微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制準(zhǔn)則

1、質(zhì)量控制相關(guān)定義l質(zhì)量控制：滿足質(zhì)量要求的操作技術(shù)和活動(dòng)。l質(zhì)量保證：為了滿足實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量要求 ，制定相應(yīng)的計(jì)劃，實(shí)施證明（記錄）所進(jìn)行的一系列的系統(tǒng)活動(dòng)l外部質(zhì)量控制：通過(guò)互相校準(zhǔn)和/或檢驗(yàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)室的操作和結(jié)果所進(jìn)行的控制l內(nèi)部質(zhì)量控制：實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部采取的以對(duì)比分析、跟蹤以及相關(guān)方法，對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作的連續(xù)性控制計(jì)劃。l質(zhì)量手冊(cè)：是描述質(zhì)量系統(tǒng)元素的文件或文件的集合。 實(shí)驗(yàn)室要求l組織：按國(guó)家實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可的概念，是指一個(gè)能夠承擔(dān)法律責(zé)任的實(shí)體。這里所指的是實(shí)驗(yàn)室（微檢室）內(nèi)建立的質(zhì)量管理的保證體系。l人員l房屋 滿足檢測(cè)工作需要。l設(shè)備人員要求l實(shí)驗(yàn)室人員的分類(lèi)：管理人員、技術(shù)人員、技術(shù)支持人員等。l

2、相應(yīng)崗位的人員，應(yīng)具備相應(yīng)的技術(shù)能力，相應(yīng)的技術(shù)能力證明（證書(shū)及證件）。l微生物檢驗(yàn)室因有相應(yīng)技術(shù)能力的人負(fù)責(zé)室內(nèi)的技術(shù)工作。并設(shè)立質(zhì)量監(jiān)督員。房屋條件要求l房屋要求：具有適宜、足夠?qū)挸ā⑼L(fēng)有良好的照明。l房屋內(nèi)墻面及地等應(yīng)采用易于清潔的材料，保持房間清潔。l房間的設(shè)置，以其開(kāi)展的工作內(nèi)容加以分用，設(shè)立專(zhuān)用房間。l房間的大小還應(yīng)根據(jù)從事實(shí)驗(yàn)人員的進(jìn)入數(shù)量上加以考慮。環(huán)境設(shè)施要求l專(zhuān)用房間的溫濕度控制與記錄（樣品存放室）l特殊環(huán)境的微生物指標(biāo)控制與記錄（無(wú)菌室等）l專(zhuān)用工作室的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程和定期的檢測(cè)校準(zhǔn)程序。（潔凈室等）l特殊環(huán)境中的專(zhuān)用設(shè)施質(zhì)量控制應(yīng)符合有關(guān)要求（凈化工作臺(tái)）環(huán)境設(shè)施的相關(guān)

3、技術(shù)指標(biāo)l凈化室、凈化工作區(qū)域、潔凈環(huán)境按國(guó)家及部頒標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè)。l空氣潔凈度指標(biāo)：l檢測(cè)頻率及檢測(cè)方法。一次/月；空氣細(xì)菌檢測(cè)（沉降法）。級(jí)別0.5m塵粒(個(gè)/L)5m塵粒(個(gè)/L)活菌顆粒平均數(shù)(cfu/平板)1003.50.01.010000350.02.53.0設(shè)備/儀器要求總則l滿足開(kāi)展相關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目的要求。l制定相關(guān)設(shè)備/儀器的作業(yè)指導(dǎo)書(shū)。l設(shè)備/儀器的檢定校準(zhǔn)，特別室新購(gòu)儀器的檢定。設(shè)備/儀器分別以送檢、送校、自檢、自校表示其所檢定的狀態(tài)。l設(shè)備/儀器的運(yùn)行檢查計(jì)劃。l設(shè)備/儀器的運(yùn)行狀況及適用記錄l維修后設(shè)備/儀器的再校準(zhǔn)或檢查，并具有完整的檢查記錄。設(shè)備控制和程序l微生物檢驗(yàn)常

4、用需監(jiān)控的設(shè)備和儀器l1培養(yǎng)箱（生化培養(yǎng)箱或CO2培養(yǎng)箱等）、干燥箱、高壓滅菌鍋、凈化工作臺(tái)、pH計(jì)、 冰箱，（低溫冰箱或冷柜）溫度計(jì)、紫外燈、顯微鏡、離心機(jī)、天平、。l2小計(jì)量容器l3微生物測(cè)定儀器、微生物檢定儀器、空氣采樣器、酶標(biāo)儀專(zhuān)用等。溫度計(jì)l實(shí)驗(yàn)室必須要有工作溫度計(jì)和參照溫度計(jì)。l工作溫度計(jì)：用于日常溫度檢查。l參照溫度計(jì)：用于校正工作的溫度計(jì)。l溫度計(jì)運(yùn)行檢查：一般可采用一次/半年的運(yùn)行檢查。l日常檢查、校準(zhǔn)檢查、運(yùn)行檢查等都應(yīng)做好相應(yīng)的技術(shù)記錄。培養(yǎng)箱、水浴箱和冰箱的溫度控制l根據(jù)培養(yǎng)物性質(zhì)及溫度要求，培養(yǎng)箱應(yīng)分別設(shè)置（以用途和溫度分）l培養(yǎng)箱的溫差要求，一般顯示值與實(shí)測(cè)值相差不

5、大于1，箱體內(nèi)各點(diǎn)溫差（內(nèi)部的溫度均衡性）以及溫度波動(dòng)同樣不大于1。l溫度監(jiān)控方法：可將工作溫度計(jì)置甘油中，放入待測(cè)箱體內(nèi)，觀察工作溫度計(jì)的溫度，最好1-2次/天監(jiān)控記錄，高壓滅菌鍋的溫度控制（一）l高壓滅菌鍋；生物指示菌法（常用）、化學(xué)變色紙片及高壓滅菌鍋溫度計(jì)等方法進(jìn)行檢測(cè)。l生物指示菌法是一種高壓滅菌鍋的效果顯示法。l高壓滅菌鍋由專(zhuān)人按作業(yè)指導(dǎo)書(shū)操作，并做好每一次的作業(yè)記錄。l高壓滅菌鍋使用時(shí)，內(nèi)置物品不能太多，單位體積內(nèi)的內(nèi)容物（每瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基）不能太多。同時(shí)應(yīng)注意內(nèi)容物不同耐受溫度?？偟谋┞稌r(shí)間最好不要超過(guò)45min。高壓滅菌鍋的溫度控制（二）l高壓滅菌鍋日常工作記錄應(yīng)包含以下信息：

6、高壓滅菌的材料、開(kāi)始時(shí)間、壓力/溫度、取出時(shí)間、高壓滅菌膠帶的顏色變化（日常常用無(wú)菌培養(yǎng)代替）l高壓滅菌鍋溫度波動(dòng)范圍：110，115和1212。l高壓滅菌鍋校準(zhǔn)周期一般在半年。干燥滅菌箱溫度控制l干燥滅菌箱日常工作記錄中應(yīng)包括以下信息：開(kāi)始的時(shí)間、到達(dá)滅菌溫度時(shí)的時(shí)間、取出的時(shí)間（或關(guān)閉時(shí)間）。l干燥滅菌箱的溫度校準(zhǔn)；用參考溫度計(jì)進(jìn)行溫度測(cè)試。l干燥滅菌箱溫度要求與精確度：1605 或180 5 。前者為滅菌2h，后者為30min。l干燥滅菌箱校準(zhǔn)時(shí)間一般為一年。培養(yǎng)基配制用蒸餾水的控制l對(duì)于蒸餾水器來(lái)說(shuō)：按設(shè)備說(shuō)明，定期清潔離子交換器和更換離子交換材料。l檢測(cè)要求：西歐標(biāo)準(zhǔn)為微生物檢驗(yàn)用蒸

7、餾水的特定電導(dǎo)率0.5ms/m；細(xì)菌數(shù)50cfu/ml。我們?nèi)粘Ｓ玫臉?biāo)準(zhǔn)為 10ms/m，未見(jiàn)有細(xì)菌指標(biāo)。l檢測(cè)頻率：1次/每月。l蒸餾水定點(diǎn)供應(yīng)，并做好相應(yīng)的質(zhì)量控制，記錄檢測(cè)結(jié)果。天平的管理l天平放置要求：無(wú)振動(dòng)、無(wú)氣流影響及水平臺(tái)面上。l天平要有使用及運(yùn)行檢查記錄。l天平作為計(jì)量?jī)x器是列入國(guó)家強(qiáng)制檢定的范圍，一般1次/年進(jìn)行檢定。l運(yùn)行檢查頻率按運(yùn)行計(jì)劃或按產(chǎn)品（天平生產(chǎn)廠家）給出的標(biāo)準(zhǔn)重量單位進(jìn)行對(duì)照。容積的控制（一）l通過(guò)一定的控制方法，保證高壓滅菌后的稀釋劑滿足標(biāo)準(zhǔn)用量。l采取稱(chēng)中法來(lái)測(cè)定蒸發(fā)量，體積100ml的稀釋劑起重量為101g。高壓夠體積偏差不得超過(guò)1%。l采取先高壓后定量

8、分裝，可避免因高壓造成的體積誤差。l對(duì)保存的定量液體應(yīng)在使用時(shí)，注意補(bǔ)充容積。容積的控制（二）l吸管的控制：通過(guò)小計(jì)量容器校準(zhǔn)，后使用。l小計(jì)量容器吸管、容量瓶、量筒等玻璃器皿，校準(zhǔn)周期一般為1-2次/一年。l小計(jì)量容器日常使用檢查可每周進(jìn)行一次，包括容器的完整性。并做好相應(yīng)的記錄。pH計(jì)lpH計(jì)使用前應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行校準(zhǔn)。l緩沖液使用有效期：PH4.00 約1年 l PH7.00 約6個(gè)月l pH9.00 約6個(gè)月lpH計(jì)的維護(hù)：電極外表的定期清洗；l 電極敏感性檢測(cè)及極性恢復(fù)。凈化工作臺(tái)的控制l水平流凈化工作臺(tái)工作區(qū)域，要求潔凈度為100級(jí)。空氣沉降30min，細(xì)菌數(shù)1個(gè)/皿。垂直流凈化工作

9、臺(tái)，細(xì)菌數(shù)0.49個(gè)/皿.l凈化工作臺(tái)運(yùn)行檢查頻次：1次/月主要是細(xì)菌沉降檢測(cè)。l凈化工作臺(tái)高效過(guò)濾膜一般為一年更換一次，并同時(shí)進(jìn)行粒子與細(xì)菌沉降檢測(cè)。紫外線燈的控制l檢測(cè)方法：儀器測(cè)試法和生物測(cè)試法。前者是通過(guò)專(zhuān)用儀器檢測(cè)紫外燈管發(fā)射的紫外光強(qiáng)度。國(guó)家消毒技術(shù)規(guī)范中表明在距離照射無(wú)1米處，要求其強(qiáng)度為90。l生物測(cè)試法：采用一定的菌培養(yǎng)物，經(jīng)一定比例稀釋?zhuān)靠刂圃?00-250個(gè)/0.5ml，涂布平板在紫外燈光下照射，2min，同時(shí)設(shè)置普通光源的對(duì)照組，后置3748h，計(jì)算其殺滅率。要求殺滅率達(dá)99%。顯微鏡的控制l顯微鏡應(yīng)制定作業(yè)指導(dǎo)書(shū)，日常維護(hù)記錄及自校記錄。l顯微鏡應(yīng)置于無(wú)振動(dòng)，避免

10、灰塵，防潮等要求的環(huán)境。其它微生物檢測(cè)專(zhuān)用儀器的控制l細(xì)菌鑒定儀、酶標(biāo)儀等設(shè)備，工作中常用陽(yáng)性對(duì)照檢測(cè)其功能的正常性。l儀器的檢定則按有關(guān)的部門(mén)檢定或按自校作業(yè)指導(dǎo)書(shū)進(jìn)行。l儀器的使用登記、校準(zhǔn)計(jì)劃、校準(zhǔn)記錄等文件存檔。l儀器專(zhuān)人使用、操作者應(yīng)取得相應(yīng)的崗位培訓(xùn)合格，持證上崗。培養(yǎng)基質(zhì)量控制l正確進(jìn)行培養(yǎng)基質(zhì)量控制，并作為一項(xiàng)經(jīng)常性的工作，建立完整的檢驗(yàn)資料，是實(shí)驗(yàn)室今后通過(guò)相應(yīng)級(jí)別的認(rèn)證，在整個(gè)檢驗(yàn)質(zhì)量控制體系中所必須具備的文件資料。 l現(xiàn)有的依據(jù)：衛(wèi)生部1993年發(fā)布的食品檢驗(yàn)用干燥培養(yǎng)基生產(chǎn)質(zhì)量控制。但這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)不完善。培養(yǎng)基的分類(lèi)l按其成分分類(lèi)按其成分分類(lèi)：有天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。l按

11、用途分類(lèi)按用途分類(lèi)：基礎(chǔ)培養(yǎng)基、增菌培養(yǎng)基、選擇性培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基及厭氧培養(yǎng)基。按培養(yǎng)基的形態(tài)分類(lèi)按培養(yǎng)基的形態(tài)分類(lèi)：液體培養(yǎng)基、流體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基及固體培養(yǎng)基。l根據(jù)培養(yǎng)基的劑型不同分類(lèi)根據(jù)培養(yǎng)基的劑型不同分類(lèi)：新鮮配制培養(yǎng)基和干燥培養(yǎng)基兩種。檢驗(yàn)中常用的培養(yǎng)基l水質(zhì)檢測(cè)用培養(yǎng)基：7種l化妝品檢驗(yàn)用培養(yǎng)基 ：8種l食品檢驗(yàn)用培養(yǎng)基 ：常用的有3 7 種，110種被列入了GB4789中，其中生化試驗(yàn)培養(yǎng)基23種，一般和專(zhuān)用培養(yǎng)基89種。l食品、化妝品及涉水產(chǎn)品等產(chǎn)品微生物檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目中所用的增菌分離培養(yǎng)基有所不同，對(duì)于菌種鑒定所用的培養(yǎng)基，各類(lèi)產(chǎn)品分離的菌種其鑒定所用的培養(yǎng)基基本相同。

12、l 常用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制常用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制 （一）l檢驗(yàn)項(xiàng)目與方法檢驗(yàn)項(xiàng)目與方法：對(duì)新批號(hào)的干燥培養(yǎng)基物理、化學(xué)及生物學(xué)指標(biāo)鑒定lA：感官（外觀）研細(xì)程度和顏色（溶解前后），透明度，雜質(zhì)等；lB：PH測(cè)定，按各種培養(yǎng)基要求的PH0.2，蒸餾水的PH應(yīng)在6.4-7.0之間。lC：生物學(xué)指標(biāo)檢定，被檢培養(yǎng)基相應(yīng)細(xì)菌生長(zhǎng)率測(cè)試；菌落大小及特征的檢測(cè)。常用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制常用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制 （二）l生長(zhǎng)率測(cè)試：生長(zhǎng)率測(cè)試：適用與液體和固體培養(yǎng)基：將菌培養(yǎng)液，用生理鹽水做倍比稀釋?zhuān)『线m稀釋度進(jìn)行平板計(jì)數(shù)或接種被檢的培養(yǎng)基試管，同時(shí)以按相關(guān)的培養(yǎng)基國(guó)標(biāo)配方新鮮配制的培養(yǎng)基進(jìn)行對(duì)照。不低與10%。常用

13、培養(yǎng)基的質(zhì)量控制常用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制 （三）l菌落大小測(cè)試：劃線分離測(cè)試菌，取10個(gè)菌落測(cè)量直徑大小，其直徑均值與新鮮配制的培養(yǎng)基無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。常用培養(yǎng)基檢定用標(biāo)準(zhǔn)菌株常用培養(yǎng)基檢定用標(biāo)準(zhǔn)菌株 甲型副傷寒沙門(mén)菌50002 傷寒沙門(mén)菌 50096 乙型副傷寒沙門(mén)茵 鴨沙門(mén)茵50083 鼠傷寒沙門(mén)氏菌 痢疾志賀菌1型5157Ol福氏志賀菌2 大腸埃希菌25922（ATCC）金黃色葡萄球菌25923（ATCC 普通變形桿菌肺炎克雷伯菌肺炎亞種 弗勞地枸櫞酸桿菌4197l綠膿桿菌27853（ATCC） 副溶血性弧菌常用培養(yǎng)基質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)常用培養(yǎng)基質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) l外觀和理化標(biāo)準(zhǔn)：l干粉顏色：淡黃色粉末或呈現(xiàn)本培

14、養(yǎng)基特有的顏色l溶解后培養(yǎng)基色澤：清晰透明（含瓊脂除外）淡黃色或特有的色澤；l滅菌后的培養(yǎng)基PH：7.22為多；個(gè)別弧菌檢驗(yàn)用培養(yǎng)基pH值偏高為：8.0 2l生物學(xué)指標(biāo)：菌落特征及菌落大小 。培養(yǎng)基保存環(huán)境培養(yǎng)基保存環(huán)境l制成的培養(yǎng)基保存環(huán)境為4冰箱，如制成平板則用塑料袋包裝置冰箱保存， l干燥培養(yǎng)基干粉含有活性物質(zhì)、遇熱易分解的物質(zhì)應(yīng)仔細(xì)查看存放條件，多數(shù)也須放在2-8 條件保存。l有的培養(yǎng)基則以存放于10-15 條件為易。如含有高濃度膽鹽的培養(yǎng)基。養(yǎng)基制備控制程序養(yǎng)基制備控制程序 l培養(yǎng)基配制所用的儀器設(shè)備培養(yǎng)基配制所用的儀器設(shè)備必須經(jīng)過(guò)相應(yīng)的鑒定 。l配制培養(yǎng)基所用的用具及容器配制培養(yǎng)基

15、所用的用具及容器必須是清潔或是滅菌的，一些特殊不易洗刷清潔的玻璃器皿，必要時(shí)可用重鉻酸鉀硫酸清潔浸泡后，取出置5%氫氧化鈉溶液浸泡數(shù)分鐘，再用3%鹽酸溶液進(jìn)行中和，然后用清水沖洗，烘干后備用。 l培養(yǎng)基配制原料，試劑質(zhì)量控制 培養(yǎng)基的配制程序（一） l不同的培養(yǎng)基配制的程序有所不同，但一般培養(yǎng)基配制程序主要有以下7個(gè)步驟、調(diào)配、融化、矯正pH、澄清過(guò)濾、分裝、滅菌及鑒定 。l注意點(diǎn)：配制時(shí)注意各類(lèi)成分的用途。lpH測(cè)定干燥培養(yǎng)基在工廠生產(chǎn)時(shí)，對(duì)培養(yǎng)基PH進(jìn)行了一定的調(diào)試，在實(shí)際工作中，由于配制的環(huán)境、配制所用的溶劑（蒸餾水）PH等條件有所不同，都會(huì)對(duì)所用的培養(yǎng)基PH要有所影響。因此對(duì)于干燥培養(yǎng)

16、基配制，同樣需要進(jìn)行PH測(cè)驗(yàn)。培養(yǎng)基的配制程序（二）l配制好的培養(yǎng)基（尤其是糖發(fā)酵管）不宜久放。，因?yàn)榕囵B(yǎng)培養(yǎng)基吸收空氣中的二氧化碳，會(huì)使培養(yǎng)基變酸，從而影響細(xì)菌的生長(zhǎng)。l培養(yǎng)基中的抑制劑及指示劑一定要精確稱(chēng)量，抑制劑要注意合理配伍。培養(yǎng)基主要原料的質(zhì)量控制， l 配制培養(yǎng)基的主要原料有蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏、膽鹽、無(wú)機(jī)鹽和瓊脂等，這些主要原料的有劣，直接影響到培養(yǎng)基的質(zhì)量，由此也將影響檢驗(yàn)質(zhì)量。l指標(biāo)有感官、理化、物理、生物學(xué)。培養(yǎng)基相關(guān)試劑的質(zhì)量控制 l培養(yǎng)基相關(guān)試劑的質(zhì)量控制及陰、陽(yáng)性對(duì)照菌株試驗(yàn)。對(duì)做生化反應(yīng)的各類(lèi)試劑，在配就后均應(yīng)進(jìn)行各項(xiàng)必要的鑒定。用已知陰、陽(yáng)性菌株進(jìn)行對(duì)照試驗(yàn)

17、。對(duì)于其它如氧化酶、觸酶、染色液等也同樣需要經(jīng)鑒定后用于試驗(yàn)。 不合格培養(yǎng)基可能的原因（一）不合格培養(yǎng)基可能的原因（一）l干燥培養(yǎng)基結(jié)塊干燥培養(yǎng)基結(jié)塊ll 培養(yǎng)基過(guò)于陳舊ll 培養(yǎng)基處于潮濕環(huán)境中l(wèi)l 培養(yǎng)基生產(chǎn)時(shí)水分過(guò)高lPH偏離規(guī)定值偏離規(guī)定值ll 培養(yǎng)基過(guò)于陳舊ll 配制時(shí)所使用的蒸餾水非中性ll 培養(yǎng)基過(guò)度滅菌不合格培養(yǎng)基可能的原因（二）不合格培養(yǎng)基可能的原因（二）l培養(yǎng)基不清澈培養(yǎng)基不清澈ll 使用了劣質(zhì)水ll 培養(yǎng)基PH值不對(duì)ll 使用了不同的容器制備ll 生產(chǎn)原料精度不夠ll 培養(yǎng)基過(guò)度滅菌l凝固溫度過(guò)高凝固溫度過(guò)高ll 培養(yǎng)基干粉用的太多l(xiāng)l 瓊脂質(zhì)量發(fā)生了變化不合格培養(yǎng)基可能

18、的原因（三）不合格培養(yǎng)基可能的原因（三）l凝膠強(qiáng)度過(guò)低凝膠強(qiáng)度過(guò)低ll 培養(yǎng)基干粉用的太少ll 培養(yǎng)基未完全溶解ll 培養(yǎng)基過(guò)度滅菌ll 傾注前未振搖培養(yǎng)基瓶ll 瓊脂粉凝固強(qiáng)度較低l顏色不對(duì)顏色不對(duì)ll PH不正確（帶指示劑的培養(yǎng)基）ll 培養(yǎng)基過(guò)度滅菌ll 使用了不潔的容器制備不合格培養(yǎng)基可能的原因（四）不合格培養(yǎng)基可能的原因（四）l培養(yǎng)基被污染培養(yǎng)基被污染ll 培養(yǎng)基滅菌不徹底ll 滅菌后存放不當(dāng)而污染ll 實(shí)驗(yàn)時(shí)使用了污染的器皿l生長(zhǎng)不良生長(zhǎng)不良ll 可能由制備容器設(shè)備、水或樣品帶入抑制物ll 樣品中含有亞致死性損傷的微生物ll PH不正確ll 添加物（抑制劑）等濃度不當(dāng)ll 培養(yǎng)基過(guò)

19、度滅菌ll 實(shí)驗(yàn)時(shí)培養(yǎng)基或溶解樣品時(shí)溫度過(guò)高不合格培養(yǎng)基可能的原因（五）不合格培養(yǎng)基可能的原因（五）l過(guò)分生長(zhǎng)過(guò)分生長(zhǎng)ll 培養(yǎng)基過(guò)度滅菌，選擇性物質(zhì)受到了破壞ll 添加物濃度不當(dāng)l菌落蔓延菌落蔓延ll 瓊脂表面過(guò)濕ll 使用了過(guò)多的接種體積ll 培養(yǎng)基過(guò)度滅菌l非典型生長(zhǎng)非典型生長(zhǎng)ll 培養(yǎng)基制備不當(dāng)ll 干燥培養(yǎng)基存放陳舊ll 制備成的培養(yǎng)基存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)ll 生長(zhǎng)條件不當(dāng)（溫度、時(shí)間、氣體）檢測(cè)質(zhì)量保證檢測(cè)質(zhì)量保證 l定期使用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和次級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（參考物質(zhì)）進(jìn)行內(nèi)部質(zhì)量控制。l實(shí)驗(yàn)室間的比對(duì)或能力驗(yàn)證l利用相同或不同方法進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)l對(duì)留存的樣品進(jìn)行在檢測(cè)。微生物檢驗(yàn)質(zhì)控方法微生物檢

20、驗(yàn)質(zhì)控方法 （一）l菌落計(jì)數(shù)精密度控制直接計(jì)數(shù)菌落計(jì)數(shù)精密度控制直接計(jì)數(shù)l選擇同一標(biāo)本，要求檢驗(yàn)人員進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。l將大腸菌（25922）或經(jīng)檢定標(biāo)化的菌片，通過(guò)合適的梯度稀釋?zhuān)x擇合適的稀釋度進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)操作。361培養(yǎng)24h進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。微生物檢驗(yàn)質(zhì)控方法（二）l菌落計(jì)數(shù)精密度控制重復(fù)計(jì)數(shù)法l選擇十個(gè)平板，每個(gè)平板具有合適的菌落數(shù)（100以內(nèi)）。將平板編號(hào)，由實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行計(jì)數(shù)并記錄結(jié)果。去掉平板編號(hào)，將平板置冰箱保存過(guò)夜，次日取出，重新給予編號(hào)，由實(shí)驗(yàn)人員重復(fù)計(jì)數(shù)并記錄。計(jì)算每位實(shí)驗(yàn)人員每對(duì)結(jié)果的平均數(shù)（X）。X=（a+b）/2；相對(duì)誤差（rd）計(jì)算：rd=|a+b|/X100%。其它

21、實(shí)驗(yàn)人員間的相對(duì)誤差范圍計(jì)算：先計(jì)算所有實(shí)驗(yàn)人員的平均菌落數(shù)，X=x/n，要求每一結(jié)果均應(yīng)在X18.2%范圍內(nèi)。重復(fù)計(jì)數(shù)要求l自身同一平皿重復(fù)計(jì)數(shù)誤差 小于7.7%l實(shí)驗(yàn)人員之間同一平皿重復(fù)計(jì)數(shù)誤差 18 .2%自身同一梯度平行加樣兩皿間相對(duì)誤 小于7.7%實(shí)驗(yàn)人員之間同一梯度計(jì)數(shù)誤差X18 .2%范圍l不同梯度間菌落計(jì)數(shù)最終誤差 小于7.7%菌種鑒定質(zhì)控菌種鑒定質(zhì)控l菌種鑒定質(zhì)控要求，對(duì)所給的微生物菌種，按有關(guān)的方法及指標(biāo)進(jìn)行生化、血清等方面的鑒定。l鑒定質(zhì)量評(píng)價(jià)：鑒定程序是否正確；鑒定方法是否正確；具體操作技術(shù)是否熟練，結(jié)果報(bào)告是否正確。每一項(xiàng)設(shè)立分值為25分?？偡譃?00分。內(nèi)部質(zhì)量控制的推薦頻率l菌落計(jì)數(shù)精密度控制： 1次/3月；l菌種鑒定控制： 1次/半年或1年l盲樣測(cè)定丟失的對(duì)照 1次/半年實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)1 l培訓(xùn)與告之培訓(xùn)與告之l實(shí)驗(yàn)室管理人員及實(shí)驗(yàn)人員必須了解相關(guān)工作有關(guān)的危險(xiǎn)。對(duì)招收新職工、工作開(kāi)始發(fā)生變化或使用新方法，啟用新的設(shè)備時(shí)，這點(diǎn)尤為重要。所有工作人員，包括清潔和服務(wù)人員都要知道。需要進(jìn)行口頭和書(shū)面兩種方式的通知。有關(guān)儀器必須要有