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文檔簡介

1、第二十二章 流式細胞儀分析技術及運用流式細胞術流式細胞術(Flow Cytometry, (Flow Cytometry, FCM)FCM)第一節(jié)第一節(jié) 流式細胞儀的原理流式細胞儀的原理 Principle of Flow Cytometer臺式流式細胞儀臺式流式細胞儀臺式流式細胞儀臺式流式細胞儀臺式流式細胞儀臺式流式細胞儀落地式流式細胞儀落地式流式細胞儀一、任務原理一、任務原理一一 液流系統(tǒng)液流系統(tǒng) 細胞樣品和包裹在外的鞘液,細胞樣品和包裹在外的鞘液,保證細胞逐個以一樣的速度、一樣保證細胞逐個以一樣的速度、一樣的軌跡檢測區(qū)。單細胞流技術。的軌跡檢測區(qū)。單細胞流技術。二激發(fā)光與光速成形系統(tǒng)二激

2、發(fā)光與光速成形系統(tǒng) 多為氬離子氣體激光多為氬離子氣體激光488nm,用圓柱形透鏡聚焦成高用圓柱形透鏡聚焦成高15um、寬、寬57um橢圓形光斑橢圓形光斑檢測區(qū)。長軸垂檢測區(qū)。長軸垂直細胞流和激光束中心軸,短軸與細直細胞流和激光束中心軸,短軸與細胞軸一致并重疊。胞軸一致并重疊。 保證每一細胞遭到保證每一細胞遭到一致的光照。單細胞照明技術。一致的光照。單細胞照明技術。三細胞信號檢測與分析和處置系統(tǒng)三細胞信號檢測與分析和處置系統(tǒng) 細胞產(chǎn)生散射光和熒光信號細胞產(chǎn)生散射光和熒光信號360360度發(fā)度發(fā)射。分光鏡和濾光片將不同波長的光射。分光鏡和濾光片將不同波長的光分開,光電倍增管及電子線路接納并分開,光電倍增管及電子線路接納并轉化為電信號,模數(shù)轉化器量化為數(shù)轉化為電信號,模數(shù)轉化器量化為數(shù)字信號由計算機采集、分析、顯示和字信號由計算機采集、分析、顯示和存儲。單細胞檢測技術。存儲。單細胞檢測技術。 二、流式細胞儀檢測二、流式細胞儀檢測 1.1.散射光測定散射光測定 2.2.熒光測定熒光測定 3.3.細胞分選原理細胞分選原理 第二節(jié)第二節(jié) 數(shù)據(jù)的顯示與分析數(shù)據(jù)的顯示與分析一、信道值一、信道值二、

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