第五章 動(dòng)植物用轉(zhuǎn)基因微生物的安全性

1、第五章第五章 動(dòng)植物用轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物用轉(zhuǎn)基因 微生物的安全性微生物的安全性第一節(jié)第一節(jié) 動(dòng)植物用轉(zhuǎn)基因微生物概況動(dòng)植物用轉(zhuǎn)基因微生物概況第二節(jié)第二節(jié) 動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物安全性評(píng)價(jià)動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物安全性評(píng)價(jià)第三節(jié)第三節(jié) 植物用轉(zhuǎn)基因微生物安全性評(píng)價(jià)植物用轉(zhuǎn)基因微生物安全性評(píng)價(jià)第四節(jié)第四節(jié) 動(dòng)植物用轉(zhuǎn)基因微生物安全管理動(dòng)植物用轉(zhuǎn)基因微生物安全管理 以微生物為受體的轉(zhuǎn)基因生物稱(chēng)為轉(zhuǎn)基因微生物以微生物為受體的轉(zhuǎn)基因生物稱(chēng)為轉(zhuǎn)基因微生物。 微生物是轉(zhuǎn)基因最常用的轉(zhuǎn)化材料，轉(zhuǎn)基因微生微生物是轉(zhuǎn)基因最常用的轉(zhuǎn)化材料，轉(zhuǎn)基因微生物比較容易培育，應(yīng)用也最廣泛。例如，生產(chǎn)奶物比較容易培育，應(yīng)用也最廣泛。例如，生產(chǎn)

2、奶酪的凝乳酶，以往只能從殺死的小牛胃中獲得，酪的凝乳酶，以往只能從殺死的小牛胃中獲得，現(xiàn)利用轉(zhuǎn)基因微生物已能夠使凝乳酶在體外大量現(xiàn)利用轉(zhuǎn)基因微生物已能夠使凝乳酶在體外大量產(chǎn)生，避免了小牛的無(wú)辜死亡，也降低了成本。產(chǎn)生，避免了小牛的無(wú)辜死亡，也降低了成本。 如果把一種微生物的抗藥性基因或其他基因轉(zhuǎn)入如果把一種微生物的抗藥性基因或其他基因轉(zhuǎn)入另一種微生物中，使之具有抗藥性，或?qū)?dòng)植物另一種微生物中，使之具有抗藥性，或?qū)?dòng)植物基因轉(zhuǎn)入微生物中。這種后來(lái)具有抗藥性或其他基因轉(zhuǎn)入微生物中。這種后來(lái)具有抗藥性或其他新性狀的微生物即為轉(zhuǎn)基因微生物。例如，開(kāi)始新性狀的微生物即為轉(zhuǎn)基因微生物。例如，開(kāi)始時(shí)不具有

3、產(chǎn)蘇氨酸、天冬氨酸、凝血蛋白等，后時(shí)不具有產(chǎn)蘇氨酸、天冬氨酸、凝血蛋白等，后經(jīng)導(dǎo)入外源基因而獲得產(chǎn)蘇氨酸、天冬氨酸、凝經(jīng)導(dǎo)入外源基因而獲得產(chǎn)蘇氨酸、天冬氨酸、凝血蛋白等的微生物均為轉(zhuǎn)基因微生物。血蛋白等的微生物均為轉(zhuǎn)基因微生物。讓微生物制造然料讓微生物制造然料-含油細(xì)菌含油細(xì)菌嗜汞細(xì)菌嗜汞細(xì)菌-能清除汞污染能清除汞污染第一節(jié)第一節(jié) 動(dòng)植物用轉(zhuǎn)基因微生物概況動(dòng)植物用轉(zhuǎn)基因微生物概況 根據(jù)轉(zhuǎn)基因微生物的用途，可分為動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因根據(jù)轉(zhuǎn)基因微生物的用途，可分為動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物、植物用轉(zhuǎn)基因微生物和醫(yī)藥用轉(zhuǎn)基因微微生物、植物用轉(zhuǎn)基因微生物和醫(yī)藥用轉(zhuǎn)基因微生物三大類(lèi)。生物三大類(lèi)。 動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物是應(yīng)

4、用于動(dòng)物的活疫苗、飼動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物是應(yīng)用于動(dòng)物的活疫苗、飼料添加劑和其他用途的轉(zhuǎn)基因微生物。料添加劑和其他用途的轉(zhuǎn)基因微生物。 植物用轉(zhuǎn)基因微生物主要是指通過(guò)重組植物用轉(zhuǎn)基因微生物主要是指通過(guò)重組DNADNA微生物微生物研制的、直接應(yīng)用于植物上的具有殺蟲(chóng)、防病、研制的、直接應(yīng)用于植物上的具有殺蟲(chóng)、防病、固氮、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)等作用的微生物。固氮、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)等作用的微生物。 轉(zhuǎn)基因微生物釋放可能會(huì)帶來(lái)一系列安全問(wèn)題，轉(zhuǎn)基因微生物釋放可能會(huì)帶來(lái)一系列安全問(wèn)題，事前須對(duì)其在環(huán)境中的基因轉(zhuǎn)移潛力、存活能力、事前須對(duì)其在環(huán)境中的基因轉(zhuǎn)移潛力、存活能力、擴(kuò)散能力及對(duì)生態(tài)系統(tǒng)的潛在影響等進(jìn)行安全評(píng)擴(kuò)散能力及對(duì)生態(tài)

5、系統(tǒng)的潛在影響等進(jìn)行安全評(píng)價(jià)，并探索有效的檢測(cè)方法和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)策略?xún)r(jià)，并探索有效的檢測(cè)方法和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)策略一、動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物的發(fā)展概況一、動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物的發(fā)展概況1 轉(zhuǎn)基因微生物飼料添加劑轉(zhuǎn)基因微生物飼料添加劑 酶制劑酶制劑( (重組酶重組酶) )：利用高產(chǎn)能和生產(chǎn)飼料酶的基因：利用高產(chǎn)能和生產(chǎn)飼料酶的基因工程菌，添加于飼料中，提高飼料的效價(jià)。如產(chǎn)植工程菌，添加于飼料中，提高飼料的效價(jià)。如產(chǎn)植酸酶的重組畢氏酵母菌酸酶的重組畢氏酵母菌(2000(2000年許可證年許可證) )。 抗菌肽：抗菌肽對(duì)水生生物常見(jiàn)病如大腸桿菌、沙抗菌肽：抗菌肽對(duì)水生生物常見(jiàn)病如大腸桿菌、沙門(mén)氏菌等具有廣譜殺菌作用門(mén)

6、氏菌等具有廣譜殺菌作用，具有良好的應(yīng)用前景具有良好的應(yīng)用前景。2004年農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)轉(zhuǎn)抗菌肽基因酵母生產(chǎn)的抗菌肽年農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)轉(zhuǎn)抗菌肽基因酵母生產(chǎn)的抗菌肽制劑的效價(jià)達(dá)制劑的效價(jià)達(dá)5000U/ml 重組生長(zhǎng)素：重組生長(zhǎng)素：GH由腦下垂體分泌，能促進(jìn)動(dòng)物的由腦下垂體分泌，能促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育，加速蛋白質(zhì)合成，但在魚(yú)類(lèi)體內(nèi)含量極生長(zhǎng)發(fā)育，加速蛋白質(zhì)合成，但在魚(yú)類(lèi)體內(nèi)含量極微。將魚(yú)微。將魚(yú)GH基因轉(zhuǎn)入微生物中大量生產(chǎn)重組魚(yú)生基因轉(zhuǎn)入微生物中大量生產(chǎn)重組魚(yú)生長(zhǎng)素，作為添加劑具有很強(qiáng)的促生長(zhǎng)作用。長(zhǎng)素，作為添加劑具有很強(qiáng)的促生長(zhǎng)作用。產(chǎn)植酸酶的轉(zhuǎn)基因重組畢氏酵母菌產(chǎn)植酸酶的轉(zhuǎn)基因重組畢氏酵母菌2 基因工程疫苗

7、基因工程疫苗 利用重組利用重組DNA技術(shù)研制的疫苗，包括：亞單位疫技術(shù)研制的疫苗，包括：亞單位疫苗、活載體疫苗和基因缺失疫苗。我國(guó)經(jīng)批準(zhǔn)進(jìn)苗、活載體疫苗和基因缺失疫苗。我國(guó)經(jīng)批準(zhǔn)進(jìn)入商業(yè)化生產(chǎn)的有狂犬病疫苗和牛羊腹瀉疫苗；入商業(yè)化生產(chǎn)的有狂犬病疫苗和牛羊腹瀉疫苗；通過(guò)安全性評(píng)估的有雞傳染性喉氣管炎疫苗、禽通過(guò)安全性評(píng)估的有雞傳染性喉氣管炎疫苗、禽流感疫苗、雞痘疫苗等。流感疫苗、雞痘疫苗等。 基因工程亞單位疫苗：利用微生物的某種表面結(jié)基因工程亞單位疫苗：利用微生物的某種表面結(jié)構(gòu)成分構(gòu)成分( (抗原抗原) )制成不含有核酸、能誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生制成不含有核酸、能誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生抗體的疫苗稱(chēng)為亞單位疫苗?？贵w

8、的疫苗稱(chēng)為亞單位疫苗。它是一種保留病原它是一種保留病原體中有效免疫原成分體中有效免疫原成分, ,而去除其無(wú)效或有害成分的而去除其無(wú)效或有害成分的單純疫苗。單純疫苗。例如例如, ,只含霍亂毒素只含霍亂毒素B B亞單位制成的霍亞單位制成的霍亂毒素亂毒素B B亞單位疫苗；用狂犬病毒主要抗原粘附在亞單位疫苗；用狂犬病毒主要抗原粘附在脂質(zhì)體上制成的狂犬病毒免疫體亞單位疫苗；以脂質(zhì)體上制成的狂犬病毒免疫體亞單位疫苗；以及麻疹病毒亞單位疫苗；等等及麻疹病毒亞單位疫苗；等等. . 將病原微生物的主要的保護(hù)性免疫原基因轉(zhuǎn)移到非將病原微生物的主要的保護(hù)性免疫原基因轉(zhuǎn)移到非致病的微生物中表達(dá)，可從其培養(yǎng)物中分離制備

9、出致病的微生物中表達(dá)，可從其培養(yǎng)物中分離制備出亞單位疫苗試劑。亞單位疫苗試劑。 轉(zhuǎn)基因活疫苗：轉(zhuǎn)基因活疫苗：活疫苗是指將病原微生物在人工誘活疫苗是指將病原微生物在人工誘發(fā)突變，失去致病性但保留免疫原性、繁衍能力和發(fā)突變，失去致病性但保留免疫原性、繁衍能力和剩余毒力的無(wú)毒或弱毒病原微生物。剩余毒力的無(wú)毒或弱毒病原微生物。 活疫苗接種后在人體內(nèi)有一定程度的繁殖或復(fù)制，活疫苗接種后在人體內(nèi)有一定程度的繁殖或復(fù)制，類(lèi)似一次輕型的自然感染，但不導(dǎo)致人發(fā)病。類(lèi)似一次輕型的自然感染，但不導(dǎo)致人發(fā)病。 轉(zhuǎn)基因活疫苗根據(jù)其外源基因載體可分為病毒活載轉(zhuǎn)基因活疫苗根據(jù)其外源基因載體可分為病毒活載體疫苗和細(xì)菌活載體疫

10、苗。前者針對(duì)病毒病，后者體疫苗和細(xì)菌活載體疫苗。前者針對(duì)病毒病，后者針對(duì)細(xì)菌性疾病。針對(duì)細(xì)菌性疾病。 轉(zhuǎn)基因活疫苗已在全球范圍開(kāi)展科技研發(fā)和應(yīng)用研轉(zhuǎn)基因活疫苗已在全球范圍開(kāi)展科技研發(fā)和應(yīng)用研究，將成為今后疫苗制劑的主要趨勢(shì)。究，將成為今后疫苗制劑的主要趨勢(shì)。二、植物用轉(zhuǎn)基因微生物的發(fā)展概況二、植物用轉(zhuǎn)基因微生物的發(fā)展概況 應(yīng)用重組應(yīng)用重組DNA技術(shù)有目的地改變微生物或其產(chǎn)品技術(shù)有目的地改變微生物或其產(chǎn)品 的遺傳性狀和生物學(xué)活性的遺傳性狀和生物學(xué)活性, ,可進(jìn)一步增強(qiáng)殺蟲(chóng)防病可進(jìn)一步增強(qiáng)殺蟲(chóng)防病效果、擴(kuò)大作用譜、延長(zhǎng)田間持效期、從而提高效果、擴(kuò)大作用譜、延長(zhǎng)田間持效期、從而提高農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的經(jīng)濟(jì)效益

11、。農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的經(jīng)濟(jì)效益。 各國(guó)獲準(zhǔn)進(jìn)入田間釋放的轉(zhuǎn)基因微生物主要為轉(zhuǎn)蘇各國(guó)獲準(zhǔn)進(jìn)入田間釋放的轉(zhuǎn)基因微生物主要為轉(zhuǎn)蘇云金芽孢桿菌遺傳工程菌和轉(zhuǎn)基因根瘤菌等活體云金芽孢桿菌遺傳工程菌和轉(zhuǎn)基因根瘤菌等活體產(chǎn)品產(chǎn)品，轉(zhuǎn)基因病毒殺蟲(chóng)劑轉(zhuǎn)基因病毒殺蟲(chóng)劑、防病轉(zhuǎn)基因微生物防病轉(zhuǎn)基因微生物。我國(guó)已構(gòu)建轉(zhuǎn)基因工程菌近百株，有十多株轉(zhuǎn)基因我國(guó)已構(gòu)建轉(zhuǎn)基因工程菌近百株，有十多株轉(zhuǎn)基因微生物處于安全性評(píng)價(jià)和田間試驗(yàn)，微生物處于安全性評(píng)價(jià)和田間試驗(yàn)，6種菌經(jīng)安全種菌經(jīng)安全性評(píng)價(jià)后進(jìn)入環(huán)境釋放，性評(píng)價(jià)后進(jìn)入環(huán)境釋放，5種菌劑完成產(chǎn)品登記，種菌劑完成產(chǎn)品登記，其中的聯(lián)合固氮菌和高效廣譜的抗性基因工程菌其中的聯(lián)合固氮菌和高效廣

12、譜的抗性基因工程菌BMB820Bt已進(jìn)入商品化生產(chǎn)。已進(jìn)入商品化生產(chǎn)。1 轉(zhuǎn)基因生物農(nóng)藥轉(zhuǎn)基因生物農(nóng)藥 殺蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因微生物殺蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因微生物 轉(zhuǎn)基因病毒殺蟲(chóng)劑：通過(guò)基因工程方法將外源殺蟲(chóng)基轉(zhuǎn)基因病毒殺蟲(chóng)劑：通過(guò)基因工程方法將外源殺蟲(chóng)基因如蝎子神經(jīng)毒素基因等與昆蟲(chóng)病毒重組，使重組病因如蝎子神經(jīng)毒素基因等與昆蟲(chóng)病毒重組，使重組病毒殺蟲(chóng)速度和毒性提高，或成為雙價(jià)殺蟲(chóng)劑；毒殺蟲(chóng)速度和毒性提高，或成為雙價(jià)殺蟲(chóng)劑； 轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)Bt基因殺蟲(chóng)劑：將來(lái)自蘇氏桿菌的基因殺蟲(chóng)劑：將來(lái)自蘇氏桿菌的Bt基因?qū)胧荏w基因?qū)胧荏w菌株中，利用受體菌或載體的增效基因，制備效力更菌株中，利用受體菌或載體的增效基因，制備效力更強(qiáng)和更持久的

13、基因工程菌，以菌體或分離的強(qiáng)和更持久的基因工程菌，以菌體或分離的Bt 毒蛋白毒蛋白制造殺蟲(chóng)劑制造殺蟲(chóng)劑。在國(guó)外已有。在國(guó)外已有1010多種制劑投入商業(yè)化生產(chǎn)。多種制劑投入商業(yè)化生產(chǎn)。 防病轉(zhuǎn)基因微生物：通過(guò)對(duì)生防菌進(jìn)行基因改良，使防病轉(zhuǎn)基因微生物：通過(guò)對(duì)生防菌進(jìn)行基因改良，使之獲得對(duì)多種病害有拮抗活性，或增強(qiáng)抗菌活性。之獲得對(duì)多種病害有拮抗活性，或增強(qiáng)抗菌活性。 將外源幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入一些木霉菌、枯草桿菌的菌將外源幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入一些木霉菌、枯草桿菌的菌株中，使其產(chǎn)生更強(qiáng)烈的抑菌作用。株中，使其產(chǎn)生更強(qiáng)烈的抑菌作用。 將一些殺蟲(chóng)基因轉(zhuǎn)移到生防菌中，可使其同時(shí)具有防將一些殺蟲(chóng)基因轉(zhuǎn)移到生防菌中，

14、可使其同時(shí)具有防病和殺蟲(chóng)的功效。病和殺蟲(chóng)的功效。 相對(duì)于傳統(tǒng)化學(xué)合成農(nóng)藥，生物農(nóng)藥具有安全、相對(duì)于傳統(tǒng)化學(xué)合成農(nóng)藥，生物農(nóng)藥具有安全、高效、針對(duì)性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，在人們環(huán)保意識(shí)不斷增高效、針對(duì)性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，在人們環(huán)保意識(shí)不斷增強(qiáng)的今天，生物農(nóng)藥受到越來(lái)越多的重視，在全強(qiáng)的今天，生物農(nóng)藥受到越來(lái)越多的重視，在全球的市場(chǎng)需求穩(wěn)步攀升。球的市場(chǎng)需求穩(wěn)步攀升。 隨著轉(zhuǎn)基因作物的增加，病蟲(chóng)害綜合防治措施的隨著轉(zhuǎn)基因作物的增加，病蟲(chóng)害綜合防治措施的應(yīng)用，以及有機(jī)農(nóng)業(yè)的不斷擴(kuò)大，預(yù)計(jì)在未來(lái)數(shù)應(yīng)用，以及有機(jī)農(nóng)業(yè)的不斷擴(kuò)大，預(yù)計(jì)在未來(lái)數(shù)年生物農(nóng)藥的研發(fā)將取得更多突破性的進(jìn)展。年生物農(nóng)藥的研發(fā)將取得更多突破性的進(jìn)展。 生

15、物農(nóng)藥的主要發(fā)展趨勢(shì)為：以基因重組為核心生物農(nóng)藥的主要發(fā)展趨勢(shì)為：以基因重組為核心高技術(shù)競(jìng)爭(zhēng)日趨激烈，關(guān)鍵技術(shù)創(chuàng)新顯著加快；高技術(shù)競(jìng)爭(zhēng)日趨激烈，關(guān)鍵技術(shù)創(chuàng)新顯著加快；轉(zhuǎn)基因生物農(nóng)藥新品種不斷涌現(xiàn)，其研發(fā)和應(yīng)用轉(zhuǎn)基因生物農(nóng)藥新品種不斷涌現(xiàn)，其研發(fā)和應(yīng)用向更安全和更環(huán)保方向發(fā)展；產(chǎn)品更新?lián)Q代速度向更安全和更環(huán)保方向發(fā)展；產(chǎn)品更新?lián)Q代速度加快，已成為涉農(nóng)工業(yè)最具前景的發(fā)展領(lǐng)域。加快，已成為涉農(nóng)工業(yè)最具前景的發(fā)展領(lǐng)域。2 轉(zhuǎn)基因微生物肥料轉(zhuǎn)基因微生物肥料 轉(zhuǎn)基因微生物肥料主要是遺傳改良的聯(lián)合固氮菌轉(zhuǎn)基因微生物肥料主要是遺傳改良的聯(lián)合固氮菌和根瘤菌，是采用基因工程技術(shù)對(duì)外源固氮基因和根瘤菌，是采用基因工

16、程技術(shù)對(duì)外源固氮基因及其調(diào)控基因進(jìn)行轉(zhuǎn)移至受體微生物而構(gòu)建出來(lái)及其調(diào)控基因進(jìn)行轉(zhuǎn)移至受體微生物而構(gòu)建出來(lái)的新型重組固氮菌。的新型重組固氮菌。 由于銨對(duì)固氮菌的固氮有一定的阻遏作用，構(gòu)建由于銨對(duì)固氮菌的固氮有一定的阻遏作用，構(gòu)建耐銨或泌銨的固氮工程菌株將能減輕銨對(duì)固氮的耐銨或泌銨的固氮工程菌株將能減輕銨對(duì)固氮的阻遏作用，明顯提高其固氮效率。阻遏作用，明顯提高其固氮效率。 美美Rearch Seeds公司的轉(zhuǎn)基因根瘤菌公司的轉(zhuǎn)基因根瘤菌RMBPC-2已于已于19971997年獲準(zhǔn)進(jìn)行商業(yè)化生產(chǎn)；我國(guó)中科院、年獲準(zhǔn)進(jìn)行商業(yè)化生產(chǎn)；我國(guó)中科院、廣東微生物所和中科院上海植生所研制的聯(lián)合固廣東微生物所和中

17、科院上海植生所研制的聯(lián)合固氮菌氮菌AC-1541-1541已獲準(zhǔn)在遼寧生產(chǎn)；中科院植物所已獲準(zhǔn)在遼寧生產(chǎn)；中科院植物所和中國(guó)農(nóng)大聯(lián)合研究的玉米聯(lián)合固氮耐銨工程菌和中國(guó)農(nóng)大聯(lián)合研究的玉米聯(lián)合固氮耐銨工程菌E7E7已獲準(zhǔn)在黑龍江進(jìn)行環(huán)境釋放。已獲準(zhǔn)在黑龍江進(jìn)行環(huán)境釋放。 第二節(jié)第二節(jié) 動(dòng)物用動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物轉(zhuǎn)基因微生物安全性評(píng)價(jià)安全性評(píng)價(jià) 動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物與動(dòng)物和人類(lèi)健康密切相關(guān)，動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物與動(dòng)物和人類(lèi)健康密切相關(guān)，也是公眾最關(guān)心和最顧慮的一類(lèi)轉(zhuǎn)基因生物。也是公眾最關(guān)心和最顧慮的一類(lèi)轉(zhuǎn)基因生物。 微生物生長(zhǎng)繁殖快、變異類(lèi)型多，有許多類(lèi)型本微生物生長(zhǎng)繁殖快、變異類(lèi)型多，有許多類(lèi)型本身就是

18、動(dòng)植物的病原體。因此，轉(zhuǎn)基因微生物向身就是動(dòng)植物的病原體。因此，轉(zhuǎn)基因微生物向環(huán)境中釋放有可能會(huì)帶來(lái)一系列的安全問(wèn)題。環(huán)境中釋放有可能會(huì)帶來(lái)一系列的安全問(wèn)題。 由于轉(zhuǎn)基因微生物種類(lèi)及其應(yīng)用環(huán)境的多樣性由于轉(zhuǎn)基因微生物種類(lèi)及其應(yīng)用環(huán)境的多樣性, ,也也由于對(duì)轉(zhuǎn)基因工作可能產(chǎn)生的各種表型變異及其由于對(duì)轉(zhuǎn)基因工作可能產(chǎn)生的各種表型變異及其作用還缺乏足夠和充分的了解作用還缺乏足夠和充分的了解, ,因此現(xiàn)階段對(duì)其安因此現(xiàn)階段對(duì)其安全性的評(píng)價(jià)一般采取個(gè)案分析的原則。全性的評(píng)價(jià)一般采取個(gè)案分析的原則。 大面積釋放之前必須對(duì)轉(zhuǎn)基因微生物在環(huán)境中發(fā)大面積釋放之前必須對(duì)轉(zhuǎn)基因微生物在環(huán)境中發(fā)生基因轉(zhuǎn)移的潛力、存活

19、能力、擴(kuò)散能力及對(duì)生生基因轉(zhuǎn)移的潛力、存活能力、擴(kuò)散能力及對(duì)生態(tài)系統(tǒng)的潛在影響等進(jìn)行生態(tài)學(xué)研究和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)，態(tài)系統(tǒng)的潛在影響等進(jìn)行生態(tài)學(xué)研究和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)，還要探索有效的檢測(cè)方法和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)策略。還要探索有效的檢測(cè)方法和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)策略。一、受體微生物的一、受體微生物的安全性評(píng)價(jià)安全性評(píng)價(jià)1 受體微生物概述受體微生物概述 受體微生物是被導(dǎo)入了重組受體微生物是被導(dǎo)入了重組DNA的微的微生物，其安全性生物，其安全性評(píng)價(jià)要考慮以下幾個(gè)方面。評(píng)價(jià)要考慮以下幾個(gè)方面。 受體微生物背景資料和生物學(xué)特性：分類(lèi)地位、天然受體微生物背景資料和生物學(xué)特性：分類(lèi)地位、天然野生還是人工培養(yǎng)、應(yīng)用情況、是否對(duì)人畜產(chǎn)生過(guò)不野生還是人

20、工培養(yǎng)、應(yīng)用情況、是否對(duì)人畜產(chǎn)生過(guò)不良影響、演變?yōu)橛泻ι锏目赡苄浴⒎敝撑c擴(kuò)散方式。良影響、演變?yōu)橛泻ι锏目赡苄浴⒎敝撑c擴(kuò)散方式。 受體微生物所適應(yīng)的生態(tài)環(huán)境：地理分布、自然生境、受體微生物所適應(yīng)的生態(tài)環(huán)境：地理分布、自然生境、 生長(zhǎng)發(fā)育要求、與其他生物的生態(tài)關(guān)系，對(duì)生態(tài)環(huán)境生長(zhǎng)發(fā)育要求、與其他生物的生態(tài)關(guān)系，對(duì)生態(tài)環(huán)境的影響及潛在危險(xiǎn)性。的影響及潛在危險(xiǎn)性。 受體微生物的遺傳變異：遺傳穩(wěn)定性、質(zhì)粒穩(wěn)定性及受體微生物的遺傳變異：遺傳穩(wěn)定性、質(zhì)粒穩(wěn)定性及其潛在危險(xiǎn)、轉(zhuǎn)座子狀況及潛在危險(xiǎn)、是否發(fā)生過(guò)對(duì)其潛在危險(xiǎn)、轉(zhuǎn)座子狀況及潛在危險(xiǎn)、是否發(fā)生過(guò)對(duì)人畜有危害的變異、自然條件下與其他微生物、動(dòng)物人畜

21、有危害的變異、自然條件下與其他微生物、動(dòng)物發(fā)生基因重組的可能性、監(jiān)測(cè)和監(jiān)控的可能性。發(fā)生基因重組的可能性、監(jiān)測(cè)和監(jiān)控的可能性。2 受體微生物安全等級(jí)受體微生物安全等級(jí) 根據(jù)根據(jù)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理辦法農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理辦法第十第十一條有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，分為一條有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，分為I-IV-IV級(jí)，即：不存在危險(xiǎn)、級(jí)，即：不存在危險(xiǎn)、低度危險(xiǎn)、中度危險(xiǎn)、高度危險(xiǎn)。低度危險(xiǎn)、中度危險(xiǎn)、高度危險(xiǎn)。 常用的受體微生物的安全等級(jí)如下：常用的受體微生物的安全等級(jí)如下： 巴斯畢赤酵母巴斯畢赤酵母GS115和啤酒酵母和啤酒酵母AB103 定為定為 I 級(jí)級(jí)； 大腸桿菌大腸桿菌BL2121 定為定為 I 級(jí)級(jí)；

22、 禽痘病毒定為禽痘病毒定為 I 級(jí)級(jí)； 痘苗病毒痘苗病毒和和腺病毒定為腺病毒定為 級(jí)級(jí)； 沙門(mén)氏菌和志賀氏菌定為沙門(mén)氏菌和志賀氏菌定為級(jí)級(jí)； 單核細(xì)胞增生李斯特菌定為單核細(xì)胞增生李斯特菌定為級(jí)；級(jí)； 重組卡介苗重組卡介苗( (分枝桿菌屬分枝桿菌屬) )定為定為 I 級(jí)級(jí)； 啤酒酵母啤酒酵母 大腸桿菌大腸桿菌 痘病毒痘病毒 腺病毒腺病毒 沙門(mén)氏菌沙門(mén)氏菌 志賀氏菌志賀氏菌 李斯特菌李斯特菌 分支桿菌分支桿菌二、轉(zhuǎn)基因操作的安全性評(píng)價(jià)二、轉(zhuǎn)基因操作的安全性評(píng)價(jià)1 1 轉(zhuǎn)基因操作安全性評(píng)價(jià)概述轉(zhuǎn)基因操作安全性評(píng)價(jià)概述 所引入的基因或?qū)⒈恍揎椀男誀畹奶匦?。所引入的基因或?qū)⒈恍揎椀男誀畹奶匦浴?實(shí)際插入

23、的序列及操作過(guò)程中將被刪除的序列：實(shí)際插入的序列及操作過(guò)程中將被刪除的序列： 大小和結(jié)構(gòu)、性狀和功能、序列信息及拷貝數(shù)。大小和結(jié)構(gòu)、性狀和功能、序列信息及拷貝數(shù)。 目的基因與載體構(gòu)建的圖譜：目的基因與載體構(gòu)建的圖譜： 載體的特性、安全性和各插入片段的資料；載體的特性、安全性和各插入片段的資料； 能否向不含該類(lèi)基因的微生物轉(zhuǎn)移及風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)。能否向不含該類(lèi)基因的微生物轉(zhuǎn)移及風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)。 基因操作方法：基因操作方法： 基因操作對(duì)受體生物安全等級(jí)的影響；基因操作對(duì)受體生物安全等級(jí)的影響； 目的基因表達(dá)的穩(wěn)定性及其檢測(cè)；目的基因表達(dá)的穩(wěn)定性及其檢測(cè)； 重組重組DNADNA的分子結(jié)構(gòu)、復(fù)制特性和安全性。的分子

24、結(jié)構(gòu)、復(fù)制特性和安全性。 基因操作影響的類(lèi)型：基因操作影響的類(lèi)型： 類(lèi)型類(lèi)型1 1 - -增加安全性；增加安全性； 類(lèi)型類(lèi)型2 2 - -不影響安全性；類(lèi)型不影響安全性；類(lèi)型3 3 - -降低安全性。降低安全性。 3 常用菌株轉(zhuǎn)基因操作的安全性常用菌株轉(zhuǎn)基因操作的安全性 酵母菌酵母菌 轉(zhuǎn)入的表達(dá)基因：抗菌肽基因、植酸酶基因、轉(zhuǎn)入的表達(dá)基因：抗菌肽基因、植酸酶基因、 生長(zhǎng)素基因、甘露聚糖酶基因。生長(zhǎng)素基因、甘露聚糖酶基因。 基因操作對(duì)酵母菌安全性影響：定為類(lèi)型基因操作對(duì)酵母菌安全性影響：定為類(lèi)型 2 2 大腸桿菌：大腸桿菌： 轉(zhuǎn)入的表達(dá)基因：生長(zhǎng)素基因、酸性植酸酶基因、轉(zhuǎn)入的表達(dá)基因：生長(zhǎng)素基因

25、、酸性植酸酶基因、 豬防御素基因。豬防御素基因。 基因操作對(duì)大腸桿菌安全性影響：定為類(lèi)型基因操作對(duì)大腸桿菌安全性影響：定為類(lèi)型 2 2 痘苗病毒、禽痘病毒和腺病毒：痘苗病毒、禽痘病毒和腺病毒： 轉(zhuǎn)入的表達(dá)基因：病原體抗原基因、血凝素基因、轉(zhuǎn)入的表達(dá)基因：病原體抗原基因、血凝素基因、 腫瘤抗原基因腫瘤抗原基因、胸苷激酶基因胸苷激酶基因、重組病毒重組病毒 等等 基因操作對(duì)其安全性影響：定為類(lèi)型基因操作對(duì)其安全性影響：定為類(lèi)型 2 2 沙門(mén)氏菌沙門(mén)氏菌 轉(zhuǎn)入的表達(dá)基因：病原體抗原或抗原亞單位基因轉(zhuǎn)入的表達(dá)基因：病原體抗原或抗原亞單位基因 基因操作對(duì)其安全性影響：定為類(lèi)型基因操作對(duì)其安全性影響：定為類(lèi)

26、型 2 2 志賀氏菌志賀氏菌 轉(zhuǎn)入的表達(dá)基因：大腸桿菌腸毒素基因、轉(zhuǎn)入的表達(dá)基因：大腸桿菌腸毒素基因、 動(dòng)物抗原蛋白基因、大腸桿菌菌毛抗原基動(dòng)物抗原蛋白基因、大腸桿菌菌毛抗原基因因 基因操作對(duì)其安全性影響：定為類(lèi)型基因操作對(duì)其安全性影響：定為類(lèi)型 2 2 李斯特菌李斯特菌 轉(zhuǎn)入的表達(dá)基因：病原體抗原或抗原亞單位基因轉(zhuǎn)入的表達(dá)基因：病原體抗原或抗原亞單位基因 腫瘤抗原基因。腫瘤抗原基因。 基因操作對(duì)其安全性影響：定為類(lèi)型基因操作對(duì)其安全性影響：定為類(lèi)型 2 2 重組卡介苗重組卡介苗 轉(zhuǎn)入的表達(dá)基因：病原體抗原或抗原亞單位基轉(zhuǎn)入的表達(dá)基因：病原體抗原或抗原亞單位基 基因操作對(duì)其安全性影響：定為類(lèi)型

27、基因操作對(duì)其安全性影響：定為類(lèi)型 2 2三、動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物的安全性評(píng)價(jià)三、動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物的安全性評(píng)價(jià)1 動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物安全性評(píng)價(jià)的內(nèi)容動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物安全性評(píng)價(jià)的內(nèi)容 動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物的生物學(xué)特性。動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物的生物學(xué)特性。 動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物對(duì)動(dòng)物的安全性。動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物對(duì)動(dòng)物的安全性。 動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物對(duì)人類(lèi)的安全性及潛在危險(xiǎn)。動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物對(duì)人類(lèi)的安全性及潛在危險(xiǎn)。 動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物對(duì)生態(tài)環(huán)境的安全性。動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物對(duì)生態(tài)環(huán)境的安全性。 動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物的檢則和鑒定技術(shù)。動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物的檢則和鑒定技術(shù)。 動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物的安全等級(jí)分為動(dòng)物用轉(zhuǎn)

28、基因微生物的安全等級(jí)分為4 4個(gè)等級(jí)個(gè)等級(jí) 其評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)考慮其評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)考慮：受體微生物安全等級(jí)受體微生物安全等級(jí) I I-IVIV級(jí)級(jí) 基因操作的影響類(lèi)型基因操作的影響類(lèi)型 1 1-3 3 類(lèi)型類(lèi)型 綜評(píng)價(jià)之后確定綜評(píng)價(jià)之后確定：轉(zhuǎn)基因微生物的安全性轉(zhuǎn)基因微生物的安全性 I I-IVIV 級(jí)級(jí)受體安全等級(jí)受體安全等級(jí) 基因操作基因操作 轉(zhuǎn)基因微生物轉(zhuǎn)基因微生物 安全等級(jí)安全等級(jí) I I 類(lèi)型類(lèi)型1 2 1 2 安全等級(jí)安全等級(jí)I I 類(lèi)型類(lèi)型3 3 安全等級(jí)安全等級(jí) I I 安全等級(jí)安全等級(jí) 類(lèi)型類(lèi)型1 2 1 2 安全等級(jí)安全等級(jí) I I 類(lèi)型類(lèi)型3 3 安全等級(jí)安全等級(jí) 安全等級(jí)安全等級(jí) 類(lèi)

29、型類(lèi)型1 1 安全等級(jí)安全等級(jí) I I 類(lèi)型類(lèi)型2 2 安全等級(jí)安全等級(jí) 類(lèi)型類(lèi)型3 3 安全等級(jí)安全等級(jí) 安全等級(jí)安全等級(jí) 類(lèi)型類(lèi)型1 1 安全等級(jí)安全等級(jí) I I 類(lèi)型類(lèi)型2 2 安全等級(jí)安全等級(jí) 類(lèi)型類(lèi)型3 3 安全等級(jí)安全等級(jí) 2 幾種代表性受體微生物轉(zhuǎn)基因后的安全性幾種代表性受體微生物轉(zhuǎn)基因后的安全性 轉(zhuǎn)重組抗菌肽基因酵母菌：華南農(nóng)大、深圳藝鵬轉(zhuǎn)重組抗菌肽基因酵母菌：華南農(nóng)大、深圳藝鵬公司、廣州微生物所和廣州華桑公司聯(lián)合研制，公司、廣州微生物所和廣州華桑公司聯(lián)合研制，已通過(guò)中間試驗(yàn)和環(huán)境釋放安全性評(píng)價(jià)，在動(dòng)物已通過(guò)中間試驗(yàn)和環(huán)境釋放安全性評(píng)價(jià)，在動(dòng)物體內(nèi)未檢出殘留，體內(nèi)未檢出殘留，2

30、0042004年年7 7月獲農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)生產(chǎn)。月獲農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)生產(chǎn)。 痘苗病毒痘苗病毒- -狂犬病毒糖蛋白狂犬病毒糖蛋白G G重組體：已在多個(gè)國(guó)重組體：已在多個(gè)國(guó)家批準(zhǔn)注冊(cè)，我國(guó)評(píng)定的安全等級(jí)為家批準(zhǔn)注冊(cè)，我國(guó)評(píng)定的安全等級(jí)為級(jí)。級(jí)。 轉(zhuǎn)基因禽痘病毒：已用于生產(chǎn)抗雞新城疫疫苗、轉(zhuǎn)基因禽痘病毒：已用于生產(chǎn)抗雞新城疫疫苗、H5H5亞型禽流感疫苗、狂犬病毒糖蛋白重組疫苗，亞型禽流感疫苗、狂犬病毒糖蛋白重組疫苗，根據(jù)我國(guó)有關(guān)機(jī)構(gòu)和部門(mén)的安全性評(píng)價(jià)，其安全根據(jù)我國(guó)有關(guān)機(jī)構(gòu)和部門(mén)的安全性評(píng)價(jià)，其安全等級(jí)為等級(jí)為級(jí)，可望不久的將來(lái)投入生產(chǎn)。級(jí)，可望不久的將來(lái)投入生產(chǎn)。 轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)p53p53基因腺病毒：導(dǎo)入了腫瘤抑制

31、基因基因腺病毒：導(dǎo)入了腫瘤抑制基因p53 p53 ，其產(chǎn)品為其產(chǎn)品為“今又生今又生”重組人重組人p53p53腺病毒注射液，腺病毒注射液，已獲國(guó)家藥監(jiān)局批準(zhǔn)生產(chǎn)，其安全等級(jí)為已獲國(guó)家藥監(jiān)局批準(zhǔn)生產(chǎn)，其安全等級(jí)為級(jí)。級(jí)。 轉(zhuǎn)基因沙門(mén)氏菌：主要用于生產(chǎn)重組病原生物抗轉(zhuǎn)基因沙門(mén)氏菌：主要用于生產(chǎn)重組病原生物抗原疫苗、抗腫瘤疫苗和口服生長(zhǎng)抑素疫苗，經(jīng)安原疫苗、抗腫瘤疫苗和口服生長(zhǎng)抑素疫苗，經(jīng)安全性評(píng)價(jià)其安全等級(jí)為全性評(píng)價(jià)其安全等級(jí)為級(jí)。其安全性主要是針級(jí)。其安全性主要是針對(duì)沙門(mén)氏菌的擔(dān)憂(yōu)，且動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中過(guò)量服用可導(dǎo)對(duì)沙門(mén)氏菌的擔(dān)憂(yōu)，且動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中過(guò)量服用可導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)受損并引起部分動(dòng)物死亡。致細(xì)胞結(jié)構(gòu)受損并

32、引起部分動(dòng)物死亡。 轉(zhuǎn)基因志賀氏菌：還未獲批準(zhǔn)進(jìn)入商業(yè)化生產(chǎn)，轉(zhuǎn)基因志賀氏菌：還未獲批準(zhǔn)進(jìn)入商業(yè)化生產(chǎn)，經(jīng)安全性評(píng)價(jià)其安全等級(jí)為經(jīng)安全性評(píng)價(jià)其安全等級(jí)為級(jí)。其主要的副作級(jí)。其主要的副作用是引起炎癥和發(fā)熱。用是引起炎癥和發(fā)熱。 轉(zhuǎn)基因單核細(xì)胞增生李斯特菌：轉(zhuǎn)基因單核細(xì)胞增生李斯特菌：還未獲批準(zhǔn)進(jìn)入還未獲批準(zhǔn)進(jìn)入商業(yè)化生產(chǎn)，商業(yè)化生產(chǎn)，經(jīng)安全性評(píng)價(jià)其安全等級(jí)為經(jīng)安全性評(píng)價(jià)其安全等級(jí)為級(jí)。級(jí)。由于其宿主范圍較廣，載體安全體系復(fù)雜，存在由于其宿主范圍較廣，載體安全體系復(fù)雜，存在一定安全問(wèn)題，其應(yīng)用可能受限。一定安全問(wèn)題，其應(yīng)用可能受限。 轉(zhuǎn)基因（重組）卡介苗：已有多種疫苗進(jìn)入臨床轉(zhuǎn)基因（重組）卡介苗：

33、已有多種疫苗進(jìn)入臨床期試驗(yàn)，尚未獲批進(jìn)入商業(yè)化生產(chǎn)，經(jīng)安全性期試驗(yàn)，尚未獲批進(jìn)入商業(yè)化生產(chǎn)，經(jīng)安全性評(píng)價(jià)其安全等級(jí)為評(píng)價(jià)其安全等級(jí)為級(jí)，具有較高的安全性。級(jí)，具有較高的安全性。3 減毒病毒和細(xì)菌疫苗中存在的隱患減毒病毒和細(xì)菌疫苗中存在的隱患 毒力及反應(yīng)原性回復(fù)：減毒表型要穩(wěn)定并防止回復(fù)突毒力及反應(yīng)原性回復(fù)：減毒表型要穩(wěn)定并防止回復(fù)突變?cè)斐啥玖貜?fù)變?cè)斐啥玖貜?fù)，可用雙基因缺失突變解決；可用雙基因缺失突變解決； 水平基因轉(zhuǎn)移：含外源基因的活載體即轉(zhuǎn)基因生物體水平基因轉(zhuǎn)移：含外源基因的活載體即轉(zhuǎn)基因生物體釋放在環(huán)境中，可能引起轉(zhuǎn)基因的水平轉(zhuǎn)移。如果轉(zhuǎn)釋放在環(huán)境中，可能引起轉(zhuǎn)基因的水平轉(zhuǎn)移。如果轉(zhuǎn)基

34、因微生物毒株或外源基因片段帶致病基因、抗藥基基因微生物毒株或外源基因片段帶致病基因、抗藥基因等，有可能通過(guò)突變或基因重組引起生物災(zāi)害。結(jié)因等，有可能通過(guò)突變或基因重組引起生物災(zāi)害。結(jié)合應(yīng)用條件致死突變可能防止。合應(yīng)用條件致死突變可能防止。 載體的抗生素抗性基因：主要擔(dān)憂(yōu)是可能引起病源菌載體的抗生素抗性基因：主要擔(dān)憂(yōu)是可能引起病源菌的抗藥性或耐藥性，可通過(guò)改變選擇標(biāo)記來(lái)解決問(wèn)題。的抗藥性或耐藥性，可通過(guò)改變選擇標(biāo)記來(lái)解決問(wèn)題。 潛在性：指潛在性：指DNA疫苗注射后整合到宿主細(xì)胞基因組疫苗注射后整合到宿主細(xì)胞基因組DNA上、或整合后引起宿主基因失活、或引起細(xì)胞癌上、或整合后引起宿主基因失活、或引起

35、細(xì)胞癌變的可能性。變的可能性。四、動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品的安全性評(píng)價(jià)四、動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品的安全性評(píng)價(jià)1 1 動(dòng)物轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品安全性評(píng)價(jià)的內(nèi)容動(dòng)物轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品安全性評(píng)價(jià)的內(nèi)容 轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品的穩(wěn)定性；轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品的穩(wěn)定性； 生產(chǎn)、加工活動(dòng)對(duì)轉(zhuǎn)基因微生物安全性的影響；生產(chǎn)、加工活動(dòng)對(duì)轉(zhuǎn)基因微生物安全性的影響； 分為三個(gè)類(lèi)型：分為三個(gè)類(lèi)型： 類(lèi)型類(lèi)型1-1-增加轉(zhuǎn)基因微生物的安全性增加轉(zhuǎn)基因微生物的安全性 類(lèi)型類(lèi)型2-2-不影響轉(zhuǎn)基因微生物的安全性不影響轉(zhuǎn)基因微生物的安全性 類(lèi)型類(lèi)型3-3-降低轉(zhuǎn)基因微生物的安全性降低轉(zhuǎn)基因微生物的安全性 轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品與轉(zhuǎn)基因微生物在環(huán)境安全

36、性轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品與轉(zhuǎn)基因微生物在環(huán)境安全性方面的差異；方面的差異； 轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品與轉(zhuǎn)基因微生物在對(duì)人類(lèi)健康轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品與轉(zhuǎn)基因微生物在對(duì)人類(lèi)健康影響方面的差異。影響方面的差異。 參照參照農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理辦法農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理辦法第十第十四條有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，確定轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品安全等級(jí)。四條有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，確定轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品安全等級(jí)。2 幾類(lèi)動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品的安全性評(píng)價(jià)幾類(lèi)動(dòng)物用轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品的安全性評(píng)價(jià) 轉(zhuǎn)基因酵母菌產(chǎn)品：從其濾液或菌體回收產(chǎn)品；生轉(zhuǎn)基因酵母菌產(chǎn)品：從其濾液或菌體回收產(chǎn)品；生產(chǎn)和加工活動(dòng)對(duì)轉(zhuǎn)基因生物影響類(lèi)型為類(lèi)型產(chǎn)和加工活動(dòng)對(duì)轉(zhuǎn)基因生物影響類(lèi)型為類(lèi)型2

37、；轉(zhuǎn)；轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品對(duì)人畜和環(huán)境具有較高的安全性；因此，基因產(chǎn)品對(duì)人畜和環(huán)境具有較高的安全性；因此，轉(zhuǎn)基因酵母菌產(chǎn)品的安全等級(jí)為轉(zhuǎn)基因酵母菌產(chǎn)品的安全等級(jí)為級(jí)。級(jí)。 轉(zhuǎn)基因大腸桿菌產(chǎn)品：產(chǎn)品純度高、穩(wěn)定性強(qiáng)、安轉(zhuǎn)基因大腸桿菌產(chǎn)品：產(chǎn)品純度高、穩(wěn)定性強(qiáng)、安全性好，生產(chǎn)和加工活動(dòng)對(duì)轉(zhuǎn)基因生物影響為類(lèi)型全性好，生產(chǎn)和加工活動(dòng)對(duì)轉(zhuǎn)基因生物影響為類(lèi)型2，因此轉(zhuǎn)基因大腸桿菌產(chǎn)品的安全等級(jí)為，因此轉(zhuǎn)基因大腸桿菌產(chǎn)品的安全等級(jí)為級(jí)。級(jí)。 轉(zhuǎn)基因病毒產(chǎn)品：轉(zhuǎn)基因表達(dá)產(chǎn)物存在于細(xì)胞內(nèi)或轉(zhuǎn)基因病毒產(chǎn)品：轉(zhuǎn)基因表達(dá)產(chǎn)物存在于細(xì)胞內(nèi)或其裂解物中，通過(guò)收獲細(xì)胞培養(yǎng)物制備相關(guān)產(chǎn)品其裂解物中，通過(guò)收獲細(xì)胞培養(yǎng)物制備相關(guān)產(chǎn)品( (

38、如液體疫苗或凍干疫苗如液體疫苗或凍干疫苗) )，生產(chǎn)過(guò)程在封閉環(huán)境中，生產(chǎn)過(guò)程在封閉環(huán)境中進(jìn)行，生產(chǎn)、加工活動(dòng)對(duì)轉(zhuǎn)基因生物影響為類(lèi)型進(jìn)行，生產(chǎn)、加工活動(dòng)對(duì)轉(zhuǎn)基因生物影響為類(lèi)型2，轉(zhuǎn)基因病毒產(chǎn)品安全等級(jí)等同于重組病毒轉(zhuǎn)基因病毒產(chǎn)品安全等級(jí)等同于重組病毒。 減毒菌的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品：減毒菌的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品： 主要是活疫苗產(chǎn)品，通過(guò)轉(zhuǎn)基因減毒菌的培養(yǎng)、收主要是活疫苗產(chǎn)品，通過(guò)轉(zhuǎn)基因減毒菌的培養(yǎng)、收集培養(yǎng)物、離心收集菌體、加入保護(hù)劑、轉(zhuǎn)入西林集培養(yǎng)物、離心收集菌體、加入保護(hù)劑、轉(zhuǎn)入西林瓶、制備液體疫苗或凍干疫苗；瓶、制備液體疫苗或凍干疫苗； 生產(chǎn)過(guò)程嚴(yán)格生產(chǎn)過(guò)程嚴(yán)格GMP要求組織生產(chǎn)；要求組織生產(chǎn)； 產(chǎn)品穩(wěn)定性

39、好、加入保護(hù)劑安全有效，沒(méi)有引入有產(chǎn)品穩(wěn)定性好、加入保護(hù)劑安全有效，沒(méi)有引入有害物質(zhì)；害物質(zhì)； 生產(chǎn)和加工活動(dòng)對(duì)轉(zhuǎn)基因生物影響類(lèi)型為類(lèi)型生產(chǎn)和加工活動(dòng)對(duì)轉(zhuǎn)基因生物影響類(lèi)型為類(lèi)型2； 因此轉(zhuǎn)基因活菌產(chǎn)品的安全性等同于轉(zhuǎn)基因的減毒因此轉(zhuǎn)基因活菌產(chǎn)品的安全性等同于轉(zhuǎn)基因的減毒菌株。菌株。 第三節(jié)第三節(jié) 植物用轉(zhuǎn)基因微生物安全性評(píng)價(jià)植物用轉(zhuǎn)基因微生物安全性評(píng)價(jià)一、受體微生物的安全性評(píng)價(jià)一、受體微生物的安全性評(píng)價(jià)1 1 評(píng)價(jià)的主要內(nèi)容評(píng)價(jià)的主要內(nèi)容 受體微生物的背景資料受體微生物的背景資料 受體微生物的生物學(xué)特性受體微生物的生物學(xué)特性 受體微生物的生態(tài)環(huán)境受體微生物的生態(tài)環(huán)境 受體微生物的遺傳變異受體微

40、生物的遺傳變異 根據(jù)根據(jù)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理辦法農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理辦法附錄附錄中規(guī)定的評(píng)價(jià)方法和依據(jù)，分析植物用轉(zhuǎn)基因中規(guī)定的評(píng)價(jià)方法和依據(jù)，分析植物用轉(zhuǎn)基因微生物可能對(duì)人畜和生態(tài)環(huán)境可能存在的危害和微生物可能對(duì)人畜和生態(tài)環(huán)境可能存在的危害和潛在的危險(xiǎn)程度，為采取安全管理措施和防控潛潛在的危險(xiǎn)程度，為采取安全管理措施和防控潛在危害提供科學(xué)依據(jù)。在危害提供科學(xué)依據(jù)。2 主要受體微生物的安全性評(píng)價(jià)主要受體微生物的安全性評(píng)價(jià) 桿狀病毒的安全性評(píng)價(jià)：桿狀病毒的安全性評(píng)價(jià)： 被開(kāi)發(fā)為生物殺蟲(chóng)劑的桿狀病毒是核型多角體病毒被開(kāi)發(fā)為生物殺蟲(chóng)劑的桿狀病毒是核型多角體病毒NPVNPV和顆粒體病毒和顆

41、粒體病毒CVCV，專(zhuān)性感染節(jié)肢動(dòng)物，昆蟲(chóng)是，專(zhuān)性感染節(jié)肢動(dòng)物，昆蟲(chóng)是其自然宿主，每種桿狀病毒能感染一種或幾種昆蟲(chóng)。其自然宿主，每種桿狀病毒能感染一種或幾種昆蟲(chóng)。 大量試驗(yàn)表明，桿狀病毒對(duì)動(dòng)植物和人類(lèi)是安全的，大量試驗(yàn)表明，桿狀病毒對(duì)動(dòng)植物和人類(lèi)是安全的，NPVNPV在田間施用不會(huì)引起環(huán)境污染，用于生物防治在田間施用不會(huì)引起環(huán)境污染，用于生物防治的桿狀病毒制劑對(duì)有益昆蟲(chóng)也是安全的。的桿狀病毒制劑對(duì)有益昆蟲(chóng)也是安全的。 桿狀病毒的安全性已得到桿狀病毒的安全性已得到 公認(rèn)，根據(jù)公認(rèn)，根據(jù)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因 生物安全評(píng)價(jià)管理辦法生物安全評(píng)價(jià)管理辦法 第十一條的規(guī)定，確定桿第十一條的規(guī)定，確定桿 狀病

42、毒的安全等級(jí)為狀病毒的安全等級(jí)為 I 級(jí)。級(jí)。 熒光假單孢菌的安全性評(píng)價(jià)熒光假單孢菌的安全性評(píng)價(jià) 為好氧的革蘭氏陰性桿菌或球桿菌，是土壤和水為好氧的革蘭氏陰性桿菌或球桿菌，是土壤和水體微生態(tài)系統(tǒng)的重要組成成分。體微生態(tài)系統(tǒng)的重要組成成分。 是根際促生菌，通過(guò)其產(chǎn)生的多種次生代謝物和是根際促生菌，通過(guò)其產(chǎn)生的多種次生代謝物和在根際定殖防治多種植物病害。在根際定殖防治多種植物病害。 作為轉(zhuǎn)基因受體菌株是從自然環(huán)境中分離的生防作為轉(zhuǎn)基因受體菌株是從自然環(huán)境中分離的生防菌，具有良好的安全性，尚未發(fā)現(xiàn)對(duì)人體健康和菌，具有良好的安全性，尚未發(fā)現(xiàn)對(duì)人體健康和生態(tài)環(huán)境的危害，對(duì)多種植物病原菌有較好的拮生態(tài)環(huán)境

43、的危害，對(duì)多種植物病原菌有較好的拮抗作用?？棺饔?。 根據(jù)根據(jù)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理辦法農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理辦法第十第十一條的規(guī)定，確定桿狀病毒的安全等級(jí)為一條的規(guī)定，確定桿狀病毒的安全等級(jí)為 I 級(jí)級(jí) 枯草芽孢桿菌的安全性評(píng)價(jià)枯草芽孢桿菌的安全性評(píng)價(jià) 枯草芽孢桿菌為嗜溫性好氧產(chǎn)芽孢的革蘭氏陽(yáng)性枯草芽孢桿菌為嗜溫性好氧產(chǎn)芽孢的革蘭氏陽(yáng)性桿狀細(xì)菌，在自然界中廣泛存在，是植物體內(nèi)常桿狀細(xì)菌，在自然界中廣泛存在，是植物體內(nèi)常見(jiàn)的內(nèi)生細(xì)菌。見(jiàn)的內(nèi)生細(xì)菌。 枯草芽孢桿菌枯草芽孢桿菌對(duì)人畜無(wú)害，對(duì)環(huán)境無(wú)污染，能產(chǎn)對(duì)人畜無(wú)害，對(duì)環(huán)境無(wú)污染，能產(chǎn)生多種抗菌素和酶，具有廣譜抗菌活性和極強(qiáng)的生多種抗菌素和

44、酶，具有廣譜抗菌活性和極強(qiáng)的抗逆能力，經(jīng)多種農(nóng)作物試驗(yàn)對(duì)多種病害表現(xiàn)出抗逆能力，經(jīng)多種農(nóng)作物試驗(yàn)對(duì)多種病害表現(xiàn)出良好的防治效果。良好的防治效果。 枯草芽孢桿菌制劑枯草芽孢桿菌制劑19881988年已作為農(nóng)藥登記，國(guó)內(nèi)年已作為農(nóng)藥登記，國(guó)內(nèi)外已有多種枯草芽孢桿菌殺菌劑投入實(shí)際應(yīng)用。外已有多種枯草芽孢桿菌殺菌劑投入實(shí)際應(yīng)用。 根據(jù)根據(jù)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理辦法農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理辦法第十第十一條的規(guī)定，確定桿狀病毒的安全等級(jí)為一條的規(guī)定，確定桿狀病毒的安全等級(jí)為 I 級(jí)。級(jí)。 木霉的安全性評(píng)價(jià)木霉的安全性評(píng)價(jià) 是自然界廣泛存在的天然生防菌，用于防治多種是自然界廣泛存在的天然生防菌，用于防

45、治多種植物真菌性病害，其活菌制劑無(wú)毒、無(wú)污染、無(wú)植物真菌性病害，其活菌制劑無(wú)毒、無(wú)污染、無(wú)殘毒，不傷害土壤中其他有益微生物。殘毒，不傷害土壤中其他有益微生物。 對(duì)動(dòng)物和環(huán)境無(wú)害，不影響土壤的微生態(tài)循環(huán)。對(duì)動(dòng)物和環(huán)境無(wú)害，不影響土壤的微生態(tài)循環(huán)。 根據(jù)根據(jù)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理辦法農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理辦法第十第十一條的規(guī)定，確定桿狀病毒的安全等級(jí)為一條的規(guī)定，確定桿狀病毒的安全等級(jí)為 I 級(jí)。級(jí)。 聯(lián)合固氮菌的安全性評(píng)價(jià)聯(lián)合固氮菌的安全性評(píng)價(jià) 定植于根表或根際，能侵入根的皮層形成共生關(guān)定植于根表或根際，能侵入根的皮層形成共生關(guān)系，有固氮作用，促進(jìn)根系生長(zhǎng)，增加產(chǎn)量。系，有固氮作用，促進(jìn)

46、根系生長(zhǎng)，增加產(chǎn)量。 根據(jù)根據(jù)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理辦法農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理辦法第十第十一條的規(guī)定，確定桿狀病毒的安全等級(jí)為一條的規(guī)定，確定桿狀病毒的安全等級(jí)為 I 級(jí)。級(jí)。 重組根瘤菌的安全性評(píng)價(jià)重組根瘤菌的安全性評(píng)價(jià) 為一類(lèi)革蘭氏陰性好氧細(xì)菌，其固氮作用成為農(nóng)為一類(lèi)革蘭氏陰性好氧細(xì)菌，其固氮作用成為農(nóng)業(yè)的主要氮源供應(yīng)，根瘤菌劑已在世界范圍內(nèi)得業(yè)的主要氮源供應(yīng)，根瘤菌劑已在世界范圍內(nèi)得到推廣和普及。到推廣和普及。 根據(jù)根據(jù)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理辦法農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理辦法第十第十一條的規(guī)定，確定重組根瘤菌的安全等級(jí)為一條的規(guī)定，確定重組根瘤菌的安全等級(jí)為 I 級(jí)級(jí) 蘇云金

47、芽孢桿菌的安全性評(píng)價(jià)蘇云金芽孢桿菌的安全性評(píng)價(jià) 為革蘭氏陽(yáng)性的土壤細(xì)菌，可在菌體一端形成內(nèi)為革蘭氏陽(yáng)性的土壤細(xì)菌，可在菌體一端形成內(nèi)生芽孢而另一端同時(shí)形成伴孢晶體，對(duì)生芽孢而另一端同時(shí)形成伴孢晶體，對(duì)2020多種重多種重要農(nóng)作物害蟲(chóng)有顯著防治效果。要農(nóng)作物害蟲(chóng)有顯著防治效果。 對(duì)人畜無(wú)害，對(duì)環(huán)境安全，根據(jù)對(duì)人畜無(wú)害，對(duì)環(huán)境安全，根據(jù)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理辦法物安全評(píng)價(jià)管理辦法第十一條的規(guī)定，確定桿第十一條的規(guī)定，確定桿狀病毒的安全等級(jí)為狀病毒的安全等級(jí)為 I 級(jí)。級(jí)。二、基因操作的安全性評(píng)價(jià)二、基因操作的安全性評(píng)價(jià) 對(duì)植物用轉(zhuǎn)基因微生物進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)時(shí)，主要對(duì)植物用轉(zhuǎn)基因微生物

48、進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)時(shí)，主要考慮以下幾方面內(nèi)容：考慮以下幾方面內(nèi)容： -植物用轉(zhuǎn)基因微生物中引入或修飾性狀和特征；植物用轉(zhuǎn)基因微生物中引入或修飾性狀和特征； -實(shí)際插入或刪除序列的資料；實(shí)際插入或刪除序列的資料； -載體的名稱(chēng)和來(lái)源；載體特性和安全性；載體的名稱(chēng)和來(lái)源；載體特性和安全性； -載體插入?yún)^(qū)域各片段的資料；載體插入?yún)^(qū)域各片段的資料； -基因操作方法；重組基因操作方法；重組DNA分子的結(jié)構(gòu)、復(fù)制特性分子的結(jié)構(gòu)、復(fù)制特性 和安全性。和安全性。 -目的基因的生存前景和表達(dá)的穩(wěn)定定性。目的基因的生存前景和表達(dá)的穩(wěn)定定性?；虿僮鲗?duì)受體生物安全性影響分為基因操作對(duì)受體生物安全性影響分為3種類(lèi)型種類(lèi)型

49、1 桿狀病毒基因操作的安全性評(píng)價(jià)桿狀病毒基因操作的安全性評(píng)價(jià) 針對(duì)野生型桿狀病毒殺蟲(chóng)速度相對(duì)較慢、寄主范圍針對(duì)野生型桿狀病毒殺蟲(chóng)速度相對(duì)較慢、寄主范圍較窄的缺陷，對(duì)其基因操作主要包括：較窄的缺陷，對(duì)其基因操作主要包括： -缺失病毒非必需基因缺失病毒非必需基因( (無(wú)關(guān)復(fù)制無(wú)關(guān)復(fù)制) )增加殺蟲(chóng)效果；增加殺蟲(chóng)效果； -插入外源基因提高殺蟲(chóng)速度插入外源基因提高殺蟲(chóng)速度, 包括昆蟲(chóng)激素基因、包括昆蟲(chóng)激素基因、昆蟲(chóng)毒素基因、植物蛋白酶抑制基因、昆蟲(chóng)病毒增昆蟲(chóng)毒素基因、植物蛋白酶抑制基因、昆蟲(chóng)病毒增強(qiáng)蛋白強(qiáng)蛋白( (增強(qiáng)病毒對(duì)幼蟲(chóng)的感染力增強(qiáng)病毒對(duì)幼蟲(chóng)的感染力) ) 基因?；?。 表達(dá)系統(tǒng)常用啟動(dòng)子是桿

50、狀病毒本身的啟動(dòng)子，也表達(dá)系統(tǒng)常用啟動(dòng)子是桿狀病毒本身的啟動(dòng)子，也可是組成型啟動(dòng)子可是組成型啟動(dòng)子hsp70或其他啟動(dòng)子?；蚱渌麊?dòng)子。 由于插入的外源基因均是針對(duì)昆蟲(chóng)，對(duì)人畜和環(huán)境由于插入的外源基因均是針對(duì)昆蟲(chóng)，對(duì)人畜和環(huán)境無(wú)害無(wú)害，基因操作對(duì)受體生物安全性影響定為類(lèi)型基因操作對(duì)受體生物安全性影響定為類(lèi)型2，即不影響安全性。即不影響安全性。2 熒光假單孢菌基因操作的安全性評(píng)價(jià)熒光假單孢菌基因操作的安全性評(píng)價(jià) 對(duì)熒光假單孢菌的基因操作主要包括：對(duì)熒光假單孢菌的基因操作主要包括： 轉(zhuǎn)入轉(zhuǎn)入Bt殺蟲(chóng)基因形成殺蟲(chóng)防病雙價(jià)基因工程菌；殺蟲(chóng)基因形成殺蟲(chóng)防病雙價(jià)基因工程菌； 使用質(zhì)粒載體和非抗生選擇標(biāo)志，

51、完全性較高，使用質(zhì)粒載體和非抗生選擇標(biāo)志，完全性較高，但遺傳穩(wěn)定性較低，易在傳代中丟失；但遺傳穩(wěn)定性較低，易在傳代中丟失； 或者使用染色體整合的載體將目的基因整合到細(xì)或者使用染色體整合的載體將目的基因整合到細(xì)菌染色體中，達(dá)到穩(wěn)定遺傳。菌染色體中，達(dá)到穩(wěn)定遺傳。 轉(zhuǎn)入的轉(zhuǎn)入的Bt基因的殺蟲(chóng)目標(biāo)為農(nóng)業(yè)上的害蟲(chóng)，基因的殺蟲(chóng)目標(biāo)為農(nóng)業(yè)上的害蟲(chóng)，對(duì)人畜無(wú)害，也不產(chǎn)生環(huán)境污染。對(duì)人畜無(wú)害，也不產(chǎn)生環(huán)境污染。 因此轉(zhuǎn)基因操作對(duì)假單孢桿菌安全性的影響因此轉(zhuǎn)基因操作對(duì)假單孢桿菌安全性的影響定為類(lèi)型定為類(lèi)型2，即不影響受體生物的安全性。，即不影響受體生物的安全性。3 枯草芽孢桿菌基因操作的安全性評(píng)價(jià)枯草芽孢桿菌基

52、因操作的安全性評(píng)價(jià) 目前對(duì)枯草芽孢桿菌基因操作主要是導(dǎo)入目前對(duì)枯草芽孢桿菌基因操作主要是導(dǎo)入BtBt殺蟲(chóng)殺蟲(chóng)基因，使新構(gòu)建工程菌株具有殺蟲(chóng)防病的作用?；颍剐聵?gòu)建工程菌株具有殺蟲(chóng)防病的作用。 新構(gòu)建枯草芽孢桿菌工程菌中采用的載體有質(zhì)粒新構(gòu)建枯草芽孢桿菌工程菌中采用的載體有質(zhì)粒載體和染色體整合載體，安全性較高。載體和染色體整合載體，安全性較高。 對(duì)人畜無(wú)害，其基因操作對(duì)安全性影響為類(lèi)型對(duì)人畜無(wú)害，其基因操作對(duì)安全性影響為類(lèi)型2。4 木霉基因操作的安全性木霉基因操作的安全性 目前對(duì)木霉基因操作主工是導(dǎo)入外源基因目前對(duì)木霉基因操作主工是導(dǎo)入外源基因(Bt(Bt殺蟲(chóng)殺蟲(chóng)基因、幾丁質(zhì)酶基因、隱地蛋白基

53、因基因、幾丁質(zhì)酶基因、隱地蛋白基因) )提高抗菌活提高抗菌活性或構(gòu)建殺蟲(chóng)防病工程菌。性或構(gòu)建殺蟲(chóng)防病工程菌。 轉(zhuǎn)基因方法有轉(zhuǎn)基因方法有PEG-CaCl2介導(dǎo)法和根癌農(nóng)桿菌介介導(dǎo)法和根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)法，有潮霉素抗性選擇標(biāo)記。導(dǎo)法，有潮霉素抗性選擇標(biāo)記。 轉(zhuǎn)入基因?qū)θ诵鬅o(wú)害，基因操作安全性為類(lèi)型轉(zhuǎn)入基因?qū)θ诵鬅o(wú)害，基因操作安全性為類(lèi)型2。5 聯(lián)合固氮菌基因操作的安全性評(píng)價(jià)聯(lián)合固氮菌基因操作的安全性評(píng)價(jià) 主要轉(zhuǎn)入對(duì)固氮有正調(diào)控作用的主要轉(zhuǎn)入對(duì)固氮有正調(diào)控作用的 nifA、hup、ntrc 基因基因以提高固氮活性以提高固氮活性，或構(gòu)建耐銨固氮工程菌。，或構(gòu)建耐銨固氮工程菌。 采用載體為質(zhì)粒載體或轉(zhuǎn)座子載

54、體采用載體為質(zhì)粒載體或轉(zhuǎn)座子載體，安全性較高安全性較高。 所有目的基因均來(lái)自固氮菌，對(duì)人畜無(wú)害，對(duì)環(huán)所有目的基因均來(lái)自固氮菌，對(duì)人畜無(wú)害，對(duì)環(huán)境安全，故對(duì)固氮菌基因操作安全性定為類(lèi)型境安全，故對(duì)固氮菌基因操作安全性定為類(lèi)型2。6 重組根瘤菌基因操作的安全性評(píng)價(jià)重組根瘤菌基因操作的安全性評(píng)價(jià) 轉(zhuǎn)入正調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)入正調(diào)節(jié)基因 nifA 提高根瘤菌固氮酶活性，或提高根瘤菌固氮酶活性，或轉(zhuǎn)入四碳二羧酸系統(tǒng)的轉(zhuǎn)入四碳二羧酸系統(tǒng)的 dct 基因提高固氮效率基因提高固氮效率。 采用載體為采用載體為T(mén)n5 轉(zhuǎn)座子載體轉(zhuǎn)座子載體，可將攜帶的外源基，可將攜帶的外源基因插入細(xì)菌基因組因插入細(xì)菌基因組DNA中。中。 外

55、源基因和載體對(duì)人畜無(wú)害，對(duì)環(huán)境安全，故基外源基因和載體對(duì)人畜無(wú)害，對(duì)環(huán)境安全，故基因操作的安全性為類(lèi)型因操作的安全性為類(lèi)型2。7 蘇云金芽孢桿菌基因操作的安全性評(píng)價(jià)蘇云金芽孢桿菌基因操作的安全性評(píng)價(jià) 基因操作的目的是拓寬殺蟲(chóng)活性譜、提高殺蟲(chóng)效基因操作的目的是拓寬殺蟲(chóng)活性譜、提高殺蟲(chóng)效果、延緩昆蟲(chóng)對(duì)毒蛋白產(chǎn)生抗性。果、延緩昆蟲(chóng)對(duì)毒蛋白產(chǎn)生抗性。 轉(zhuǎn)入的基因主要有：提高抗蟲(chóng)活性的新殺蟲(chóng)基因轉(zhuǎn)入的基因主要有：提高抗蟲(chóng)活性的新殺蟲(chóng)基因CryIAc、增加抗蟲(chóng)譜的、增加抗蟲(chóng)譜的Cry3Aa基因?；颉?采用的載體為轉(zhuǎn)座子載體或去掉抗生素抗性基因采用的載體為轉(zhuǎn)座子載體或去掉抗生素抗性基因的位點(diǎn)專(zhuān)一性重組質(zhì)粒

56、載體。的位點(diǎn)專(zhuān)一性重組質(zhì)粒載體。 目的基因均來(lái)自天然菌株，可提高工程菌的殺蟲(chóng)目的基因均來(lái)自天然菌株，可提高工程菌的殺蟲(chóng)活性和擴(kuò)大抗蟲(chóng)譜，根據(jù)活性和擴(kuò)大抗蟲(chóng)譜，根據(jù)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理辦法評(píng)價(jià)管理辦法第十二條確定蘇云金芽孢桿菌的第十二條確定蘇云金芽孢桿菌的相關(guān)基因操作為類(lèi)型相關(guān)基因操作為類(lèi)型2，即基因操作不影響受體，即基因操作不影響受體菌的安全性菌的安全性。三、植物用轉(zhuǎn)基因微生物的安全性評(píng)價(jià)三、植物用轉(zhuǎn)基因微生物的安全性評(píng)價(jià) 植物用轉(zhuǎn)基因微生物的安全性評(píng)價(jià)，主要植物用轉(zhuǎn)基因微生物的安全性評(píng)價(jià)，主要考慮以下幾個(gè)方面：考慮以下幾個(gè)方面： 與受體微生物相比，其定殖、存活、擴(kuò)展、

57、致病與受體微生物相比，其定殖、存活、擴(kuò)展、致病性、毒性、遺傳變異等方面的能力是否改變；性、毒性、遺傳變異等方面的能力是否改變； 與受體微生物相比，其與植物、動(dòng)物、人類(lèi)或與與受體微生物相比，其與植物、動(dòng)物、人類(lèi)或與其他微生物的生態(tài)關(guān)系是否發(fā)生改變；其他微生物的生態(tài)關(guān)系是否發(fā)生改變； 與人畜接觸的可能性及危險(xiǎn)性；與人畜接觸的可能性及危險(xiǎn)性； 與同用途的其他生物農(nóng)藥、其他生物肥料相比較與同用途的其他生物農(nóng)藥、其他生物肥料相比較的安全性；的安全性； 對(duì)應(yīng)用范圍內(nèi)的生態(tài)環(huán)境的影響及潛在危險(xiǎn)性；對(duì)應(yīng)用范圍內(nèi)的生態(tài)環(huán)境的影響及潛在危險(xiǎn)性； 對(duì)靶標(biāo)生物或非靶標(biāo)生物的有益性或有害性。對(duì)靶標(biāo)生物或非靶標(biāo)生物的有益

58、性或有害性。1 轉(zhuǎn)基因桿狀病毒的安全性評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)基因桿狀病毒的安全性評(píng)價(jià) 已有實(shí)驗(yàn)表明，轉(zhuǎn)基因桿狀病毒對(duì)非靶標(biāo)鱗翅目已有實(shí)驗(yàn)表明，轉(zhuǎn)基因桿狀病毒對(duì)非靶標(biāo)鱗翅目昆蟲(chóng)和非靶標(biāo)鱗翅目節(jié)肢動(dòng)物是安全的昆蟲(chóng)和非靶標(biāo)鱗翅目節(jié)肢動(dòng)物是安全的 通過(guò)動(dòng)物注射和皮膚接觸試驗(yàn)，證明其對(duì)哺乳動(dòng)通過(guò)動(dòng)物注射和皮膚接觸試驗(yàn)，證明其對(duì)哺乳動(dòng)物是安全的。不能在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，僅短期表達(dá)。物是安全的。不能在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，僅短期表達(dá)。 重組病毒殺蟲(chóng)劑對(duì)捕食天敵的影響與野生病毒基重組病毒殺蟲(chóng)劑對(duì)捕食天敵的影響與野生病毒基本相同，對(duì)捕食天敵個(gè)體發(fā)育與種群特征的影響本相同，對(duì)捕食天敵個(gè)體發(fā)育與種群特征的影響很小，通過(guò)捕食天敵而獲得的擴(kuò)散力很有限

59、。病很小，通過(guò)捕食天敵而獲得的擴(kuò)散力很有限。病毒毒DNADNA不存在于寄生性天敵的組織中。不存在于寄生性天敵的組織中。 在生態(tài)效應(yīng)方面，重組病毒比野生病毒的適應(yīng)性在生態(tài)效應(yīng)方面，重組病毒比野生病毒的適應(yīng)性較低較低，對(duì)環(huán)境影響也低對(duì)環(huán)境影響也低，比野生病毒危險(xiǎn)性低比野生病毒危險(xiǎn)性低。 重組病毒具有可靠的安全性，安全等級(jí)為等級(jí)重組病毒具有可靠的安全性，安全等級(jí)為等級(jí)I。2 轉(zhuǎn)基因熒光假單孢菌的安全性評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)基因熒光假單孢菌的安全性評(píng)價(jià) 土壤跟蹤監(jiān)測(cè)未發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因熒光假單孢菌對(duì)土壤土壤跟蹤監(jiān)測(cè)未發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因熒光假單孢菌對(duì)土壤細(xì)菌群落組成和結(jié)構(gòu)產(chǎn)生可檢測(cè)的影響。細(xì)菌群落組成和結(jié)構(gòu)產(chǎn)生可檢測(cè)的影響。 轉(zhuǎn)三價(jià)轉(zhuǎn)

60、三價(jià)Bt-Cry基因的熒光假單孢菌經(jīng)溫室和田間基因的熒光假單孢菌經(jīng)溫室和田間釋放證明對(duì)人畜安全無(wú)毒，安全等級(jí)為等級(jí)釋放證明對(duì)人畜安全無(wú)毒，安全等級(jí)為等級(jí)I 。 北京和江蘇連云港對(duì)轉(zhuǎn)基因熒光假單孢菌北京和江蘇連云港對(duì)轉(zhuǎn)基因熒光假單孢菌IPP202和和BioP8菌株的田間試驗(yàn)表明，沒(méi)有在土壤中殘留菌株的田間試驗(yàn)表明，沒(méi)有在土壤中殘留和擴(kuò)散，對(duì)土壤中天然存在芽孢桿菌數(shù)量動(dòng)態(tài)消和擴(kuò)散，對(duì)土壤中天然存在芽孢桿菌數(shù)量動(dòng)態(tài)消長(zhǎng)沒(méi)有什么影響，對(duì)田間節(jié)肢動(dòng)物天敵的群落結(jié)長(zhǎng)沒(méi)有什么影響，對(duì)田間節(jié)肢動(dòng)物天敵的群落結(jié)構(gòu)和多樣性沒(méi)有影響。構(gòu)和多樣性沒(méi)有影響。 在自然生態(tài)環(huán)境中，工程菌株競(jìng)爭(zhēng)力弱于天然菌在自然生態(tài)環(huán)境中，