熒光定量PCR原理、應(yīng)用及Stratagene_Mx3000P介紹

1、Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 實(shí)時(shí)熒光定量實(shí)時(shí)熒光定量PCRPCR原理及應(yīng)用原理及應(yīng)用上海吉泰生物科技有限公司上海吉泰生物科技有限公司Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 內(nèi)內(nèi) 容容 提提 綱綱 熒光定量PCR原理及應(yīng)用 Stratagene Mx3000P熒光定量PCR儀Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科

2、技有限公司www.Gwww.G 常規(guī)核酸定量方法常規(guī)核酸定量方法 Southern 雜交雜交 Northern 雜交雜交 原位雜交原位雜交 傳統(tǒng)傳統(tǒng) RT-PCR 半定量半定量 PCR存在的問題存在的問題 3靈敏度3準(zhǔn)確性3特異性3時(shí)間Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 實(shí)時(shí)熒光定量實(shí)時(shí)熒光定量PCR 定義定義利用熒光信號(hào)對(duì)利用熒光信號(hào)對(duì)PCR反應(yīng)的過程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控反應(yīng)的過程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控 目的目的對(duì)起始模板進(jìn)行定量對(duì)起始模板進(jìn)行定量 優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn) 靈敏靈敏, 重復(fù)性重復(fù)性, 動(dòng)態(tài)范圍寬動(dòng)態(tài)范圍

3、寬, 高通量高通量l原理原理 C(t)值與起始模板濃度的對(duì)數(shù)成反比值與起始模板濃度的對(duì)數(shù)成反比Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 什么是什么是C(t)C(t)值值C(t)Threshold（域值）域值）Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 值與起始模板的關(guān)系值與起始模板的關(guān)系Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有

4、限公司www.Gwww.G 為什么要引入為什么要引入C(t)值值CtEndpoints96 replicates of B7 gene molecular beaconGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 1221利用電泳定量利用電泳定量11,500 counts / 5200 counts = 2.2 fold differenceGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 實(shí)時(shí)熒光定量實(shí)時(shí)熒

5、光定量Ct 18 and Ct 22, 2(4 Ct shift) = 16 fold differenceGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 如何定量如何定量標(biāo)標(biāo) 準(zhǔn)準(zhǔn) 曲曲 線線 未未 知知 樣樣 品品 的的 C(t) 值值 定量定量Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有

6、限公司www.Gwww.G 常用的熒光試劑常用的熒光試劑 SYBR Green ITM TaqMan / TaqMan-MGB Molecular Beacons MGB EclipseTM Probes Lux primers ScorpionsTM Amplifluor Q-Zyme Others.dsDNA DetectionTarget-specific DetectionGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G ssDNA = free dye(weak fluorophore)dsD

7、NA =Binds minor groove(intense fluorophore)SYBR Green I (雙鏈雙鏈DNA結(jié)合染料結(jié)合染料)Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G SYBR Green I DetectionGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G TaqMan 探針探針未結(jié)合的探針未結(jié)合的探針探針、引物與目的片段結(jié)合，探針、引物與目的片段結(jié)合，F(xiàn)RET光發(fā)射或者以熱量形式

8、散失光發(fā)射或者以熱量形式散失Donor dye (Reporter)Acceptor dye (Quencher)LightEnergy transferTaqTaq 水解探針，報(bào)告熒光素與淬滅熒光素分離水解探針，報(bào)告熒光素與淬滅熒光素分離TaqLight EmissionLightGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G HCV (FAM) RNA virus65bp ampliconHIV-1 (HEX) RNA Virus74bp ampliconHBV (CY5) DNA virus 8

9、1bp ampliconTaqman 三通道實(shí)驗(yàn)三通道實(shí)驗(yàn)Daniel Candotti - Cambridge, UKGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 熒光定量熒光定量PCR應(yīng)用應(yīng)用 特異核酸（基因）定性、定量特異核酸（基因）定性、定量 RNA (RNA (cDNAcDNA) ) 基因表達(dá)差異分析基因表達(dá)差異分析 基因芯片結(jié)果驗(yàn)證基因芯片結(jié)果驗(yàn)證 DNADNA 病原體定性與定量病原體定性與定量 GMO (GMO (遺傳改良組織遺傳改良組織) )檢測(cè)檢測(cè) 序列特異性序列特異性 等位基因分

10、型等位基因分型, , SNP SNP 檢測(cè)檢測(cè)Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 應(yīng)用之一：病原體檢測(cè)與定量應(yīng)用之一：病原體檢測(cè)與定量絕對(duì)定量（特異基因的拷貝數(shù)病原體的多少）絕對(duì)定量（特異基因的拷貝數(shù)病原體的多少）標(biāo)準(zhǔn)品（如質(zhì)粒）：梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品（如質(zhì)粒）：梯度稀釋未知樣品未知樣品陰性對(duì)照（陰性對(duì)照（NTCNTC）Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 應(yīng)用之一：病原體檢測(cè)與定量應(yīng)用之一：

11、病原體檢測(cè)與定量Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 應(yīng)用之一：病原體檢測(cè)與定量應(yīng)用之一：病原體檢測(cè)與定量Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 應(yīng)用之二：基因表達(dá)差異分析應(yīng)用之二：基因表達(dá)差異分析相對(duì)定量：基因表達(dá)量上升或者表達(dá)被抑止的相對(duì)定量：基因表達(dá)量上升或者表達(dá)被抑止的倍數(shù)倍數(shù)兩種樣品：兩種樣品：CalibratorCalibrator（對(duì)照，如正常組織）對(duì)照，如正常組織） 與與Sa

12、mpleSample（待測(cè)樣品）待測(cè)樣品）兩個(gè)基因：目的基因與看家基因兩個(gè)基因：目的基因與看家基因Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G Normalizer看家基因看家基因應(yīng)用之二：基因表達(dá)差異分析應(yīng)用之二：基因表達(dá)差異分析CalibratorSampleGene of Interest目的基因目的基因CtCtCtCt Ct1 Ct2Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 應(yīng)用之二：基因表達(dá)

13、差異分析應(yīng)用之二：基因表達(dá)差異分析基因表達(dá)差異基因表達(dá)差異2 /2 Ct1 Ct2 Ct1 - Ct2Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 應(yīng)用之二：基因表達(dá)差異分析應(yīng)用之二：基因表達(dá)差異分析RNA抽提抽提RT定量定量PCRcDNA產(chǎn)物產(chǎn)物系列稀釋系列稀釋兩個(gè)基因的擴(kuò)增效率兩個(gè)基因的擴(kuò)增效率Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 應(yīng)用之二：基因表達(dá)差異分析應(yīng)用之二：基因表達(dá)差異分析Genet

14、imes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 4 fold down3 fold up應(yīng)用之二：基因表達(dá)差異分析應(yīng)用之二：基因表達(dá)差異分析Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 兩條探針分別針對(duì)不同等位基因兩條探針分別針對(duì)不同等位基因應(yīng)用之三：應(yīng)用之三：SNPSNP分析分析Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.

15、G 應(yīng)用之三：應(yīng)用之三：SNPSNP分析分析FAMFAMTETTETFAMFAMTETTETGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 應(yīng)用之三：應(yīng)用之三：SNPSNP分析分析Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 應(yīng)用之四：應(yīng)用之四：GMO檢測(cè)檢測(cè)目的：檢測(cè)食品等中轉(zhuǎn)基因成分的含量目的：檢測(cè)食品等中轉(zhuǎn)基因成分的含量大量的作物被遺傳改良來獲得一些性狀，大量的作物被遺傳改良來獲得一些性狀，如：抗除草

16、劑，抗蟲，抗病等如：抗除草劑，抗蟲，抗病等Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 應(yīng)用之四：應(yīng)用之四：GMO檢測(cè)檢測(cè)抗除草劑的轉(zhuǎn)基因大豆抗除草劑的轉(zhuǎn)基因大豆廣泛使用的除草劑的作用成分是草甘膦。廣泛使用的除草劑的作用成分是草甘膦。草甘膦是草甘膦是EPSPSEPSPS（5-5-烯醇丙酮莽草酸烯醇丙酮莽草酸-3-3-磷酸合成酶磷酸合成酶 ）的競(jìng)爭(zhēng)抑制物。在草甘膦存在的條件下，）的競(jìng)爭(zhēng)抑制物。在草甘膦存在的條件下，EPSPSEPSPS的活性被抑制。的活性被抑制。植物被轉(zhuǎn)化了一種耐受草甘膦的植物被轉(zhuǎn)化了

17、一種耐受草甘膦的EPSPSEPSPS基因，獲得基因，獲得抗性。抗性。Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 檢測(cè)策略抗性EPSPS基因的量 轉(zhuǎn)基因大豆的量 Lectin基因的量 食品中大豆總量應(yīng)用之四：應(yīng)用之四：GMO檢測(cè)檢測(cè)EPSPSLectin CtGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 熒光定量熒光定量PCR儀的硬件條件儀的硬件條件激發(fā)光源激發(fā)光源熱循環(huán)加熱、制冷熱循環(huán)加熱、制冷 樣品樣

18、品檢測(cè)設(shè)備檢測(cè)設(shè)備Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 熒光定量熒光定量PCR儀應(yīng)滿足的要求儀應(yīng)滿足的要求 光源的光譜范圍寬廣，能激發(fā)不同的熒光染料 能分開不同熒光素的激發(fā)光與發(fā)射光波長(zhǎng) 能檢測(cè)的靈敏度與動(dòng)態(tài)檢測(cè)范圍 準(zhǔn)確的溫度控制和良好的孔間溫度均一性.Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 熒光定量PCR原理及應(yīng)用 Stratagene Mx3000P熒光定量PCR儀Genetimes

19、TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G Stratagenes New Mx3000P!High Performance Personal PriceGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G Stratagene 公司成立于公司成立于1984年年,致力于致力于發(fā)展生命科學(xué)領(lǐng)域的創(chuàng)新產(chǎn)品與科技發(fā)展生命科學(xué)領(lǐng)域的創(chuàng)新產(chǎn)品與科技. 總部位于美國(guó)總部位于美國(guó) La Jolla, California .在歐在歐洲與日本設(shè)有

20、分公司洲與日本設(shè)有分公司.Stratagene 公司簡(jiǎn)介公司簡(jiǎn)介Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G Mx3000P 整體設(shè)計(jì)整體設(shè)計(jì)熱蓋熱循環(huán)系統(tǒng)石英鹵鎢燈發(fā)射光濾鏡輪激發(fā)光濾鏡輪光纖掃描臂Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G Mx3000P 熱循環(huán)系統(tǒng)熱循環(huán)系統(tǒng) 96 孔樣品槽孔樣品槽 半導(dǎo)體加熱制冷半導(dǎo)體加熱制冷 溫度均一性溫度均一性: +/- 0.25C 升降溫速率升降溫速率: u

21、p to 2.5C/secGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 熱循環(huán)系統(tǒng)熱循環(huán)系統(tǒng) 半導(dǎo)體加熱制冷半導(dǎo)體加熱制冷 resistive and convective heat exchange 獨(dú)特的溫度補(bǔ)償條，整板溫度均獨(dú)特的溫度補(bǔ)償條，整板溫度均一性一性 +/- 0.25C 熱蓋熱蓋 反應(yīng)體積反應(yīng)體積10-100ulGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G Mx3000P 光路系統(tǒng)光路系統(tǒng)

22、PMT96 well plate石英鹵鎢燈激發(fā)光濾鏡輪發(fā)射光濾鏡輪掃描式檢測(cè)同軸光纖Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G Mx3000P 光學(xué)系統(tǒng)光學(xué)系統(tǒng) 石英鹵鎢燈(350-750nm) 2 個(gè)濾鏡輪 可選擇的濾鏡: Filter sets: FAM/SYBR, HEX/JOE/VIC, ROX/Texas Red, Cy5, Alexa350, TET, NED/TAMRA, Cy3 1 PMT（光電倍增管）檢測(cè)器 350-700nm 發(fā)射光檢測(cè)范圍 掃描式檢測(cè)設(shè)計(jì)Genetimes T

23、echnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G Mx3000P 掃描系統(tǒng)掃描系統(tǒng) 整板掃描3.5s 濾鏡輪旋轉(zhuǎn)進(jìn)行多通道掃描Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G Lasers: 光強(qiáng)高, 波長(zhǎng)范圍窄；石英鹵鎢燈石英鹵鎢燈: 中等光強(qiáng), 波長(zhǎng)范圍寬；LED: 光強(qiáng)低, 波長(zhǎng)受限制。Halogen LampLaserLEDGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰

24、生物科技有限公司www.Gwww.G Mx3000P 可用熒光染料可用熒光染料Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 發(fā)射光濾鏡發(fā)射光濾鏡熒光濾鏡系統(tǒng)熒光濾鏡系統(tǒng)Ex. Filter350 nm750 nm10 nm InterferenceMx3000PGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 四通道設(shè)計(jì)，避免光譜重疊四通道設(shè)計(jì)，避免光譜重疊Mx3000P 發(fā)射光濾鏡輪發(fā)射光濾鏡輪Geneti

25、mes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 熒光檢測(cè)系統(tǒng)的發(fā)展熒光檢測(cè)系統(tǒng)的發(fā)展PMT光電倍增管光電倍增管冷冷CCDCCDPhotodiodes光電二極管光電二極管Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G PMT (光電倍增管光電倍增管)冷 CCDCCDPhotodiodes光電二極管Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.

26、Gwww.G PMT與與CCD的檢測(cè)原理的檢測(cè)原理 hvhve-e-PMTCCDGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G CCD與與PMT檢測(cè)區(qū)別檢測(cè)區(qū)別無邊緣效應(yīng)邊緣效應(yīng)CCDMirrorGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 19.019.520.020.521.021.522.0113253749617385Well numberCtSimultaneous Illumination/De

27、tection20.521.021.522.022.523.023.5113253749617385Well numberCtCCD與與PMT檢測(cè)結(jié)果均一性對(duì)比檢測(cè)結(jié)果均一性對(duì)比Ct vs. Well number(across plate groupings)Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G Mx3000P均一性實(shí)驗(yàn)均一性實(shí)驗(yàn)96 well uniformity run. SYBR Green I detection96 wellsMean Ct = 18.1St.Dev. = 0.0

28、5C.V . = 0.3%Ct Range = 0.26 cyclesGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 2-fold serial dilution (20,000 to 1.2 copies hgDNA. -Actin Mol. Beacon)Std. CurveR2 = 0.996Slope = -3.183Amplification Efficiency =106.1% Mx3000PMx3000P的分辨率與靈敏度檢測(cè)圖。的分辨率與靈敏度檢測(cè)圖。Genetimes Technolo

29、gyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 10 x dynamic range, T7 hydrolysis probe, 8 replicates each concentration10 x dynamic range standard curve, Ct range 6-39, Rsq=0.999, Efficiency=98.6% Mx3000PMx3000P檢測(cè)動(dòng)態(tài)范圍檢測(cè)圖（高達(dá)十個(gè)數(shù)量級(jí)）。檢測(cè)動(dòng)態(tài)范圍檢測(cè)圖（高達(dá)十個(gè)數(shù)量級(jí)）。Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科

30、技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G Mx3000P Multiplex - 4 Color ResultFAMGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G FAMHEXMx3000P Multiplex - 4 Color ResultGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G FAMHEXROXMx3000P 4通道實(shí)驗(yàn)結(jié)果通道實(shí)驗(yàn)結(jié)果Genetimes TechnologyGenet

31、imes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G FAMHEXROXCy5Mx3000P Multiplex - 4 Color ResultGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G Mx3000P 4通道標(biāo)準(zhǔn)曲線通道標(biāo)準(zhǔn)曲線 Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 利用利用FullVelocity 技術(shù)提高技術(shù)提高PCR運(yùn)行速度運(yùn)行速度最新的工程聚合酶

32、最新的工程聚合酶 Archaeal (non-Taq) DNA polymerase 同樣具有優(yōu)越的同樣具有優(yōu)越的: 靈敏度 特異性 可重復(fù)性Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G Mx3000P 軟件軟件 易學(xué)易用易學(xué)易用 各種數(shù)據(jù)分析方式：自動(dòng)分析或者各種數(shù)據(jù)分析方式：自動(dòng)分析或者手動(dòng)分析手動(dòng)分析 支持熒光定量支持熒光定量PCRPCR的多種應(yīng)用模式的多種應(yīng)用模式Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.G

33、www.G 多種應(yīng)用模式多種應(yīng)用模式Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 軟件的結(jié)構(gòu)軟件的結(jié)構(gòu)Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G PCR板的設(shè)定板的設(shè)定Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G PCR程序設(shè)定程序設(shè)定Genetimes TechnologyGenetimes Technol

34、ogy吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 運(yùn)行時(shí)的狀態(tài)運(yùn)行時(shí)的狀態(tài)Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 實(shí)時(shí)擴(kuò)增數(shù)據(jù)實(shí)時(shí)擴(kuò)增數(shù)據(jù)Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 軟件自行優(yōu)化的數(shù)據(jù)分析軟件自行優(yōu)化的數(shù)據(jù)分析Adaptive baseline correctionAmplification-based thresholdGenetimes TechnologyG

35、enetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 標(biāo)標(biāo) 準(zhǔn)準(zhǔn) 曲曲 線線Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 相對(duì)定量相對(duì)定量4 fold down3 fold upGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 基因分型結(jié)果顯示基因分型結(jié)果顯示User defined genotypes, color coded populations, and

36、automatic calling on text reportGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G “只讀板只讀板”實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果Genetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 結(jié)果文本顯示結(jié)果文本顯示Text Report or raw data can be exported to Excel or a text fileCustomize reportGenetimes Technolog

37、yGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 多種格式輸出結(jié)果多種格式輸出結(jié)果Text ReportExcel spreadsheetPowerPoint presentationAny screen shotGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G Brilliant QRT-PCR and QPCR Reagents Master mixes and reagent kits for any fluorescent chemistry

38、 Compatible with sequence-specific probes SYBR Green kitsGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G DNA AmplificationBrilliant SYBR Green QPCR Master Mix Brilliant SYBR Green QPCR Core Reagent KitRNA AmplificationBrilliant SYBR Green QPCR Master Mix, 1-StepBrilliant SYBR

39、Green QPCR ReagentsGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G DNA AmplificationBrilliant QPCR Core Reagent Kit Brilliant Plus Core Reagent KitBrilliant QPCR Master Mix2-step RT-PCRRNA AmplificationBrilliant QRT-PCR Core Reagent Kit, 1 - StepBrilliant QRT-PCR Master Mix Ki

40、t, 1 - StepBrilliant QRT-PCR Plus Core Reagent Kit, 1 - Step1-step RT-PCRBrilliant QRT-PCR Core Reagent Kit, 2 - StepBrilliant QRT-PCR Plus Core Reagent Kit, 2 - StepBrilliant Probe-based QPCR ReagentsGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 2-fold discrimination using

41、the Brilliant SYBR QPCR master mix on the Mx3000P instrumentCt variation 0.5Cts10,000 copies5,000 copiesBrilliant QPCR KitsTarget = Beta actin / Template = Human genomic DNA36 wells of 10,000 copies with a Ct variation of 0.5 Cts and 36 wells of 5,000 copies with Ct variation of 0.5CtsGenetimes TechnologyGenetimes Technology吉泰生物科技有限公司吉泰生物科技有限公司www.Gwww.G 引物探針設(shè)計(jì)軟件引物探針設(shè)計(jì)軟件設(shè)計(jì)設(shè)計(jì)SYBR Green 引物引物,