動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)教案

1、2.2動物細(xì)胞工程2.2.1動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)學(xué)習(xí)目標(biāo)1.歸納動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程、條件及應(yīng)用。2.歸納通過動物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動物的過程及應(yīng)用前景。核心素養(yǎng)1.科學(xué)思維：能用文字和圖示表述克隆動物的培育過程。2.社會責(zé)任：了解克隆動物的新進(jìn)展和尚未解決的問題，理性地看待克隆技術(shù)的社會影響。一、動物細(xì)胞工程和動物細(xì)胞培養(yǎng)1.動物細(xì)胞工程基礎(chǔ)技術(shù)手段應(yīng)用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物體細(xì)胞核移植、動物細(xì)胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體等(1)深入探索并改造生物的遺傳特性；(2)大量培養(yǎng)細(xì)胞；(3)單克隆抗體的制備等2.動物細(xì)胞培養(yǎng)(1)概念：從動物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個細(xì)胞，然后

2、，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和增殖。(2)過程(3)相關(guān)概念細(xì)胞貼壁：懸液中分散的細(xì)胞貼附在瓶壁上。接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時，細(xì)胞停止分裂增殖的現(xiàn)象。原代培養(yǎng)：指動物組織消化后的初次培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)：貼壁的細(xì)胞，出現(xiàn)接觸抑制后，需要重新用胰蛋白酶來處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖的培養(yǎng)過程。(4)培養(yǎng)條件無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理，培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，并定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物，防止對細(xì)胞自身造成危害。營養(yǎng)溫度和pH氣體環(huán)境(5)應(yīng)用生產(chǎn)生物制品：如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。應(yīng)用于基因工程：動物細(xì)胞是基因工程技術(shù)中常用的

3、受體細(xì)胞。應(yīng)用于檢測有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性。用于生理、病理、藥理等方面的研究，如用于篩選抗癌藥物等。歸納總結(jié)動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中的幾個要點(diǎn)(1)選取幼齡動物的組織、器官作為材料的原因動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖。動物細(xì)胞培養(yǎng)時，一般選取幼齡動物的組織、器官，其細(xì)胞的分化程度較低，增殖能力強(qiáng)，有絲分裂旺盛，容易培養(yǎng)。(2)將動物細(xì)胞分散成單個細(xì)胞培養(yǎng)的原因分散成單個細(xì)胞后容易培養(yǎng)，細(xì)胞所需的營養(yǎng)容易供應(yīng)，其代謝廢物容易排出。同時，分散成單個細(xì)胞培養(yǎng)，可使得在細(xì)胞水平操作的其他技術(shù)得以實(shí)現(xiàn)。(3)細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別細(xì)胞株：傳代培養(yǎng)的細(xì)胞能傳到1050代，這樣的傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞株。細(xì)胞系：傳代

4、培養(yǎng)的細(xì)胞在傳到50代后，有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變，獲得不死性，這種具有癌變特點(diǎn)的細(xì)胞稱為細(xì)胞系。1.如圖為動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)胞增殖情況的變化曲線，圖中B、E兩點(diǎn)表示經(jīng)篩選、分裝后繼續(xù)培養(yǎng)。下列判斷錯誤的是()A.B點(diǎn)之前的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，之后的培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)B.接觸抑制現(xiàn)象主要發(fā)生在AB段和DE段C.分瓶后的每個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞群稱為一個克隆D.E點(diǎn)后的細(xì)胞大多數(shù)具有異倍體核型，可連續(xù)傳代答案C解析人們通常將動物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，貼滿瓶壁的細(xì)胞用胰蛋白酶處理，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖的培養(yǎng)過程稱為傳代培養(yǎng)，B點(diǎn)之后細(xì)胞繼續(xù)生長，可見B點(diǎn)之后進(jìn)行了傳代培養(yǎng)，A正確

5、；當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時，細(xì)胞就會停止分裂增殖，即會發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，在AB段和DE段細(xì)胞幾乎生長停滯，可能發(fā)生了接觸抑制，B正確；細(xì)胞克隆的最基本要求是必須保證分離出來的是一個細(xì)胞而不是多個細(xì)胞，C錯誤；已獲無限增殖能力能持續(xù)生存的細(xì)胞系，稱為連續(xù)細(xì)胞系或無限細(xì)胞系，無限細(xì)胞系大多已發(fā)生異倍化，具異倍體核型，D正確。2.下列屬于動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)區(qū)別的是()A.動物細(xì)胞培養(yǎng)基與植物細(xì)胞培養(yǎng)基的成分有所不同B.動物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進(jìn)行C.動物細(xì)胞培養(yǎng)可發(fā)生遺傳物質(zhì)改變，而植物組織培養(yǎng)不能D.植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)都體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性答案A解析動物細(xì)胞培養(yǎng)所用的

6、培養(yǎng)基與植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分不同，如培養(yǎng)動物細(xì)胞的培養(yǎng)基需加入血清，而植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基則不需要加入血清；動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)都需要在無菌、人工控制的條件下進(jìn)行；動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)過程中都可發(fā)生遺傳物質(zhì)的改變；植物組織培養(yǎng)最終能夠形成完整的植物體，能體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性，動物細(xì)胞最終不能被培養(yǎng)成新的個體，不能體現(xiàn)動物細(xì)胞的全能性。前掛后連植物組織培養(yǎng)與動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)生物學(xué)原理植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體液體培養(yǎng)基成分蔗糖、氨基酸、水、礦物質(zhì)、生長素、細(xì)胞分裂素、瓊脂等葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素、水、血

7、清、血漿等培養(yǎng)結(jié)果新的植株或組織大量新細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物應(yīng)用快速繁殖；培育無病毒植株；細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)；制作人工種子生產(chǎn)病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等；檢測有毒物質(zhì)；生理、病理、藥理研究培養(yǎng)條件無菌、適宜的溫度和pH取材植物器官、組織或細(xì)胞動物早期胚胎、幼齡動物的器官或組織培養(yǎng)對象植物器官、組織或細(xì)胞分散的單個細(xì)胞過程脫分化、再分化原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)細(xì)胞分裂、生長、分化的特點(diǎn)分裂：形成愈傷組織；分化：形成根、芽只分裂不分化；貼壁生長；接觸抑制二、動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物1.概念將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，最終發(fā)育為動物個體。

8、2.分類包括胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，其中胚胎細(xì)胞核移植較易成功。3.過程4.體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景(1)加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育。(2)增加瀕危動物的存活數(shù)量。(3)生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白。(4)用于組織器官的移植。(5)用于科學(xué)研究。5.體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題(1)成功率非常低。(2)克隆動物存在健康問題。(3)克隆動物食品的安全性存在爭議等。歸納總結(jié)1.細(xì)胞核移植的原理動物體細(xì)胞核移植的原理是細(xì)胞核的全能性，而不是動物細(xì)胞的全能性。因?yàn)閯游矬w細(xì)胞的全能性受到限制，不能經(jīng)培養(yǎng)直接發(fā)育成完整個體，所以用體細(xì)胞核移植技術(shù)能夠得到克隆動物，說明動物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。

9、2.供體和受體的選擇(1)供體：一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，因?yàn)?0代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型，保證了供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)。(2)受體：選擇M期的卵母細(xì)胞，其原因是：卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)存在激發(fā)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。卵母細(xì)胞體積大，便于操作。卵母細(xì)胞內(nèi)卵黃多，營養(yǎng)物質(zhì)豐富。3.克隆動物的遺傳特點(diǎn)克隆動物的親本有三個，即體細(xì)胞核供體、卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體和代孕母體。(1)克隆動物細(xì)胞核基因來自體細(xì)胞核供體，因此，克隆動物的性狀與體細(xì)胞核供體基本相同。(2)克隆動物的細(xì)胞質(zhì)基因來自卵母細(xì)胞，因此，克隆動物的性狀與卵母細(xì)胞供體部分相同。(3)代孕母體沒有為克隆動物提供遺傳物質(zhì)，因此，克

10、隆動物的性狀與代孕母體沒有直接關(guān)系。3.如圖為某哺乳動物的生殖過程圖，下列敘述正確的是()A.動物個體2為克隆動物，c為高度分化的體細(xì)胞B.動物個體2的遺傳性狀與提供b細(xì)胞的母體完全不同C.產(chǎn)生動物個體2的生殖方式為有性生殖D.e細(xì)胞為完成減數(shù)分裂的卵細(xì)胞答案A解析通過克隆技術(shù)培育的動物稱為克隆動物，提供細(xì)胞核的是高度分化的體細(xì)胞，A項(xiàng)正確；克隆動物絕大部分性狀與供體動物相同，少數(shù)性狀(由線粒體DNA控制的性狀)與提供卵母細(xì)胞的動物相同，B項(xiàng)錯誤；動物的克隆實(shí)際上是無性生殖過程，C項(xiàng)錯誤；e細(xì)胞是處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞，并沒有完全完成減數(shù)分裂，D項(xiàng)錯誤。拓展提升判斷有性生殖與無性生殖

11、的兩種方法(1)從概念上判斷：有性生殖是指經(jīng)兩性生殖細(xì)胞結(jié)合而成的合子或有性配子直接發(fā)育成個體的生殖方式；無性生殖是指不經(jīng)過生殖細(xì)胞的結(jié)合而由親本直接產(chǎn)生子代的生殖方式。(2)從培養(yǎng)細(xì)胞的種類上判斷：組織培養(yǎng)中培養(yǎng)的不是體細(xì)胞而是有性配子或合子時，才屬于有性生殖；植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞核移植都屬于無性生殖。4.(2018全國，38)2018年細(xì)胞期刊報道，中國科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細(xì)胞對非人靈長類動物進(jìn)行克隆，獲得兩只克隆猴“中中”和“華華”?；卮鹣铝袉栴}：(1)“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過程，核移植是指。通過核移植方法獲得的克隆猴，與核供體相比，克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)

12、目(填“減半”“加倍”或“不變”)。(2)哺乳動物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動物的難度(填“大于”或“小于”)體細(xì)胞核移植，其原因是。(3)在哺乳動物核移植的過程中，若分別以雌性個體和雄性個體的體細(xì)胞作為核供體，通常，所得到的兩個克隆動物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目(填“相同”或“不同”)，性染色體組合(填“相同”或“不同”)。答案(1)將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中不變(2)小于胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對容易(3)相同不同解析(1)核移植是指將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，形成重組細(xì)胞。重組

13、細(xì)胞形成的早期胚胎可移植到受體子宮內(nèi)進(jìn)一步發(fā)育，最終分娩得到克隆動物。因?yàn)槿旧w在細(xì)胞核中，所以克隆動物體細(xì)胞的染色體數(shù)目與提供細(xì)胞核的個體的體細(xì)胞相同。(2)由于動物的胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對容易，而動物的體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)全能性十分困難，因此，動物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。(3)哺乳動物雌雄個體的體細(xì)胞中，細(xì)胞核內(nèi)常染色體的數(shù)目是相同的，性染色體組合是不同的。若分別以雌性個體和雄性個體的體細(xì)胞作為核供體，則得到的克隆動物的體細(xì)胞中常染色體的數(shù)目相同，性染色體組合不同。1.判斷正誤：(1)動物細(xì)胞培養(yǎng)體現(xiàn)了動物細(xì)胞的全能性()(2)從動物機(jī)體取出相關(guān)組織，可以用

14、胃蛋白酶將它分散成單個細(xì)胞()(3)動物細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中一些細(xì)胞會發(fā)生遺傳物質(zhì)的變化()(4)在動物細(xì)胞的培養(yǎng)過程中，使用的合成培養(yǎng)基中可以不加入血清和血漿等物質(zhì)()(5)體細(xì)胞核移植技術(shù)產(chǎn)生的個體組織與供體的性狀完全相同()答案(1)(2)(3)(4)(5)2.下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述中，不正確的是()A.傳代培養(yǎng)時需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的細(xì)胞B.細(xì)胞的癌變發(fā)生于原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過渡過程中C.癌細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中不會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象D.動物細(xì)胞培養(yǎng)一般需要使用CO2培養(yǎng)箱答案B解析由原代培養(yǎng)分瓶進(jìn)行傳代培養(yǎng)時，需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理貼壁生長的細(xì)胞，A項(xiàng)正確；細(xì)胞的癌變一般發(fā)生

15、于50代后的細(xì)胞培養(yǎng)過程中，B項(xiàng)錯誤；癌細(xì)胞膜上糖蛋白減少，細(xì)胞間的黏著性降低，失去了接觸抑制，容易分散和轉(zhuǎn)移，C項(xiàng)正確；動物細(xì)胞培養(yǎng)的場所是CO2培養(yǎng)箱，培養(yǎng)箱內(nèi)含有95%的空氣加5%的CO2的混合氣體，為動物細(xì)胞提供適宜的氣體環(huán)境，D項(xiàng)正確。3.生物技術(shù)的發(fā)展速度很快，已滅絕生物的“復(fù)生”將不再是神話。如果世界上最后一頭野驢剛死亡，以下提供的“復(fù)生”野驢個體的方法中能夠成功的是()A.將野驢的體細(xì)胞取出，利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，可培育成新個體B.將野驢的體細(xì)胞兩兩融合，再經(jīng)組織培養(yǎng)培育成新個體C.取出野驢的體細(xì)胞核移植到母家驢的去核卵母細(xì)胞中，經(jīng)孕育培養(yǎng)成新個體D.將野驢的一個基因?qū)爰殷H的受精

16、卵中，培育成新個體答案C解析由于動物細(xì)胞的全能性受到限制，目前動物細(xì)胞通過細(xì)胞培養(yǎng)或通過動物細(xì)胞融合技術(shù)還不能培養(yǎng)成動物個體；將野驢的一個基因?qū)爰殷H的受精卵中，培育成的是帶有野驢基因的家驢；野驢的體細(xì)胞核中具有發(fā)育成野驢的全部基因，因此通過動物體細(xì)胞核移植技術(shù)，可使野驢“復(fù)生”。4.下列對動物核移植技術(shù)的描述不正確的是()A.體細(xì)胞核移植過程中通常采用M期卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞B.體細(xì)胞核移植的過程中可通過顯微操作去除卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核C.哺乳動物核移植包括胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，動物體細(xì)胞核移植的難度明顯低于胚胎細(xì)胞核移植D.通過體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動物不是對體細(xì)胞動物進(jìn)行了10

17、0%的復(fù)制答案C解析體細(xì)胞核移植過程中通常采用M期卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，A正確；體細(xì)胞核移植的過程中可通過顯微操作去除卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核，B正確；哺乳動物核移植包括胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，動物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，C錯誤；通過體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動物不是對體細(xì)胞動物進(jìn)行了100%的復(fù)制，因?yàn)檫€有細(xì)胞質(zhì)基因，D正確。5.科學(xué)家通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了含有人生長激素基因的奶牛，如果要加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育，可以對此轉(zhuǎn)基因奶牛進(jìn)行克隆(如圖所示)。請結(jié)合圖示回答下列相關(guān)問題：(1)在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)之前，要對取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織細(xì)胞進(jìn)行分離，形成單個細(xì)胞，這個過程中需要利用酶處

18、理。(2)用于核移植的供體細(xì)胞，一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是。(3)在進(jìn)行原代培養(yǎng)時，細(xì)胞增殖的方式是，此外，細(xì)胞增殖還表現(xiàn)出_和接觸抑制等特點(diǎn)。(4)將進(jìn)行培養(yǎng)的供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中，去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核的目的是。(5)將重組細(xì)胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)成的重組胚胎移入受體母牛后，該母牛就會生出與供體奶牛遺傳物質(zhì)相同的犢牛，但也不是100%的復(fù)制，原因最可能是。答案(1)胰蛋白(或膠原蛋白)(2)該種細(xì)胞代謝旺盛、分裂能力強(qiáng)，且遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變(3)有絲分裂貼壁生長(4)使克隆出的動物個體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來自供體細(xì)胞(5)生物的性狀受細(xì)胞核基因和細(xì)胞質(zhì)基因共同控制；生物的性狀還受

19、環(huán)境因素的影響解析(1)在進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)前常用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動物組織細(xì)胞使其分散開來。(2)傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞代謝旺盛、分裂能力強(qiáng)，遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變，適于作動物體細(xì)胞核移植的供體細(xì)胞。(3)在進(jìn)行原代培養(yǎng)時，細(xì)胞以有絲分裂的方式進(jìn)行增殖，同時表現(xiàn)出貼壁生長和接觸抑制的現(xiàn)象。(4)去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核的目的是使克隆出的動物個體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來自供體細(xì)胞。(5)生物的性狀是細(xì)胞核基因和細(xì)胞質(zhì)基因共同作用的結(jié)果，同時，生物的性狀還受環(huán)境的影響，因此，克隆動物不可能是供體奶牛100%的復(fù)制品。題組一動物細(xì)胞工程和動物細(xì)胞的培養(yǎng)1.CCTV4“國際頻道”曾報道，廣東出入境檢疫部門連

20、續(xù)兩次從美國進(jìn)口凍豬腎和加拿大進(jìn)口凍豬肉中檢測出獸藥殘留物萊克多巴胺。這種獸藥對人體細(xì)胞的毒性大小可以采用的檢測技術(shù)是()A.組織培養(yǎng)技術(shù)B.細(xì)胞融合技術(shù)C.動物細(xì)胞培養(yǎng)D.基因拼接技術(shù)答案C解析動物細(xì)胞培養(yǎng)可以應(yīng)用于檢測有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性。2.一般來說，動物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足的條件有()無毒的環(huán)境無菌的環(huán)境培養(yǎng)液中需加血漿溫度與動物體溫相近需要O2加CO2維持培養(yǎng)液的pHA.B.C.D.答案A解析動物細(xì)胞體外培養(yǎng)要求環(huán)境無菌、無毒，在細(xì)胞培養(yǎng)液中需添加血清、血漿等一些天然成分，培養(yǎng)溫度一般與動物體溫相近。動物細(xì)胞培養(yǎng)還需要O2和CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2可維持培養(yǎng)液的

21、pH。3.實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)(非克隆培養(yǎng))的基本過程如圖所示。下列敘述錯誤的是()A.甲過程需要對實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒B.乙過程對皮膚組織可用胰蛋白酶消化C.丙過程得到的細(xì)胞大多具有異倍體核型D.丁過程得到的細(xì)胞可能具有異質(zhì)性答案C解析進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)前需要對提供實(shí)驗(yàn)材料的動物進(jìn)行消毒，A正確；進(jìn)行培養(yǎng)的組織需先用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，使其消化分散成單個細(xì)胞，B正確；丙過程屬于原代培養(yǎng)，細(xì)胞的核型穩(wěn)定，C錯誤；丁過程屬于傳代培養(yǎng)，期間部分細(xì)胞會出現(xiàn)異質(zhì)性，D正確。4.下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯誤的是()A.可用于檢測某種物質(zhì)的毒性B.可通過培養(yǎng)各種病變細(xì)胞，用于藥理等方面的研究C.可

22、通過動物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)來生產(chǎn)病毒疫苗、干擾素等D.經(jīng)過脫分化、再分化，可構(gòu)建人造皮膚答案D解析動物細(xì)胞培養(yǎng)沒有脫分化與再分化過程。5.在將動物組織塊分散成單個細(xì)胞時，可以使用胰蛋白酶。由此判斷以下推測不合理的是()A.動物細(xì)胞之間可能依靠蛋白質(zhì)相互聯(lián)系B.處理時一定要注意處理時間、加酶量C.胰蛋白酶一定不會對動物細(xì)胞造成損傷D.動物細(xì)胞培養(yǎng)液的pH應(yīng)與胰蛋白酶作用的適宜pH基本一致答案C解析胰蛋白酶可使蛋白質(zhì)分解，由胰蛋白酶可破壞動物細(xì)胞之間的聯(lián)系，可推測動物細(xì)胞之間可能依靠蛋白質(zhì)相互聯(lián)系；細(xì)胞膜中含有蛋白質(zhì)成分，所以一定要注意處理的時間和酶的用量，以防止對動物細(xì)胞造成損傷；酶促反應(yīng)需要適宜

23、的pH，所以培養(yǎng)液的pH應(yīng)與胰蛋白酶作用的適宜pH基本一致。6.對某種動物的肝腫瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，下列說法錯誤的是()A.在利用肝組織塊制備細(xì)胞懸液時，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理B.細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是刺激細(xì)胞呼吸C.為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素D.在合成培養(yǎng)基中，通常需加入血清、血漿等天然成分答案B解析在利用肝組織塊制備細(xì)胞懸液時，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，以分解細(xì)胞間的蛋白質(zhì)，得到單個細(xì)胞；細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH；為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染，要求對培養(yǎng)液

24、進(jìn)行消毒、滅菌，也可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素；合成培養(yǎng)基通常需加入血清、血漿等天然成分。7.動物細(xì)胞體外培養(yǎng)時，通常要在培養(yǎng)基中補(bǔ)充一定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，不能從該圖獲得的結(jié)論是()A.正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率相同B.有無血清對正常細(xì)胞培養(yǎng)的影響較大C.培養(yǎng)基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培養(yǎng)D.培養(yǎng)基中是否補(bǔ)充血清對癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大答案A解析分析圖中曲線可知，對癌細(xì)胞來說，相同培養(yǎng)時間內(nèi)，培養(yǎng)基中有無血清，其細(xì)胞數(shù)目相差不大，說明培養(yǎng)基中有無血清對癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大；對正常細(xì)胞來說，在相同的培養(yǎng)時間內(nèi)，有血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)目遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于沒

25、有血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)目，說明有無血清對正常細(xì)胞的培養(yǎng)影響較大；在相同條件和相同的培養(yǎng)時間內(nèi)，癌細(xì)胞和正常細(xì)胞的數(shù)目差距較大，正常細(xì)胞達(dá)到一定的數(shù)目后不再增加，而癌細(xì)胞卻能不斷增加。題組二動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物8.下列關(guān)于哺乳動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物的敘述，正確的是()A.體細(xì)胞核移植過程中可以用任何細(xì)胞作為受體細(xì)胞B.目前科學(xué)家可以用類似植物組織培養(yǎng)的方法獲得完整的動物個體C.利用動物體細(xì)胞核移植技術(shù)可有選擇地繁殖某一性別的家畜D.用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代50代以內(nèi)的細(xì)胞答案C解析體細(xì)胞核移植過程中常用減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞；動物體細(xì)胞的全能性

26、受到限制，不能通過類似植物組織培養(yǎng)的方法獲得動物個體；用于核移植的供體細(xì)胞一般是10代以內(nèi)的細(xì)胞；克隆動物細(xì)胞核內(nèi)的遺傳物質(zhì)來自供體細(xì)胞，其性別與提供細(xì)胞核的動物一致，因此可有選擇地克隆某一性別的家畜。9.科學(xué)家培育克隆羊時，使用了三種細(xì)胞核的供體細(xì)胞，分別將這些細(xì)胞核移入去核卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，形成重組細(xì)胞，發(fā)育成重組胚胎，這些重組胚胎的發(fā)育情況如下表所示。據(jù)此分析不正確的是()細(xì)胞核供體細(xì)胞的類型妊娠數(shù)/受體母羊數(shù)乳腺上皮細(xì)胞1/13胚胎成纖維細(xì)胞4/10早期胚胎細(xì)胞14/27A.早期胚胎細(xì)胞作為細(xì)胞核的供體細(xì)胞妊娠成功率最高B.克隆羊的遺傳信息與細(xì)胞核的供體細(xì)胞完全相同C.體細(xì)胞核移植難

27、度高于胚胎細(xì)胞核移植D.重組細(xì)胞的發(fā)育與去核卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)有關(guān)答案B解析分析表格數(shù)據(jù)可知，早期胚胎細(xì)胞作為細(xì)胞核的供體細(xì)胞妊娠成功率最高，A正確；克隆羊的培育用到了核移植、胚胎移植技術(shù)，克隆羊細(xì)胞核的遺傳信息來自細(xì)胞核的供體，細(xì)胞質(zhì)的遺傳信息來自去核卵母細(xì)胞，B錯誤；對比表格中的數(shù)據(jù)可知，體細(xì)胞核移植難度高于胚胎細(xì)胞核移植，C正確；核移植中作受體細(xì)胞的都是卵母細(xì)胞，可見重組細(xì)胞發(fā)育與去核卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)有關(guān)，D正確。10.核移植的受體細(xì)胞是M期卵母細(xì)胞，下列有關(guān)說法錯誤的是()A.M期卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)B.M期卵母細(xì)胞體積比較大，操作起來相對容易C.可以把供體細(xì)

28、胞直接注入去核的卵母細(xì)胞中D.M期卵母細(xì)胞對克隆動物的遺傳特性沒有任何影響答案D解析直接把供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中也是可以的，并且這樣可以減少對細(xì)胞核的損傷，更有利于重組細(xì)胞的分裂；M期卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有少量的遺傳物質(zhì)，也會對克隆動物的遺傳特性產(chǎn)生影響。11.下列有關(guān)體細(xì)胞核移植技術(shù)的說法，不正確的是()A.體細(xì)胞核移植技術(shù)在多種動物中獲得了成功，成功率非常高B.克隆技術(shù)的各個環(huán)節(jié)有待于進(jìn)一步改進(jìn)C.大多數(shù)克隆動物還存在一些遺傳和生理缺陷類的健康問題D.克隆動物食品的安全性問題仍然存在爭議答案A解析盡管體細(xì)胞核移植技術(shù)已經(jīng)在許多種動物中獲得成功，但其成功率仍然非常低，產(chǎn)下的活克隆動物占

29、移植克隆胚胎的比率平均不到10%。12.下圖是某克隆羊的培育過程模式圖，與獲得該克隆羊接近的生殖方式和其發(fā)育成熟時所分泌的主要性激素分別是()A.無性生殖；雄性激素B.無性生殖；雌性激素C.有性生殖；雄性激素D.有性生殖；雌性激素答案A解析克隆羊的產(chǎn)生屬于無性生殖；由于此過程是雄性羊供核，故得到的克隆羊?yàn)樾坌?，其分泌的性激素主要是雄性激素?3.某生物興趣小組對一種抗癌新藥進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時，以動物肝癌細(xì)胞為材料，測定抗癌藥物對體外培養(yǎng)細(xì)胞增殖的影響。請回答下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的問題：(1)在動物細(xì)胞培養(yǎng)時，將細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基稱為培養(yǎng)基。通常在培養(yǎng)基中還需要加入

30、適量等一些天然成分。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是。另外，還應(yīng)該保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于、的環(huán)境。(2)在細(xì)胞生長過程中，當(dāng)細(xì)胞貼壁生長到一定程度時，其生長會受到抑制，這種現(xiàn)象稱為。(3)為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的。(4)請你幫助興趣小組的同學(xué)分析本實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)的自變量是，實(shí)驗(yàn)組和對照組除了自變量不同外，其他處理均應(yīng)該相同，這是為了遵循實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的_原則。答案(1)合成血清、血漿維持培養(yǎng)液的pH無菌無毒(2)接觸抑制(3)抗生素(4)是否加入抗癌藥物單一變量解析(1)將動物細(xì)胞所需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基，稱為合成培養(yǎng)基。由于對細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)還沒有完全搞清楚，因此，在使用合成培養(yǎng)基時，還要加入一些動物血清、血漿等天然成分。細(xì)胞培養(yǎng)所需的氣體中有CO2，作用是維持培養(yǎng)液的pH。被培養(yǎng)的細(xì)胞必須處于無菌、無毒的環(huán)境中，才能保證細(xì)胞正常地生長增殖。(2)動物細(xì)胞在分裂過程中有接觸抑制的現(xiàn)象。(3)抗生素能殺死培養(yǎng)基中的微生物，保證無菌、無毒的環(huán)境。(4)實(shí)驗(yàn)的目的是要測定抗癌藥物對體外培養(yǎng)細(xì)胞增殖的影響，故實(shí)驗(yàn)的自變量為抗癌藥物的有無，其他無關(guān)變量應(yīng)該相同，否則會干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果，這種設(shè)計(jì)遵循的是實(shí)驗(yàn)的單一變量原則。14.下圖表示通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動物(二倍體)的流程