分枝桿菌屬M(fèi)ycobacteriumPPT學(xué)習(xí)教案

1、會(huì)計(jì)學(xué)1分枝桿菌屬分枝桿菌屬M(fèi)ycobacterium第1頁(yè)/共41頁(yè)第一節(jié)、第一節(jié)、結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌致病菌主要為：致病菌主要為：人型結(jié)核桿菌 牛型結(jié)核桿菌俗稱結(jié)核菌，引起人類結(jié)核病的病原菌俗稱結(jié)核菌，引起人類結(jié)核病的病原菌第2頁(yè)/共41頁(yè)AIDS、吸毒、應(yīng)用免疫抑制劑以及耐藥菌的出現(xiàn)，發(fā)病率有上升趨勢(shì)，成為全球性衛(wèi)生問題 世界防治結(jié)核病日3月24日結(jié)核病在舊中國(guó)流行嚴(yán)重，死亡率高第3頁(yè)/共41頁(yè)（1 1）形態(tài)形態(tài)細(xì)長(zhǎng), 稍有彎曲, 兩端呈圓形,可見分枝狀。 人工培養(yǎng)基上呈多形性（球形、串珠形和絲狀）。無鞭毛, 無芽胞，有莢膜。細(xì)胞壁脂質(zhì)含量占干重的60%。 1. 形態(tài)與染色形態(tài)與染色

2、第4頁(yè)/共41頁(yè)初染初染5石炭酸復(fù)紅石炭酸復(fù)紅脫色脫色3鹽酸酒精鹽酸酒精復(fù)染復(fù)染堿性美藍(lán)堿性美藍(lán)結(jié)果結(jié)果分枝桿菌呈紅色，其他分枝桿菌呈紅色，其他細(xì)菌和背景物質(zhì)為藍(lán)色細(xì)菌和背景物質(zhì)為藍(lán)色第5頁(yè)/共41頁(yè)第6頁(yè)/共41頁(yè)饞饞-營(yíng)養(yǎng)要求較高，必須在含血清、卵黃、馬鈴薯、甘油以及含某些無機(jī)鹽類的特殊培養(yǎng)基（羅氏）上才能生長(zhǎng)良好。懶懶-生長(zhǎng)緩慢，14-1 8 h分裂1次，在固體培養(yǎng)基上3-4 w才出現(xiàn)肉眼可見的菌落。2. 培養(yǎng)特性培養(yǎng)特性 丑丑-典型菌落為粗糙型，表面干燥呈顆粒狀，不透明，乳白色或淡黃色，如菜花樣。第7頁(yè)/共41頁(yè)生化反應(yīng)不活潑，不發(fā)酵糖類與非結(jié)核分枝桿菌鑒別： 耐熱觸酶試驗(yàn)?zāi)蜔嵊|酶試驗(yàn)

3、；（非結(jié)核分枝桿菌）與牛分枝桿菌鑒別 煙酸試驗(yàn)煙酸試驗(yàn)；（牛分枝桿菌）第8頁(yè)/共41頁(yè)4.抵抗力抵抗力四抗四抗抗干燥抗干燥抗酸堿抗酸堿抗堿性抗堿性染料染料抗青霉抗青霉素素四怕四怕怕紫外怕紫外線線怕酒精怕酒精怕抗結(jié)怕抗結(jié)核藥物核藥物怕濕怕濕熱熱第9頁(yè)/共41頁(yè)5. 變異性變異性變變異異性性形態(tài)結(jié)構(gòu)變異形態(tài)結(jié)構(gòu)變異典型形態(tài)典型形態(tài)細(xì)菌的細(xì)菌的L L型型卡介苗卡介苗牛結(jié)核桿菌的減毒株牛結(jié)核桿菌的減毒株毒力變異毒力變異耐異煙肼及其它抗結(jié)核藥物的菌株耐異煙肼及其它抗結(jié)核藥物的菌株耐藥性變異耐藥性變異第10頁(yè)/共41頁(yè) 不產(chǎn)生內(nèi)、外毒素，無侵襲性的酶。不產(chǎn)生內(nèi)、外毒素，無侵襲性的酶。( (一一) )致致病

4、病物物質(zhì)質(zhì)脂質(zhì)脂質(zhì)蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)糖類糖類l索狀因子索狀因子(cord factor): 破壞細(xì)胞、引起肉芽腫肉芽腫；l磷脂磷脂(phosphatide): 引起結(jié)核結(jié)節(jié)結(jié)核結(jié)節(jié)及干酪樣壞死；l蠟質(zhì)蠟質(zhì)(wax D): 引起遲發(fā)性超敏反應(yīng)遲發(fā)性超敏反應(yīng)；l硫酸腦苷脂硫酸腦苷脂(sulfatides): 抑制吞噬體與溶酶體的結(jié)合引起遲發(fā)性超敏反應(yīng)細(xì)胞壁表面，類似莢膜，抗吞噬作用第11頁(yè)/共41頁(yè)傳播與擴(kuò)散傳播與擴(kuò)散通過各種途徑，引起各種結(jié)核細(xì)細(xì)菌菌呼吸道消化道破損皮膚粘膜擴(kuò)散擴(kuò)散侵犯多種組織和器官引起相應(yīng)的結(jié)核病體體內(nèi)內(nèi)血液淋巴管消化道支氣管第12頁(yè)/共41頁(yè)第13頁(yè)/共41頁(yè)1.1.肺部感染肺部感

5、染原發(fā)感染原發(fā)感染外源性感染外源性感染 多見成人，有免疫力 病灶局限，引起局部TB、開放性TB （反應(yīng)劇烈，干酪性壞死、空洞）繼發(fā)感染繼發(fā)感染外源性或內(nèi)源（原發(fā)感染遺留）性感外源性或內(nèi)源（原發(fā)感染遺留）性感染染（反應(yīng)一般，滲出性炎癥）第14頁(yè)/共41頁(yè) 經(jīng)淋巴、血液循環(huán)引起其它部位感染： 腦、腎、骨、關(guān)節(jié)等結(jié)核 帶菌痰液被咽入消化道引起腸結(jié)核、腹膜炎 免疫力極度低下著可引起全身粟粒狀結(jié)核第15頁(yè)/共41頁(yè)M. tuberculosis enters the alveoli by airborne transmissionIt resists destruction by alveolar ma

6、crophages and proliferateTo spread to lymph nodesCell-mediated immune response stops cycle of destruction and spread. To enter bloodstream and seed other organsTo reseed the lungsTo cause primary tuberculosisTissue destruction results from cell-mediated hypersensitivity.To lead to post-primary tuber

7、culosis第16頁(yè)/共41頁(yè)1結(jié)核分枝桿菌是胞內(nèi)感染菌，機(jī)體抵抗結(jié)核分枝桿菌感染主要是細(xì)胞免疫細(xì)胞免疫。2感染率較高 , 但發(fā)病率較低。3抗結(jié)核免疫屬感染免疫感染免疫，又稱帶帶菌免疫菌免疫。4 抗結(jié)核免疫與型超敏反應(yīng)，免疫與超敏反應(yīng)同行第17頁(yè)/共41頁(yè)第18頁(yè)/共41頁(yè)郭霍現(xiàn)象郭霍現(xiàn)象有毒TB菌以前感染過或免疫豚鼠24-48 h局部紅腫、淺潰瘍 不擴(kuò)散，有免不擴(kuò)散，有免疫有超敏反應(yīng)疫有超敏反應(yīng)皮下皮下正常豚鼠10-14 d局部紅腫、潰瘍壞死，經(jīng)久不愈局部反應(yīng)小，局部反應(yīng)小，全身擴(kuò)散全身擴(kuò)散第19頁(yè)/共41頁(yè)第20頁(yè)/共41頁(yè)機(jī)體抗結(jié)核免疫特點(diǎn)：傳染、免疫、超敏反應(yīng)共存共存第21頁(yè)/共41

8、頁(yè)應(yīng)用結(jié)核菌素進(jìn)行皮膚試驗(yàn),來測(cè)定機(jī)體對(duì)結(jié)核桿菌是否能發(fā)生遲遲發(fā)型發(fā)型（IVIV）超超敏反應(yīng)敏反應(yīng)的一種試驗(yàn)。概念概念方法方法材料材料舊結(jié)核菌素舊結(jié)核菌素 ( old tuberculin, OT)： 結(jié)核桿菌加熱處理后提取的粗制品，主要為結(jié)核菌蛋白純蛋白質(zhì)衍化物純蛋白質(zhì)衍化物 (purified protein derivative, PPD)： 三氯醋酸沉淀后的純化物注射于前臂皮內(nèi)第22頁(yè)/共41頁(yè)48-72 h后觀察結(jié)果第23頁(yè)/共41頁(yè)第24頁(yè)/共41頁(yè)患有其他傳染病如麻疹等導(dǎo)致的細(xì)胞免疫功能低下者；艾滋??；腫瘤；用過免疫抑制劑者。 第25頁(yè)/共41頁(yè)第26頁(yè)/共41頁(yè)根據(jù)感染部位不同

9、選擇不同的標(biāo)本1. 標(biāo)本處理：濃縮集菌（NaOH處理）2. 直接鏡檢：抗酸染色、金胺染色3. 分離培養(yǎng)：培養(yǎng)基、時(shí)間4. 快速診斷：PCR等5. 動(dòng)物試驗(yàn)：豚鼠等 確診的主要依據(jù)第27頁(yè)/共41頁(yè)濃縮集菌濃縮集菌痰液、尿、糞等涂片染色（105cfu/ml）分離培養(yǎng)(接種培養(yǎng)基)（102-3cfu/ml）4%NaOH、3%HCl或6%H2SO4處理15 m離心、沉淀第28頁(yè)/共41頁(yè)抗酸染色金胺O染色染色檢查涂片檢查直接增菌臨床標(biāo)本分離培養(yǎng)核酸檢測(cè)抗體檢測(cè)處理過/無污染標(biāo)本液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基豚鼠/小白鼠病變臟器圖片鏡檢6-8 w菌種鑒定抗酸染色藥敏試驗(yàn)菌落特點(diǎn)慢生長(zhǎng)菌快速生長(zhǎng)菌37 oC，5-

10、10% CO27 d鑒定試驗(yàn)第29頁(yè)/共41頁(yè)報(bào)告方式報(bào)告方式鏡檢結(jié)果鏡檢結(jié)果-仔細(xì)檢查300個(gè)視野未發(fā)現(xiàn)抗酸桿菌300個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1-2條抗酸菌100個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1-9條抗酸菌210個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1-9條抗酸菌3每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1-9條抗酸菌4每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)9條以上抗酸菌第30頁(yè)/共41頁(yè)預(yù)防卡介苗治療早期發(fā)現(xiàn)、早期治療、聯(lián)合用藥、徹底治愈常用藥物異煙肼、利福平、鏈霉素、乙胺丁醇、對(duì)氨水楊酸鈉等第31頁(yè)/共41頁(yè)第32頁(yè)/共41頁(yè)非典型分枝桿菌非典型分枝桿菌(atypical mycobacteria) 是指結(jié)核分枝桿菌與麻風(fēng)分枝桿菌以外的分枝桿菌。 大多為環(huán)境中的腐生菌 對(duì)酸堿比較敏感 對(duì)常用抗結(jié)核藥耐受 為條件致病菌，艾滋病患者易感染鳥復(fù)合分枝桿菌第33頁(yè)/共41頁(yè)性狀性狀結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌非結(jié)核分枝桿菌非結(jié)核分枝桿菌菌落特征外形粗糙光滑或粗糙色澤乳酪色黃或橘色毒力測(cè)定索狀因子+中性紅試驗(yàn)+耐熱H2O2酶試驗(yàn)-豚鼠致病+第34頁(yè)/共41頁(yè)第35頁(yè)/共41頁(yè)麻風(fēng)分枝麻風(fēng)分枝桿菌桿菌生物學(xué)性狀生物學(xué)性狀第36頁(yè)/共41