藥物分析A抗生素類藥物分析

1、第十一章抗生素類藥物的分析進(jìn)入返回主目錄藥物分析A抗生素類藥物分析思考與練習(xí)第一節(jié) 概 述第二節(jié) 內(nèi)酰胺類抗生素 第三節(jié) 氨基糖苷類抗生素第四節(jié) 四環(huán)素類抗生素第五節(jié) 抗生素類藥物中高分 子雜質(zhì)的檢查基本要求藥物分析A抗生素類藥物分析基本要求一、掌握抗生素類藥物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與分析方法之間的關(guān)系。二、掌握抗生素類藥物的鑒別原理與方法。三、掌握抗生素類藥物法定含量測(cè)定方法的原理、測(cè)定方法與計(jì)算。四、熟悉抗生素類藥物雜質(zhì)檢查的方法。五、了解抗生素類藥物中高分子聚合物檢查。返 回藥物分析A抗生素類藥物分析第一節(jié) 概述1. 抗生素藥物的特點(diǎn)化學(xué)純度較低活性組分易發(fā)生變異穩(wěn)定性差藥物分析A抗生素類藥物分析2

2、. 微生物學(xué)法與理化法的比較微生物檢定法理化法以抗生素對(duì)微生物的殺傷或抑制程度為指標(biāo)衡量抗生素的生物效價(jià) 根據(jù)抗生素結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，利用其特有的理化性質(zhì)測(cè)定其含量已知或新發(fā)現(xiàn)的抗生素、精致品或粗制品均能測(cè)定 測(cè)定化學(xué)結(jié)構(gòu)已知、已提純的抗生素靈敏度高、樣品需用量小、反映抗生素的醫(yī)療價(jià)值，但操作步驟多、費(fèi)時(shí)、誤差大 迅速、準(zhǔn)確、專屬性高、樣品需用量小、操作簡(jiǎn)單、省時(shí)藥物分析A抗生素類藥物分析3.抗生素的活性以效價(jià)單位來(lái)表示： 每ml或每mg中含有某種抗生素的有效成分的多少，用單位（u）或g 表示。 1mg青霉素G鈉鹽定為1667單位 1mg青霉素G鉀鹽的單位（u） =1667356.4/372.5=15

3、95u/mg藥物分析A抗生素類藥物分析分類（按結(jié)構(gòu)與性質(zhì)）： 內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、 四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類、 氯霉素類、多肽類、抗腫瘤類 林可霉素類、其他抗生素類返 回藥物分析A抗生素類藥物分析第二節(jié) 內(nèi)酰胺類抗生素 青霉素類NSCH3CH3COOHOHN1234567RCO母核（6-氨基青霉烷酸）AB藥物分析A抗生素類藥物分析頭孢菌素類AB藥物分析A抗生素類藥物分析青霉素（青霉素鉀、鈉）藥物分析A抗生素類藥物分析氨芐西林（氨芐青霉素）藥物分析A抗生素類藥物分析阿莫西林（羥氨芐青霉素）藥物分析A抗生素類藥物分析普魯卡因青霉素藥物分析A抗生素類藥物分析頭孢氨芐藥物分析A抗生素類藥物分析頭孢拉啶藥

4、物分析A抗生素類藥物分析頭孢羥氨芐藥物分析A抗生素類藥物分析頭孢噻吩鈉藥物分析A抗生素類藥物分析酸性結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與性質(zhì)一、Na與堿金屬(Na+、K+)成鹽 （一）羧基 易溶于水 藥物分析A抗生素類藥物分析與有機(jī)堿(普魯卡因)成鹽 難溶于水普魯卡因青霉素藥物分析A抗生素類藥物分析（二）手性C 頭孢菌素類 C6 C7青霉素類 C3 C5 C6 旋光性藥物分析A抗生素類藥物分析 （三）共軛體系 頭孢菌素類 母核有共軛體系 青霉素類 母核無(wú)明顯UV 多數(shù)有苯環(huán)取代基 UV藥物分析A抗生素類藥物分析（四）內(nèi)酰胺環(huán) 水溶液 不穩(wěn)定 干燥純凈 穩(wěn)定 不穩(wěn)定性因素四元環(huán)張力大 酰胺鍵易水解 藥物分析A抗生素類藥物

5、分析青霉素類 某些氧化劑酸、堿、青霉素酶（某些金屬離子） （溫度）降解失效藥物分析A抗生素類藥物分析例青霉素的降解反應(yīng)青霉素青霉噻唑酸H2O/OH青霉素酶青霉酸H2OpH2100青霉噻唑?；u胺酸NH2OH青霉烯酸pH4青霉胺CO2青霉醛HgCl2藥物分析A抗生素類藥物分析頭孢菌素類酸、堿、胺類-內(nèi)酰胺酶降解失效藥物分析A抗生素類藥物分析（一）呈色反應(yīng)1. 羥肟酸鐵反應(yīng)-內(nèi)酰胺類呈色羥肟酸衍生物Fe3+/3H+鑒別試驗(yàn) 二、NaOH2HClNOHH-b內(nèi)酰胺類藥物分析A抗生素類藥物分析H+Fe3+/3 （紅、棕、褐）藥物分析A抗生素類藥物分析2. 茚三酮反應(yīng) -氨基-氨基茚三酮藍(lán)紫色藥物分析A

6、抗生素類藥物分析3. 雙縮脲反應(yīng)似肽鍵（開環(huán)分解）- 內(nèi)酰胺類堿性酒石酸銅紫藥物分析A抗生素類藥物分析4. 與重氮苯磺酸反應(yīng)橙黃色重氮苯磺酸-56OHHC（偶合）酚羥基頭孢哌酮藥物分析A抗生素類藥物分析5. 與變色酸-硫酸反應(yīng)活潑“-CH2-”青霉素阿莫西林氨芐西林（分解）變色酸顯色藥物分析A抗生素類藥物分析1. K+、Na+的火焰反應(yīng)（二）各種鹽的反應(yīng) 焰色鮮黃色 + 醋酸氧鈾鋅黃 Na+ 焰色紫色 + 0.1%四苯硼鈉 + Ac白 K+藥物分析A抗生素類藥物分析2. 沉淀反應(yīng)（青霉素鹽）遇酸在過量HCl或有機(jī)溶劑中溶解白青霉素青霉素鈉青霉素鉀緘+H藥物分析A抗生素類藥物分析3. 重氮化 -

7、 偶合反應(yīng) 重氮化-偶合反應(yīng)芳伯氨基藥物分析A抗生素類藥物分析4. 與三硝基苯酚反應(yīng) 二芐基乙二胺藥物分析A抗生素類藥物分析mp三硝基苯酚藥物分析A抗生素類藥物分析光譜法（三）1、UV法樣品、分解產(chǎn)物Cu2+頭孢氨芐 max = 262nm青霉素V鈉 A280nm/A264nm = 1.301.50藥物分析A抗生素類藥物分析pH3.8分子重排藥物分析A抗生素類藥物分析藥物分析A抗生素類藥物分析2、IR法3180cm-1N-H內(nèi)酰胺 C=O1780cm-13470cm-1O-H1690cm-1仲酰胺C=O1250cm-1C-O以阿莫西林為例藥物分析A抗生素類藥物分析色譜法（四）1、TLC法對(duì)照品

8、對(duì)照法2、HPLC法藥物分析A抗生素類藥物分析三、雜質(zhì)檢查 藥物 檢查項(xiàng)目 檢查方法 頭孢他啶 聚合物 HPLC法 頭孢曲松鈉 頭孢哌酮鈉 頭孢噻肟鈉 頭孢呋辛酯 有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體 HPLC法 頭孢氨芐 有關(guān)物質(zhì) 反相TLC法 青霉素鉀（鈉） 吸收度 紫外分光光度法 藥物分析A抗生素類藥物分析 1.頭孢他啶聚合物的測(cè)定 固定相：葡聚糖凝膠G-10（ 40120m ） 流動(dòng)相A：3.5%硫酸銨的0.01mol/L磷酸鹽緩沖液 流動(dòng)相B：0.01%十二烷基硫酸鈉 對(duì)照品溶液：頭孢他啶對(duì)照品 100g/ml藥物分析A抗生素類藥物分析1）系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：理論塔板數(shù)和拖尾因子用1mg/ml藍(lán)色葡聚糖20

9、00、流動(dòng)相A測(cè)定；重復(fù)性用對(duì)照品溶液、流動(dòng)相B測(cè)定。 N不低于900，拖尾因子0.751.5，峰面積的RSD應(yīng)小于5.0%。2）測(cè)定方法 進(jìn)樣供試液，用流動(dòng)相A；進(jìn)樣對(duì)照液，用流動(dòng)相B。以外標(biāo)法計(jì)算，含頭孢他啶聚合物以頭孢他啶計(jì)不得超過0.3%。藥物分析A抗生素類藥物分析2.頭孢呋辛酯中有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體的檢查 固定相：ODS 流動(dòng)相：0.2mol/L磷酸二氫銨-甲醇（62:38） 1）頭孢呋辛酯2-異構(gòu)體的制備：頭孢呋辛酯對(duì) 照品+流動(dòng)相 頭孢呋辛酯2-異構(gòu)體。2）系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：各異構(gòu)體之間的R1.5，以 頭孢呋辛酯A異構(gòu)體計(jì)算n1500。藥物分析A抗生素類藥物分析 3）異構(gòu)體： tR1 相對(duì)保留時(shí)間 r12=- 1-被測(cè)物 tR2 2-標(biāo)準(zhǔn)物異構(gòu)體 相對(duì)保留時(shí)間 判斷B異構(gòu)體 0.85 供試液譜圖中A異構(gòu)體的峰面積A異構(gòu)體 1.0 與A、B異構(gòu)體峰面積和之比應(yīng) 為0.480.55。 藥物分析A抗生素類藥物分析3.頭孢氨芐中有關(guān)物質(zhì)的檢查-反相TLC法 固定相：活化后的硅膠G板置5%（V/V）正十四 烷的正己烷溶液中，展至頂部，涼干 展開劑：0.1mol/L枸櫞酸-0.2mol/L磷酸氫二 鈉-丙酮（120：80：3） 供試液：本品 50mg/ml 對(duì)照液（1）：本品 0.5 mg/ml 對(duì)照液（2）：-苯甘氨酸 0.