清潔驗(yàn)證相關(guān)知識(shí)

1、清潔驗(yàn)證相關(guān)知識(shí)1 .清洗操作規(guī)程的要點(diǎn)1.1. 拆卸應(yīng)在設(shè)備的清潔規(guī)程中規(guī)定一臺(tái)設(shè)備需要拆卸的程度，大多數(shù)設(shè)備，如大容量注射劑的灌裝機(jī)、固體制劑一步制粒機(jī)等在清潔前需要預(yù)先拆卸到一定程度，小針的灌裝機(jī)則幾乎可以說(shuō)是完全拆卸。應(yīng)有書(shū)面的、內(nèi)容清晰完整的拆卸指導(dǎo)，最好附有示意圖，以使操作人員容易理解。1.2. 預(yù)洗/檢查預(yù)洗的目的是除去大量的（可見(jiàn)的）殘留產(chǎn)品或原料，為此后的清潔創(chuàng)造一個(gè)基本一致的起始條件。由于清潔規(guī)程往往不是專(zhuān)用的，它需要適用于生產(chǎn)多種產(chǎn)品和濃度或劑量規(guī)格的通用設(shè)備，以簡(jiǎn)化管理及操作，因此需要進(jìn)行預(yù)洗。預(yù)洗的作用是確立一個(gè)相對(duì)一致的起始點(diǎn)，以提高隨后各步操作的重現(xiàn)性。預(yù)洗所用水

2、質(zhì)不必苛求，通常飲用水或經(jīng)一定程序凈化（如過(guò)濾）的飲用水已經(jīng)足夠，使用水管或手持高壓噴槍以新鮮的流水沖洗設(shè)備以除去殘留物。對(duì)于殘留物物理性質(zhì)差異較大的情況，有的企業(yè)希望制定一份產(chǎn)品與預(yù)洗參數(shù)如水溫、壓力、時(shí)間等一一對(duì)應(yīng)的對(duì)照表，由操作人員按實(shí)際產(chǎn)品選擇參數(shù)。這種方法在實(shí)施時(shí)并不十分理想。由于操作人員的素質(zhì)及習(xí)慣，從一大堆方案中去選擇應(yīng)當(dāng)采用的方案反而容易造成差錯(cuò)，比較簡(jiǎn)單而切合實(shí)際的方法是讓操作者檢查是否還有可見(jiàn)的殘留物，讓他們持續(xù)噴洗設(shè)備直至可見(jiàn)殘留物消失，以此作為預(yù)洗的終點(diǎn)。因此操作者判斷預(yù)洗完成與否的標(biāo)準(zhǔn)必須盡可能的明確，特別是應(yīng)檢查的部位。例如可在規(guī)程中作出這樣的規(guī)定，用熱的飲用水持續(xù)

3、噴淋機(jī)器的所有表面，使所有可見(jiàn)的殘留顆粒消失，特別注意檢查不易清潔的部位。1.2清洗參數(shù)清洗程序的操作參數(shù)（如清潔劑種類(lèi)、濃度、接觸時(shí)間、殘留物的特性、污染條件），還包括清洗設(shè)備的特性，自動(dòng)化的清洗路徑，清潔環(huán)境的順序，每步的流速，在投入使用前都需要確認(rèn)。清潔程序每一步均包含4個(gè)參數(shù)，分別是時(shí)間、動(dòng)作、濃度及溫度。這四個(gè)參數(shù)是互相聯(lián)系的，且會(huì)對(duì)清潔周期中的每一階段的成功存在直接關(guān)系，比如通過(guò)對(duì)清潔劑的加熱以提高去污能力。作為清潔參數(shù)的變量需要確定，清潔參數(shù)的可接受范圍作為清潔程序開(kāi)發(fā)工作的一部分進(jìn)行建立。1.2.1. 時(shí)間被定義為清洗步驟的時(shí)間的長(zhǎng)短，在一個(gè)清洗步驟中，可以采用兩種方式來(lái)進(jìn)行定

4、義和測(cè)量：直接法與間接法，直接法時(shí)可使用作為控制系統(tǒng)中的計(jì)時(shí)器測(cè)量時(shí)問(wèn)。也可以通過(guò)間接法測(cè)量時(shí)間，例如在淋洗時(shí)，有時(shí)通過(guò)測(cè)量體積來(lái)代替測(cè)量時(shí)間，因?yàn)橥ㄟ^(guò)體積和流速可以確定時(shí)間。對(duì)于最終淋洗水，普遍會(huì)增加測(cè)試要求，如電導(dǎo)率。1.2.2. 動(dòng)作被定義為清潔劑的流體動(dòng)作。如浸泡，洗滌，沖擊，湍流。攪動(dòng)能夠提高清潔劑的有效性和清潔工藝的效果。典型的手工清洗包括浸泡和擦洗，以達(dá)到清潔效果。自動(dòng)清潔程序通常采用沖擊流或湍流作為清潔動(dòng)作。清潔程序需明確清潔動(dòng)作。流速是清潔劑和清洗水在流經(jīng)設(shè)備時(shí)的重要參數(shù)，應(yīng)該在清潔工藝的每個(gè)步驟中規(guī)定流速并進(jìn)行確認(rèn)。噴淋裝備要具有最大和最小流量的要求，管道的淋洗流速要確保形

5、成湍流。1.2.3. 清潔劑的濃度直接影響清潔程序是否能夠成功，化學(xué)清洗劑可以是濃縮型的稀釋后使用。清潔效果與清潔劑的濃度有關(guān)系，清潔劑使用太少可能達(dá)不到清潔效果，使用太多來(lái)自清潔劑的殘留可能難以去除，并需要使用大量的淋洗。通常，對(duì)于堿性清潔劑達(dá)到最佳清潔效果的方法可以是在攪拌狀態(tài)下提高溫度或延長(zhǎng)湍流淋洗周期的時(shí)間。化學(xué)清洗劑在采購(gòu)和處置方面，均會(huì)產(chǎn)生不小的資金投入，因此確定正確的濃度以保證清潔效果是極為重要的。清潔劑添加的自動(dòng)系統(tǒng)，必須具有可重現(xiàn)性。不管采用何種添加方式，確認(rèn)清潔劑濃度有助于證實(shí)該方式的一致性。對(duì)于自動(dòng)清潔程序，電導(dǎo)率測(cè)試是最容易測(cè)試強(qiáng)堿或強(qiáng)酸清潔劑濃度的方式。應(yīng)能夠通過(guò)清潔

6、劑的化學(xué)組成在線測(cè)試出清潔劑濃度的異常變化，例如一些清潔劑添加系統(tǒng)以體積進(jìn)行控制并采用電導(dǎo)率測(cè)試作為確認(rèn)方法。當(dāng)電導(dǎo)率超出預(yù)設(shè)值時(shí)，就會(huì)報(bào)警，允許的范圍需來(lái)自清潔程序開(kāi)發(fā)的數(shù)據(jù)。1.2.4. 溫度清潔程序中不同步驟的最佳溫度范圍會(huì)有所不同，初始清潔劑典型的溫度為室溫，目的是最大程度的去除變性或降解產(chǎn)物和最大程度的稀釋產(chǎn)物。清潔劑經(jīng)過(guò)加熱以提高效果，最終清洗水可通過(guò)高溫以加快干燥速率和提高任何工藝及清潔劑殘留的溶解性。1清潔驗(yàn)證主計(jì)劃所有驗(yàn)證活動(dòng)應(yīng)有計(jì)劃，清潔驗(yàn)證計(jì)劃的要求應(yīng)在主計(jì)劃或類(lèi)似文件中規(guī)定和記錄，藥品生產(chǎn)清潔驗(yàn)證主計(jì)劃的內(nèi)容原則上可能是相同。計(jì)劃應(yīng)描述職責(zé)、清潔驗(yàn)證計(jì)劃和清潔驗(yàn)證的實(shí)施

7、情況。最好有一個(gè)詳細(xì)的清潔驗(yàn)證主計(jì)劃，該計(jì)劃在整個(gè)廠區(qū)驗(yàn)證主計(jì)劃中有所描述，清潔驗(yàn)證主計(jì)劃可能包含所有內(nèi)容。還有一種方法是準(zhǔn)備一個(gè)概述版的清潔驗(yàn)證主計(jì)劃，再準(zhǔn)備一個(gè)清潔驗(yàn)證執(zhí)行或項(xiàng)目計(jì)劃，詳細(xì)說(shuō)明清潔驗(yàn)證的要求。應(yīng)當(dāng)定期審核和更新這些實(shí)際存在的文件，定期編寫(xiě)計(jì)劃報(bào)告，總結(jié)計(jì)劃執(zhí)行過(guò)程中的重要活動(dòng)。計(jì)劃應(yīng)說(shuō)明清潔驗(yàn)證程序的每個(gè)重要方面，主計(jì)劃的構(gòu)成及所需提供的適當(dāng)細(xì)節(jié)取決于特定設(shè)施的實(shí)際操作，主計(jì)劃的構(gòu)成包括但不限于以下主題。1.1 目的清潔驗(yàn)證主計(jì)劃有助于公司管理層了解驗(yàn)證活動(dòng)所涉及時(shí)間、人員的安排，以及進(jìn)行相關(guān)確認(rèn)與驗(yàn)證活動(dòng)的必要性，有助于驗(yàn)證團(tuán)隊(duì)成員了解各自的職責(zé)，此外讓參與這個(gè)項(xiàng)目的人員

8、以及檢查人員能夠從全局了解該工廠所使用的驗(yàn)證方法和所有的驗(yàn)證活動(dòng)。1.2 范圍清潔驗(yàn)證主計(jì)劃包括驗(yàn)證的一般原則，可接受標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算，分組（矩陣）和最差條件產(chǎn)品評(píng)估等方面的規(guī)定。1.3 職責(zé)規(guī)定對(duì)驗(yàn)證過(guò)程中各部門(mén)的職責(zé)進(jìn)行詳細(xì)規(guī)定與描述。1.4 產(chǎn)品與設(shè)備分組（矩陣）和最差條件產(chǎn)品評(píng)估通常情況下一條生產(chǎn)線會(huì)同時(shí)生產(chǎn)多個(gè)品種，每個(gè)品種由活性成分和輔料組成，在清潔驗(yàn)證中不必為所有殘留物制定限度標(biāo)準(zhǔn)并一一檢測(cè)，因?yàn)檫@是不切實(shí)際且沒(méi)有必要的。在一定意義上，清潔的過(guò)程是個(gè)溶解的過(guò)程，因此通常的做法是從各組分中確定最難清潔的物質(zhì)，作為目標(biāo)化合物即驗(yàn)證對(duì)象，目標(biāo)化合物一般要考慮其特性，如：o溶解性風(fēng)險(xiǎn)o毒性、藥理

9、o難于清洗，如對(duì)設(shè)備表面材質(zhì)有一定附著力o配方中包含難以清洗的油脂、色料或矯味劑的產(chǎn)品（顏色、香味與味道）o生廠量圖的品種（生廠頻率圖的廣品相應(yīng)的清洗頻率圖）o清洗過(guò)程如果使用清洗劑，則其殘留物也應(yīng)視為標(biāo)記物o同一工序使用到的設(shè)備可能會(huì)有很多種，對(duì)于同一類(lèi)型的設(shè)備，可以考慮對(duì)其分組并同時(shí)進(jìn)行驗(yàn)證。對(duì)于設(shè)備分組，以形式和功能為標(biāo)準(zhǔn)定義分組原則，對(duì)設(shè)計(jì)和功能相似，大小不同的設(shè)備可以分為一組。1.5 殘留限度的計(jì)算和可接受標(biāo)準(zhǔn)o化學(xué)殘留可接受限度o清潔劑殘留的確定o微生物水平的確定如何確定殘留物限度是一個(gè)相當(dāng)復(fù)雜的問(wèn)題，企業(yè)應(yīng)當(dāng)根據(jù)其生產(chǎn)設(shè)備和產(chǎn)品的實(shí)際情況，制定科學(xué)合理的，能實(shí)現(xiàn)并能通過(guò)適當(dāng)?shù)姆椒?/p>

10、檢驗(yàn)的限度標(biāo)準(zhǔn)。目前企業(yè)普遍接受的限度標(biāo)準(zhǔn)基于以下原則：以目檢為依據(jù)的限度；化學(xué)殘留可接受限度；微生物殘留可接受限度。1.5.1. 以目檢為依據(jù)的限度目檢要求不得有可見(jiàn)殘留物，在每次清洗完后都要求進(jìn)行檢查并對(duì)檢查結(jié)果進(jìn)行記錄，此項(xiàng)檢查應(yīng)該作為清潔驗(yàn)證接受限度的第一個(gè)接受標(biāo)準(zhǔn)。1.5.2. 化學(xué)殘留可接受限度計(jì)算化學(xué)殘留可接受限度有兩種方法，生物活性限度（最低日劑量的1/1000）和濃度限度（10ppm）。在考慮可接受殘留限度時(shí)，綜合考慮兩種方法，選擇最嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)作為清潔驗(yàn)證最終標(biāo)準(zhǔn)。采用健康基礎(chǔ)數(shù)據(jù)的可接受標(biāo)準(zhǔn)在可以獲得可接受日暴露水平（ADE或允許日暴露量（PDE值時(shí)，最大允許殘留（MAC。

11、應(yīng)基于ADE計(jì)算。MAC0算的原則是基于ADE/PDES,計(jì)算允許從上一個(gè)產(chǎn)品帶入下一個(gè)產(chǎn)品中的殘留量。根據(jù)以下公司計(jì)算ADEfi或PDEffi,將結(jié)果用于MAC。：的計(jì)算：ADE=NOAELBW/（UFcXMR<PQ根據(jù)以下公式從ADEfi計(jì)算MACOS:MACO=ADEprevioUSMBSnext/TDDnextADE-可接受日暴露水平MACO-允許最大殘留：從上一產(chǎn)品帶入下一產(chǎn)品的最大可接受量BW-平均成人體重UFc-組分不確定因子：反映單個(gè)變量之間、不同品種差異、亞急性折算為急性外推、最低可見(jiàn)損害作用水平到無(wú)可見(jiàn)損害作用水平的推斷，數(shù)據(jù)完整性等補(bǔ)償因素的綜合系數(shù)MF-修正因子：

12、用于表達(dá)未被其它因子覆蓋的不確定因素MBSnext-下一產(chǎn)品的最小批量TDDnext-下一產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)治療日服用劑量 生物活性的可接受限度：最低日治療劑量的1/1000根據(jù)藥物的生物學(xué)活性數(shù)據(jù)-最低日治療劑量（MTDD確定殘留物的限度是制藥企業(yè)普遍采用的的方法。一般取最低日治療劑量1/1000為殘留物限度，可以認(rèn)為即使存在很大個(gè)體差異，該殘留量也不會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生藥理反應(yīng)。因此高活性、敏感性的藥物宜使用本法確定殘留物限度。一般表面計(jì)算公式如下：L1/1000=MTDa/1000XNb/MDDbSbMTDa-清洗前產(chǎn)品最小日給藥劑量中的活性成分含量Nb-清洗后產(chǎn)品的批量MDDb-清洗后產(chǎn)品的最大日給藥

13、劑量的活性成分含量Sb-清洗后產(chǎn)品活性成分含量的百分比（%W/W 濃度限度：十萬(wàn)分之一（10ppm）在下一個(gè)產(chǎn)品中的殘留物數(shù)量級(jí)別應(yīng)不超過(guò)十萬(wàn)分之一（10Ppm，該限度依據(jù)分析方法客觀能達(dá)到的能力而制定的，從控制微生物污染及熱原污染角度上看，也比較安全。一般除非是高活性、高敏感性的藥品，該限度的安全性是足夠的。從殘留物濃度限度可以推導(dǎo)出設(shè)備內(nèi)表面的單位面積殘留物濃度(表面殘留物限度)，假設(shè)殘留物均勻分布在設(shè)備內(nèi)表面上，在下批生產(chǎn)時(shí)全部溶解在產(chǎn)品中。設(shè)備下批產(chǎn)品的生產(chǎn)批量為B(kg),因殘留物濃度最高為10X10-6即10mg/kg,則殘留物總量最大為10B(mg)；單位面積殘留物的限度為殘留物

14、總量除以測(cè)量的與產(chǎn)品接觸的內(nèi)表面積，設(shè)設(shè)備總內(nèi)表面積為SA(cm2,則表面殘留物限度L=10B/SA(mg/cm2)o為確保安全，一般應(yīng)除以安全因子F,則L=10B/(SAXF)(mg/cm2)計(jì)算接受殘留限度需考慮的要素如下表表2-9-1計(jì)算接受殘留限度考慮因素影響因素最小日治療劑量/毒性溶解度批量最大日治療劑量接觸產(chǎn)品的面積難清洗位置取樣面積清洗前產(chǎn)品VV清洗后產(chǎn)品VV設(shè)備VV取樣方法V清洗劑VV1.5.3. 微生物限度清洗的微生物驗(yàn)證可以和清洗的化學(xué)驗(yàn)證同步進(jìn)行，微生物的特點(diǎn)是在一定環(huán)境條件下會(huì)迅速繁殖，數(shù)量急劇增加。而且空氣中存在的微生物能通過(guò)各種途徑污染已清潔的設(shè)備。設(shè)備清洗后存放的

15、時(shí)間越長(zhǎng)，被微生物污染的幾率越大。因此,企業(yè)應(yīng)綜合考慮其生產(chǎn)實(shí)際情況和需求，自行制定微生物污染水平控制的限度及清洗后到下次生產(chǎn)的最長(zhǎng)貯存期限。1.5.4. 殘留溶劑的限度標(biāo)準(zhǔn)藥品生產(chǎn)和清潔中可能用到除水外的有機(jī)溶劑，ICH在殘留溶劑指南中將溶劑分為3個(gè)級(jí)別。一類(lèi)溶劑因其具有不可接受的毒性或?qū)Νh(huán)境造成公害，第一類(lèi)溶劑在制藥生產(chǎn)中不應(yīng)該使用，如必須使用時(shí)按下表對(duì)殘留進(jìn)行控制，其名稱(chēng)如下表：2-9-2第一類(lèi)溶劑濃度限度溶劑濃度限度(ppm)備注溶劑濃度限度(ppm)備注苯2致癌物四氯化碳4毒性及危害環(huán)境1,2-二氯乙烷5毒性1,1,1-三氯乙1500危害環(huán)境1,1-二氯乙烯8毒性烷二類(lèi)溶劑由于其毒性

16、在制劑中應(yīng)予限制，并嚴(yán)格限制允許的每日攝入量，其名稱(chēng)如下表:2-9-3第二類(lèi)溶劑濃度限度溶劑最大允許攝入量mg/d濃度限度(ppm)溶劑最大允許攝入量mg/d濃度限度(ppm)乙月青4.1410甲醇30.03000氯苯3.63602-甲氧基乙醇0.550氯仿0.660甲基丁基酮0.550異丙基苯0.770甲基環(huán)己烷11.81180環(huán)己烷38.83880甲基異基酮4545001,2-二氯乙烯18.71870N-甲基-叱咯烷酮5.3530二氯甲烷6.0600硝基甲烷0.5501,2-二甲氧基乙烷1.0100叱噬2.0200N,N-一甲基乙酰胺10.91090劃、碉1.6160N,N-二甲基甲酰胺8

17、.8880四氫吠喃7.27201,4-二吸烷3.8380四氫恭1.01002-乙氧基乙醇1.6160甲苯8.9890乙二醇6.26201,1,2-三氯乙烯0.880甲酰胺2.2220二甲苯21.72170己烷2.9290第三類(lèi)溶劑第三類(lèi)溶劑屬于低毒，對(duì)人體危害很小，其名稱(chēng)如下表:表2-9-4第三類(lèi)溶劑濃度限度乙酸內(nèi)酮苯甲醴1-醇乙酸酯叔基甲基醴二甲基業(yè)碉乙醇乙酸乙酯乙醴甲酸甲酯甲酸庚烷乙酸異酯乙酸異丙酯乙酸甲酯3-甲基-1-醇甲基乙基酮2-甲基-1-丙醇戊烷1-戊醇1-丙醇2-丙醇乙酸丙酯三乙胺2-醇ICH殘留溶劑指南規(guī)定，一類(lèi)、二類(lèi)溶劑僅在不可替代的情況下用于藥品生產(chǎn)，但不能用作清潔劑。在無(wú)

18、法避免時(shí)，三類(lèi)溶劑可作為清潔劑，其在下批生產(chǎn)中允許的溶劑殘留濃度不應(yīng)超過(guò)初始溶劑濃度的0.5%。1.6 最難清潔部位和取樣點(diǎn)設(shè)備最難清潔部位一般是根據(jù)生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估進(jìn)行確定，考慮到在線清洗無(wú)法覆蓋的區(qū)域及手工清洗中無(wú)法拆卸的部件表面，另外對(duì)于設(shè)備中不同組成部分,使用到的不同材質(zhì)，需要對(duì)其進(jìn)行綜合考慮，確認(rèn)設(shè)備最難清潔部位。確定最難清潔部位首先可以作為設(shè)備設(shè)計(jì)時(shí)的參考，其次能進(jìn)一步確認(rèn)清潔驗(yàn)證中取樣點(diǎn)，但這個(gè)過(guò)程僅適用于淋洗法取樣的方式。1.7 清潔驗(yàn)證取樣方法確認(rèn)清潔難消證取樣方法確認(rèn)可以參見(jiàn)2.9.5.2節(jié)取樣方法驗(yàn)證。1.8 清潔驗(yàn)證主計(jì)劃其他內(nèi)容還包括不局限于以下內(nèi)容包括不局限于如下

19、內(nèi)容o清潔驗(yàn)證時(shí)間計(jì)劃表o清潔驗(yàn)證日常監(jiān)測(cè)/維護(hù)要求o參考文件o附錄風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估貫穿于產(chǎn)品整個(gè)生命周期，同樣適用于清潔驗(yàn)證過(guò)程，合理運(yùn)用風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估在清潔驗(yàn)證中能達(dá)到如下目的：1 .選出清潔驗(yàn)證目標(biāo)產(chǎn)品，有效的減少清潔驗(yàn)證工作量，提高清潔驗(yàn)證的適用性；2 .選出合適的清潔劑，更加高效且節(jié)省成本的達(dá)到清洗目的；3 .選出合適的檢測(cè)方法，如專(zhuān)屬性與非專(zhuān)屬性的方法分別適用于不同的工藝與設(shè)備;4 .選出取樣點(diǎn)位置并選擇合理的取樣方法，從而更高效的開(kāi)展清潔驗(yàn)證。清潔和清潔驗(yàn)證可以從相關(guān)的工藝系統(tǒng)知識(shí)，污染物和設(shè)備清潔輔助系統(tǒng)中進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、確認(rèn)。這些系統(tǒng)要進(jìn)行設(shè)計(jì)審核，然后根據(jù)相關(guān)的可接受標(biāo)準(zhǔn)確認(rèn)，證明

20、已經(jīng)達(dá)到系統(tǒng)的相關(guān)要求。在清潔驗(yàn)證執(zhí)行的過(guò)程中，有很多影響清潔驗(yàn)證不成功的因素，每個(gè)因素都存在著不同的潛在的風(fēng)險(xiǎn)，必須對(duì)每個(gè)因素進(jìn)行充分的分析、評(píng)估，確保清潔驗(yàn)證順利地進(jìn)行，下圖用魚(yú)骨圖分析確認(rèn)所有的影響因素。環(huán)晤方怯AS預(yù)防不成功的清清驗(yàn)證HVAC的級(jí)別分析方法培調(diào)環(huán)境溫濕度取樣方法般驗(yàn)消沽設(shè)備儲(chǔ)存條件清洗SOP的】AQT細(xì)心其他干擾嵇治布/分析落油設(shè)總清潔工具/取樣生產(chǎn)設(shè)備水的項(xiàng)履/設(shè)備校的/沒(méi)箭材版娥慌物/網(wǎng)收率霎驗(yàn)設(shè)備形狀.：光鬻3Mp制狗方材料潴后設(shè)名圖2-9-3風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估魚(yú)骨圖1 環(huán)境環(huán)境因素對(duì)清潔驗(yàn)證的影響至關(guān)重要，一個(gè)良好的環(huán)境能夠保證清潔驗(yàn)證順利的進(jìn)行。環(huán)境因素嚴(yán)重影響著清潔驗(yàn)

21、證過(guò)程中的微生物殘留項(xiàng)目，不同級(jí)別的環(huán)境有不同的微生物和塵埃粒子要求，在進(jìn)行清潔驗(yàn)證之前，必須確保HVAC的性能確認(rèn)已完成，環(huán)境的溫濕度已經(jīng)符合要求。特別是對(duì)清潔后的設(shè)備的儲(chǔ)存條件，清潔后的設(shè)備必須儲(chǔ)存在干燥的環(huán)境中，需要進(jìn)行干凈設(shè)備保留時(shí)間和臟設(shè)備保留時(shí)間的驗(yàn)證，而這兩個(gè)時(shí)間驗(yàn)證主要是針對(duì)微生物殘留限度，因?yàn)榄h(huán)境因素如不能被有效控制，必定導(dǎo)致清潔驗(yàn)證失敗。2 方法清潔驗(yàn)證執(zhí)行之前，必須完成與清潔驗(yàn)證相關(guān)的分析方法和取樣方法驗(yàn)證以及所有相關(guān)設(shè)備的清潔SOR在設(shè)備清潔SOP中必須清楚的描述T.A.C.T(Temperature,Action,Concentration,Time)參數(shù)，確保清潔規(guī)

22、程的可操作性。3 人員對(duì)于參與的清潔驗(yàn)證的相關(guān)人員，特別是與清潔驗(yàn)證相關(guān)設(shè)備清潔的操作人員，必須對(duì)相關(guān)的清洗規(guī)程進(jìn)行嚴(yán)格的培訓(xùn)，保證設(shè)備清洗的一致性，必要時(shí)在清潔驗(yàn)證過(guò)程中可以采用不同的班組人員對(duì)設(shè)備進(jìn)行清洗，從而證明清潔SOP的耐用性。執(zhí)行清潔驗(yàn)證的人員必須全部通過(guò)清潔驗(yàn)證方案的培訓(xùn)，在執(zhí)行過(guò)程中，盡量選用有經(jīng)驗(yàn)的人員，尤其是取樣操作人員，必須通過(guò)回收率實(shí)驗(yàn)的培訓(xùn)，否則不能進(jìn)行取樣操作。4材料為了使設(shè)備的清洗達(dá)到一定的潔凈度，設(shè)備的清洗必須嚴(yán)格選用清潔劑和清潔工具，清潔劑必須采用成分單一和制藥行業(yè)允許的清潔劑，而且在清潔驗(yàn)證執(zhí)行的過(guò)程中要測(cè)定清潔劑殘留，清潔工具一定要選擇沒(méi)有任何脫落物質(zhì)的清

23、潔工具，重要的清潔工具的變更可能導(dǎo)致清潔程序重新驗(yàn)證。設(shè)備清洗所采用水的質(zhì)量對(duì)于最終可接受標(biāo)準(zhǔn)的制定有著很大的影響，不同的水質(zhì)清潔代表著不同的潔凈要求，比如注射用水一般都是無(wú)菌制藥廠房中進(jìn)行，而純化水對(duì)設(shè)備的清潔一般都在非無(wú)菌制藥廠房中進(jìn)行，所以最終清潔用水的質(zhì)量好壞決定著清潔驗(yàn)證微生物限度制訂原則。藥品生產(chǎn)過(guò)程中，每個(gè)公司的每個(gè)車(chē)間都會(huì)有很多品種和劑型藥品，由于在清潔驗(yàn)證過(guò)程中，要耗費(fèi)大量的人力和物力，我們不可能針對(duì)每個(gè)品種都要單獨(dú)的進(jìn)行清潔驗(yàn)證，為了降低成本和將復(fù)雜的清潔驗(yàn)證簡(jiǎn)單化，我們需要對(duì)車(chē)間所有的品種和劑型進(jìn)行分組分類(lèi)，從中選擇最差條件的產(chǎn)品進(jìn)行清潔驗(yàn)證。5 測(cè)量清潔驗(yàn)證過(guò)程中涉及的

24、所有的設(shè)備的儀器儀表必須進(jìn)行校準(zhǔn)，確保獲得數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。考慮不同人員操作的差異性，取樣操作應(yīng)經(jīng)過(guò)嚴(yán)格培訓(xùn)并能?chē)?yán)格遵守規(guī)程的人員進(jìn)行，同時(shí)為保證樣品具有較好的重現(xiàn)性，取樣操作應(yīng)由完成回收率實(shí)驗(yàn)的人員進(jìn)行操作。棉簽使用前用取樣溶劑預(yù)先清洗，以防止纖維殘留在取樣位置表面。不同材質(zhì)的回收率實(shí)驗(yàn)在此方案進(jìn)行前必須完成，應(yīng)由同一人至少進(jìn)行3次操作，應(yīng)大于或等于50%三次結(jié)果的RS而不大于20%為確保產(chǎn)品的安全性,在計(jì)算殘留量時(shí)應(yīng)以最低的回收值代入，即算得最大可能殘留量。對(duì)于不同材質(zhì)的回收率結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，為最大程度地降低污染的風(fēng)險(xiǎn)，采取回收率最低的材質(zhì)作為最終回收率。6 設(shè)備制藥生產(chǎn)中每個(gè)公司有不同的劑型，

25、每個(gè)劑型使用的設(shè)備也各不相同,又存在著不同的廣品，在清潔驗(yàn)證的執(zhí)行過(guò)程中，不可能對(duì)每個(gè)廠品的設(shè)備鏈進(jìn)行驗(yàn)證，如果一個(gè)公司某劑型的產(chǎn)品非常多，那么清潔驗(yàn)證周期會(huì)很長(zhǎng)，浪費(fèi)大量的人力和物力資源。所以我們會(huì)根據(jù)產(chǎn)品使用的設(shè)備鏈和產(chǎn)品的相似性對(duì)設(shè)備鏈進(jìn)行分組驗(yàn)證，對(duì)于同一類(lèi)別的設(shè)備鏈，只需要選擇最差條件設(shè)備鏈驗(yàn)證，只要最差條件設(shè)備鏈通過(guò)驗(yàn)證，那么其余的設(shè)備鏈也就不需要進(jìn)行驗(yàn)證了，大大減輕了清潔驗(yàn)證的負(fù)擔(dān)。制藥生產(chǎn)過(guò)程中，由于設(shè)備的種類(lèi)非常多，每個(gè)設(shè)備都有不同的幾何形狀，所以設(shè)備取樣點(diǎn)的選擇是非常重要的，所選擇的取樣點(diǎn)必須有很強(qiáng)的代表性，最終取樣點(diǎn)結(jié)果的合格證明該設(shè)備的清洗程序是適用的。因?yàn)樵谇鍧嶒?yàn)證過(guò)

26、程中主要的目的是證明上批產(chǎn)品的活性成分對(duì)下批產(chǎn)品沒(méi)有造成污染，所以對(duì)于有些沒(méi)有接觸到活性成分的設(shè)備，我們可以適當(dāng)?shù)刂贫ㄆ錅y(cè)試項(xiàng)目，并不是所有的測(cè)試項(xiàng)目都是一成不變的。清潔驗(yàn)證相關(guān)的分析方法清潔驗(yàn)證相關(guān)的分析方法一般包括分析方法驗(yàn)證與取樣方法驗(yàn)證，清潔驗(yàn)證中選擇一個(gè)合適的分析方法是非常必要的，適當(dāng)?shù)姆治龇椒☉?yīng)能夠充分檢測(cè)相關(guān)殘留物。可以從分析結(jié)果中得出什么結(jié)論也很重要（例如檢測(cè)的是產(chǎn)品還是清潔劑，結(jié)果是否合格），檢測(cè)結(jié)果決定了清潔方法是否可行或需要進(jìn)一步改進(jìn)。本章討論的內(nèi)容是怎樣選擇一個(gè)合適的測(cè)試方法，包括適用性和化學(xué)與微生物測(cè)試方法的信息，以及測(cè)試方法的驗(yàn)證。分析方法驗(yàn)證1 .專(zhuān)屬性專(zhuān)屬性是指

27、其他物質(zhì)存在干擾的情況下，被分析物能準(zhǔn)確可靠檢測(cè)的能力。對(duì)于清潔驗(yàn)證來(lái)說(shuō)，干擾物包括降解物、輔料、取樣溶劑、取樣棉簽、清潔劑等干擾。2 .準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度也稱(chēng)為真實(shí)度，指真實(shí)值或認(rèn)可的參考值與測(cè)量值之間的相近程度，一般用回收率表示，綜合回收率要求不低于75%,回收率的RSD要求不大于10%,將測(cè)定的回收率中最低值作為校正因子f,樣品的測(cè)定結(jié)果除以校正因子表示樣品的實(shí)際量。3 .精密度指在規(guī)定條件下對(duì)均質(zhì)樣品多次取樣進(jìn)行一系列檢測(cè)結(jié)果的接近程度，精密度可從三個(gè)層次考查：重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性，精密度考察應(yīng)使用均質(zhì)的、可信的樣品，如果得不到，可人為配制樣品溶液進(jìn)行研究。4 .線性分析方法的線性是指

28、在給定的范圍內(nèi)，檢測(cè)結(jié)果與樣品中被分析物的濃度（量）成比例關(guān)系的能力。范圍指能達(dá)到一定的準(zhǔn)確度、精密度和線性，測(cè)試方法適用的試樣中被測(cè)物的高、低限濃度或量。5 .范圍分析方法的范圍是指樣品中被分析物的較高濃度和較低濃度的一個(gè)區(qū)間，并已證實(shí)在此區(qū)間內(nèi)，該方法具有合適的準(zhǔn)確性、精密度和線性濃度范圍應(yīng)達(dá)到殘留物限度的50%150%6 .檢測(cè)限與定量限檢測(cè)限是指樣品中的被分析物能被檢測(cè)到的最低量，定量限是指能定量檢測(cè)樣品中被分析物的最低量。檢測(cè)限和定量限可采用直觀評(píng)價(jià)和信噪比的方法，或者采用響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差和斜率的方法進(jìn)行驗(yàn)證。7 .耐用性耐用性是指試驗(yàn)參數(shù)適當(dāng)?shù)陌l(fā)生細(xì)小改變時(shí)，測(cè)量保持不受影響的能力，

29、可用于說(shuō)明正常使用時(shí)的可靠性耐用性測(cè)試是在改變其分析參數(shù)的條件下，分析方法的適用性，以HPLC方法為例典型變化的參數(shù)如下：流動(dòng)相PH值變化流動(dòng)相組分變化柱溫和流速變化8 .溶液穩(wěn)定性樣品在分析前放置于一定的儲(chǔ)存條件下，可能會(huì)發(fā)生降解和變化，在這些情況下，需要考察被分析物的穩(wěn)定性。使用同一份溶液，測(cè)定其預(yù)先選定的時(shí)間間隔里結(jié)果的差異，以此分析樣品的穩(wěn)定性。9 .系統(tǒng)適用性定量檢測(cè)時(shí)應(yīng)制備2份對(duì)照品，對(duì)照品一致性檢查不大于5%對(duì)照品的RSD不超過(guò)10%表1檢驗(yàn)方法中限度檢查和定量檢查需驗(yàn)證的參數(shù)檢查方法參數(shù)限度檢查法定量檢查法專(zhuān)屬性VV精密度XV線性/范圍XV準(zhǔn)確度VV檢測(cè)限和定量限檢測(cè)限驗(yàn)證定量

30、限驗(yàn)證樣品溶液的穩(wěn)定性系統(tǒng)適用性V（一份標(biāo)準(zhǔn)品）V（兩份標(biāo)準(zhǔn)品作平行樣）取樣回收率研究取樣回收率研究通常需要證明采用適當(dāng)?shù)姆治龇椒ê腿映绦?，可充分測(cè)量或量化設(shè)備表面的殘留物。這些研究為殘留物測(cè)量的取樣以及分析方法建立提供了科學(xué)依據(jù)。它的目的是建立一個(gè)可重現(xiàn)的設(shè)備表面回收率。以下探討三種類(lèi)型的取樣回收率：擦拭取樣回收率，淋洗取樣回收率以及“目檢”回收率。對(duì)于擦拭以及淋洗取樣而言，回收率研究可以作為分析方法驗(yàn)證的一部分，或者一旦確定分析方法能夠檢測(cè)溶液中殘留物，可單獨(dú)進(jìn)行研究。取樣回收率研究是實(shí)驗(yàn)室研究，需要不同被取樣設(shè)備材質(zhì)（如不銹鋼、玻璃、PTFE以及EPDM試樣,并在上面涂布待檢測(cè)殘留物。

31、1.擦拭法回收率擦拭回收率研究中，將已知濃度的殘留物溶液均勻涂布在材質(zhì)試樣上，自然晾干，采用一定的擦拭方法進(jìn)行取樣，選用合適的溶劑提取棉簽上的殘留，然后檢測(cè)提取液中殘留物的數(shù)量。回收量與材質(zhì)試樣上的加入量之比就是取樣百分回收率。由于擦拭屬于人工操作，通常每人需要重復(fù)三次回收率研究。每個(gè)殘留物和表面類(lèi)型的組合至少需要兩個(gè)人進(jìn)行擦拭回收率研究。研究建立的回收率可以通過(guò)不同的方式定義，但通常定義為任意一個(gè)擦拭取樣人員的最低平均回收率。一個(gè)可接受的拭子回收率取決于如何進(jìn)行拭子回收率試驗(yàn)。如果在回收率研究確認(rèn)取樣方法時(shí)，沒(méi)有對(duì)殘留限度或分析結(jié)果進(jìn)行修正，回收率通常要求70%或更高。如果回收率用于修正殘留

32、物限度或分析結(jié)果，回收率一般要達(dá)到50%或以上。.2.淋洗法回收率淋洗法回收率研究同擦拭回收率相似，將目標(biāo)殘留物溶液涂布在材質(zhì)試樣上自然晾干。對(duì)于擦拭取樣的回收率，必須嚴(yán)格執(zhí)行預(yù)定擦拭步驟。與之相反對(duì)于淋洗取樣，無(wú)法在實(shí)驗(yàn)室中準(zhǔn)確地重復(fù)淋洗步驟了提取取樣的特殊情況）。然而在實(shí)驗(yàn)室中模擬淋洗程序是可行的。在可能的情況下，模擬淋洗的條件應(yīng)該同實(shí)際的設(shè)備淋洗條件相同，包括淋洗溶劑以及淋洗溶劑溫度的選擇。其他情況下，應(yīng)該選擇與設(shè)備淋洗相同或最差的淋洗條件，例如回收率研究中溶劑量與被取樣表面積之比應(yīng)該同設(shè)備淋洗時(shí)相同或更低。3 .目檢回收率這個(gè)過(guò)程實(shí)際上是確定一個(gè)定量的“目視檢測(cè)限”，如果目檢只是作為擦

33、拭或沖洗取樣的補(bǔ)充，則可以但不要求確定“目視檢測(cè)限”。指定觀察條件下的目視檢測(cè)限可以通過(guò)在設(shè)備材質(zhì)試樣上涂布不同濃度（醫(yī)g/cm2）的殘留物來(lái)確定。并需要一組訓(xùn)練有素的觀察者來(lái)確定表面殘留物明顯可見(jiàn)時(shí)的最低殘留水平。目視檢測(cè)限的意義在于，如果在清潔驗(yàn)證方案中，在同樣（或更嚴(yán)格）的觀察條件下確定設(shè)備表面已目檢潔凈，則可認(rèn)為實(shí)際殘留水平低于目視檢測(cè)限。適當(dāng)?shù)挠^察條件包括距離，光照以及觀察角度。目視檢測(cè)限取決于殘留物性質(zhì)，表面性質(zhì)（例如，不銹鋼對(duì)PTF日以及觀察者的視力。文獻(xiàn)報(bào)道的典型的目視檢測(cè)限是1-4醫(yī)g/cm2。對(duì)于目視檢測(cè)限，不需要確定回收率。該研究的目的是確定殘留物明顯可見(jiàn)時(shí)的一個(gè)殘留物水

34、平，這樣目視潔凈的任何表面上殘留水平都低于目視檢測(cè)限。4 .生物負(fù)載及內(nèi)毒素取樣回收率對(duì)于微生物取樣，不適合進(jìn)行回收率研究以確定表面回收率，原因之一是微生物檢測(cè)的計(jì)數(shù)問(wèn)題通常以“菌落形成單位”進(jìn)行計(jì)數(shù)而不是單個(gè)微生物。第二個(gè)原因是在一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的取樣回收率研究中，當(dāng)材質(zhì)試樣晾干時(shí)微生物會(huì)死亡或失去生存能力。第三個(gè)原因是不清楚選用哪種微生物進(jìn)行回收率研究。第四個(gè)原因是通常生物負(fù)載限度已明顯低于可能影響產(chǎn)品質(zhì)量或工藝性能（如在線滅菌）的水平，因此即使回收率低（50%）,不引入回收因子也不會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量和/或工藝性能。1 .清潔驗(yàn)證方案參照物質(zhì)或最難清潔物質(zhì)、最難清潔部位和取樣部位，如何制訂驗(yàn)證的合格標(biāo)

35、準(zhǔn)即最大允許殘留清潔驗(yàn)證方案必須符合一般驗(yàn)證方案的共性要求。驗(yàn)證方案中最關(guān)鍵技術(shù)問(wèn)題為如何確定限度，用什么手段能準(zhǔn)確地定量殘留量，這包括取樣方法和檢測(cè)方法的開(kāi)發(fā)和驗(yàn)證。1.1 參照物質(zhì)與最難清潔物質(zhì)一般藥品都由活性成分和輔料組成。對(duì)于復(fù)方制劑，含有多個(gè)活性成分。所有這些物質(zhì)的殘留物都是必須除去的。在清潔驗(yàn)證中是否需要為所有殘留物都制定限度標(biāo)準(zhǔn)一一檢測(cè)呢？這是不切實(shí)際且沒(méi)有必要的。在一定的意義上，清潔的過(guò)程是個(gè)溶解的過(guò)程，因此通常的做法是從各組分中確定最難清潔（溶解）的物質(zhì)，以此作為參照物質(zhì)。通常相對(duì)于輔料，人們更關(guān)注活性成分的殘留，因?yàn)樗赡苤苯佑绊懴屡a(chǎn)品的質(zhì)量、療效和安全性。因此活性成分的

36、殘留限度必須作為驗(yàn)證合格的標(biāo)準(zhǔn)之一。如當(dāng)存在兩個(gè)以上的活性成分時(shí)，其中最難溶解的成分即可作為最難清潔物質(zhì)論處。以復(fù)方18氨基酸注射液為例，它有18種氨基酸，均為活性成分。其中最難溶解的為胱氨酸，僅微溶于熱水，因此可將其作為最難清潔物質(zhì)。這樣一來(lái)，清潔驗(yàn)證就找到了殘留的“參照物”而不用考慮其他易溶解組分。1.2 最難清潔部位和取樣點(diǎn)取樣點(diǎn)應(yīng)包括各類(lèi)最難清潔的部位，及各種材質(zhì)的全面考慮。1.3 清潔驗(yàn)證方案清潔驗(yàn)證方案可用多種格式，其共同要求要素包括如下內(nèi)容: 目的明確待驗(yàn)證的設(shè)備和清潔方法。 清潔規(guī)程待驗(yàn)證的清潔方法的SOP即清潔規(guī)程應(yīng)當(dāng)在驗(yàn)證開(kāi)始前確定下來(lái)，在驗(yàn)證方案中列出清潔規(guī)程以表明清潔規(guī)

37、程已經(jīng)制定。 驗(yàn)證人員列出參加驗(yàn)證人員的名單，說(shuō)明參加者所屬的部門(mén)和各自的職責(zé)，對(duì)相關(guān)操作人員的培訓(xùn)要求。 確定參照物和限度標(biāo)準(zhǔn)在本部分應(yīng)詳細(xì)闡述確定參照物的依據(jù)，確定限度標(biāo)準(zhǔn)的計(jì)算過(guò)程和結(jié)果。一般可將相關(guān)設(shè)備列表，計(jì)算總表面積，特殊表面面積；將相關(guān)產(chǎn)品列表，列入主要活性成分及其相關(guān)物理化學(xué)性質(zhì)，MTDD直等，確定參照物質(zhì)，計(jì)算限度標(biāo)準(zhǔn)。 檢驗(yàn)方法學(xué)本部分應(yīng)說(shuō)明取樣方法、工具、溶劑，主要檢驗(yàn)儀器，取樣方法和檢驗(yàn)方法的驗(yàn)證情況等。取樣要求用示意圖、文字等指明取樣點(diǎn)的具體位置和取樣計(jì)劃，明確規(guī)定何時(shí)、何地、取多少樣品，如何給各樣品標(biāo)記。這部分的內(nèi)容對(duì)方案的實(shí)施和保證驗(yàn)證結(jié)果的客觀性是至關(guān)重要的?？?/p>

38、靠性判斷標(biāo)準(zhǔn)在本部分應(yīng)規(guī)定為證明待驗(yàn)證清潔規(guī)程的可靠性，驗(yàn)證試驗(yàn)須重復(fù)的次數(shù)，一般至少連續(xù)3次試驗(yàn)，所有數(shù)據(jù)都符合限度標(biāo)準(zhǔn)方可。2,清潔驗(yàn)證狀態(tài)的維護(hù)5.1 日常監(jiān)控清潔驗(yàn)證完成后該清潔方法即生效，清潔方法即進(jìn)入維護(hù)與再驗(yàn)證階段，企業(yè)應(yīng)當(dāng)對(duì)清潔驗(yàn)證狀態(tài)進(jìn)行持續(xù)維護(hù)，保證清潔方法持續(xù)可靠。在日常生產(chǎn)過(guò)程中對(duì)清潔方法進(jìn)行監(jiān)控的目的是進(jìn)一步考察清潔程序的可靠性，對(duì)于手工清洗過(guò)程來(lái)說(shuō)，監(jiān)控尤其重要，因?yàn)槠渲噩F(xiàn)性很在程度上取決于人員的培訓(xùn)和操作人員的實(shí)際操作技能。監(jiān)控辦法為在日常清潔時(shí)，定期進(jìn)行抽樣檢測(cè)，確認(rèn)清潔過(guò)程的有效性與操作的重現(xiàn)性。通過(guò)日常監(jiān)控?cái)?shù)據(jù)的回顧，以確定再驗(yàn)證的周期。5.2 變更管理當(dāng)已經(jīng)驗(yàn)證的設(shè)備、清潔程序有任何變更以及產(chǎn)品處方、增加新產(chǎn)品等可能導(dǎo)致清潔規(guī)程或設(shè)備的變更，應(yīng)組織相關(guān)人員對(duì)變更情況進(jìn)行評(píng)估，確定是否需要進(jìn)行再驗(yàn)證，當(dāng)發(fā)生下列情形之一時(shí)，須對(duì)清潔程序進(jìn)行再驗(yàn)