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1、課題課題1 1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 本專(zhuān)題一共包括本專(zhuān)題一共包括3個(gè)課題,本課題個(gè)課題,本課題微生微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)是開(kāi)展其他兩個(gè)課題的基是開(kāi)展其他兩個(gè)課題的基礎(chǔ)。學(xué)生只有掌握了本課題中所介紹的基本礎(chǔ)。學(xué)生只有掌握了本課題中所介紹的基本技術(shù),才能完成本專(zhuān)題的其他課題。技術(shù),才能完成本專(zhuān)題的其他課題。 本課題通過(guò)生產(chǎn)中的實(shí)例,首先引導(dǎo)學(xué)生本課題通過(guò)生產(chǎn)中的實(shí)例,首先引導(dǎo)學(xué)生認(rèn)識(shí)微生物的培養(yǎng)過(guò)程中,保持培養(yǎng)物的純認(rèn)識(shí)微生物的培養(yǎng)過(guò)程中,保持培養(yǎng)物的純凈的重要性。通過(guò)學(xué)習(xí)讓學(xué)生進(jìn)一步明確培凈的重要性。通過(guò)學(xué)習(xí)讓學(xué)生進(jìn)一步明確培養(yǎng)微生物的要領(lǐng),就是為所需要的微生物提養(yǎng)微
2、生物的要領(lǐng),就是為所需要的微生物提供良好的生存環(huán)境,同時(shí)阻止或抑制其他微供良好的生存環(huán)境,同時(shí)阻止或抑制其他微生物的生長(zhǎng)。生物的生長(zhǎng)。 學(xué)生在必修一模塊學(xué)習(xí)了細(xì)胞中學(xué)生在必修一模塊學(xué)習(xí)了細(xì)胞中的元素和化合物,由此可引導(dǎo)學(xué)生的元素和化合物,由此可引導(dǎo)學(xué)生分析培養(yǎng)基的成分,同時(shí)根據(jù)日常分析培養(yǎng)基的成分,同時(shí)根據(jù)日常生活學(xué)生能知道微生物無(wú)處不在,生活學(xué)生能知道微生物無(wú)處不在,由此指導(dǎo)學(xué)生對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處由此指導(dǎo)學(xué)生對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理。理。知識(shí)與技能知識(shí)與技能 1、了解有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識(shí)。、了解有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識(shí)。 2、進(jìn)行無(wú)菌技術(shù)的操作。、進(jìn)行無(wú)菌技術(shù)的操作。 3、進(jìn)行微生物的培養(yǎng)。、進(jìn)行微
3、生物的培養(yǎng)。情感、態(tài)度與價(jià)值觀(guān)情感、態(tài)度與價(jià)值觀(guān) 形成勇于實(shí)踐、嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)的形成勇于實(shí)踐、嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)的科學(xué)態(tài)度和科學(xué)精神科學(xué)態(tài)度和科學(xué)精神。過(guò)程與方法過(guò)程與方法 分析實(shí)驗(yàn)流程,對(duì)比前面的實(shí)驗(yàn)分析實(shí)驗(yàn)流程,對(duì)比前面的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),歸納共性,分析差異。設(shè)計(jì),歸納共性,分析差異。課題重點(diǎn):無(wú)菌技術(shù)的操作。課題重點(diǎn):無(wú)菌技術(shù)的操作。課題難點(diǎn):無(wú)菌技術(shù)的操作。課題難點(diǎn):無(wú)菌技術(shù)的操作。(一)培養(yǎng)基(一)培養(yǎng)基 知識(shí)要點(diǎn):知識(shí)要點(diǎn):1、培養(yǎng)基的用途和種類(lèi),指出培養(yǎng)基可分為液體和固體、培養(yǎng)基的用途和種類(lèi),指出培養(yǎng)基可分為液體和固體 兩大類(lèi)。兩大類(lèi)。 2、不同的微生物往往需要采用不同的培養(yǎng)基配方。、不同的微生物往往需
4、要采用不同的培養(yǎng)基配方。3、培養(yǎng)基的基本成分都包括水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。、培養(yǎng)基的基本成分都包括水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。(二)無(wú)菌技術(shù)(二)無(wú)菌技術(shù) 知識(shí)要點(diǎn)知識(shí)要點(diǎn)1、無(wú)菌技術(shù)的概念。、無(wú)菌技術(shù)的概念。2、消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)別。、消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)別。3、常用的消毒與滅菌的方法。、常用的消毒與滅菌的方法。1.1.何為培養(yǎng)基?何為培養(yǎng)基?3.3.不同的培養(yǎng)基有不同的配方,但是不同的培養(yǎng)基有不同的配方,但是其基本成分都相同,都包括哪些營(yíng)養(yǎng)其基本成分都相同,都包括哪些營(yíng)養(yǎng)成分?有何作用?請(qǐng)舉例說(shuō)明。成分?有何作用?請(qǐng)舉例說(shuō)明。課前自主學(xué)習(xí)課前自主學(xué)習(xí): : 2.2.按照不同的培養(yǎng)
5、基劃分標(biāo)準(zhǔn),培養(yǎng)按照不同的培養(yǎng)基劃分標(biāo)準(zhǔn),培養(yǎng)基有哪些種類(lèi)、配制特點(diǎn)及其應(yīng)用?基有哪些種類(lèi)、配制特點(diǎn)及其應(yīng)用?1 1、何為無(wú)菌技術(shù)?無(wú)菌技術(shù)包括哪、何為無(wú)菌技術(shù)?無(wú)菌技術(shù)包括哪 些方面?些方面?2 2、消毒和滅菌的區(qū)別?、消毒和滅菌的區(qū)別?3 3、常用的消毒方法有哪些?、常用的消毒方法有哪些?4 4、常用的滅菌方法有哪些?、常用的滅菌方法有哪些?5 5、干熱滅菌法和高壓蒸汽滅菌法的、干熱滅菌法和高壓蒸汽滅菌法的操作步驟。操作步驟。課前自主學(xué)習(xí):課前自主學(xué)習(xí):課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基1、概念:人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、概念:人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不
6、同需求,配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)的不同需求,配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。養(yǎng)基質(zhì)。固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基2、種類(lèi)、種類(lèi)用途用途化學(xué)成分化學(xué)成分物理性質(zhì)物理性質(zhì)固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基需加入凝固需加入凝固劑,如瓊脂劑,如瓊脂選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基應(yīng)用應(yīng)用加入青霉素加入青霉素分離酵母菌、霉菌等真菌分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽加入高濃度食鹽分離金黃色葡萄球菌分離金黃色葡萄球菌不加氮源不加氮源分離固氮菌分離固氮菌不加含碳有機(jī)物的不加含碳有機(jī)物的無(wú)碳培養(yǎng)基無(wú)碳培養(yǎng)基分離自養(yǎng)型微生物分離自養(yǎng)型微生物加入青
7、霉素等抗生加入青霉素等抗生素素分離導(dǎo)入了目的基因的受分離導(dǎo)入了目的基因的受體細(xì)胞體細(xì)胞3、培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)基成分水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽4. 4. 配制原則配制原則目的明確:目的明確:營(yíng)養(yǎng)全面、濃度適宜、比例恰當(dāng)營(yíng)養(yǎng)全面、濃度適宜、比例恰當(dāng)適宜的適宜的pHpH值:值:有機(jī)碳源有機(jī)碳源異養(yǎng)型:異養(yǎng)型:根據(jù)微生物的根據(jù)微生物的種類(lèi)、培養(yǎng)目的種類(lèi)、培養(yǎng)目的選擇原料選擇原料自養(yǎng)型:自養(yǎng)型:加入緩沖劑加入緩沖劑細(xì)菌偏堿,真菌偏酸細(xì)菌偏堿,真菌偏酸(COCO2 2碳源)碳源)固體培養(yǎng)基:菌落固體培養(yǎng)基:菌落菌落菌落 菌菌落落是是鑒鑒定定菌菌種種的的重重要要依依據(jù)據(jù)消毒消毒使用較使用較溫
8、和溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物的物理或化學(xué)方法僅殺死物體體表面或內(nèi)部一部分表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生對(duì)人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。物(不包括芽孢和孢子)。滅菌滅菌使用使用強(qiáng)烈強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)的理化因素殺死物體內(nèi)所有所有的的微生物,包括芽孢和孢子。微生物,包括芽孢和孢子。常用的消毒方法常用的消毒方法1 1、煮沸消毒法:、煮沸消毒法:100100煮沸煮沸5-6min5-6min2 2、巴氏消毒法:、巴氏消毒法:70-75 70-75 下煮下煮30min30min或或 80 80 下煮下煮15min15min3 3、用、用75%75%酒精、新潔爾滅等進(jìn)行皮膚消毒酒精、新潔爾滅
9、等進(jìn)行皮膚消毒4 4、氯氣消毒水源、氯氣消毒水源5 5、紫外線(xiàn)消毒、紫外線(xiàn)消毒1 1、灼燒滅菌、灼燒滅菌2 2、干熱滅菌:、干熱滅菌:160-170 160-170 下加熱下加熱1-2h1-2h。3 3、高壓蒸氣滅菌:、高壓蒸氣滅菌:100kPa100kPa、121 121 下維持下維持15-30min15-30min。常用的滅菌方法常用的滅菌方法A.A.培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基或培養(yǎng)皿培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基或培養(yǎng)皿B.B.玻棒、試管、燒瓶和吸管玻棒、試管、燒瓶和吸管C.C.接種環(huán)、接種針接種環(huán)、接種針D.D.實(shí)驗(yàn)操作者的雙手實(shí)驗(yàn)操作者的雙手滅菌滅菌滅菌滅菌滅菌滅菌消毒消毒(四)(四)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基
10、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基1. 1. 計(jì)算計(jì)算2 2稱(chēng)量稱(chēng)量3 3溶化溶化4 4滅菌滅菌5 5倒平板倒平板 器具的滅菌器具的滅菌 培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基的配制 培養(yǎng)基的滅菌培養(yǎng)基的滅菌約約50防止皿蓋上的水珠落入防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染培養(yǎng)基,造成污染灼燒滅菌,防止瓶口灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基的微生物污染培養(yǎng)基1.1.培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50 50 左左右時(shí),才能用來(lái)倒平板。你用什么辦法右時(shí),才能用來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度?來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度? 可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙
11、手時(shí),感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí),就可以進(jìn)行倒平板了。就可以進(jìn)行倒平板了。2.2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰?為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰? 通過(guò)灼燒滅菌,防止瓶口的微生物通過(guò)灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。污染培養(yǎng)基。3.3.平板冷凝后,為什么要將平板倒置?平板冷凝后,為什么要將平板倒置?4.4.在倒平板的過(guò)程中,如果不小心將培養(yǎng)在倒平板的過(guò)程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎?為什么?還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎?為什么? 平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的培平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固
12、后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染??諝庵械奈⑸锟赡茉诿笊w與皿底之間的培養(yǎng)空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生基上滋生,因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。物。(二)純化大腸桿菌(二)純化大腸桿菌平板劃線(xiàn)法平板劃線(xiàn)法稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法常用的微生物接種方法:常用的微生物接種方法:平平板板劃劃線(xiàn)線(xiàn)法法1.1.為什么在操作的第一步以及每次劃線(xiàn)之前都
13、為什么在操作的第一步以及每次劃線(xiàn)之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線(xiàn)操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼要灼燒接種環(huán)?在劃線(xiàn)操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?燒接種環(huán)嗎?為什么? 操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;每次劃線(xiàn)環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;每次劃線(xiàn)前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線(xiàn)結(jié)束后,接前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線(xiàn)結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線(xiàn)時(shí),接種環(huán)種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線(xiàn)時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線(xiàn)的末端,從而通上的菌種直接來(lái)源于上次劃線(xiàn)的末端,從而通過(guò)劃線(xiàn)次數(shù)的增加,使每次劃線(xiàn)時(shí)菌種的數(shù)目過(guò)劃
14、線(xiàn)次數(shù)的增加,使每次劃線(xiàn)時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。劃線(xiàn)結(jié)束后灼燒接逐漸減少,以便得到菌落。劃線(xiàn)結(jié)束后灼燒接種環(huán),能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免種環(huán),能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。 2. 2.在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線(xiàn)?卻后再進(jìn)行劃線(xiàn)?以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。 3. 3.在作第二次以及其后的劃線(xiàn)操作在作第二次以及其后的劃線(xiàn)操作時(shí),為什么總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)時(shí),為什么總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)?始劃線(xiàn)? 劃線(xiàn)后,線(xiàn)條末端細(xì)菌的數(shù)目比線(xiàn)
15、條起始處劃線(xiàn)后,線(xiàn)條末端細(xì)菌的數(shù)目比線(xiàn)條起始處要少,每次從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始,能使細(xì)要少,每次從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始,能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而逐步減少,最菌的數(shù)目隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法 涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線(xiàn)與系列稀釋的無(wú)近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線(xiàn)與系列稀釋的無(wú)菌操作要求,想一想,第菌操作要求,想一想,第2 2步應(yīng)如何進(jìn)行步應(yīng)如何進(jìn)行無(wú)菌操作?無(wú)菌操作? 應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無(wú)菌無(wú)菌”。例如,酒精燈與
16、培養(yǎng)皿的距離要合適、吸例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周?chē)鹊?。精燈火焰周?chē)鹊取?7C恒溫箱中,培養(yǎng)恒溫箱中,培養(yǎng)12-14小時(shí)小時(shí)1 1、臨時(shí)保藏:、臨時(shí)保藏:接種到固體斜面培接種到固體斜面培養(yǎng)基,菌落長(zhǎng)成后養(yǎng)基,菌落長(zhǎng)成后置于置于44冰箱保存。冰箱保存。 2 2、長(zhǎng)期保存:、長(zhǎng)期保存:甘油冷凍管藏法甘油冷凍管藏法(四)(四)四、課題成果評(píng)價(jià)四、課題成果評(píng)價(jià) (一)培養(yǎng)基的制作是否合格(一)培養(yǎng)基的制作是否合格 如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1 12 d2 d后后無(wú)菌落生長(zhǎng)
17、,說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功的,否則需要無(wú)菌落生長(zhǎng),說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功的,否則需要重新制備。重新制備。 (二)接種操作是否符合無(wú)菌要求(二)接種操作是否符合無(wú)菌要求 如果培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落的顏色、形狀、大小基如果培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落的顏色、形狀、大小基本一致,并符合大腸桿菌菌落的特點(diǎn),則說(shuō)明接種操本一致,并符合大腸桿菌菌落的特點(diǎn),則說(shuō)明接種操作是符合要求的;如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落,則作是符合要求的;如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落,則說(shuō)明接種過(guò)程中,無(wú)菌操作還未達(dá)到要求,需要分析說(shuō)明接種過(guò)程中,無(wú)菌操作還未達(dá)到要求,需要分析原因,再次練習(xí)。原因,再次練習(xí)。 (三)是否進(jìn)行了及時(shí)細(xì)致的觀(guān)察與記錄(三
18、)是否進(jìn)行了及時(shí)細(xì)致的觀(guān)察與記錄 培養(yǎng)培養(yǎng)12 h12 h與與24 h24 h后的大腸桿菌菌落的大小會(huì)有后的大腸桿菌菌落的大小會(huì)有明顯不同,及時(shí)觀(guān)察記錄的同學(xué)會(huì)發(fā)現(xiàn)這一點(diǎn),并能明顯不同,及時(shí)觀(guān)察記錄的同學(xué)會(huì)發(fā)現(xiàn)這一點(diǎn),并能觀(guān)察到其他一些細(xì)微的變化。這一步的要求主要是培觀(guān)察到其他一些細(xì)微的變化。這一步的要求主要是培養(yǎng)學(xué)生良好的科學(xué)態(tài)度與習(xí)慣。養(yǎng)學(xué)生良好的科學(xué)態(tài)度與習(xí)慣。(09遼寧、寧夏卷)遼寧、寧夏卷)40.【生物生物選修選修1生物技術(shù)實(shí)踐生物技術(shù)實(shí)踐】(15分)分)(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中,除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外,還要考慮)在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中,除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外,還要考慮_、_和滲透壓等條件。由于
19、該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類(lèi)型容和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類(lèi)型容易選擇、易選擇、_、_等優(yōu)點(diǎn),因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。等優(yōu)點(diǎn),因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。(2)在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中,為防止雜菌污染,需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn))在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中,為防止雜菌污染,需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行行_(消毒、滅菌);操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和(消毒、滅菌);操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和_;靜;靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線(xiàn)殺滅,其原因是紫外線(xiàn)能使蛋白質(zhì)變性,還能止空氣中的細(xì)菌可用紫外線(xiàn)殺滅,其原因是紫外線(xiàn)能使蛋白質(zhì)變性,還能_。(3)若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的
20、個(gè)數(shù),要想使所得估計(jì)值更)若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù),要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值,除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外,還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的接近實(shí)際值,除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外,還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的_。(4)通常,對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì))通常,對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的菌進(jìn)行初步的_。(5)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí),在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí),在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是_。(6)若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn),使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)
21、過(guò))若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn),使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)_處理后才能丟棄,以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。處理后才能丟棄,以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。34(12分分)下列是與微生物培養(yǎng)有關(guān)的問(wèn)題,請(qǐng)回答下列是與微生物培養(yǎng)有關(guān)的問(wèn)題,請(qǐng)回答(1)某細(xì)菌固體培養(yǎng)基德組成成分是)某細(xì)菌固體培養(yǎng)基德組成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、瓊脂和蒸餾水,其中凝固劑是、葡萄糖、尿素、瓊脂和蒸餾水,其中凝固劑是_,碳源是,碳源是_,氮源是氮源是_。已知只有能合成脲酶的細(xì)菌才能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng),故該。已知只有能合成脲酶的細(xì)菌才能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng),故該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。按照化學(xué)成分分類(lèi),該培
22、養(yǎng)基。按照化學(xué)成分分類(lèi),該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。從同化作用類(lèi)型看,培養(yǎng)基。從同化作用類(lèi)型看,用該培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)菌屬于用該培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)菌屬于_。(2)將少量細(xì)菌接種到一定體積的液體培養(yǎng)基中,適宜條件下)將少量細(xì)菌接種到一定體積的液體培養(yǎng)基中,適宜條件下培養(yǎng),定時(shí)取樣測(cè)定菌體數(shù)目,以時(shí)間為橫坐標(biāo),以菌體數(shù)培養(yǎng),定時(shí)取樣測(cè)定菌體數(shù)目,以時(shí)間為橫坐標(biāo),以菌體數(shù)目的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo),可以得到細(xì)菌的目的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo),可以得到細(xì)菌的_曲線(xiàn)。該曲線(xiàn)中曲線(xiàn)。該曲線(xiàn)中以菌體數(shù)目的對(duì)數(shù)作為縱坐標(biāo)的原因是以菌體數(shù)目的對(duì)數(shù)作為縱坐標(biāo)的原因是_。實(shí)驗(yàn)室中,為了獲得。實(shí)驗(yàn)室中,為了獲得 形態(tài)和生理特征一致的菌體,一般應(yīng)在形態(tài)和生理特征一致的菌體,一般應(yīng)在_期取期取 材;在生產(chǎn)中,常收集培養(yǎng)至材;在生產(chǎn)中,常收集培養(yǎng)
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