第3章培養(yǎng)基1-dong

1、MS培養(yǎng)基20世紀30、40年代的簡單培養(yǎng)基無機鹽濃度低，雜質(zhì)高，培養(yǎng)效果差維生素氨基酸生長調(diào)節(jié)物質(zhì)調(diào)節(jié)無機鹽濃度胡蘿卜黑櫻桃MS基本培養(yǎng)基（含有較高濃度的硝酸鹽、銨鹽、鉀鹽）改良MS培養(yǎng)基椰乳、水解酪蛋白、氨基酸等增加各種無機鹽濃度，尤其是氮和鉀的濃度生長調(diào)節(jié)物質(zhì)圖圖 3.1培養(yǎng)基改良過程中營養(yǎng)物質(zhì)的變化培養(yǎng)基改良過程中營養(yǎng)物質(zhì)的變化1865年Knop鹽溶液培養(yǎng)基1939年 Gautheret 愈傷組織培養(yǎng)基1925年Uspenski和Uspenskaia海藻培養(yǎng)基1943年White根培養(yǎng)基1962年Murashige & Skoog的MS培養(yǎng)基B5十字花科植物(Gamborg等，

2、1968)N6(朱至清等,1975,1987)和Nitsch H (Nitsch,1969)禾本科植物花粉培養(yǎng)WS (Wolter & Skoog，1966)& LS(Lingmal & Skoog，1962)木本植物改良培養(yǎng)基圖3.2 培養(yǎng)基的發(fā)展過程圖3.2 培養(yǎng)基的發(fā)展過程圖3.2 培養(yǎng)基的發(fā)展過程圖圖3.2 培養(yǎng)基的發(fā)展過程培養(yǎng)基的發(fā)展過程一、培養(yǎng)基的種類一、培養(yǎng)基的種類不同的植物不同的植物不同培養(yǎng)部位不同培養(yǎng)部位 不同的培養(yǎng)目的不同的培養(yǎng)目的需選用不同需選用不同的培養(yǎng)基的培養(yǎng)基一、培養(yǎng)基的種類一、培養(yǎng)基的種類 培養(yǎng)基成分培養(yǎng)基成分二、培養(yǎng)基的成分二、培養(yǎng)基的成

3、分水水無機營養(yǎng)成分無機營養(yǎng)成分有機營養(yǎng)成分有機營養(yǎng)成分植物激素植物激素培養(yǎng)體的支持材料培養(yǎng)體的支持材料其它輔助性物質(zhì)其它輔助性物質(zhì)水是植物原生質(zhì)體的組成成分，也是一切水是植物原生質(zhì)體的組成成分，也是一切代謝過程的介質(zhì)和溶媒。代謝過程的介質(zhì)和溶媒。 配制培養(yǎng)基母液時要用配制培養(yǎng)基母液時要用蒸餾水或者去離子蒸餾水或者去離子水水，以保持母液及培養(yǎng)基成分的精確性，防止儲，以保持母液及培養(yǎng)基成分的精確性，防止儲藏過程發(fā)霉變質(zhì)。藏過程發(fā)霉變質(zhì)。大規(guī)模生產(chǎn)時可用自來水。大規(guī)模生產(chǎn)時可用自來水。但但在少量研究上盡量用蒸餾水，以防成分的變化引在少量研究上盡量用蒸餾水，以防成分的變化引起不良效果。起不良效果。表表

4、11 11 植物所需大量元素占植物體干重的植物所需大量元素占植物體干重的 百分數(shù)百分數(shù)(%) (%) 也是也是染色體的組成成分，在細胞分裂過程中起作用；染色體的組成成分，在細胞分裂過程中起作用； 。缺鈣時細胞分裂受到影響，細胞壁形缺鈣時細胞分裂受到影響，細胞壁形成受阻，嚴重時幼芽、幼根會潰爛壞死。成受阻，嚴重時幼芽、幼根會潰爛壞死。v現(xiàn)代生物學研究還證明鈣是植物體內(nèi)的信號分子（信使）現(xiàn)代生物學研究還證明鈣是植物體內(nèi)的信號分子（信使）之一，在植物信號轉(zhuǎn)導中發(fā)揮重要作用，鈣離子與鈣調(diào)之一，在植物信號轉(zhuǎn)導中發(fā)揮重要作用，鈣離子與鈣調(diào)蛋白結(jié)合形成的蛋白結(jié)合形成的Ca2+CaM復合體，能活化各種酶，調(diào)復

5、合體，能活化各種酶，調(diào)節(jié)植物對外界環(huán)境的反應(yīng)與應(yīng)答過程。節(jié)植物對外界環(huán)境的反應(yīng)與應(yīng)答過程。碳水化合物碳水化合物維生素維生素氨基酸氨基酸肌醇肌醇天然復合物天然復合物椰乳椰乳 、水解酪蛋白、水、水解酪蛋白、水解乳蛋白、酵母提取物、解乳蛋白、酵母提取物、胰蛋白胨、西紅柿汁、胰蛋白胨、西紅柿汁、香蕉粉、橘子汁、可可香蕉粉、橘子汁、可可汁汁（三）有機營養(yǎng)成分（三）有機營養(yǎng)成分1. 碳水化合物碳水化合物種類：種類： VB1 (鹽酸硫胺素鹽酸硫胺素) 、 VB6 (鹽酸吡哆醇鹽酸吡哆醇) 、Vpp( (煙酸煙酸) ) 、 Vc (抗壞血酸抗壞血酸)，有時還使用生物素、葉酸、核黃素等。，有時還使用生物素、葉酸

6、、核黃素等。濃度：濃度： 0.11.0mg/L作用：作用： VB1促愈傷組織產(chǎn)生，提高活力促愈傷組織產(chǎn)生，提高活力 VB6 促根生長促根生長 Vpp與代謝和胚發(fā)育有關(guān)與代謝和胚發(fā)育有關(guān) Vc防組織褐變防組織褐變2.維生素維生素(vitamin)促進愈傷組織生長促進愈傷組織生長以及以及胚狀體和芽的形成胚狀體和芽的形成對組織細胞繁殖、分化的促進作用對組織細胞繁殖、分化的促進作用濃度濃度100 mg/L5. 天然復合物天然復合物6、植物激素、植物激素(hormone)植物激素是植物激素是指自然狀態(tài)下植物體內(nèi)合成，指自然狀態(tài)下植物體內(nèi)合成，并從產(chǎn)生處運送到別處，對生長發(fā)育產(chǎn)并從產(chǎn)生處運送到別處，對生長

7、發(fā)育產(chǎn)生顯著作用的微量（生顯著作用的微量（1微摩爾微摩爾/升以下）有升以下）有機物；機物；植物生長調(diào)節(jié)劑植物生長調(diào)節(jié)劑是指一些具有植物激素是指一些具有植物激素活性的人工合成的物質(zhì)?；钚缘娜斯ず铣傻奈镔|(zhì)。植物生長植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)調(diào)節(jié)物質(zhì)植物激素植物激素植物生長調(diào)節(jié)劑植物生長調(diào)節(jié)劑在植物組織培養(yǎng)中使用的生長調(diào)節(jié)物質(zhì)主要在植物組織培養(yǎng)中使用的生長調(diào)節(jié)物質(zhì)主要有有生長素類和細胞分裂素類生長素類和細胞分裂素類兩大類，少數(shù)培兩大類，少數(shù)培養(yǎng)基中還添加赤霉素養(yǎng)基中還添加赤霉素GA3等等 （1）種類）種類IAA IBANAA 2,4D（2）作用誘導愈傷組織形成和根分化，促進細）作用誘導愈傷組織形成和根分化，促進細胞分裂和伸長生長。胞分裂和伸長生長。根對生長素最敏感，在極低濃根對生長素最敏感，在極低濃度下就可促進生長，其次是莖和芽。度下就可促進生長，其次是莖和芽。 （3）濃度）濃度0.055mg/L，（4）天然的生長素熱穩(wěn)定性差，高溫高壓或受光天然的生長素熱穩(wěn)定性差，高溫高壓或受光條件易被破壞。在植物體內(nèi)也易受到體內(nèi)酶的分解。條件易被破壞。在植物體內(nèi)也易受到體內(nèi)酶