安捷倫HPLC1100培訓(xùn)資源5_HPLCTM.

1、Author：Tianyou Yue1Agilent 1100LC一般性維護(hù)保養(yǎng) 本節(jié)內(nèi)容 Agilent1100LC的各部件簡(jiǎn)要原理介紹； 1100LC各模塊使用注意事項(xiàng)； 1100LC各個(gè)模塊易耗品的更換；Author：Tianyou Yue2關(guān)于溶劑所用溶劑應(yīng)為HPLC級(jí)，水應(yīng)為二次超純水；所用溶劑應(yīng)經(jīng)過過濾。過濾水應(yīng)使用水相濾膜，過濾有機(jī)相應(yīng)使用有機(jī)相濾膜，不能混用，也不要用錯(cuò)。每一張濾膜只能用一次，不能重復(fù)使用。如果沒有在線脫氣機(jī)，所用溶劑應(yīng)經(jīng)過超聲脫氣。水易滋生藻類，避免直接照射，過濾后的水最好使用不要超過兩天。如果條件允許可向溶劑中加入0.001-0.0001M的疊氮化鈉。注意溶

2、劑的相容性，避免使用不相容的溶劑。避免使用強(qiáng)酸、強(qiáng)堿或有機(jī)氯等腐蝕性溶劑。在溶劑瓶中的溶劑過濾頭可能會(huì)堵塞，必要時(shí)小心拿下用強(qiáng)酸（35%硝酸）浸泡1小時(shí)，用水沖洗，但不要使用超聲處理。Author：Tianyou Yue3溶劑準(zhǔn)備：過濾防止固體顆粒損傷儀器或柱頭使用小于 0.5 m過濾膜.有機(jī)物 - Teflon 水 - Nylon 66使用HPLC純?nèi)軇┻^濾裝置真空Author：Tianyou Yue4溶劑準(zhǔn)備：脫氣溶劑準(zhǔn)備：脫氣目的脫氣方法He脫氣排除溶解在流動(dòng)相中的氧氣和氮?dú)?回流加熱脫氣真空脫氣超聲脫氣Author：Tianyou Yue5在線真空脫氣機(jī)在線真空脫氣機(jī)的管路容量為12m

3、l，壓力范圍為110Torr-190Torr。為保證脫氣機(jī)的良好使用性能，在下述情況下需要用注射器抽洗脫氣機(jī)管路，每個(gè)通道使用不低于30ml的異丙醇。1，新的脫氣機(jī)或新的管路；2，更換了溶劑，尤其是緩沖鹽與有機(jī)相之間、兩個(gè)不相容流動(dòng)相之間的互換時(shí)；3，輸液泵關(guān)閉了一段時(shí)間，或使用揮發(fā)性溶劑混合物。4，完成上述操作后，打開清洗閥，用大流量沖洗，5ml/min。12 mlSolenoid valveAuthor：Tianyou Yue6關(guān)于泵（四元泵）阻尼器/壓力傳感器泵驅(qū)動(dòng)溶劑瓶梯度比例閥主動(dòng)輸入閥AV出口球閥BOV清洗閥Purge Valve柱塞桿PistonAuthor：Tianyou Yu

4、e7二元泵工作原理二元泵工作原理DamperPurge valveMixerABInlet valveOutlet valveWasteInlet valveOutlet valveAuthor：Tianyou Yue81，在線沖洗組件Seal Wash，可選件。2，密封墊；3，Washer密封膜；關(guān)于泵（泵頭組件）123密封墊Seal出口球閥BOV清洗閥Purge Valve柱塞桿Piston主動(dòng)輸入閥AVAuthor：Tianyou Yue9更換過濾白頭在清洗閥中的過濾白頭需要更換，在清洗狀態(tài)下，設(shè)置流量為5ml/min，此時(shí)系統(tǒng)壓力如果超過10bar，則需更換過濾白頭。更換步驟：1，關(guān)閉

5、泵電源；2，用扳手去掉通往進(jìn)樣器上的毛細(xì)管，拔掉廢液管；3，用專用扳手小心把清洗閥卸下來；4，輕輕去掉聚四氟乙烯密封墊和金密封墊，將過濾白頭拿出；5，更換新的過濾白頭，裝上聚四氟乙烯密封墊和金密封墊；6，裝上清洗閥；7，連接管路。過濾白頭聚四氟乙烯密封墊金密封墊清洗閥PurgeValveAuthor：Tianyou Yue10更換過濾白頭1，去掉毛細(xì)管，廢液管2，卸掉清洗閥3，更換過濾白頭4，更換白頭，裝好清洗閥Author：Tianyou Yue11泵的注意事項(xiàng)1，溶劑的過濾、脫氣；2，避免使用腐蝕性溶劑；3，在滿足分析的前提下，盡可能使用較低的流速較低的系統(tǒng)壓力。4，更換過濾白頭；5，考慮

6、溶劑的相容性；6，盡可能使用新鮮的水；7，使用0.01M以上濃度的緩沖溶液要選配柱塞清洗組件，清洗液不能干涸。8，使用正相溶劑比如環(huán)己烷時(shí)，建議使用聚乙烯密封墊，部件號(hào)為0905-1420，在0200Bar下使用聚乙烯密封墊比標(biāo)準(zhǔn)密封墊更耐磨損。四元泵： 四元泵多通道比例閥MCGV使用時(shí)注意，緩沖溶液要放在A、D通道，以避免鹽顆粒析出。建議A通道：水；B、C通道：有機(jī)溶劑；D通道：緩沖溶液。二元泵： 設(shè)置壓縮因子補(bǔ)償，以達(dá)到最佳比例效果。Author：Tianyou Yue12樣品準(zhǔn)備樣品完全溶解在流動(dòng)相中樣品沒有完全溶解過濾樣品，確保樣品中不含固體顆粒用流動(dòng)相或比流動(dòng)相弱的溶劑溶解樣品進(jìn)樣量

7、盡量小關(guān)于進(jìn)樣器Author：Tianyou Yue13六通閥手動(dòng)進(jìn)樣閥 - 六通閥ToWasteSample Loop(Fixed Volume)FromToColumnSampleSyringeLoadInjectToColumnPumpFrom PumpTo Waste手動(dòng)進(jìn)樣器Author：Tianyou Yue14樣品要干凈、經(jīng)過過濾。合適的進(jìn)樣體積，比如定量環(huán)為20ul，進(jìn)樣體積應(yīng)為010ul，或者20ul，進(jìn)樣20ul時(shí)注射樣品量應(yīng)至少60ul以上。定期清洗進(jìn)樣閥，清洗過程如下： 1，將進(jìn)樣閥旋至Inject位置； 2，用帶有專用頭的注射器用純水約2030ml沖洗進(jìn)樣閥； 3，將

8、進(jìn)樣閥旋至Load位置。 參考左圖。手動(dòng)進(jìn)樣器Author：Tianyou Yue15自動(dòng)進(jìn)樣器Metering device6-port valveSampling unitFrom pumpTo columnTo waste準(zhǔn)備位置準(zhǔn)備位置調(diào)用樣品瓶調(diào)用樣品瓶吸樣品吸樣品進(jìn)樣和運(yùn)行位置進(jìn)樣和運(yùn)行位置標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)樣過程標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)樣過程 .Author：Tianyou Yue16自動(dòng)進(jìn)樣器樣品要干凈、經(jīng)過過濾。l洗針：把樣品殘留洗針：把樣品殘留降低到最小限度，降低到最小限度，可降低進(jìn)樣的記憶可降低進(jìn)樣的記憶效應(yīng)，洗針瓶最好效應(yīng)，洗針瓶最好不要加瓶墊。不要加瓶墊。l多次吸液多次吸液用于進(jìn)樣量大于用于進(jìn)樣量

9、大于100100ululAuthor：Tianyou Yue17關(guān)于恒溫柱箱控制范圍：最高80C，低溫低于室溫10C。預(yù)熱塊體積左面為3ul，右面為6ul，除非有特殊要求，左右溫度應(yīng)保持一致。一定要關(guān)閉前面板。Author：Tianyou Yue18預(yù)柱和保護(hù)柱從泵來的 流動(dòng)相預(yù)柱進(jìn)樣口保護(hù)柱分析柱至檢測(cè)器預(yù)柱是針對(duì)流動(dòng)相來保護(hù)色譜柱 保護(hù)柱是針對(duì)樣品來保護(hù)色譜柱色譜柱保護(hù)色譜柱保護(hù)Author：Tianyou Yue19色譜柱保護(hù)色譜柱保護(hù) 過濾所有的溶劑和樣品過濾所有的溶劑和樣品 使用保護(hù)柱使用保護(hù)柱 儀器在使用完畢，要沖洗整個(gè)系統(tǒng)，移走系統(tǒng)中的緩沖液。儀器在使用完畢，要沖洗整個(gè)系統(tǒng)，移走

10、系統(tǒng)中的緩沖液。 柱子在不使用時(shí)，兩端密封保存柱子在不使用時(shí)，兩端密封保存 在適當(dāng)?shù)娜軇┲斜４嬷釉谶m當(dāng)?shù)娜軇┲斜４嬷?注意色譜柱的注意色譜柱的pHpH值使用范圍值使用范圍 不要高壓沖洗柱子不要高壓沖洗柱子 不要高溫下過長(zhǎng)時(shí)間使用硅膠鍵合相不要高溫下過長(zhǎng)時(shí)間使用硅膠鍵合相Author：Tianyou Yue20檢測(cè)器DADDAD的光源氘燈有一定的半衰期，一般為1000小時(shí)左右，所以在沒有樣品分析任務(wù)時(shí)要關(guān)閉氘燈，以延長(zhǎng)氘燈的使用壽命。流動(dòng)池污染后，會(huì)造成靈敏度下降、噪聲加大，應(yīng)避免臟的樣品進(jìn)入流動(dòng)池。定期使用異丙醇沖洗系統(tǒng)對(duì)保持流動(dòng)池性能有一定好處。更換氘燈。Author：Tianyou Y

11、ue21檢測(cè)器VWDVWD的光源氘燈有一定的半衰期，一般為1000小時(shí)左右，所以在沒有樣品分析任務(wù)時(shí)要關(guān)閉氘燈，以延長(zhǎng)氘燈的使用壽命。流動(dòng)池污染后，會(huì)造成靈敏度下降、噪聲加大，應(yīng)避免臟的樣品進(jìn)入流動(dòng)池。定期使用異丙醇沖洗系統(tǒng)對(duì)保持流動(dòng)池性能有一定好處。更換氘燈。Author：Tianyou Yue22計(jì)算機(jī)操作系統(tǒng)的維護(hù)計(jì)算機(jī)操作系統(tǒng)的維護(hù)經(jīng)常性刪除臨時(shí)文件子目錄中及垃圾斗中的文件。使用ScanDisk或Checkdisk檢查盤上的錯(cuò)誤。消除硬盤上的碎片（Windows 2K）。使用殺病毒軟件。創(chuàng)建Emergency Repair disk (Windows 2K)。運(yùn)行rdisk。如果計(jì)算機(jī)被非法關(guān)機(jī)，臨時(shí)文件子目錄中會(huì)留下許多臨時(shí)文件，如果不及時(shí)清除，這些文件會(huì)影響系統(tǒng)的性能。所以，這些文件應(yīng)定期刪除。定期拷貝有用的文件。定期拷貝有用的文件。在工作站中有用