培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證方案

1、培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證方案起草人:方案審核人:方案批準(zhǔn)人:日期：年月日日期：年月日日期：年月日1. 驗(yàn)證目的32. 參照標(biāo)準(zhǔn)33. 驗(yàn)證項(xiàng)目34. 驗(yàn)證小組人員及職責(zé)3-45. 驗(yàn)證可接受的標(biāo)準(zhǔn)46. 驗(yàn)證材料4-57. 菌液制備58. 適用性檢查5-69. 控制菌檢查71. 驗(yàn)證目的：需氧菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)用的培養(yǎng)基及控制菌培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查。本次驗(yàn)證的目的是確認(rèn)胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱液體培養(yǎng)基和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基適合需氧菌、霉菌及酵母菌、大腸埃希菌的測(cè)定和控制菌適用性檢查。2. 參照標(biāo)準(zhǔn)：2015版中國(guó)藥典微生物限度檢查法。3. 驗(yàn)證項(xiàng)目：胰酪大豆胨瓊脂培

2、養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱液體培養(yǎng)基和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基的適用性檢查4. 驗(yàn)證小組人員及職責(zé)：驗(yàn)證小組人員：小組人員職務(wù)姓名所在部門(mén)職務(wù)組長(zhǎng)劉秀質(zhì)量管理部經(jīng)理組員郝枝桃質(zhì)量管理部QC主任組員王和霞質(zhì)量管理部檢驗(yàn)員組員蘭丹質(zhì)量管理部檢驗(yàn)員驗(yàn)證人員職責(zé)及要求按驗(yàn)證方案及相關(guān)文件實(shí)施驗(yàn)證。認(rèn)真觀察并做好驗(yàn)證原始記錄。對(duì)實(shí)施驗(yàn)證的結(jié)果負(fù)責(zé)。驗(yàn)證中各部門(mén)的職責(zé)驗(yàn)證領(lǐng)導(dǎo)組職責(zé)制訂驗(yàn)證總計(jì)劃，負(fù)責(zé)全公司驗(yàn)證工作的管理確定驗(yàn)證項(xiàng)目及驗(yàn)證項(xiàng)目負(fù)責(zé)人。負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的批準(zhǔn)工作。負(fù)責(zé)驗(yàn)證資料及結(jié)果的審核工作。負(fù)責(zé)驗(yàn)證報(bào)告的批準(zhǔn)工作。驗(yàn)證工作小組職責(zé)負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的起草工作。參與驗(yàn)證方案的討論、確認(rèn)工作。負(fù)責(zé)驗(yàn)證方

3、案的實(shí)施。負(fù)責(zé)驗(yàn)證結(jié)果的分析、統(tǒng)計(jì)、報(bào)告工作參與驗(yàn)證結(jié)果的評(píng)價(jià)工作。質(zhì)量部職責(zé)負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的審核工作。負(fù)責(zé)驗(yàn)證過(guò)程中儀器、儀表、計(jì)量器具的校驗(yàn)工作。負(fù)責(zé)驗(yàn)證中各項(xiàng)檢測(cè)工作，提供驗(yàn)證的檢驗(yàn)記錄、檢驗(yàn)報(bào)告，對(duì)驗(yàn)證過(guò)程中的各項(xiàng)檢驗(yàn)工作負(fù)責(zé)。負(fù)責(zé)驗(yàn)證資料和報(bào)告的審核工作。負(fù)責(zé)驗(yàn)證文件回收、歸檔管理工作。5. 合格標(biāo)準(zhǔn)：被檢培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)不小于對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的70%且菌落形態(tài)大小與對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落一致。6. 試驗(yàn)材料：.被驗(yàn)證培養(yǎng)基：沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基、胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱液體培養(yǎng)基.儀器設(shè)備：手提式不銹鋼蒸鍋型電熱恒溫培養(yǎng)箱250B生化培養(yǎng)箱101型電熱恒

4、溫培養(yǎng)箱驗(yàn)證用培養(yǎng)基名稱(chēng)生產(chǎn)廠家批號(hào)胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基麥康凱瓊脂培養(yǎng)基麥康凱液體培養(yǎng)基胰酪大豆胨瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基沙氏葡萄糖瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基麥康凱瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基麥康凱液體對(duì)照培養(yǎng)基驗(yàn)證用菌株：（第代）試驗(yàn)菌株鋰傘甘培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時(shí)間（小時(shí)）白色念珠菌沙氏匍萄糖瓊脂培養(yǎng)基20-25C24-48h黑曲霉5-7天金黃色葡萄球菌胰酪大豆胨培養(yǎng)基3035C18-24h大腸埃布困銅綠假單胞菌7. 菌液制備.取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、白色念球菌的新鮮培養(yǎng)物。.用勺無(wú)菌氯化鈉溶液，制成適宜濃度的菌懸液。.取黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物加入3-5ml濃度為勺無(wú)菌氯化鈉溶液，將抱子洗脫

5、。7.4采用適宜的方法吸出抱子懸液至無(wú)菌試管中。.用勺無(wú)菌氯化鈉溶液制成適宜濃度的抱子懸液。.注意事項(xiàng)：菌液制備后，如在室溫下放置，應(yīng)在2h內(nèi)使用；如保存在2-8C,可在24h內(nèi)使用，黑曲霉抱子懸液可保存在2-8C,在驗(yàn)證過(guò)的儲(chǔ)存期內(nèi)使用。&培養(yǎng)基適用性檢查：分別接種不大于100cfu的金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌的菌液至胰酪大豆胨培養(yǎng)基。每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平板，混勻、凝固，置于30-35C培養(yǎng)不超過(guò)3天計(jì)數(shù)。分別接種不大于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉的菌液至沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。每個(gè)試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平板，混勻、凝固，置于20-25C培養(yǎng)不超過(guò)5天計(jì)數(shù)。用對(duì)應(yīng)的對(duì)照培養(yǎng)基

6、代替被檢培養(yǎng)基進(jìn)行上述試驗(yàn)。結(jié)果判定：被檢培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)對(duì)照培養(yǎng)基上菌落平均數(shù)的70%且菌落形態(tài)大少與對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落一致，判定培養(yǎng)基的適用性試驗(yàn)檢測(cè)符合規(guī)定。試驗(yàn)時(shí)間年月日完成時(shí)間年月日驗(yàn)證菌株平皿號(hào)供試品組cfu/ml對(duì)照培養(yǎng)基組cfu/ml回收率%應(yīng)70%銅綠假單胞菌1-（培養(yǎng)3天計(jì)數(shù)）2-平均值金黃色葡萄球菌（培養(yǎng)3天計(jì)數(shù)）1-2-平均值大腸埃布困（培養(yǎng)3天計(jì)數(shù)）1-2-平均值白色念珠菌（培養(yǎng)5天開(kāi)始計(jì)數(shù)）1-2-平均值黑曲霉菌（培養(yǎng)5天開(kāi)始計(jì)數(shù)）1-2-平均值結(jié)論試驗(yàn)人復(fù)核人9、控制菌檢查控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查項(xiàng)目包括促生長(zhǎng)能力、抑制能力及指示特性的檢查。常用培養(yǎng)基適

7、用性檢測(cè)項(xiàng)目及所用菌株見(jiàn)下表。大腸埃布困麥康凱液體培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力大腸埃布困抑制能力金黃色葡萄球菌麥康凱瓊脂培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力+指示特性大腸埃布困麥康凱液體培養(yǎng)基適用性檢查促生長(zhǎng)能力檢查分別接種不大于100cfu的大腸埃希菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基中。在35C條件下培養(yǎng)24h，與對(duì)照培養(yǎng)基管比較。檢查標(biāo)準(zhǔn)：被檢培養(yǎng)基管試驗(yàn)菌應(yīng)生長(zhǎng)良好。檢驗(yàn)結(jié)果：抑制能力檢查分別接種不少于100cfu的金黃色葡萄球菌于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基中。在35r條件下培養(yǎng)24h,并將被檢培養(yǎng)基與對(duì)照培養(yǎng)基管比較。檢查標(biāo)準(zhǔn)：被檢培養(yǎng)基管和對(duì)照培養(yǎng)基管試驗(yàn)菌均不得生長(zhǎng)檢驗(yàn)結(jié)果：麥康凱瓊脂培養(yǎng)基適用性檢查：促生長(zhǎng)能力+指示特性的檢查用