液相-2010中國(guó)藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1、中國(guó)藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程2010年版 高效液相色譜法11、對(duì)儀器的一般要求l 所用儀器為高效液相色譜儀，由輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器和色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成 ，儀器應(yīng)按現(xiàn)行國(guó)家技術(shù)監(jiān)督局“液相色譜儀檢定規(guī)程”定期檢定并符合有關(guān)規(guī)定。1.1 色譜柱l最常用的色譜柱填充劑為化學(xué)鍵合硅膠 。反相色譜系統(tǒng)使用非極性添充劑 ，以十八烷基硅烷鍵合硅膠最為常用，辛基硅烷鍵合硅膠和其他類型的硅烷鍵合硅膠（如氰基鍵合硅烷和氨基鍵合硅烷等）也有使用。正相色譜系統(tǒng)使用極性填充劑，常用的填充劑有硅膠等。離子交換色譜使用離子交換填充劑；分子排阻色譜使用凝膠或高分子多孔微球等填充劑；對(duì)映異構(gòu)體的分離通常使用手性填充劑。

2、 l 填充劑的性能（如載體的形狀、粒徑、孔徑、表面積、鍵合基團(tuán)的表面覆蓋度、含碳量和鍵合類型等）以及色譜柱的填充，直接影響供試品的保留行為和分離效果。分析分子量小于2000的化合物應(yīng)選擇孔徑在15nm（1nm=10）以下的填料，分析分子量大于2000的化合物則應(yīng)選擇孔徑在30nm以上的填料。l除另有規(guī)定外，普通分析柱的填充劑粒徑一般在310m之間，粒徑更?。s2m）的填充劑常用于填裝微徑柱（內(nèi)徑約2mm）。 l 使用微徑柱時(shí)，輸液泵的性能、進(jìn)樣體積、檢測(cè)池體積和系統(tǒng)的死體積等必須與之匹配；如有必要，色譜條件也需作適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。當(dāng)對(duì)其測(cè)定的結(jié)果產(chǎn)生爭(zhēng)議時(shí)，應(yīng)以品種項(xiàng)下規(guī)定的色譜條件的測(cè)定結(jié)果為準(zhǔn)。

3、l以硅膠為載體的鍵合固定相的使用溫度通常不超過40，為改善分離效果可適當(dāng)提高色譜柱的使用溫度，但不宜超過60。 l流動(dòng)相的PH值應(yīng)控制在28之間。當(dāng)pH大于8時(shí)，可使載體硅膠溶解；當(dāng)pH小于2時(shí)，與硅膠相連的化學(xué)鍵合相易水解脫落。當(dāng)色譜系統(tǒng)中需使用PH大于8的流動(dòng)相時(shí)，應(yīng)選用耐堿的填充劑，如采用高純硅膠為載體并具有高表面覆蓋度的鍵合硅膠填充劑、包覆聚合物填充劑、有機(jī)-無機(jī)雜化填充劑或非硅膠基鍵合填充劑等；當(dāng)需使用PH小于2的流動(dòng)相時(shí)，應(yīng)選用耐酸的填充劑，如具有大體積側(cè)鏈能產(chǎn)生空間位阻保護(hù)作用的二異丙基或二異丁基取代十八烷基硅烷鍵合硅膠填充劑、有機(jī)-無機(jī)雜化填充劑等。1.2 檢測(cè)器l最常用的檢測(cè)

4、器為紫外檢測(cè)器，包括二極管陣列檢測(cè)器，其他常見的檢測(cè)器有熒光檢測(cè)器、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器、示差折光檢測(cè)器、電化學(xué)檢測(cè)器和質(zhì)譜檢測(cè)器等。l. 紫外、熒光、電化學(xué)檢測(cè)器為選擇性檢測(cè)器，其響應(yīng)值不僅與待測(cè)溶液的濃度有關(guān)，還與化合物的結(jié)構(gòu)有關(guān)；蒸發(fā)光散射檢測(cè)器和示差折光檢測(cè)器為通用型檢測(cè)器，對(duì)所有的化合物均有響應(yīng)；蒸發(fā)光散色檢測(cè)器對(duì)結(jié)構(gòu)類似的化合物，其響應(yīng)值幾乎僅與待測(cè)物的質(zhì)量有關(guān)；二極管陣列檢測(cè)器可以同時(shí)記錄待測(cè)物的吸收光譜，故可用于待測(cè)物的光譜鑒定和色譜峰的純度檢查。l紫外、熒光、電化學(xué)和示差折光檢測(cè)器的響應(yīng)值與待測(cè)溶液的濃度在一定范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，但蒸發(fā)光散射檢測(cè)器響應(yīng)值與待測(cè)溶液的濃度通常呈指數(shù)關(guān)

5、系，故進(jìn)行計(jì)算時(shí)，一般需經(jīng)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換。l不同的檢測(cè)器，對(duì)流動(dòng)相的要求不同。如采用紫外檢測(cè)器，所用流動(dòng)相應(yīng)符合紫外可見分光光度法（中國(guó)藥典2010年版二部附錄 A）項(xiàng)下對(duì)溶劑的要求；采用低波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)，還應(yīng)考慮有機(jī)相中有機(jī)溶劑的截止使用波長(zhǎng)，并選用色譜級(jí)有機(jī)溶劑。蒸發(fā)光散射檢測(cè)器和質(zhì)譜檢測(cè)器通常不允許使用含不揮發(fā)鹽組分的流動(dòng)相。 1.3 流動(dòng)相l(xiāng) 反相色譜系統(tǒng)的流動(dòng)相首選甲醇-水系統(tǒng)（采用紫外末端波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)，首選乙腈-水系統(tǒng)），如經(jīng)試用不合適時(shí)，再選用其他溶劑系統(tǒng)。應(yīng)盡可能少用含有緩沖液的流動(dòng)相，必須使用時(shí)，應(yīng)盡可能選用含較低濃度緩沖液的流動(dòng)相。由于C18鏈在水相環(huán)境中不易保持伸展?fàn)顟B(tài)，故對(duì)于十八烷

6、基硅烷鍵合硅膠為固定相的反相色譜系統(tǒng)，流動(dòng)相中有機(jī)溶劑的比例通常應(yīng)不低于5%，否則C18鏈的隨機(jī)卷曲將導(dǎo)致組分保留值變化，造成色譜系統(tǒng)不穩(wěn)定。 l各品種項(xiàng)下規(guī)定的條件除固定相種類、流動(dòng)相組成、檢測(cè)器類型不得改變外，其余如色譜柱內(nèi)徑、長(zhǎng)度、載體粒度、流動(dòng)相流速、混合流動(dòng)相各組成的比例、柱溫、進(jìn)樣量、檢測(cè)器的靈敏度等，均可適當(dāng)改變，以適應(yīng)供試品并達(dá)到系統(tǒng)適用性試驗(yàn)的要求。其中，調(diào)整流動(dòng)相組分比例時(shí)，以組分比例較低者（小于或等于50%）相對(duì)于自身的改變量不超過30%且相對(duì)于總量的改變量不超過10%為限，如30%相對(duì)改變量的數(shù)值超過總量的10%時(shí)，則改變量以總量的10%為限。 l對(duì)于必須使用特定牌號(hào)的

7、填充劑方能滿足分離要求的品種，可在該品種項(xiàng)下注明。2、系統(tǒng)適用性試驗(yàn)l色譜系統(tǒng)的適用性試驗(yàn)通常包括理論板數(shù)、分離度、重復(fù)性和拖尾因子等四個(gè)參數(shù)。其中，分離度和重復(fù)性尤為重要。 l按各品種項(xiàng)下要求對(duì)色譜系統(tǒng)進(jìn)行適用性試驗(yàn)，即用規(guī)定的對(duì)照品溶液或系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液在規(guī)定的色譜系統(tǒng)進(jìn)行試驗(yàn)，必要時(shí)，可對(duì)色譜系統(tǒng)進(jìn)行調(diào)整，以符合要求。2.1 色譜柱的理論板數(shù)(n)。 l 用于評(píng)價(jià)色譜柱的分離效能。由于不同物質(zhì)在同一色譜柱上的色譜行為不同，采用理論板數(shù)作為衡量柱效能的指標(biāo)時(shí)，應(yīng)指明測(cè)定物質(zhì)，一般為待測(cè)組分或內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的理論板數(shù)。l 在規(guī)定的條件下，注入供試品溶液或各品種項(xiàng)下規(guī)定的內(nèi)標(biāo)物質(zhì)溶液，記錄色譜圖，

8、量出供試品主成分峰或內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的保留時(shí)間t R（以分鐘或長(zhǎng)度計(jì)，下同，但應(yīng)取相同單位）和峰寬（W）半峰高寬（Wh/2 ），按n16(t R/W)2或n=5.54(tR/Wh/2)2計(jì)算色譜柱的理論板數(shù)。2.2 分離度（R） l 用于評(píng)價(jià)待測(cè)組分與相鄰共存物或難分離物質(zhì)之間的分離程度，是衡量色譜系統(tǒng)效能的關(guān)鍵指標(biāo)?？梢酝ㄟ^測(cè)定待測(cè)物質(zhì)與已知雜質(zhì)的分離度，也可以通過測(cè)定待測(cè)組分與某一添加的指標(biāo)性成分（內(nèi)標(biāo)物質(zhì)或其他難分離物質(zhì)）的分離度，或?qū)⒐┰嚻坊驅(qū)φ掌酚眠m當(dāng)?shù)姆椒ń到?，通過測(cè)定待測(cè)組分與某一降解產(chǎn)物的分離度，對(duì)色譜系統(tǒng)進(jìn)行評(píng)價(jià)與控制。 l 無論是定性鑒別還是定量分析，均要求待測(cè)峰與其他峰、內(nèi)標(biāo)峰

9、或特定的雜質(zhì)對(duì)照峰之間有較好的分離度。除另有規(guī)定外，待測(cè)組分與相鄰共存物之間的分離度應(yīng)大于1.5。 2.3 重復(fù)性 l用于評(píng)價(jià)連續(xù)進(jìn)樣后，色譜系統(tǒng)響應(yīng)值的重復(fù)性能。采用外標(biāo)法時(shí)，通常取各品種項(xiàng)下的對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣5次，除另有規(guī)定外，其峰面積測(cè)量值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于2.0；采用內(nèi)標(biāo)法時(shí)，通常配制相當(dāng)于80、100和120的對(duì)照品溶液，加入規(guī)定量的內(nèi)標(biāo)溶液，配成3種不同濃度的溶液，分別至少進(jìn)樣2次，計(jì)算平均校正因子，其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差也應(yīng)不大于2.0。 2.4 拖尾因子（T） l 用于評(píng)價(jià)色譜峰的對(duì)稱性。為保證分離效果和測(cè)量精度，應(yīng)檢查待測(cè)峰的拖尾因子是否符合各品種項(xiàng)下的規(guī)定。拖尾因子計(jì)算公式

10、為： TW0.05h/2d1l 式中, W0.05h 為5%峰高處的峰寬；d1為5%峰高出峰頂點(diǎn)至峰前沿之間的距離。l 除另有規(guī)定外，峰高法定量時(shí)T應(yīng)在0.951.05之間。l 峰面積法測(cè)定時(shí)，若拖尾嚴(yán)重，將影響峰面積的準(zhǔn)確測(cè)量。必要時(shí)，應(yīng)在各品種項(xiàng)下對(duì)拖尾因子做出規(guī)定。3、測(cè)定法 3.1 內(nèi)標(biāo)法 按各品種項(xiàng)下的規(guī)定，精密稱（量）取對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，分別配成溶液，精密量取各適量，混合配成校正因子測(cè)定用的對(duì)照溶液。取一定量注入儀器，記錄色譜圖。測(cè)量對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高，按下式計(jì)算校正因子 校正因子（）（AS/CS）/(AR/CR) 式中 ,AS 為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高；AR為對(duì)照品的

11、峰面積或峰高；CS為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的濃度；CR為對(duì)照品的濃度。l 再取各品種項(xiàng)下含有內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的供試品溶液，注入儀器，記錄色譜圖，測(cè)量供試品中待測(cè)成分和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高，按下式計(jì)算含量： 含量（CX）AX/(ASCS) 式中,Ax為供試品峰面積或峰高； CX為供試品的 濃度；AS為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高；CS為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的濃度；為較正因子。 采用內(nèi)標(biāo)法，可避免因樣品前處理及進(jìn)樣體積誤差對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響。 3.2 外標(biāo)法l按各品種項(xiàng)下的規(guī)定，精密稱(量)取對(duì)照品和供試品，配制成溶液，分別精密取一定量，注入儀器，記錄色譜圖，測(cè)量對(duì)照品溶液和供試品溶液中待測(cè)成分的峰面積（或峰高），按下式計(jì)算含量： 含量

12、（CX）CR(AX/AR) 式中各符號(hào)意義同上。l由于微量注射器不易精確控制進(jìn)樣量，當(dāng)采用外標(biāo)法測(cè)定供試品中某成分或雜質(zhì)含量時(shí)，以定量環(huán)或自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣為好。3.3 加校正因子的主成分自身對(duì)照法 l測(cè)定雜質(zhì)含量時(shí)，可采用加校正因子的主成分自身對(duì)照法。在建立方法時(shí)，按各品種項(xiàng)下的規(guī)定，精密稱（量）取雜質(zhì)對(duì)照品和待測(cè)成分對(duì)照品各適量，配制測(cè)定雜質(zhì)校正因子的溶液，進(jìn)樣，記錄色譜圖，按上述3.1法計(jì)算雜質(zhì)的校正因子。此校正因子可直接載入各品種項(xiàng)下，用于校正雜質(zhì)的實(shí)測(cè)峰面積。這些需作較正計(jì)算的雜質(zhì)，通常以主成分為參照，采用相對(duì)保留時(shí)間定位，其數(shù)值一并載入各品種項(xiàng)下。 l 測(cè)定雜質(zhì)含量時(shí)，按各品種項(xiàng)下規(guī)定

13、的雜質(zhì)限度，將供試品溶液稀釋成與雜質(zhì)限度相當(dāng)?shù)娜芤鹤鳛閷?duì)照溶液，進(jìn)樣，調(diào)節(jié)儀器靈敏度（以噪音水平可接受為限）或進(jìn)樣量（以柱子不過載為限），使對(duì)照溶液的主成分色譜峰高約達(dá)滿量程的1025或其峰面積能準(zhǔn)確積分【通常含量低于0.5%的雜質(zhì)，峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）應(yīng)小于10%；含量在0.5%2%的雜質(zhì)，峰面積的RSD應(yīng)小于5%；含量大于2%的雜質(zhì)，峰面積的RSD應(yīng)小于2%】。然后，取供試品溶液和對(duì)照品溶液適量，分別進(jìn)樣，供試品溶液的記錄時(shí)間，除另有規(guī)定外，應(yīng)為主成分色譜峰保留時(shí)間的2倍，測(cè)量供試品溶液色譜圖上各雜質(zhì)的峰面積，分別乘以相應(yīng)的校正因子后與對(duì)照溶液主成分的峰面積比較，依法計(jì)算各雜質(zhì)含

14、量。3.4 不加校正因子的主成分自身對(duì)照法 l測(cè)定雜質(zhì)含量時(shí)，若沒有雜質(zhì)對(duì)照品，也可采用不加校正因子的主成分自身對(duì)照法。同上述3.3法配制對(duì)照溶液并調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度后，取供試品溶液和對(duì)照溶液適量，分別進(jìn)樣，前者的記錄時(shí)間除另有規(guī)定外，應(yīng)為主成分保留時(shí)間的2倍，測(cè)量供試品溶液色譜圖上各雜質(zhì)的峰面積并與對(duì)照溶液主成分的峰面積比較，計(jì)算雜質(zhì)含量。l若供試品所含的部分雜質(zhì)未與溶劑峰完全分離，則按規(guī)定先記錄供試品溶液的色譜圖，再記錄等體積純?nèi)軇┑纳V圖。色譜圖上雜質(zhì)峰的總面積（包括溶劑峰），減去色譜圖上的溶劑峰面積，即為總雜質(zhì)峰的校正面積。然后依法計(jì)算。3.5 面積歸一法l按各品種項(xiàng)下的規(guī)定，配制供試品溶

15、液，取一定量注入儀器，記錄色譜圖。測(cè)量各峰的面積和色譜圖上除溶劑峰以外的總色譜峰面積，計(jì)算各峰面積占總峰面積的百分率。l用于雜質(zhì)檢查時(shí)，由于峰面積歸一化法測(cè)定誤差大，因此，通常只用于粗略考察供試品中的雜質(zhì)含量。除另有規(guī)定外，一般不宜用于微量雜質(zhì)的檢查。4、注意事項(xiàng)l 4.1 流動(dòng)相的制備與保存l 用高純度的試劑配制流動(dòng)相，必要時(shí)照紫外-可見分光光度法進(jìn)行溶劑檢查，應(yīng)符合要求；水應(yīng)為新鮮制備的高純水，可用超純水器制得或用重蒸水。凡規(guī)定pH值的流動(dòng)相，應(yīng)使用精密pH計(jì)進(jìn)行調(diào)節(jié)，除另有規(guī)定外，偏差一般不超過0.2pH單位。配制好的流動(dòng)相應(yīng)通過適宜的0.45m（或0.22m)濾膜濾過，以除去雜質(zhì)微粒。

16、流動(dòng)相用前必須脫氣，否則容易在系統(tǒng)內(nèi)逸出氣泡，影響泵的工作、色譜柱的分離效率、檢測(cè)器的靈敏度以及基線穩(wěn)定性等。l流動(dòng)相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯等容器內(nèi)，不能貯存在塑料容器中。因許多有機(jī)溶劑如甲醇、乙腈等可浸出塑料表面的增塑劑，導(dǎo)致流動(dòng)相受污染。貯存溶劑一定要蓋嚴(yán)，以防止溶劑揮發(fā)引起組成變化，也防止氧和二氧化碳溶入流動(dòng)相引起pH值變化，對(duì)分離或分析結(jié)果帶來誤差。磷酸鹽、醋酸鹽緩沖液容易發(fā)霉變質(zhì)，應(yīng)盡量新鮮配制使用。如確需貯存，可在冰箱內(nèi)冷藏，并在3天內(nèi)使用，用前應(yīng)重新濾過。4.2 溶劑的配制與保存l除另有規(guī)定外，采用規(guī)定溶劑配制對(duì)照品溶液和供試品溶液，定量測(cè)定時(shí)，對(duì)照品溶液和供試品溶液均應(yīng)分別

17、配制兩份。供試品溶液在注入液相色譜儀前，一般應(yīng)經(jīng)適宜的0.45m（或0.22m)濾膜濾過，以減少對(duì)色譜系統(tǒng)產(chǎn)生污染或影響色譜分離。應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)要求和供試品的穩(wěn)定性，設(shè)置待測(cè)溶液的貯存條件（如溫度、遮光等）。4.3 色譜柱的使用與保存l 根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求和流動(dòng)相的pH值范圍，參照色譜柱說明書，選用適宜的色譜柱。安裝色譜柱時(shí)應(yīng)使流動(dòng)相流路的方向與色譜柱標(biāo)簽上箭頭所示方向一致。除另有規(guī)定外，不宜反向使用，否則會(huì)導(dǎo)致色譜柱柱效明顯降低，無法恢復(fù)。進(jìn)樣前，色譜柱應(yīng)用流動(dòng)相充分沖洗平衡。經(jīng)色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)測(cè)試，應(yīng)符合要求。l 色譜柱在使用過程中，應(yīng)避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)。溫度的突然變化或者機(jī)械

18、震動(dòng)都會(huì)影響柱內(nèi)定相的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流動(dòng)相流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行。l 試驗(yàn)結(jié)束后，可按色譜柱的使用說明書，對(duì)色譜柱進(jìn)行沖洗和保存。l 一般來講，對(duì)于反相色譜柱，如使用緩沖液或含鹽溶液作為流動(dòng)相，在試驗(yàn)結(jié)束后，應(yīng)用10倍柱體積（如150mm柱長(zhǎng)，約15ml）的低濃度的甲醇/乙腈-水溶液（10%20%）沖洗，使色譜柱內(nèi)的鹽完全溶解洗脫出，再用較高濃度的甲醇/乙腈-水溶液（50%）沖洗，最后用高濃度的甲醇/乙腈-水溶液（80% 100%）沖洗，使色譜柱中的強(qiáng)吸附物質(zhì)沖洗出來。l 如色譜柱需長(zhǎng)期保存，反相柱可以貯存于甲醇或乙腈中，正相柱可以貯存于經(jīng)脫水處理后的正

19、己烷中，離子交換柱可以貯存于含5%甲醇或含0.05%疊氮化納的水中，并將色譜柱兩端密封，以免干燥，室溫保存。4.4 流動(dòng)相的調(diào)整l為滿足色譜柱系統(tǒng)適用性要求，試驗(yàn)中有時(shí)需要調(diào)整流動(dòng)相組分的比例。在調(diào)整流動(dòng)相組分比例時(shí)，以組分比例較低者（小于或等于50%）相對(duì)改變量不超過30%且絕對(duì)改變量不超過10%為限，如30%相對(duì)改變量的數(shù)值超過10%時(shí)，則改變量以10%為限。下面舉例說明。4.4.1 二元流動(dòng)相系統(tǒng)l例1 兩組分比例為50：50 按上述原則，50%的最大相對(duì)該變量為15%，已超過了絕對(duì)改變量允許的范圍，故該流動(dòng)相比例調(diào)節(jié)的范圍是10%，即40：60至60:40。l例2 兩組分比例為2:98

20、 按上述原則，2%的最大相對(duì)改變量為0.6%，故該流動(dòng)相比例調(diào)節(jié)的范圍是1.4:98.6至2.6:97.4。4.4.2 三元流動(dòng)相系統(tǒng)l 例3 三組分比例為60:35:5 按上述原則，可每次調(diào)節(jié)流動(dòng)相系統(tǒng)中比例較低的兩個(gè)組分。l 對(duì)于35%的組分，其最大相對(duì)改變量為10.5%，已超過了絕對(duì)該變量允許的范圍，故該組分比例調(diào)節(jié)的范圍是10%，即25% 45%，則流動(dòng)相系統(tǒng)比例的調(diào)節(jié)范圍是50:45:5至70:25:5。l 對(duì)于5%的組分，其最大相對(duì)改變量為1.5%，該組分比例調(diào)節(jié)的范圍是1.5%，即3.5% 6.5%，則流動(dòng)相系統(tǒng)比例的調(diào)節(jié)范圍是58.5:35:6.5至61.5:35:3.5。4.5 雜質(zhì)檢查時(shí)色譜參數(shù)的設(shè)置l 在進(jìn)行雜質(zhì)檢查時(shí)，選擇適宜的檢測(cè)靈敏度和設(shè)定適宜的積分參數(shù)非常重要。國(guó)內(nèi)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，通常制備與雜質(zhì)限度相當(dāng)濃度的對(duì)照溶液，用以調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使對(duì)照溶液的主成分色譜峰高達(dá)滿量程的10% 25%，再進(jìn)行供試品溶液的測(cè)定，以峰面積計(jì)算單個(gè)雜質(zhì)量和總雜質(zhì)量。l 目前國(guó)內(nèi)色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)大致有積分儀和色譜工作站兩種類型，對(duì)于傳統(tǒng)的積分儀，由