查藥物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有有機(jī)雜質(zhì)機(jī)雜質(zhì)。 這類(lèi)雜質(zhì)多數(shù)結(jié)構(gòu)未知，常采用加硫酸呈色后與對(duì)這類(lèi)雜質(zhì)多數(shù)結(jié)構(gòu)未知，常采用加硫酸呈色后與對(duì)照液比較的方法進(jìn)行檢查。照液比較的方法進(jìn)行檢查。八、溶液澄清度檢查法八、溶液澄清度檢查法( (檢查檢查不溶性雜質(zhì)不溶性雜質(zhì)) ) 與濁度標(biāo)準(zhǔn)液比較與濁度標(biāo)準(zhǔn)液比較 濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液：硫酸肼烏洛托品濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液：硫酸肼烏洛托品甲醛腙甲醛腙 （白色混濁）（白色混濁） 濁度標(biāo)準(zhǔn)原液濁度標(biāo)準(zhǔn)原液 濁度標(biāo)準(zhǔn)液：濁度標(biāo)準(zhǔn)液：5 5個(gè)級(jí)號(hào)個(gè)級(jí)

26、號(hào) 澄清澄清：系指供試品溶液的澄清度相當(dāng)于所用溶劑或：系指供試品溶液的澄清度相當(dāng)于所用溶劑或 未超過(guò)未超過(guò)0.50.5號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液H2OH2O九、熾灼殘?jiān)鼨z查法（控制非揮發(fā)性無(wú)機(jī)雜質(zhì)）九、熾灼殘?jiān)鼨z查法（控制非揮發(fā)性無(wú)機(jī)雜質(zhì)） 熾灼殘?jiān)簾胱茪堅(jiān)河袡C(jī)藥物經(jīng)炭化或經(jīng)加熱使揮發(fā)性無(wú)機(jī)物分解后，有機(jī)藥物經(jīng)炭化或經(jīng)加熱使揮發(fā)性無(wú)機(jī)物分解后，高溫?zé)胱?，所產(chǎn)生的非揮發(fā)性高溫?zé)胱?，所產(chǎn)生的非揮發(fā)性無(wú)機(jī)雜質(zhì)無(wú)機(jī)雜質(zhì)的硫酸鹽。的硫酸鹽。 加硫酸熾灼法：加硫酸熾灼法：700700800800; ; 如熾灼殘?jiān)枳魅鐭胱茪堅(jiān)枳髦亟饘贆z查重金屬檢查，則熾灼溫度應(yīng)控制在，則熾灼溫度應(yīng)控制在5005006

27、00600 恒重：供試品連續(xù)兩次熾灼或干燥后的重量差異在恒重：供試品連續(xù)兩次熾灼或干燥后的重量差異在0.3mg0.3mg以下以下除盡硫酸蒸氣濕潤(rùn)炭化供試品低溫放冷緩緩熾灼ml15 . 0SOH42恒重放冷灰化熾灼干燥熾灼800700800700十、干燥失重測(cè)定法十、干燥失重測(cè)定法檢查藥物中水分和其他揮發(fā)性物質(zhì)檢查藥物中水分和其他揮發(fā)性物質(zhì)干燥失重：藥品在規(guī)定條件下，經(jīng)干燥后所減失的量干燥失重：藥品在規(guī)定條件下，經(jīng)干燥后所減失的量。 1.1.常壓恒溫干燥法常壓恒溫干燥法 適用于受熱較穩(wěn)定的藥物適用于受熱較穩(wěn)定的藥物 溫度：溫度：105105 2.2.減壓干燥法減壓干燥法 適用于熔點(diǎn)低、受熱分解的

28、藥物適用于熔點(diǎn)低、受熱分解的藥物 3.3.干燥劑干燥法干燥劑干燥法 適用于受熱易分解或升華的藥物適用于受熱易分解或升華的藥物 干燥劑：干燥劑：硅膠、硫酸、五氧化二磷硅膠、硫酸、五氧化二磷 4. 4.熱分析法熱分析法 （在程序控制溫度下，測(cè)定物質(zhì)的物理、化學(xué)性質(zhì)與溫在程序控制溫度下，測(cè)定物質(zhì)的物理、化學(xué)性質(zhì)與溫度關(guān)系的一類(lèi)技術(shù)。）度關(guān)系的一類(lèi)技術(shù)。）熱重分析法（熱重分析法（TGATGA） 在程序升溫下，測(cè)量物質(zhì)的質(zhì)量與溫度的關(guān)系。在程序升溫下，測(cè)量物質(zhì)的質(zhì)量與溫度的關(guān)系。 特點(diǎn)：樣品用量少、靈敏、快速特點(diǎn)：樣品用量少、靈敏、快速 常用于貴重和易氧化藥物的干燥失重測(cè)定。常用于貴重和易氧化藥物的干燥

29、失重測(cè)定。草酸鈣草酸鈣(CaC(CaC2 2O O4 4HH2 2O)O)的熱重曲線的熱重曲線G1G2G310008006004002000WT1T2T3398838635478134226T()在溫度在溫度T1時(shí)時(shí) CaC2O4H2O CaC2O4+H2O在溫度在溫度T2時(shí)時(shí) CaC2O4 CaCO3+CO在溫度在溫度T3時(shí)時(shí) CaCO3 CaO+CO2 . .差熱分析法（差熱分析法（DTA)DTA) 是在程序升溫下，測(cè)量供試品和參比物之間的溫是在程序升溫下，測(cè)量供試品和參比物之間的溫度差與溫度關(guān)系的一種技術(shù)。度差與溫度關(guān)系的一種技術(shù)。 參比物是一種惰性物質(zhì)，在加熱過(guò)程中不發(fā)生相參比物是一種

30、惰性物質(zhì)，在加熱過(guò)程中不發(fā)生相變和化學(xué)變化。因此溫差變和化學(xué)變化。因此溫差( (T)T)只與被測(cè)物質(zhì)的量質(zhì)只與被測(cè)物質(zhì)的量質(zhì) 變化有關(guān)。變化有關(guān)。 T= 0 T= 0 被測(cè)物未發(fā)生吸熱或放熱反應(yīng)被測(cè)物未發(fā)生吸熱或放熱反應(yīng) T= - T= - 為吸熱峰為吸熱峰 ，峰頂向下，峰頂向下 T= + T= + 為放熱峰為放熱峰 ，峰頂向上，峰頂向上 測(cè)定藥物熔點(diǎn)測(cè)定藥物熔點(diǎn)應(yīng)用應(yīng)用 尖峰為物理變化尖峰為物理變化 藥物定性分析藥物定性分析 寬峰為化學(xué)變化寬峰為化學(xué)變化 估測(cè)藥物的純度估測(cè)藥物的純度鑒別鑒別 . .差示掃描量熱法差示掃描量熱法( (DSC) DSC) 是在程序升溫下，測(cè)量是在程序升溫下，測(cè)量

31、維持樣品和參比物的溫度相同維持樣品和參比物的溫度相同，系統(tǒng)所需輸給待測(cè)物質(zhì)和參比物的系統(tǒng)所需輸給待測(cè)物質(zhì)和參比物的能量差能量差隨溫度（或時(shí)間）隨溫度（或時(shí)間）變化的熱分析技術(shù)。變化的熱分析技術(shù)。 供試品吸熱：系統(tǒng)供能增加供試品吸熱：系統(tǒng)供能增加 供試品放熱：系統(tǒng)供能減少供試品放熱：系統(tǒng)供能減少應(yīng)用：鑒別、晶型鑒別、純度檢查、測(cè)定熔點(diǎn)或水分應(yīng)用：鑒別、晶型鑒別、純度檢查、測(cè)定熔點(diǎn)或水分不同純度苯甲酸的不同純度苯甲酸的DSCDSC曲線曲線溫度溫度97.2%98.6%標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)品十一、水分測(cè)定法十一、水分測(cè)定法 卡爾卡爾費(fèi)休法費(fèi)休法 原理：原理： I I2 2+ SO+ SO2 2 + + H H2

32、 2O O 2HI + SO 2HI + SO3 3 費(fèi)休氏液：費(fèi)休氏液：I I2 2、 SOSO2 2、無(wú)水甲醇、無(wú)水甲醇、無(wú)水吡啶無(wú)水吡啶 終點(diǎn)：費(fèi)休氏液：淡黃終點(diǎn)：費(fèi)休氏液：淡黃紅棕色紅棕色 永停法永停法 十二、有機(jī)溶劑殘留量測(cè)定法十二、有機(jī)溶劑殘留量測(cè)定法 主要檢查藥物在生產(chǎn)過(guò)程中引入的主要檢查藥物在生產(chǎn)過(guò)程中引入的有害的有機(jī)溶劑有害的有機(jī)溶劑 常采用常采用氣相色譜法氣相色譜法進(jìn)行檢查進(jìn)行檢查 直接進(jìn)樣法直接進(jìn)樣法 頂空進(jìn)樣法（適用于揮發(fā)性大的樣品測(cè)定）頂空進(jìn)樣法（適用于揮發(fā)性大的樣品測(cè)定） 第三節(jié)第三節(jié) 特殊雜質(zhì)檢查方法特殊雜質(zhì)檢查方法 特殊雜質(zhì)：在該藥物的生產(chǎn)和貯存過(guò)程中，根特殊雜

33、質(zhì)：在該藥物的生產(chǎn)和貯存過(guò)程中，根據(jù)藥物的性質(zhì)、生產(chǎn)方法和工藝條件，有可能據(jù)藥物的性質(zhì)、生產(chǎn)方法和工藝條件，有可能引入的特有雜質(zhì)。引入的特有雜質(zhì)。 方法：方法：利用藥物和雜質(zhì)在利用藥物和雜質(zhì)在物理物理和和化學(xué)化學(xué)性質(zhì)上的性質(zhì)上的差異差異進(jìn)行進(jìn)行一、物理性質(zhì)上差異：一、物理性質(zhì)上差異：臭味及揮發(fā)性的差異臭味及揮發(fā)性的差異顏色的差異顏色的差異溶解行為的差異溶解行為的差異旋光性質(zhì)的差異旋光性質(zhì)的差異二、化學(xué)性質(zhì)上差異：二、化學(xué)性質(zhì)上差異：酸、堿性質(zhì)的差異酸、堿性質(zhì)的差異氧化還原性的差異氧化還原性的差異雜質(zhì)與一定試劑產(chǎn)生沉淀雜質(zhì)與一定試劑產(chǎn)生沉淀雜質(zhì)與一定試劑產(chǎn)生顏色反應(yīng)雜質(zhì)與一定試劑產(chǎn)生顏色反應(yīng)雜質(zhì)

34、與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生氣體雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生氣體三、光譜分析法：三、光譜分析法： （一）紫外分光光度法（一）紫外分光光度法 在在藥物無(wú)吸收而雜質(zhì)有吸收藥物無(wú)吸收而雜質(zhì)有吸收的波長(zhǎng)測(cè)定吸收度，規(guī)定測(cè)得的吸的波長(zhǎng)測(cè)定吸收度，規(guī)定測(cè)得的吸 收度不得超過(guò)某一限值。收度不得超過(guò)某一限值。例如：例如：腎上腺酮腎上腺酮及及腎上腺素腎上腺素的紫外吸收曲線的紫外吸收曲線HOHOOCCH2NHCH3HOHOOHCHCH2NHCH3220 260 300 nmmax310nm利用藥物和雜質(zhì)對(duì)光選擇性吸收性質(zhì)的利用藥物和雜質(zhì)對(duì)光選擇性吸收性質(zhì)的差異差異 （二）原子吸收分光光度法（二）原子吸收分光光度法 用于用于金屬金

35、屬元素的測(cè)定。元素的測(cè)定。 試樣試樣預(yù)處理預(yù)處理原子化器原子化器待檢元素的原子蒸氣待檢元素的原子蒸氣 求出待檢元素含量求出待檢元素含量檢測(cè)器檢測(cè)器吸收特定吸收特定的光的光 （三）紅外分光光度法（三）紅外分光光度法 用于藥物中用于藥物中無(wú)效或低效晶型無(wú)效或低效晶型的測(cè)定。的測(cè)定。晶晶型結(jié)構(gòu)型結(jié)構(gòu)不同，化學(xué)鍵的不同，化學(xué)鍵的鍵長(zhǎng)、鍵角鍵長(zhǎng)、鍵角等發(fā)生等發(fā)生不同程度的變化，導(dǎo)致紅外吸收光譜中某不同程度的變化，導(dǎo)致紅外吸收光譜中某些特征峰的些特征峰的頻率、峰形、強(qiáng)度頻率、峰形、強(qiáng)度等出現(xiàn)顯著等出現(xiàn)顯著差異。差異。四、色譜分析法四、色譜分析法（一）（一）TLCTLC1.1.雜質(zhì)對(duì)照品法雜質(zhì)對(duì)照品法判斷結(jié)

36、果：供試品溶液如顯判斷結(jié)果：供試品溶液如顯與對(duì)照品相應(yīng)的與對(duì)照品相應(yīng)的雜質(zhì)斑點(diǎn)雜質(zhì)斑點(diǎn)，其顏色與對(duì)照品溶液主斑點(diǎn)比較，其顏色與對(duì)照品溶液主斑點(diǎn)比較，不得更深。，不得更深。需要對(duì)照品需要對(duì)照品特點(diǎn)：分離效能高，分離的同時(shí)進(jìn)行測(cè)定，應(yīng)用廣泛特點(diǎn)：分離效能高，分離的同時(shí)進(jìn)行測(cè)定，應(yīng)用廣泛 供試品供試品A對(duì)照品對(duì)照品BA？B前沿前沿原點(diǎn)原點(diǎn)l0l 2.2.高低濃度對(duì)比法高低濃度對(duì)比法當(dāng)雜質(zhì)結(jié)構(gòu)不能確定、或無(wú)雜質(zhì)對(duì)照品時(shí)，采用此法當(dāng)雜質(zhì)結(jié)構(gòu)不能確定、或無(wú)雜質(zhì)對(duì)照品時(shí)，采用此法要求：雜質(zhì)斑點(diǎn)的顏色與主成分斑點(diǎn)顏色相同或相近要求：雜質(zhì)斑點(diǎn)的顏色與主成分斑點(diǎn)顏色相同或相近供試液供試液稀釋稀釋對(duì)照液對(duì)照液點(diǎn)樣、

37、展開(kāi)、干燥、顯色點(diǎn)樣、展開(kāi)、干燥、顯色結(jié)果判斷：供試液所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)與對(duì)照液主斑點(diǎn)比較，結(jié)果判斷：供試液所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)與對(duì)照液主斑點(diǎn)比較，不得更深。不得更深。（高）（高）（低）（低） 3.13.1法與法與2 2法并用法并用適用：當(dāng)藥物中存在多個(gè)雜質(zhì)時(shí)，其中有的雜質(zhì)有適用：當(dāng)藥物中存在多個(gè)雜質(zhì)時(shí)，其中有的雜質(zhì)有對(duì)照品，有的雜質(zhì)沒(méi)有對(duì)照品或結(jié)構(gòu)未知對(duì)照品，有的雜質(zhì)沒(méi)有對(duì)照品或結(jié)構(gòu)未知4.4.對(duì)照藥物法對(duì)照藥物法適用：無(wú)合適雜質(zhì)對(duì)照品，或供試品雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色適用：無(wú)合適雜質(zhì)對(duì)照品，或供試品雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色與主成分斑點(diǎn)顏色有差異。與主成分斑點(diǎn)顏色有差異。可用與可用與供試品相同的藥物作為對(duì)照品，供試品相同的藥物作

38、為對(duì)照品，此藥物所含此藥物所含待檢雜質(zhì)需符合限量要求，且穩(wěn)定性好。待檢雜質(zhì)需符合限量要求，且穩(wěn)定性好。 （二）高效液相色譜法（二）高效液相色譜法( (HPLC)HPLC) 1.1.內(nèi)標(biāo)法加校正因子測(cè)定法內(nèi)標(biāo)法加校正因子測(cè)定法 需要雜質(zhì)對(duì)照品需要雜質(zhì)對(duì)照品校正因子的測(cè)定校正因子的測(cè)定雜質(zhì)對(duì)照品雜質(zhì)對(duì)照品+內(nèi)標(biāo)物質(zhì)內(nèi)標(biāo)物質(zhì)測(cè)定測(cè)定對(duì)對(duì)內(nèi)內(nèi)C/AC/AfC/ AAC內(nèi)內(nèi)雜雜f供試品供試品+內(nèi)標(biāo)物質(zhì)內(nèi)標(biāo)物質(zhì)測(cè)定測(cè)定雜雜內(nèi)內(nèi)C/AC/ Af2.外標(biāo)法測(cè)定外標(biāo)法測(cè)定需要雜質(zhì)對(duì)照品需要雜質(zhì)對(duì)照品，進(jìn)樣量能夠精確控制。，進(jìn)樣量能夠精確控制。供試液：供試液：A雜雜對(duì)照液：對(duì)照液：A對(duì)對(duì)對(duì)雜對(duì)雜CCAA對(duì)對(duì)雜雜A

39、CAC 3.加校正因子的主成分自身對(duì)照法加校正因子的主成分自身對(duì)照法 建立方法時(shí)，需要雜質(zhì)對(duì)照品建立方法時(shí)，需要雜質(zhì)對(duì)照品 雜質(zhì)檢查時(shí)，不需雜質(zhì)對(duì)照品雜質(zhì)檢查時(shí)，不需雜質(zhì)對(duì)照品雜質(zhì)對(duì)照品藥物對(duì)照品雜質(zhì)對(duì)照品藥物對(duì)照品 f 校正因子直接載入各品種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中校正因子直接載入各品種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中供試液供試液 對(duì)照液：供試液稀釋成與雜質(zhì)限度相當(dāng)?shù)娜芤簩?duì)照液：供試液稀釋成與雜質(zhì)限度相當(dāng)?shù)娜芤悍謩e分別測(cè)定測(cè)定對(duì)雜對(duì)雜AACCfC雜雜 4.4.不加校正因子主成分對(duì)照法不加校正因子主成分對(duì)照法 用于用于沒(méi)有雜質(zhì)對(duì)照品沒(méi)有雜質(zhì)對(duì)照品時(shí)雜質(zhì)的檢查時(shí)雜質(zhì)的檢查 對(duì)照液：供試品的對(duì)照液：供試品的稀釋液，稀釋液，進(jìn)樣測(cè)得進(jìn)

40、樣測(cè)得A A主主 供試液：進(jìn)樣測(cè)得雜質(zhì)供試液：進(jìn)樣測(cè)得雜質(zhì)A Ai i，雜質(zhì)，雜質(zhì)A Ai i A A主主即為合格即為合格. . 5. 5.峰面積歸一化法峰面積歸一化法適用于粗略測(cè)量雜質(zhì)含量適用于粗略測(cè)量雜質(zhì)含量L% = AL% = Ai i /(A /(Ai i + A + A主主）100% 100% 例如：利巴韋林中有關(guān)雜質(zhì)的檢查：例如：利巴韋林中有關(guān)雜質(zhì)的檢查：對(duì)照品液對(duì)照品液(5(5g/ml)g/ml)進(jìn)樣進(jìn)樣1010l,l,調(diào)靈敏度，使主峰調(diào)靈敏度，使主峰達(dá)滿(mǎn)量程的達(dá)滿(mǎn)量程的20%20%25%25%樣品液樣品液(0.4(0.4mg/ml)mg/ml)進(jìn)樣進(jìn)樣1010l, l, 雜質(zhì)雜質(zhì)A Ai i(A(Ai i+A+A主主）的）的1.0%1