培訓(xùn)護士臨床微生物標本采集規(guī)范

1、.主要內(nèi)容1.正確標本采集重要性2.血培養(yǎng)的標本采集3.痰培養(yǎng)的標本采集4.尿培養(yǎng)的標本采集5.大便培養(yǎng)的標本采集6.生殖道標本的采集7.化膿和創(chuàng)傷標本的采集8.穿刺液標本的采集9.眼、耳、鼻、咽拭子標本的采集10.組織標本的采集11.其他.1. 正確標本采集重要性.成功治療感染癥的因素 成功分離病原菌并檢測成功分離病原菌并檢測 標本收集、運送、保存標本收集、運送、保存 標本處理方法 檢驗醫(yī)師專業(yè)知識 醫(yī)師判讀病原菌培養(yǎng)結(jié)果醫(yī)師判讀病原菌培養(yǎng)結(jié)果 選擇適當治療方法選擇適當治療方法.培養(yǎng)假陽性的危害增加患者抗生素用量，破壞微生態(tài)環(huán)境破壞微生態(tài)環(huán)境延長住院天數(shù)延長住院天數(shù)延誤病情延誤病情診斷增加經(jīng)

2、濟負擔經(jīng)濟負擔增加醫(yī)療糾紛醫(yī)療糾紛的風險.微生物樣本采樣基本原則微生物樣本采樣基本原則在抗菌藥物使用前采集標本采樣時嚴格執(zhí)行無菌操作采樣后立即送檢標本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑.血培養(yǎng)檢測采血指征臨床上疑為敗血癥、膿毒血癥或其他血液感染血液感染的患者 1. 發(fā)熱（38）或低溫（36）2. 寒戰(zhàn)3. 白細胞增多（10109/L、“核左移”、未成熟白細胞增多） 4. 粒細胞減少（成熟的多核白細胞1109/L）5. 血小板減少6皮膚粘膜出血7昏迷，休克8多器官衰竭 9. CRP升高.如何正確進行血培養(yǎng)標本的采集？最佳采血時機最佳采血時機標準的采血方案標準的采血方案合適的采血量合適的采血量標準消

3、毒方法標準消毒方法 正確的標本采集，能很大程度上提高血培養(yǎng)檢測質(zhì)量和臨床價值，并減少樣本污染和“假陽性”結(jié)果的發(fā)生率。.血培養(yǎng)最佳的采血時機盡可能在患者寒戰(zhàn)開始時、發(fā)熱高峰前30-60分鐘內(nèi)采血在患者接受抗生素治療前采血如患者已經(jīng)應(yīng)用抗菌藥物進行治療，應(yīng)在下一次用藥之前采血培養(yǎng).細菌量 體溫 時間上升幅度.標準的采血方案 不同部位抽取2套血培養(yǎng) 成人一套：1需氧瓶+1厭氧瓶 兒童：1需氧瓶 注：一個靜脈穿刺點只能采集1套血培養(yǎng)，采集第2套血培養(yǎng)應(yīng)該選擇第2個靜脈穿刺點;一次靜脈采血注入到多個培養(yǎng)瓶中應(yīng)視為單個血培養(yǎng).血培養(yǎng)組合的累積敏感性.急性高燒：10分鐘內(nèi)，同部位抽取2套非急性高燒疾病：

4、24小時內(nèi)，由同的部位抽取2-3套（間隔小于3小時）急性心內(nèi)膜炎： 1-2小時內(nèi)，由三個同的部位抽取3套亞急性心內(nèi)膜炎：24小時內(nèi)采集3套，每套間隔1小時以上，培養(yǎng)24小時陰性者，追加2-3套.采血量成年患者：每瓶8-10ml嬰幼兒患者：每瓶1-3ml病原菌檢出率與采血量成正比例增長。每增加1ml的血液，病原菌的檢出率增加3.2%兒童患者因為血液中病原菌濃度較高，血培養(yǎng)量無需等同于成人.血培養(yǎng)檢測消毒程序l皮膚消毒程序皮膚消毒程序1.75%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30s以上2.1%-2%碘酊作用30秒或10%碘伏作用60秒，從穿刺點向外畫圈消毒，至消毒區(qū)域直徑達3cm以上3.75%酒精脫碘，待酒

5、精揮發(fā)干燥后采血.l培養(yǎng)瓶瓶塞消毒培養(yǎng)瓶瓶塞消毒 用75%酒精消毒培養(yǎng)瓶塞，充分待干待干60秒注意：塑料帽下面的橡皮塞并非是無菌的，必須進 行消毒.l要要 求求嚴格無菌操作，不允許在皮膚消毒后用手按壓靜脈，除非帶有無菌手套不推薦采血和接種血培養(yǎng)瓶更換注射器針頭，采用真空采血裝置能降低污染率l不建議采集不建議采集1.動脈血2.靜脈留置導(dǎo)管，因其常伴有高污染率。如果必須從留置導(dǎo)管內(nèi)采血，也應(yīng)同時從外周靜脈采集另外一個血培養(yǎng)標本，以幫助陽性結(jié)果的判讀.血培養(yǎng)標本的運送采集后的血培養(yǎng)瓶應(yīng)在1小時之內(nèi)送檢血培養(yǎng)瓶在接種前和接種后均不得冷藏、冷凍.3.痰培養(yǎng)標本采集規(guī)范.痰標本現(xiàn)狀l國內(nèi)常規(guī)痰標本中約半數(shù)

6、存在唾液嚴重污染現(xiàn)象l多種微生物存在于呼吸道：細菌、真菌、病毒、支原體、衣原體與立克次體、原蟲、寄生蟲l唾液中口咽部定植菌的濃度可達108 109/ml.采集方法自然咳痰法 以晨痰為佳。用清水反復(fù)漱口，用力咳出呼吸道深部的痰（非唾液），吐入無菌容器中，盡快送檢.小兒取痰法小兒取痰法用壓舌板向后壓舌，用棉拭子深入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時，可獲得肺部和氣管分泌物，粘在棉拭子上送檢。對難于自主吐痰者（嬰幼兒）可用無菌吸痰管抽取氣管深部分泌物支氣管鏡采集法支氣管鏡采集法經(jīng)支氣管鏡直接吸引、支氣管肺泡灌洗、防污染樣本毛刷.注意事項注意事項在抗生素應(yīng)用前采集痰標本取標本前應(yīng)摘去牙托，清潔口腔如刷牙和漱口

7、深咳，采集標本過程應(yīng)予以指導(dǎo)痰標本及時送檢者（室溫耽擱久，定植口咽部的非致病菌過度生長，4冰箱會導(dǎo)致肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌檢出率降低）對于細菌性肺炎，痰標本送檢每天1次，連續(xù)23天，不建議24h內(nèi)多次采集，除非痰液外觀性狀改變懷疑分枝桿菌感染者，應(yīng)連續(xù)收集3天清晨痰液送檢.4.尿培養(yǎng)標本采集規(guī)范.標本采集方法清潔中段尿清潔中段尿 先用肥皂水清洗會陰部，再用清水沖洗尿道口周圍；將前段尿排去，留取中段尿10ml左右于無菌容器內(nèi)，立即加蓋送檢恥骨上膀胱穿刺恥骨上膀胱穿刺 使用無菌注射器直接從恥骨上經(jīng)皮膚消毒穿入膀胱吸取尿液.留置導(dǎo)尿管收集尿液留置導(dǎo)尿管收集尿液 消毒導(dǎo)尿管外部及尿管口，采取無菌操作

8、方法，用注射器通過導(dǎo)尿管吸取尿液。注意防止混入消毒劑。長期留置導(dǎo)尿管者，應(yīng)在更換新導(dǎo)尿管后留取尿標本。注：不能從尿液收集袋中采集尿液注：不能從尿液收集袋中采集尿液.采集時間和標本運送 抗菌藥物應(yīng)用前不得加防腐劑和消毒劑采集清晨第1次尿液送檢，確保尿液在膀胱內(nèi)停留4h以上，囑患者睡前少飲水以免尿液稀釋標本采集后應(yīng)立即送檢、室溫不得超過1h，冷藏必須在4h內(nèi)送檢（不用于淋病檢測）.5.大便培養(yǎng)標本采集規(guī)范 .采集時間腹瀉患者應(yīng)在急性期，并盡可能在使用抗生素之前采集新鮮糞便采集標本后應(yīng)立即送檢.采集方法自然排便采集法自然排便采集法 挑取有膿血或黏液部位的糞便2-3g，液狀糞便取絮狀物于無菌容器內(nèi)送檢

9、直腸拭子采集法直腸拭子采集法 將拭子前端用甘油濕潤。然后插入肛門約45cm（幼兒約23cm）處，輕輕在直腸內(nèi)旋轉(zhuǎn)，擦取直腸表面粘液后取出，盛入無菌試管中送檢.6.生殖道標本采集規(guī)范 .采集方法尿道分泌物 清洗尿道口，用滅菌紗布或棉球擦拭干凈，用泌尿生殖道拭子插入尿道24cm，旋轉(zhuǎn)拭子采集. 陰道分泌物 擦除過多的分泌物和排出液，用無菌棉拭子采取陰道口內(nèi)4cm內(nèi)側(cè)壁或后穹窿處分泌物宮頸分泌物 先清除陰道和宮頸局部分泌物，然后輕壓宮頸使宮頸內(nèi)分泌物流出，用女性拭子插入宮頸管1-2cm轉(zhuǎn)動并停留1030s采取分泌物，置入滅菌試管內(nèi)送檢.注意事項生殖器是開放性器官，標本采集過程中應(yīng)嚴格遵 循無菌操作規(guī)

10、程以減少雜菌污染疑有宮腔感染，如遇產(chǎn)婦需行剖宮產(chǎn)，待胎兒娩出后取宮腔分泌物，并同時取嬰兒耳拭子一同送檢沙眼衣原體和病毒均在宿主細胞內(nèi)繁殖，取材時拭子應(yīng)在病變部位（移行上皮處稍內(nèi)）停留十幾秒鐘，并采集盡可能多的上皮細胞.l淋病奈瑟菌檢查時，因為淋球菌好發(fā)于柱狀上皮細胞而不是復(fù)層鱗狀上皮細胞。故拭子需插入尿道或子宮頸3cm深轉(zhuǎn)動并停留10-30s取樣送檢l淋病奈瑟菌要盡快送檢，立即接種，標本離體時間越短越好.7.化膿和創(chuàng)傷標本采集規(guī)范.標本采集開放性感染和已潰破的化膿灶開放性感染和已潰破的化膿灶 標本采集前先用滅菌生理鹽水拭去表面滲出物，從膿腫底部或膿腫壁取樣，效果最好。.封閉性膿腫封閉性膿腫 局

11、部消毒后用注射器抽吸膿腫壁，將所有物質(zhì)置于無菌試管內(nèi)送檢，疑為厭氧菌感染時立即送檢（針頭插一橡皮塞隔絕空氣）。大面積創(chuàng)傷感染大面積創(chuàng)傷感染可取感染組織塊或沾有膿汁的內(nèi)層敷料送檢.注意事項細菌對干燥敏感或只能采集少量標本時，用棉拭子采集標本后立即放入液體培養(yǎng)基內(nèi)，或采標本前先將棉拭子沾少許肉湯以保持標本濕度對于不能立即送檢的標本，應(yīng)放4保存（淋病奈瑟菌和腦膜炎奈瑟菌除外）采樣前病灶局部應(yīng)避免用抗菌藥物或消毒劑.8.穿刺液標本采集規(guī)范 .穿刺液主要包括：腦脊液、膽汁、胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜液在正常人體中，上述體液均是無菌的。采集時尤其應(yīng)注意無菌操作.腦脊液采集時間采集時間懷疑為腦膜炎時，

12、應(yīng)立即采集腦脊液采集方法采集方法用腰穿方法采集腦脊液35ml，分裝到3個無菌試管中，每個試管12ml。第一管用于細菌培養(yǎng)運送和保存運送和保存標本應(yīng)立即送檢（30 min），并注意保溫、防干燥。切不可置冰箱保存 .其它穿刺液采集時間采集時間 懷疑感染存在，應(yīng)盡早采集標本采集方法采集方法無菌操作穿刺抽取標本或外科手術(shù)采集標本。標本采集量應(yīng)1ml。胸腔積液、腹水可抽10ml； 心包液、關(guān)節(jié)液等可抽取25ml標本采集后注入無菌小瓶或無菌試管中送檢為防止穿刺液的凝固，應(yīng)在無菌試管中預(yù)先加入滅菌肝素，再注入穿刺液.9.眼、耳、鼻、咽拭子標本采集規(guī)范 .標本采集眼眼 結(jié)膜：分別用（無菌鹽水預(yù)濕）拭子繞每一個

13、結(jié)膜取；采集完即接種培養(yǎng)基；將拭子涂片在兩個玻片上染色角膜刮擦：滴兩滴局部麻醉液；用無菌鏟刮擦膿腫或潰瘍，將刮擦物直接接種于培養(yǎng)基；將剩余材料涂于兩個干凈的玻片上染色液體或抽吸物：常為術(shù)中標本，需備眼，用針頭抽吸液體.耳耳 內(nèi)耳：對復(fù)雜的、反復(fù)的或慢性頑固的中耳炎做鼓膜穿刺術(shù)，接觸耳鼓室先用肥皂水清洗耳道再用注射器收集液體；對破裂的鼓室，借助耳科診視器，用軟桿拭子收集液體外耳：用濕拭子將耳道的任何碎屑或痂皮拭去；在外耳道用力旋轉(zhuǎn)拭子取樣. 鼻或鼻咽分泌物鼻或鼻咽分泌物 直接用拭子涂抹病灶部位，切勿接觸周圍粘膜或皮膚，標本立即送檢咽分泌物咽分泌物 先用清水漱口，用壓舌板將舌向下向外壓，將咽拭子在咽后壁或懸雍垂后側(cè)涂抹數(shù)次，插入運送培養(yǎng)基。切勿接觸口腔和舌粘膜.標本運送和保存無菌拭子采集病變明顯處的膿液和分泌物，置于運送培養(yǎng)基或培養(yǎng)拭子運送，以防干燥立即送檢，如不能及時送檢，應(yīng)置于冰箱保存，超過48h不可使用.10.其它標本采集結(jié)核抗體（空腹，紅管，2ml）九