第16章超敏反應及其檢測1

1、第第1616章章 超敏反應性疾病與免疫學檢驗超敏反應性疾病與免疫學檢驗（hypersensitivity and immunoassays） 教學內容教學內容前前 言言 第一節(jié)第一節(jié) 型超敏反應型超敏反應第二節(jié)第二節(jié) 型超敏反應型超敏反應 第三節(jié)第三節(jié) 型超敏反應型超敏反應第四節(jié)第四節(jié) 型超敏反應型超敏反應目的要求目的要求1 1掌握超敏反應的概念、特點、分型；各型的發(fā)生機制。掌握超敏反應的概念、特點、分型；各型的發(fā)生機制。2 2熟悉各型超敏反應的免疫學檢測及臨床常見疾病。熟悉各型超敏反應的免疫學檢測及臨床常見疾病。變態(tài)反應變態(tài)反應( (allergy) ) 超敏反應超敏反應( (hyperse

2、nsitivity) ) ： 是機體受抗原是機體受抗原持續(xù)刺激持續(xù)刺激或或再次再次受到相同抗受到相同抗原刺激后發(fā)生的一種原刺激后發(fā)生的一種異?；虿±硇援惓；虿±硇缘拿庖邞?。的免疫應答。變應原變應原(allergen )及及變應原性質變應原性質 類型類型：見下圖見下圖 I I型型( (速發(fā)型速發(fā)型) ) 最常見最常見 型型( (細胞毒型或細胞溶解型細胞毒型或細胞溶解型) ) 型型( (免疫復合物型或血管炎型免疫復合物型或血管炎型) ) 型型( (遲發(fā)型遲發(fā)型) )特點特點：特異性，記憶性，病理性，可轉移性。：特異性，記憶性，病理性，可轉移性。類型類型（1963年年Gell和和Coombs） I

3、 I型超敏反應型超敏反應速發(fā)型超敏反應IIII型超敏反應型超敏反應IIIIII型超敏反應型超敏反應型超敏反應型超敏反應細胞毒型超敏反應免疫復合物型超敏反應遲發(fā)型超敏反應第一節(jié)第一節(jié) I型超敏反應性疾病與免疫學檢驗型超敏反應性疾病與免疫學檢驗 特點：特點：主要由主要由IgE抗體介導，發(fā)作迅速、強烈，但消退亦快；抗體介導，發(fā)作迅速、強烈，但消退亦快；常引起機體生理功能紊亂，但無嚴重的組織細胞損傷；常引起機體生理功能紊亂，但無嚴重的組織細胞損傷；有明顯的個體差異，與機體的遺傳素質有關；有明顯的個體差異，與機體的遺傳素質有關；效應器官：平滑肌，粘膜，毛細血管，皮膚等。效應器官：平滑肌，粘膜，毛細血管，

4、皮膚等。 特應性素質個體：特應性素質個體： 過程：速發(fā)相和遲發(fā)相。過程：速發(fā)相和遲發(fā)相。一、發(fā)生機制一、發(fā)生機制( (一一) )致敏階段致敏階段1 1變應原變應原 如圖如圖 吸人性變應原吸人性變應原 食入性變應原食入性變應原 某些藥物某些藥物 動物免疫血清動物免疫血清 2 2特異性特異性IgE抗體的產生抗體的產生 3 3IgE與效應細胞表面與效應細胞表面FcR結合結合 效應細胞的致敏，機體致敏狀態(tài)形成。效應細胞的致敏，機體致敏狀態(tài)形成。 嗜酸粒細胞作用：雙重性。嗜酸粒細胞作用：雙重性。能夠誘導變態(tài)反應的抗能夠誘導變態(tài)反應的抗原性物質。原性物質。( (二二) )發(fā)敏階段發(fā)敏階段 1 1效應細胞活

5、化和脫顆粒效應細胞活化和脫顆粒 2 2活性介質釋放活性介質釋放 (1)(1)預存介質：預存介質： 組胺組胺(histamine) 激肽原酶激肽原酶(kininogenase) 嗜酸粒細胞趨化因子嗜酸粒細胞趨化因子(eosinophil chemotactic factor of anaphylaxis，ECF-A)( (三三) )效應階段效應階段 (2)(2)新合成的介質：新合成的介質： 前列腺素前列腺素D2(prostaglandin D2，PGD2)： 白三烯白三烯(1eukotriene，LT)： 血小板活化因子血小板活化因子( (platelet activating factor，

6、PAF)： 細胞因子：細胞因子：IL-4、 IL-13等，可促進等，可促進Th2細胞應答和細胞應答和B 細胞向細胞向IgE類型類型轉換。轉換。靜息肥大細胞靜息肥大細胞激活后激活后5 5分鐘分鐘激活后激活后6060分鐘分鐘型超敏反應的發(fā)生過程和發(fā)生機制型超敏反應的發(fā)生過程和發(fā)生機制二、臨床常見疾病二、臨床常見疾病( (一一) )過敏性休克過敏性休克 1 1藥物過敏性休克藥物過敏性休克 2 2血清過敏性休克血清過敏性休克 ( (二二) )呼吸道過敏反應呼吸道過敏反應 1 1支氣管哮喘支氣管哮喘 2 2過敏性鼻炎過敏性鼻炎 ( (三三) )消化道過敏反應消化道過敏反應( (四四) )皮膚過敏反應皮膚

7、過敏反應三、免疫學檢驗三、免疫學檢驗型超敏反應性疾病的診斷型超敏反應性疾病的診斷 詳盡的病史、體內試驗和體外試驗詳盡的病史、體內試驗和體外試驗。 （一）皮膚試驗（一）皮膚試驗( (skin test) ) 原理、部位、類型、方法及結果判定原理、部位、類型、方法及結果判定 (1) (1)皮內試驗皮內試驗( (intracutaneous test) ) 注意：注意： 設置陽性及陰性對照。設置陽性及陰性對照。 搶救準備，藥物及儀器。搶救準備，藥物及儀器。 假性現象。假性現象。相同超敏原不同稀釋度相同超敏原不同稀釋度 速發(fā)型速發(fā)型151530min30min內觀察內觀察 遲發(fā)型遲發(fā)型484872h7

8、2h內觀察內觀察0.010.010.03ml/0.03ml/針針4mm/針針方法結果皮內試驗皮內試驗l 比皮內試驗敏感性稍低，但假陽性較少；比皮內試驗敏感性稍低，但假陽性較少；l 皮試液濃度要比皮內試驗高皮試液濃度要比皮內試驗高1010100100倍。倍。將試驗抗原與對照液分別將試驗抗原與對照液分別滴于試驗部位的皮膚上滴于試驗部位的皮膚上用針尖透過液滴輕挑一下用針尖透過液滴輕挑一下以刺破皮膚而不出血為度以刺破皮膚而不出血為度1min后拭（吸）去試驗抗原液后拭（吸）去試驗抗原液點刺試驗點刺試驗速發(fā)型皮膚試驗的結果判定標準分級分級 皮皮 內內 試試 驗驗 點點 刺刺 試試 驗驗-無風團或小于陰性對

9、照無風團反應或小于陰性對照+風團35mm、紅暈20mm無風團,陰性對照紅暈20mm+風團69mm伴紅暈無風團，紅暈20mm+風團1015mm伴紅暈風團伴紅暈+風團15mm伴紅暈和偽足風團伴紅暈和偽足遲發(fā)型皮試結果判定標準反應程度反應程度 結果判定結果判定 -無反應或小于陰性對照 +僅有紅腫 +紅腫伴硬結 +紅腫、硬結、小皰 +大皰或/和潰瘍l第一次讀：第一次讀：4848小時打開斑試器小時打開斑試器, ,間隔間隔3030min待斑試器待斑試器 壓痕消失后判定結果。壓痕消失后判定結果。l第二次讀：第第二次讀：第3 3天或第天或第4 4天。天。l如懷疑光過敏，在斑貼試驗的基礎上給予紫外線照如懷疑光過

10、敏，在斑貼試驗的基礎上給予紫外線照 射，操作過程相似。射，操作過程相似。 斑貼試驗斑貼試驗斑貼試驗結果判定標準反應程度結果判定 無反應或小于陰性對照 +輕度紅腫、搔癢 +明顯紅腫、時有紅斑 +紅腫伴皮疹、水皰 +紅腫、水皰伴潰瘍（三）結果分析及注意事項（三）結果分析及注意事項 l假陽性出現的常見原因： 皮試液含有非特異性刺激物； 患者患有皮膚劃痕征； 操作手法較重； 注入量較大或濃度過高； 注入少量空氣等。l詢問病史詢問病史陽性對照l必備搶救藥品和設施必備搶救藥品和設施如何避免假性結果的出現如何避免假性結果的出現：適應證陰性對照皮試液濃度應用與評價應用與評價 l預防藥物或疫苗等過敏預防藥物或疫

11、苗等過敏 l防治防治型超敏反應性疾病型超敏反應性疾病 l結核菌素試驗結核菌素試驗l評估機體細胞免疫功能評估機體細胞免疫功能 l預防皮膚接觸過敏預防皮膚接觸過敏假陽性：假陽性：皮試液不純，含有非特異性刺激物；皮試液不純，含有非特異性刺激物；患者皮膚反應過強，如患者皮膚劃痕癥陽性；患者皮膚反應過強，如患者皮膚劃痕癥陽性；操作者手法較重，注射量較大或濃度過高、注入少量空操作者手法較重，注射量較大或濃度過高、注入少量空 氣等。氣等。假陰性：假陰性：皮試液抗原性低或失效；皮試液抗原性低或失效；患者皮膚反應性差如老年人，或疾病大發(fā)作后；患者皮膚反應性差如老年人，或疾病大發(fā)作后；皮試前使用過抗組胺藥物或免疫

12、抑制劑等。皮試前使用過抗組胺藥物或免疫抑制劑等。(2)(2)點刺試驗點刺試驗( (prick test) )：方法：方法：注意：注意： 設置陽性及陰性對照。設置陽性及陰性對照。 搶救準備。搶救準備。 假性現象。假性現象。 2 2應用與評價應用與評價 真實、客觀，與其他檢測相關性強。真實、客觀，與其他檢測相關性強。預防原則：尋找變應原，避免接觸。預防原則：尋找變應原，避免接觸。 (1)(1)尋找變應原：尋找變應原： (2) (2)預防藥物或疫苗過敏：預防藥物或疫苗過敏：( (二二) )粘膜激發(fā)試驗粘膜激發(fā)試驗( (provocation test) ) 是模擬自然途徑，使變應原進人體內，引起是模

13、擬自然途徑，使變應原進人體內，引起一一 次輕微的發(fā)作，用以確定變應原的試驗。次輕微的發(fā)作，用以確定變應原的試驗。 注意：注意：嚴格的對照；搶救措施。嚴格的對照；搶救措施。1 1支氣管激發(fā)試驗支氣管激發(fā)試驗 (1) (1)非特異性激發(fā)試驗：非特異性激發(fā)試驗： 常用指標：常用指標：第第1s1s用力呼氣量用力呼氣量( (FEV-1) )和肺活量；和肺活量； 1520min后復查后復查FEV-1； 陽性：陽性： 明顯自覺癥狀，如胸部緊迫感和喘息等；明顯自覺癥狀，如胸部緊迫感和喘息等； 肺部聞及哮鳴音；肺部聞及哮鳴音； FEV-1下降下降2020以上。以上。 目的：目的： (2) (2)變應原激發(fā)試驗：

14、變應原激發(fā)試驗： (3) (3)應用評價：特異性高，與患者的病史、癥狀和應用評價：特異性高，與患者的病史、癥狀和 過敏原吸附試驗的相關性較強。過敏原吸附試驗的相關性較強。 2其他激發(fā)試驗其他激發(fā)試驗 (1)鼻黏膜激發(fā)試驗：鼻黏膜激發(fā)試驗： (2)食物和藥物激發(fā)試驗：食物和藥物激發(fā)試驗： (3)結膜激發(fā)試驗：結膜激發(fā)試驗： ( (三三) )血清血清IgEIgE的檢測的檢測1 1血清總血清總IgEIgE的測定的測定 (1)ELISA：雙抗體夾心法。：雙抗體夾心法。 (2)放射免疫吸附試驗放射免疫吸附試驗(radioimmunosorbent test，RIST)； (3)化學發(fā)光法：化學發(fā)光法：

15、參考值參考值：成人血清：成人血清IgE水平在水平在20200IUml (1IU=24ng)。意義：疾病。意義：疾病。注意：注意：總總IgE高不一定是超敏反應；高不一定是超敏反應； 而過敏者總而過敏者總IgE也不一定升高。也不一定升高。 2 2特異性特異性IgEIgE測定測定 (specific IgE，sIgE) (1)放射性變應原吸附試驗放射性變應原吸附試驗(radioallergosorbent test， RAST)： 1967年由年由Wide建立建立 原理：固相載體原理：固相載體-變應原變應原-sIgE-125I標記的抗人標記的抗人IgE (2)ELISA (3)CAP變應原檢測系統變

16、應原檢測系統(CAP system)： 瑞典瑞典Pharmacia公司推出公司推出 原理：熒光固相免疫檢測系統。其載體為原理：熒光固相免疫檢測系統。其載體為CAP。 單價變應原單價變應原CAP， 多價變應原多價變應原CAP。（4）免疫芯片）免疫芯片意義：專一性檢測變應原。意義：專一性檢測變應原。 (5)吸入物變應原過篩試驗吸入物變應原過篩試驗(Phadiatop)：原理：原理： Sample CAP，變應原吸附，將空氣中，變應原吸附，將空氣中95 以上的氣傳變應原吸附到以上的氣傳變應原吸附到1個個CAP上，患者上，患者 血清中只要有針對這些變應原其中之一的血清中只要有針對這些變應原其中之一的

17、sIgE，即可呈陽性反應。，即可呈陽性反應。用途：過篩試驗。用途：過篩試驗。 ( (四四) )嗜酸粒細胞陽離子蛋白測定嗜酸粒細胞陽離子蛋白測定 (eosinophil cationic protein，ECP) 作用：作用： 標本：肺泡灌洗液和標本：肺泡灌洗液和空腹血清空腹血清ECP 測定方法：測定方法：CAP system雙抗體夾心法。雙抗體夾心法。 ELISA ( (五五) )嗜酸粒細胞涂片檢查嗜酸粒細胞涂片檢查 標本：分泌物，排泄物。標本：分泌物，排泄物。 ( (六六) )嗜堿粒細胞脫顆粒試驗嗜堿粒細胞脫顆粒試驗原理：原理： 方法：方法：外周血分離嗜堿粒細胞外周血分離嗜堿粒細胞+變應原變

18、應原 染色染色判定：與對照比較，嗜堿粒細胞數減少判定：與對照比較，嗜堿粒細胞數減少 30以上時為陽以上時為陽 性。性。 評價；與評價；與RAST和皮膚試驗的符合率較高，可用于和皮膚試驗的符合率較高，可用于 尋找過敏原及判斷脫敏治療的療效。尋找過敏原及判斷脫敏治療的療效。第二節(jié)第二節(jié) 型超敏反應型超敏反應 特點：特點：抗體抗體(主要為主要為IgG或或IgM類類)，補體、吞噬細胞和，補體、吞噬細胞和 NK細胞，導致靶細胞損傷或破壞。細胞，導致靶細胞損傷或破壞。 細胞溶解型或細胞毒性超敏反應。細胞溶解型或細胞毒性超敏反應。一、發(fā)生機制一、發(fā)生機制 (一一)抗原刺激抗原刺激 1細胞膜固有抗原細胞膜固有抗原 血細胞表面同種異型抗原血細胞表面同種異