保健食品原料目錄 破壁靈芝孢子粉（2020）

1、附件2保健食品原料目錄 破壁靈芝孢子粉原料名稱每日用量功效名稱用量范圍適宜人群不適宜人群注意事項(xiàng)破壁靈芝孢子粉1-4g免疫力低下者少年兒童、孕婦及乳母增強(qiáng)免疫力破壁靈芝孢子粉原料技術(shù)要求【來(lái)源】破壁靈芝孢子粉為多孔菌科真菌赤芝（Ganoderma lucidum (Leyss. ex Fr.) Karst.）、紫芝（Ganoderma sinense Zhao, Xu et Zhang）、松杉靈芝（Ganoderma tsugae）的干燥成熟孢子，經(jīng)滅菌(輻照滅菌和濕熱滅菌等滅菌方法），干燥，低溫物理破壁，過(guò)篩制得?！靖泄僖蟆繎?yīng)符合表1規(guī)定。表1 感官指標(biāo)項(xiàng)目要求色澤棕褐色滋味、氣味氣微，味

2、淡或微苦狀態(tài)無(wú)結(jié)塊，干燥疏松細(xì)膩粉末，無(wú)粘連，無(wú)沙粒感，無(wú)正常視力可見(jiàn)外來(lái)異物【鑒別】顯微鑒別：粉末棕褐色，置顯微鏡下觀察，孢壁多破碎，可見(jiàn)多數(shù)黃褐色的大小不等的微粒、孢子破碎程度不同的殼段或孢子破碎后里面的黃色至黃褐色的內(nèi)容物，少見(jiàn)有未破壁的孢子，不得檢出子實(shí)體、菌絲、淀粉粒等異物。【理化指標(biāo)】應(yīng)符合表2規(guī)定。表2 理化指標(biāo)項(xiàng)目指標(biāo)檢驗(yàn)方法破壁率% 951 破壁率的測(cè)定水分，% 9.0GB 5009.3 總灰分，% 3.0GB 5009.4鉛（以Pb計(jì)）， mg/kg 2.0GB5009.12砷（以As計(jì)）， mg/kg 1GB/T 5009.11汞（以Hg計(jì)）， mg/kg 0.1GB/T

3、 5009.17鎘 （以Cd計(jì)），mg/kg 0.5GB5009.15鎳 （以Ni計(jì)）， mg/kg 1.0GB/T 5009.138鉻 （以Cr計(jì)）， mg/kg 2.0GB/T 5009.123過(guò)氧化值（以靈芝孢子油計(jì)），g/100g 0.20GB5009.2271 破壁率的測(cè)定1.1 儀器與設(shè)備1.1.1 血球計(jì)數(shù)板：25個(gè)中格16個(gè)小格或16個(gè)中格25個(gè)小格。1.1.2 電子分析天平：精度0.1 mg。1.1.3 超聲波清洗器：功率45 W。1.1.4 光學(xué)顯微鏡：放大倍數(shù)200。1.1.5 烘箱。1.2 試劑和溶液除非另有規(guī)定，本方法中所用試劑均為分析純。1.2.1 實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合G

4、B/T6682規(guī)定的三級(jí)水規(guī)格。1.2.2 吐溫80。1.2.3 蔗糖。1.3 樣品制備分別取同一批次有代表性靈芝孢子粉和破壁靈芝孢子粉的樣品各至少100 g，分別充分混勻，置于密閉的容器內(nèi)。1.4 分析步驟1.4.1 取適量同一批次的靈芝孢子粉A和破壁靈芝孢子粉B，于烘箱60下烘干5 h。1.4.2 準(zhǔn)確稱取經(jīng)烘干的孢子粉A和破壁靈芝孢子粉B，其中mA=0.1000 g，mB=0.1500 g。1.4.3 分別稱取5.0 g經(jīng)過(guò)研磨后過(guò)100目篩的蔗糖粉末，分別與孢子粉A、B充分混合至色澤均一。用蒸餾水分別溶解上述樣品，在樣品溶液中加0.1 mL吐溫80，用蒸餾水定容到100 mL的容量瓶中

5、，并在室溫超聲震蕩30 min，使孢子充分分散。1.4.4 將待測(cè)孢子懸液，用吸管吸取一滴置于蓋玻片的邊緣，使液體緩緩滲入，多余的液體用吸水紙吸取，進(jìn)樣完成后靜置約30 s，然后將血球計(jì)數(shù)板置于200倍及以上放大倍數(shù)的光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察計(jì)數(shù)。1.4.5 使用25個(gè)中格16個(gè)小格的計(jì)數(shù)板時(shí)，應(yīng)計(jì)算出血球計(jì)數(shù)板4個(gè)角上與中央5個(gè)中格中含完整靈芝孢子的數(shù)目（即以80個(gè)小格為一個(gè)計(jì)數(shù)單位）；當(dāng)使用16個(gè)中格25個(gè)小格的計(jì)數(shù)板時(shí)，應(yīng)計(jì)算出血球計(jì)數(shù)板4個(gè)角上的4個(gè)中格中含完整靈芝孢子的數(shù)目（即以100個(gè)小格為一個(gè)計(jì)數(shù)單位）。如有部分孢子處于中格邊線上，計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)該僅統(tǒng)計(jì)位于中格四個(gè)邊線的其中兩個(gè)邊線的孢子

6、數(shù)，每個(gè)樣品觀察計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)去掉離群較大的值，每個(gè)樣品有效觀察計(jì)數(shù)不少于3次，然后計(jì)算它們的平均數(shù)n。1.5 結(jié)果計(jì)算1.5.1 使用25個(gè)中格16個(gè)小格的計(jì)數(shù)板時(shí)，每克孢子粉中含完整靈芝孢子數(shù)按式（1.1）計(jì)算： （1.1）式中：N每克孢子粉含完整的靈芝孢子數(shù)，單位為個(gè)每克（個(gè)/g）；n80個(gè)小方格內(nèi)含完整靈芝孢子的總數(shù)，單位為個(gè)；V孢子稀釋液的體積，單位為毫升（mL）；m樣品的質(zhì)量，單位為克（g）；400血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室內(nèi)共有400個(gè)小方格；10000血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)室的容積為0.1mm3，1mL相當(dāng)于10000個(gè)血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)室的容積。1.5.2 使用16個(gè)中格25個(gè)小格的計(jì)數(shù)板時(shí)，每克孢子

7、粉中含完整靈芝孢子數(shù)按式（1.2）計(jì)算：（1.2）式中：N每克孢子粉含完整的靈芝孢子數(shù)，單位為個(gè)每克（個(gè)/g）；n100個(gè)小方格內(nèi)含完整靈芝孢子的總數(shù)，單位為個(gè)；V孢子稀釋液的體積，單位為毫升（mL）；m樣品的質(zhì)量，單位為克（g）；400血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室內(nèi)共有400個(gè)小方格；10000血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)室的容積為0.1 mm3，1 mL相當(dāng)于10000個(gè)血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)室的容積。1.5.3 破壁率按式（1.3）計(jì)算：（1.3）式中：X破壁靈芝孢子粉的破壁率，%；NB每克破壁靈芝孢子粉中含完整的靈芝孢子數(shù)，單位為個(gè)每克（個(gè)/g）；NA每克靈芝孢子粉中含完整的靈芝孢子數(shù)，單位為個(gè)每克（個(gè)/g）。【微生

8、物指標(biāo)】應(yīng)符合表3規(guī)定。表3 微生物指標(biāo)項(xiàng)目指標(biāo)檢驗(yàn)方法菌落總數(shù)，CFU/g 30000GB 4789.2霉菌和酵母，CFU/g 50GB 4789.15大腸菌群，MPN/g 0.92GB 4789.3 MPN計(jì)數(shù)法沙門(mén)氏菌 0/25gGB 4789.4金黃色葡萄球菌 0/25gGB 4789.10【標(biāo)志性成分指標(biāo)】 應(yīng)符合表4規(guī)定。表4標(biāo)志性成分指標(biāo)項(xiàng)目指標(biāo)檢驗(yàn)方法多糖，% 0.9（以無(wú)水葡萄糖（C6H12O6）計(jì)）2 多糖的測(cè)定2 多糖的測(cè)定2.1試劑和材料2.1.1硫酸（分析純）2.1.2葡萄糖（分析純）2.1.3無(wú)水乙醇（分析純）2.1.4硫酸蒽酮溶液：精密稱取蒽酮0.1 g，加硫酸溶

9、液100 mL使溶解，搖勻，置于棕色瓶中即得。2.2 儀器和設(shè)備2.2.1分析天平（感量0.0001g）2.2.2分光光度計(jì)2.2.3玻璃回流裝置2.2.4電熱恒溫水浴鍋2.2.5容量瓶25 mL，50 mL容量瓶2.2.6各規(guī)格移液管2.2.7具塞試管25 mL2.2.8濾紙（中速定性濾紙）。2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備2.3.1對(duì)照品溶液的制備取無(wú)水葡萄糖對(duì)照品適量，精密稱定加水制成每1 mL含0.12 mg的溶液，即得。2.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制精密量取對(duì)照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL，分別置于10 mL的具塞試管中，各加水至2.0 mL，迅速精密加入硫酸蒽酮溶液6

10、mL，立即搖勻，放置15 min，立即置冰水浴中冷卻15 min，取出，以相應(yīng)的試劑為空白，在625 nm處測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)曲線圖2.4供試品溶液的制備取本品粉末約2 g，精密稱定，置圓底燒瓶中，加水60 mL，靜置1h，加熱回流4 h，趁熱過(guò)濾，用少量熱水洗滌濾器和濾渣，將濾紙和濾渣置圓底燒瓶中，加水60 mL，加熱回流3 h，趁熱過(guò)濾，合并濾液，置水浴鍋上蒸干，殘?jiān)盟? mL溶解，邊攪拌邊緩慢加入乙醇75 mL，搖勻，在4放置12 h，離心，棄去上清液，沉淀物用熱水溶解并轉(zhuǎn)移至50 mL，放冷，加水至刻度，搖勻取溶液適量，離心，精密量取上清液3 mL，置25 mL量瓶，加水至刻度，搖勻，即得。2.5測(cè)定精密量取供試品溶液2 mL，置10 mL具塞試管中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法，自“ 迅速精密加入硫酸蒽酮溶液6 mL”起，同法