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文檔簡介

1、細胞生物學目錄第一章緒論第二章細胞生物的研究方法和技術第三章質膜的跨膜運輸第四章細胞與環(huán)境的相互作用第五章細胞通訊第六章核糖體和核酶第七章線粒體和過氧化物酶體第八章葉綠體和光合作用第九章內質網,蛋白質分選,膜運輸第十章細胞骨架,細胞運動第H一章細胞核和染色體第十二章細胞周期和細胞分裂第十三章胚胎發(fā)育和細胞分化第十四章細胞衰老和死亡第一章緒論1 .原生質體:被質膜包裹在細胞內的所有的生活物質,包括細胞核和細胞質細胞質:細胞內除核以外的原生質,即細胞中細胞核以外和細胞膜以內的原生質部分原生質體:除去細胞壁的細胞2 .結構域:生物大分子中具有特異結構和獨立功能的區(qū)域3 .裝配模型:模板組裝,酶效應組

2、裝,自組裝4 .五級裝配:第一級,小分子有機物的形成第二級,小分子有機物組裝成生物大分子第三級,由生物大分子進一步組裝成細胞的高級結構第四級,由生物大分子組裝成具有空間結構和生物功能的細胞器第五級,由各種細胞器組裝成完整細胞6.支原體:目前已知的最小的細胞第二章細胞生物的研究方法和技術1 .顯微鏡技術:光鏡標本制備技術、2 .光鏡標本制備技術步驟:樣品固定、包埋與切片、染色3 .電子顯微鏡種類:透射電子顯微鏡,掃描電鏡,金屬投影,冷凍斷裂和冷凍石刻電鏡,復染技術,掃描隧道顯微鏡4 .細胞化學技術:酶細胞化學技術,免疫細胞化學技術,放射自顯影5 .細胞分選技術:流式細胞術6 .分離技術:離心技術

3、,層析技術,電泳技術第三章質膜的跨膜運輸1 .細胞功能:外界與通透性障礙,組織和功能定位,運輸作用,細胞間通訊,信號檢測2 .膜化學組成:膜脂,膜糖,膜蛋白3 .膜脂的三個種類:磷脂,糖脂,膽固醇4 .脂質體用途:用作生物膜的研究模型,作為生物大分子與藥物的運載體5 .膜糖功能:細胞與環(huán)境的相互作用,接觸抑制,信號轉導,蛋白質分選,保護作用。6 .膜蛋白類型:整合蛋白,外周蛋白,脂錨定蛋白7 .膜蛋白功能:運輸蛋白,酶,連接蛋白,受體(信號接受和傳遞)8 .不對稱性的研究方法:冰凍斷裂復型,冰凍蝕刻9 .膜流動性研究方法:質膜融合,淋巴細胞的成斑成帽效應,熒光漂白恢復技術10 .膜流動性的重要

4、性:酶活性,信號轉導,物質運輸,能量轉換,細胞周期11 .影響膜脂流動性的因素:脂肪酸鏈,膽固醇,卵磷脂/鞘磷脂比值12 .影響膜蛋白流動的因素:整合蛋白,膜骨架,細胞外基因,相鄰細胞,細胞外配體、抗體、藥物大分子13 .膜骨架的主要蛋白:血影蛋白,肌動蛋白和原肌球蛋白,帶4.1蛋白,錨定蛋白14 .轉運蛋白質包括:載體蛋白,通道蛋白15 .協(xié)同運輸的方向:同向協(xié)同,反向協(xié)同第四章細胞與環(huán)境的相互作用1 .細胞表面結構:細胞外被、膜骨架、胞質溶膠2 .細胞外被功能:連接,細胞保護,屏障3 .糖萼:由細胞表面的碳水化合物形成的質膜保護層,又稱為多糖包被。4 .細胞壁成分:纖維素,半纖維素,果膠質

5、,木質素,糖蛋白5 .細胞外基質成分:蛋白聚糖(成分是糖胺聚糖),結構蛋白,黏著蛋白6 .透明質酸:細胞外基質中游離存在,在結締組織中起強化、彈性和潤滑作用,具有抗壓能力7 .膠原的功能:是骨、腱和皮膚組織中的主要蛋白,起細胞外基因骨架作用;促進細胞生長;維持并誘導細胞分化。8 .彈性蛋白:是彈性纖維的主要成分,富含甘氨酸和谷氨酸。9 .黏著蛋白的種類:纖粘連蛋白FN,層粘連蛋白LN10 .FN功能:介導細胞黏著,是細胞外基質的組織者,影響細胞的遷移11 .LN功能:是基膜的主要結構;介導細胞黏著于膠原,使之發(fā)生鋪展;影響細胞遷移、生長、分化。12 .基膜的組成成分:層粘連蛋白,巢蛋白,IV型

6、膠原,硫酸肝素糖蛋白13 .基膜作用:對組織起支持作用,調節(jié)分子通透性,作為細胞運動的選擇性通透屏障14 .細胞識別中起作用的事糖被,引起細胞黏著的是膜蛋白15 .細胞識別系統(tǒng):抗原一抗體的識別,酶與底物的識別,細胞間的識別,酶與信號分子的識別16 .識別反應三類型:內吞,細胞黏著,信號反應17 .鈣黏著蛋白能通過它們所在的細胞類型進行區(qū)別:E-鈣黏著蛋白(表皮),N-鈣黏著蛋白(神經),P-鈣黏著蛋白(胎盤)18 .斑塊連接分為:黏著連接,橋粒19 .黏著連接有兩種:黏著帶:細胞-細胞間黏著斑:細胞與細胞外基質20 .參與黏著連接的組分:鈣黏著蛋白,肌動蛋白,細胞質斑21 .黏著斑組分:整聯(lián)

7、蛋白,纖連蛋白22 .橋粒分為:橋粒(鈣黏著蛋白),半橋粒(整聯(lián)蛋白)細胞是通過中間纖維錨定在細胞骨架上。23 .通訊連接:一種特殊的細胞連接,位于特化的具有細胞間通訊作用的細胞。方式:間隙連接,胞間連接,化學突觸第五章細胞通訊1 .細胞通訊的一般過程:識別,信號轉導2 .細胞應答包括:酶活性的變化,基因表達的變化,細胞骨架,通透性的變化,細胞死亡程序的變化3 .細胞通訊的方式:信號分子,相鄰細胞表面分子的黏著,細胞與細胞外基質連接4 .細胞通訊的基本過程:信號分子的合成信號分子的釋放信號分子的傳遞靶細胞與信號分子識別胞外信號的跨膜轉導靶分子的激活和細胞應答的開始5 .信號分子分為:水溶性,脂

8、溶性6 .信號分子與細胞通訊:糖分泌,化學突觸,內分泌7 .信號分子種類:激素(內分泌信號),局部介質(糖分泌信號),神經遞質(神經元信號)8 .受體存在位置:細胞表面受體(水溶性),細胞內部受體(脂溶性)9 .細胞內部受體的基本結構:C端配體結合結構域,中間結構域,N端轉錄激活結構域10 .細胞表面受體主要種類:離子通道偶聯(lián)受體,G蛋白偶聯(lián)受體,酶連受體。11 .跨膜受體:12 .研究細胞表面受體的方法:單克隆抗體標記法,親和標記法13 .兩種信號轉導類型:G-蛋白,酶活性。14 .信號轉導包括:磷酸化和去磷酸化15 .級聯(lián)反應:16 .第二信使特點:僅在細胞內部起作用,能啟動或調節(jié)細胞內稍

9、晚的反應,五種(cAMP,DG,IP3,cGMPCa2+)17 .細胞質膜上最多,最重要的信號轉導系統(tǒng):G-蛋白連接的受體18 .信號轉導系統(tǒng)的三部分:七個螺旋跨膜受體,G-蛋白,效應物19 .G-蛋白連接的受體的兩個主要結構域:外部結構域(識別信號分子),內部結構域(連接到G蛋白,調控某種結合酶的活性,產生第二信使)20 .效應物:接收信息后能夠產生第二信使的物質21 .G蛋白的a亞基的三個功能位點:GTP結合位點,GTP酶活性位點,ATP核糖化位點22 .PKA中,第二信使cAMP勺類型:激活型,抑制型23 .激活型系統(tǒng)的組成:Rs激活型受體,Gs激活型的G蛋白,效應物24 .抑制型系統(tǒng)的

10、組成:抑制型受體,抑制型G蛋白(Giprotein),效應物25 .PKA信號途徑:產生cAMP信號放大(蛋白激酶A的活化),信號的解除和抑制26 .被激活的PKA作用方式:使關鍵把酶磷酸化,調節(jié)基因表達27 .毒素影響cAMP信號途徑:霍亂毒素(choleratoxin),百日咳毒素(pertussistoxin)28 .信號系統(tǒng)的組成:受體,Gq蛋白,PLC-0(激活PLC,在PKA途徑中激活AC29 .PKC途徑的第二信使:雙信號(DAGWIP3的產生)30 .細胞如何調控Ca2咪度?細胞中存在Ca2+M可幫助細胞進行Ca2+調控細胞質膜的一側有和Ca2+吉合的位點,一次可結合兩個Ca2

11、+,結合后使酶激活,并結合上一分子的ATP伴隨ATP的水解和酶被磷酸化,Ca2琛構型發(fā)生改變,結合Ca2+勺一面轉到細胞外側,由于結合親和力低的Ca2+被釋放,此時酶發(fā)生去磷酸化,構型恢復到靜止狀態(tài)。當細胞內Ca2+濃度升高,Ca2胴鈣調蛋白結合,形成復合物,該復合物同抑制區(qū)結合,釋放激活位點,泵開始工作。當濃度低時,CaM同抑制區(qū)脫離,抑制區(qū)又同激活位點結合,使泵處于靜止狀態(tài)。另一種情況。抑制區(qū)的磷酸化從而失去抑制作用,反之,起抑制作用。32 .信號的終止:DAG勺水解,IP3的水解,Ca2+勺水解33 .酶連接受彳的特點:不需要G蛋白,而是通過受體自身的蛋白激酶的活性來完成信號跨膜轉換。該

12、通過對信號反應慢。與細胞分裂有關34 .酶連受體的結構:配體結合區(qū),像PK的區(qū)域,催化區(qū)域35 .酶連受體類型:受體酪氨酸激酶,受體鳥昔環(huán)化酶,受體酪氨酸磷酸酶,受體絲氨酸激酶,酪氨酸激酶偶聯(lián)受體。內源酶促活性受體36 .Ras的信號放大作用:蛋白活性改變,基因表達改變37 .趨同(convergence):不同的信號因子作用于不同的受體,但能整合激活一個共同的效應物。(信號不同,受體不同,激活產物相同)趨異(divergence):相同配體,能轉換激活許多不同的效應物,引起細胞不同反應。(信號相同,受體相同,效應不同)交談(crosstalk):不同信號轉導途徑間的相互影響。(信號分子不同,

13、受體不同,效應相互交談、影響。)38 .信號終止的途徑:信號分子的水解,受體鈍化,受體的減量調節(jié)第六章核糖體和核酶1,核糖體的rRNA基因:選擇性擴增,轉錄,前體rRNA的加工和修飾,5SrRNA的合成和加工2,前體rRNA加工修飾時,甲基化修飾主要部位在核糖第二位羥基上。3, RNA聚合酶I參與rRNA三大亞基的轉錄4, 5SrRNA的合成和加工時,在核仁外進行,通過聚合酶W轉錄5,小亞基的rRNA和蛋白質的裝配關系:組成核糖體的蛋白質和rRNA在大小亞基中均有一定的空間排布6,核糖體在組裝過程中,蛋白質與RNA的結合具有先后層次。根據rRNA結合的順序,將核糖體蛋白分為兩種:初級結合蛋白,

14、次級結合蛋白7,大腸桿菌的核糖體與葉綠體核糖體亞基重組后具有功能,線粒體的核糖體亞基同原核生物核糖體亞基相互重組后核糖體沒有功能。8,核糖體與mRNA吉合的位點:SD序列9,嗯吟毒素(puromycin)對蛋白質合成有抑制作用10,N端規(guī)則(N-endrule):多肽鏈N端特異性的氨基酸與半衰期有關11,真核生物中的小分子RNA#類:snRNA(核內小RNA,scRNA(胞質小RNA12,反義snRNA在前體RNRm工中的作用:與特定的蛋白質形成核小核糖核蛋白,在真核生物的前體rRNA加工時候需要大量的snRNA的幫助,snRNA與rRNA進行互補形成的RNA-RN烈鏈部分可彳為前體rRNA進

15、行加工的標志13,核剪接:發(fā)生在細胞核中,從前體mRN即切除內含子,加工成熟的mRN微運送到細胞質。遵循GU-AU規(guī)則14, I組內含子剪接特點:需要游離的鳥背,存在于低等真核生物細胞核rRNA基因和真菌線粒體基因中。基因:前體rRNA、mRNAtRNA15, II組內含子剪接特點:內含子轉錄后形成6個發(fā)夾環(huán),遵循GU-AU規(guī)則,不需要snRNA參與,不形成剪接體,形成套索,存在的細胞器:線粒體和葉綠體?;颍呵绑wmRNA第七章線粒體和過氧化物酶體1,外膜功能:半透性。參與磷脂的合成,將線粒體基質中進行徹底氧化的物質先進行初步分解2,內膜功能:高度不通透。ATP的合成和電子傳遞鏈參與氧化磷酸化

16、。轉運蛋白參與。合成酶類:合成DNARNA蛋白質3,膜間隙功能:建立電化學梯度4,細胞內Ca2+乍用?細胞如何調控Ca2+乍用?(三個部位)5, (12分)蛋白質合成后如何轉運到細胞的不同部位?(三條途徑:內質網高爾基體溶酶體,線粒體葉綠體,核內)Ca2琉,線粒體,細胞質基質中6, Ca2侑哪些功能?(膜內:Ca2課,Na+-Ca2佼換器,膜外:內質網鈣調蛋白)7,細胞質中的核糖體在合成蛋白質時有兩種可能的存在狀態(tài):游離核糖體(freeribosome),膜結合核糖體(membrane-boundribosome)8 ,蛋白質的兩種轉運模型:翻譯后轉運(post-translationaltr

17、anslation)、共翻譯轉運(Co-translationaltranslation)9 ,freeribosome:前導肽leadingpeptide,轉運肽transitpeptide,導向序歹Utargetingsequence,導向信號targetingsignal10 .membrane-boundribosome:信號序歹U,信號肽11,線粒體轉運肽轉運蛋白質的特點:受體,接觸點,去折疊,消耗能量,轉運肽酶,分子伴侶12,前導肽的特異性:具有細胞結構的特異性,前導肽的不同片段含有不同的信息13,如何證明信號肽引導蛋白質進入線粒體?實驗設計:無細胞體系合成酵母線粒體蛋白質,分離線

18、粒體,與具有線粒體基質定位信號的前體蛋白溫育,胰蛋白酶處理14,線粒體內膜空間蛋白的定位:保守性尋靶,非保守性尋靶15,線粒體內膜蛋白定位涉及:TOMg合體,TIM復合體,OXA1合體15,線粒體功能:氧化磷酸化16,電子載體種類:鐵硫蛋白。黃素蛋白,細胞色素,泛素17,內膜上的F1-F0顆粒是呼吸鏈中ATP合成的部位,是氧化磷酸化的偶聯(lián)裝置。18,F1-F0顆粒結構:headsection,stalksection,membranesection19,電子傳遞鏈分為:主呼吸鏈(包括復合物I、W、IV,從NADHe的電子依次經過這三個復合物,進行傳遞),次呼吸鏈(包括復合物U、皿、IV,來自F

19、ADH2勺電子不經過I)20,過氧化氫酶體的標志酶:過氧化氫酶第八章葉綠體和光合作用1,葉綠體的形態(tài):前質體,色素體,白色體,葉綠體,有色體2,類囊體成分:蛋白質,脂質3,葉綠體蛋白定位機理與線粒體相似:posttranslationaltranslation第9章EndomembraneSystemproteinsortingandmembranetraffici,膜結合細胞器生物意義:形成特定的功能區(qū)域和微環(huán)境,合理使用資源,集團化管理,提高工作效率2,內膜系統(tǒng)特點:獨立性(內膜封閉的區(qū)室,執(zhí)行獨立的功能),協(xié)作性(生化合成途徑,分泌途徑,內吞途徑)3,與生俱來的三種信號序列:壽命信號,加

20、工信號,定位信號4,膜系統(tǒng)研究方法:放射性自顯影技術,用離心的方法來分離微粒體5,內質網(endoplasmicreticulum)的種類:粗面內質網(roughER):合成蛋白質?;鎯荣|網(smoothER):形成小泡6,核膜與內質網關系:外核膜上有核糖體附著核膜與內質網想通7,內質網的外表面:溶膠面sytosolicspace內質網的內表面:潴泡面cisternalspace8,特殊類型的內質網:肌質網sarcoplasmicreticulum9,SER酶類:糖代謝酶類,脂代謝酶類,蛋白質的加工酶類,脫毒與相關的氧化酶10,磷脂轉運方式:小泡-內膜系統(tǒng)磷脂轉運蛋白PTP11,離體實驗證明

21、了信號肽的存在:RER小泡對產物的影響,蛋白水解酶實驗,多聚核糖體的離體翻譯實驗12,信號肽種類:N-端信號肽,內含信號肽13, SPR(signalrecognitionpartical信號識別特例)的三個功能結構域:翻譯暫停結構域,信號肽識別結合位點,SPR受體蛋白結合位點14, DP(Dockingprotein停靠蛋白)是SPR在內質網膜上的受體蛋白15,跨膜信號和膜蛋白的方向:分泌蛋白:起始轉移信號膜蛋白:終止轉移序列,可切割的信號序列cleavablesignalsequence,內部新號序列internalsignalsequence16,BiP蛋白:一類分子伴侶,在ER中有防止

22、錯誤折疊的作用17,蛋白質在ER中的加工修飾:二硫鍵的形成,N連接的糖普化,羥基化修飾,GPI脂錨定蛋白18,高爾基體的極性:CGN5爾基內側網絡(順面,形成面,初級分選站),中間潴泡(加工和修飾),TGN高爾基外側網絡(外側面,成熟面,分類包裝)19,高爾基體標記酶:糖基轉移酶20,O-linkedglycosylation氧連接的糖基化:將糖鏈轉移到多肽鏈的絲氨酸、蘇氨酸或羥賴氨酸的羥基上。21,溶酶體膜的穩(wěn)定性:溶酶體的膜蛋白高度糖基化,膜上含有能促進膜穩(wěn)定性的膽固醇22,溶酶體標記酶:酸性磷酸酶(去磷酸化)23,次級溶酶體包括:自噬性溶酶體,異噬性溶酶體24,溶酶體的生物發(fā)生:甘露糖6

23、磷酸途徑、非甘露糖6磷酸途徑25,溶酶體的酶上有個特殊標記:6磷酸甘露糖M6P,高爾基體外側網絡通過對M6P的識別將溶酶體的酶分選出來。26,溶酶體膜中的糖蛋白:0葡糖腦普脂酶27,溶酶體膜結合蛋白前體被合成的溶酶體酶:酸性磷酸酶28,溶酶體的非M6P途徑的信號:酪氨酸29,溶酶體功能缺失造成的疾病:包涵體細胞疾病,休克,糖原貯積癥30,細胞分泌經過:內質網,高爾基體,脂膜plasmamembrane31,分泌種類:組成型分泌途徑,調節(jié)型分泌途徑32,細胞內吞:吞噬作用(巨噬細胞,中性細胞),吞飲作用(液相內吞,吸附內吞)33,內吞過程中受體與配體的命運:受體再循環(huán)、配體被降解受體與配體一起再

24、循環(huán)(轉鐵蛋白結合鐵離子的內吞作用)受體配體都被降解轉胞吞作用34,網絡蛋白小泡的形成過程:披網絡蛋白小窩,披網絡蛋白小泡,有被小泡,無被小泡,分子伴侶hsc70蛋白參與該過程,需要ATPoCa2慘與了包被的形成和去被的過程。35,網絡蛋白小泡包括:網格蛋白,銜接蛋白,發(fā)動蛋白36,COPt膜小泡的形成種類:ARF:裝配反應因子,參與COPI被膜小泡的裝配。Sar1:參與COPQ被膜小泡的裝配37,膜合成的兩種類型:自裝配模型,膜擴展模型38,脂錨定蛋白:糖脂錨定蛋白,脂肪酸錨定蛋白39,初級內體:是由于細胞的內吞作用而形成的含有內吞物質的膜結合的細胞器,通常是管狀和小泡狀的網絡結構集合體。4

25、0,次級內體中的pH呈酸性,且具有分揀作用,次級內體又被稱為CURL(compartmentofuncouplingofreceptorandligand),意思是受體與配體非偶聯(lián)的區(qū)室。)10章Cellcytoskeleton細胞骨架andCellmotility細胞運動1,微絲功能:作為支架,在細胞中形成框架結構,為細胞內物質和細胞器的運輸運動提供機械支持,為細胞的位置移動提供力,為信使RNA提供錨定位點,促進mRNA羽譯成多肽是細胞分裂的機器,參與信號轉導2,細胞骨架研究方法:熒光顯微鏡,電視顯微鏡,電子纖維技術3,根據結構,MT種類:單體,雙聯(lián)體,三聯(lián)體根據穩(wěn)定性,分為:動態(tài)的短壽微管

26、,穩(wěn)定的長壽微管4,MAP蛋白功能:使微管相互交聯(lián)形成束狀結構促進微管聚合作為分子發(fā)動機轉運細胞物質的軌道提高微管的穩(wěn)定性同微管結合能控制微管長度,防止微管解聚5,分子發(fā)動機分為:驅動蛋白家族,動力蛋白家族,肌球蛋白家族6,微管功能:維持細胞形態(tài)細胞內物質運輸鞭毛和纖毛運動紡錘體和染色體運動7,微管的裝配:原纖維微管核化片狀結構形成fMT形成加GTP帽子微絲的裝配過程:成核,延伸,穩(wěn)定狀態(tài)8,影響微絲裝配核去裝配的因素:G肌動蛋白臨界濃度,離子影響9,肌動蛋白的結合蛋白種類:單體隔離蛋白,交聯(lián)蛋白,纖維割斷蛋白,肌動蛋白絲去聚合蛋白,膜結合蛋10,三類肌球蛋白結構:myosinI和V:鈣調素輕

27、鏈。運輸作用myosinU:必需輕鏈,調節(jié)輕鏈。肌收縮,胞質分裂11,微絲的功能:硬粒纖維和微絨毛運輸胞質環(huán)流細胞運動(微絲的裝配假說和滑動假說)細胞質分裂細胞形狀的維持肌肉收縮12,中間纖維特點:沒有極性是纖維狀,不是球形自發(fā)裝配,不需要ATP和結合蛋白受細胞周期調控具有組織特異性,不同類型細胞含有不同的IF13,中間纖維的裝配:單體二聚體四聚體3個四聚體組成原絲8條四聚體結構14,中間纖維功能:提供機械支撐參與細胞聯(lián)接維持核的形態(tài)第H一章細胞核和染色體1,核轉運系統(tǒng):核蛋白,核定位信號,核輸出信號,輸入蛋白,輸出蛋白2,染色質和染色體,在化學本質上沒有差異,在構型上不同,是遺傳物質在細胞周

28、期不同階段的不同表現形式。3, Z型DNAf細胞癌變有關4, DNA吉構穩(wěn)定遺傳的功能序列:ARS(自主復制序列,復制起始序列),CEN(著絲粒序列),TEL(端粒序列)5,人工染色體:人工構建的含有穩(wěn)定染色體的天然結構序列,即ARSCENTEL序列的微小染色體,可以像天然染色體一樣在寄主細胞中穩(wěn)定遺傳。6,組蛋白種類:H1、H2AH2BH47, H2AH2BH4的作用:與DNAtS裝成核小體H1作用:在構成核小體時起連接作用,并賦予染色質極性8,非組蛋白功能:參與染色體構建,參與DNA復制,調控基因表達9,反式作用因子:轉錄因子,影響位于其他染色體上的基因的表達順式作用元件:控制下游基因轉錄

29、,影響同一DNA分子上基因的表達10,反式作用因子:鋅脂結構基序,螺旋-轉角-螺旋基序,亮氨酸拉鏈基序,螺旋-環(huán)-螺旋基序11,核小體:是染色體的基本結構單位,146bp的DNA&繞組蛋白八聚體1.75圈。12,巨型染色體:多線染色體,燈刷染色體,13,核仁的結構:纖維中心,致密纖維組分,顆粒區(qū)。14,核仁的功能:rRNA的合成,rRNA前體的加工,參與核糖體大小亞基的裝配,控制蛋白質合成的速度。15,核基質功能:與染色體構建有關,是基因轉錄加工的場所為DNA勺復制提供支架結構支持第12章CellcyclesandCelldivision1,細胞類型:持續(xù)分裂細胞,終端分化細胞,休眠細

30、胞2,G1:12hS:68hG2:34hM:1h3,細胞周期時間的確定:標記有絲分裂百分率法:對測定細胞進行脈沖標記、定時取材、利用放射自顯影技術顯示標記細胞,通過統(tǒng)計標記有絲分裂細胞百分率的方法測定細胞周期4,細胞周期的研究方法:條件突變體,細胞周期同化(自然同步化,人工同步化)5,人工同步化:誘導同步法,選擇同步法6,誘導同步法:采用胸腺嗑咤核音阻斷技術,高濃度的胸腺嗑咤核音能阻斷DN砧成所需的核昔酸的合成。7,選擇同步法:有絲分裂選擇法(單層細胞培養(yǎng)),細胞沉淀分離法(懸浮細胞培養(yǎng))8,成熟促進因子MPEM期細胞中存在的促進細胞分裂的因子。是由催化亞基和調控亞基組成的異質二聚體。9,泛素

31、介導的細胞周期蛋白的降解:E1:遍在蛋白活化酶。E2:遍在蛋白綴合酶。E3:遍在蛋白剪接酶10,蛋白質的降解過程:一是進行標記,由泛素完成。二是蛋白酶解作用,由蛋白酶體催化11,泛素調節(jié)的蛋白質降解過程:被降解的蛋白質與多個泛素分子共價結合,從而被標記蛋白質-泛素共價結合的復合物與蛋白酶體頂部的帽子結合泛素被切除。未折疊的蛋白質被送入蛋白酶體的腔蛋白質在蛋白酶體中降解11, APC(促后期復合物)的活性調節(jié)控制周期蛋白B的降解12,三類周期蛋白-CDK復合物:G1期周期蛋白-CDK復合物,S期周期蛋白-CDK復合物,有絲分裂周期蛋白-CDK復合物13,哺乳動物細胞周期的調控:G1期,在生長因子

32、的刺激下,cyclinD表達,并與CDK4CDK6結合,使下游的蛋白質如Rb磷酸化,Rb釋放出轉錄因子E2F,促進許多基因的轉錄。G1-S期,cyclinE與CDK2吉合,促進細胞進入S期cyclinE的抗體能使細胞停滯于G1期。在G2-M期,cyclinA、cyclinB與CDK1結合,CDK1使底物蛋白磷酸化,如將組蛋白H1磷酸化導致染色體凝縮,核纖層蛋白磷酸化使核膜解體。在中期當MPF活性達到最高時,激活后促進因子APC將泛素連接cyclinB上,cyclinB被蛋白酶體降解,完全一個細胞周期。13,細胞分裂基因:酵母細胞的START(起始點),哺乳動物的R點或限制點(關卡)14, P5

33、3蛋白在細胞周期調控中的作用:抑制細胞周期,抑制DNA復制15, MPF的作用機制:使染色體凝聚核被膜解體高爾基體和內質網破碎微管結合蛋白磷酸化16,紡錘體微管類型:動力微管,極微管,星微管17,中心粒:確定分裂極,形成紡錘體18,染色體分離后期的兩個階段:后期A,后期B19,力產生的兩點機制后期A:微管去聚合假說后期B:紡錘體微管滑動假說20,胞質分裂機制:MPF調節(jié)肌球蛋白和胞質分裂21,減數分裂類型:配子減數分裂,合子減數分裂,抱子減數分裂第13章Embryodevelopmentandcelldifferentiation1,受精作用:頂體反應(一級阻斷)皮層反應(二級阻斷)原核融合2,受精后胚胎的早期發(fā)育主要包括:卵裂,胚泡形成,宮內植入3,細胞決定子:從受精卵第一次卵裂開始,細胞核就受到內環(huán)境的影響,這些特殊的細胞質組分是細胞決定子。支配著細胞分化的途徑。4,胚胎誘導(embryonicinduction):動物在一定的胚胎發(fā)育時期,一部分細胞影響相鄰細胞使其向一定方向分化的作用。5,轉決定是一群細胞而不是單一細胞發(fā)生變化6,持家基因housekeep

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