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1、PAGE PAGE 23生物技術(shù)(jsh)在其他方面的應(yīng)用考點(diǎn)一植物(zhw)的組織培養(yǎng)技術(shù)1植物(zhw)組織培養(yǎng)的基本過程2菊花的組織培養(yǎng)過程(1)影響植物組織培養(yǎng)的主要因素選材:一般選擇未開花植株的莖上部新生的側(cè)枝。培養(yǎng)基:常用MS培養(yǎng)基,其主要成分有大量元素、微量元素、有機(jī)物,常需要添加植物激素。(2)實(shí)驗(yàn)操作過程制備MS固體培養(yǎng)基:配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌eq x(外植體消毒):eq x(70%酒精消毒)eq x(無菌水清洗)eq x(0.1%的氯化汞溶液消毒)eq x(無菌水清洗)接種:始終在酒精燈火焰旁進(jìn)行,對(duì)接種工具要用火焰灼燒滅菌,將菊花莖段插入培養(yǎng)基中時(shí)注意不要倒插培
2、養(yǎng)與移栽:在1822 的無菌箱中培養(yǎng),得到試管苗后進(jìn)行移栽3月季的花藥培養(yǎng)(1)被子植物的花粉發(fā)育過程eq 小孢子母細(xì)胞四分體時(shí)期單核期雙核期花粉粒(2)產(chǎn)生花粉植株的兩條途徑(3)影響花藥培養(yǎng)的因素主要因素:材料的選擇和培養(yǎng)基的組成。月季花藥培養(yǎng)一般選擇單核期。思維診斷(1)二倍體植株的花粉(hufn)經(jīng)脫分化與再分化后可得到穩(wěn)定遺傳的植株(2011江蘇,16B)()(2)培育(piy)草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是植物組織培養(yǎng)()(3)脫分化過程不需要(xyo)植物激素,植物激素只有在再分化過程中發(fā)揮作用()(4)由于植物細(xì)胞都具有全能性,所以菊花的組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中選材不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果()(
3、5)制備好的MS培養(yǎng)基用于植物組織培養(yǎng)時(shí),需要加入植物激素()(6)被子植物的花粉發(fā)育要經(jīng)過小孢子四分體時(shí)期、雙核期和單核期等階段()(7)單倍體植株的形成有兩種途徑,兩種途徑主要取決于培養(yǎng)基中植物激素的種類及其濃度配比()(8)如果通過植物組織培養(yǎng)從愈傷組織中提取某種成分,應(yīng)先使用生長素后使用細(xì)胞分裂素()題組一植物的組織培養(yǎng)過程和條件分析1下圖為植物組織培養(yǎng)過程的流程圖,以下相關(guān)敘述不正確的是()A上述過程中脫分化發(fā)生在步驟b,在此過程中植物激素發(fā)揮了重要作用B再分化發(fā)生在步驟d,是愈傷組織重新分化形成根或芽等器官的過程C從葉組織塊到種苗形成的過程利用的原理是植物葉片細(xì)胞具有全能性D人工種
4、子可以解決有些作物品種繁殖能力差、結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問題答案B解析植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性;再分化發(fā)生在步驟c,為愈傷組織重新分化形成根或芽等器官的過程;植物激素在啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化中發(fā)揮重要作用。2生物工程的研究成果已經(jīng)廣泛應(yīng)用于各個(gè)領(lǐng)域,目前科學(xué)家利用植物的莖尖或葉片、莖段等,在無菌條件下,培養(yǎng)在玻璃器皿中人工配制的培養(yǎng)基上,使之發(fā)育成完整的植株。下圖是運(yùn)用該技術(shù)培養(yǎng)蘭花植株的示意圖。下列關(guān)于這種生物工程技術(shù)的敘述,錯(cuò)誤的是()A這種技術(shù)(jsh)叫做組織培養(yǎng),可以(ky)克隆生物體B、過程(guchng)需要生長素和細(xì)胞分裂素的調(diào)節(jié)C用此方法克隆植物要盡量選擇優(yōu)
5、良、細(xì)胞全能性表達(dá)不充分的基因型D這種技術(shù)可與基因工程、航天工程結(jié)合培育高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)的作物品種答案C解析為獲得植物克隆的成功,要盡量選擇優(yōu)良、細(xì)胞全能性表達(dá)充分的基因型。隨著科技的發(fā)展,植物組織培養(yǎng)可與基因工程、航天工程結(jié)合培育高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)的作物品種。1影響植物組織培養(yǎng)的主要因素(1)培養(yǎng)材料不同植物的影響:不同的植物組織,培養(yǎng)的難易程度差別很大,容易進(jìn)行無性繁殖的植物也容易進(jìn)行組織培養(yǎng)。同一植物發(fā)育狀況、保存狀況的影響:同一種植物材料的年齡、保存時(shí)間的長短等對(duì)培養(yǎng)也有影響,幼齡、保存時(shí)間短的植物材料容易培養(yǎng)成功。(2)無菌條件:培養(yǎng)基上有細(xì)菌等微生物存在時(shí),它們比植物細(xì)胞生長、繁殖得更快,而且它
6、們會(huì)產(chǎn)生毒素,使培養(yǎng)的植物細(xì)胞很快中毒腐爛,因此在培養(yǎng)過程中要求進(jìn)行一系列的消毒、滅菌,并且要求無菌操作。(3)植物激素:在配制好的MS培養(yǎng)基中,常常需要添加植物激素。其中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。2植物組織培養(yǎng)過程中生長素和細(xì)胞分裂素發(fā)揮重要作用,兩種植物激素的使用順序及用量比例會(huì)對(duì)細(xì)胞分裂和分化產(chǎn)生影響。(1)使用先后順序與細(xì)胞分裂和分化的關(guān)系使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先生長素,后分裂素有利于分裂但不分化先分裂素,后生長素細(xì)胞既分裂也分化同時(shí)使用分化頻率提高 (2)用量比例與根、芽的分化生長素和細(xì)胞分裂素比值結(jié)果比值高時(shí)促進(jìn)根的分化,抑制芽的形成比值低時(shí)促進(jìn)芽的分
7、化,抑制根的形成比值適中促進(jìn)愈傷組織的生長題組二植物(zhw)的花藥培養(yǎng)過程分析3(原創(chuàng)(yun chun)題)如圖是花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉(hufn)植株的兩種途徑,下列相關(guān)判斷錯(cuò)誤的是()A圖中的A和B分別是胚狀體和愈傷組織B和過程的實(shí)質(zhì)相同C選擇的花藥在花粉發(fā)育過程中越早越好D整個(gè)培養(yǎng)過程中的細(xì)胞增殖方式只有有絲分裂答案C解析圖中A和B分別是胚狀體和愈傷組織,和表示分化和再分化。無論是分化還是再分化,它們的實(shí)質(zhì)都是基因選擇性表達(dá)。選擇的花藥太早或太晚都不利于培養(yǎng),處于單核期的最好,尤其是單核靠邊期,故C錯(cuò)誤。整個(gè)培養(yǎng)過程中無減數(shù)分裂,所以細(xì)胞增殖方式只有有絲分裂。4育種工作者常采用花藥培養(yǎng)的方
8、法,使花粉粒發(fā)育為單倍體植株。下面過程是采用水稻的花藥進(jìn)行培養(yǎng)的步驟:選取水稻花藥對(duì)花藥消毒接種和培養(yǎng)植物體請據(jù)此回答下面的問題:(1)誘導(dǎo)花粉植株能否成功及誘導(dǎo)成功率的高低,受多種因素的影響,其中_、_是主要的影響因素;選擇合適的_也是提高誘導(dǎo)成功率的重要因素。(2)花粉在發(fā)育過程中要經(jīng)歷_、_、_等階段,選取的水稻花藥應(yīng)為_期的花藥,此時(shí)細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè),花藥培養(yǎng)成功率最高。(3)在剝離花藥時(shí),要盡量不損傷花藥,原因是_;同時(shí)還要徹底去除花絲,原因是_。(4)通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生單倍體植株一般(ybn)有兩種途徑:一種是花粉(hufn)通過_階段發(fā)育為植株(zhzh);另一種是在誘導(dǎo)培
9、養(yǎng)基上先形成_,將其誘導(dǎo)分化成植株。(5)試管苗形成過程中,必須從培養(yǎng)基中獲得無機(jī)鹽或礦質(zhì)元素和小分子有機(jī)物等營養(yǎng)物質(zhì)。要促進(jìn)花粉細(xì)胞分裂和生長,培養(yǎng)基中應(yīng)有_和_兩類激素。答案(1)材料的選擇培養(yǎng)基的組成花粉發(fā)育時(shí)期(2)四分體時(shí)期單核期雙核期單核(3)如果花藥受損,接種后容易從受損傷的部位產(chǎn)生愈傷組織與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成(4)胚狀體愈傷組織(5)細(xì)胞分裂素生長素解析誘導(dǎo)花粉植株能否成功及誘導(dǎo)成功率的高低,受多種因素的影響,其中材料的選擇與培養(yǎng)基的組成是主要的影響因素;選擇合適的花粉發(fā)育時(shí)期也是提高誘導(dǎo)成功率的重要因素?;ǚ墼诎l(fā)育過程中要經(jīng)歷四分體時(shí)期、單核期、雙核期
10、等階段,選取的水稻花藥應(yīng)為單核期的花藥;在剝離花藥時(shí)要盡量不損傷花藥,否則接種后容易從受傷的部位產(chǎn)生愈傷組織;同時(shí)還要徹底去除花絲,因?yàn)榕c花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成;通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生單倍體植株一般有兩種途徑:一種是通過胚狀體階段發(fā)育為植株;一種是先形成愈傷組織再將其誘導(dǎo)分化成植株。植物組織培養(yǎng)和花藥離體培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)花藥離體培養(yǎng)相同點(diǎn)理論依據(jù)植物細(xì)胞的全能性基本過程脫分化再分化影響因素選材、營養(yǎng)、激素、溫度、pH、光照等不同點(diǎn)外植體體細(xì)胞生殖細(xì)胞(花粉粒)生殖方式無性生殖有性生殖培養(yǎng)結(jié)果正常的可育植株高度不育的單倍體操作流程制備培養(yǎng)基外植體消毒接種培養(yǎng)移栽栽培選
11、材材料的消毒接種和培養(yǎng)篩選和誘導(dǎo)移栽栽培選育考點(diǎn)二植物有效成分的提取1提取(tq)玫瑰精油實(shí)驗(yàn)(1)方法(fngf):水蒸氣蒸餾(zhngli)法。(2)實(shí)驗(yàn)流程鮮玫瑰花加清水,水蒸氣蒸餾油水混合物eq o(,sup7(加入NaC1)分離油層eq o(,sup7(加入無水Na2SO4)除水eq o(,sup7(過濾)玫瑰油2提取橘皮精油的實(shí)驗(yàn)(1)方法:一般采用壓榨法。(2)實(shí)驗(yàn)流程:石灰水浸泡漂洗壓榨過濾靜置再次過濾橘皮油。3胡蘿卜素的提取(1)胡蘿卜素性質(zhì):不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有機(jī)溶劑。(2)提取方法及流程方法:萃取法,石油醚最適宜作萃取劑。實(shí)驗(yàn)流程:胡蘿卜粉碎干燥萃取過濾
12、濃縮胡蘿卜素。(3)鑒定方法:紙層析法。思維診斷(1)植物芳香油的提取方法有蒸餾、壓榨和萃取等,根據(jù)提取的芳香油的用途采取提取的方法()(2)用柑橘和檸檬作為材料不適合用水中蒸餾的方法進(jìn)行提取()(3)萃取是利用了芳香油易溶于有機(jī)溶劑的特性進(jìn)行提取的一種方法()(4)提取玫瑰精油時(shí),玫瑰與水的質(zhì)量比是41()(5)提取橘皮精油時(shí),要將橘皮在石灰水中浸泡5 h,目的是防止壓榨時(shí)滑脫()(6)由于胡蘿卜素易溶于石油醚等有機(jī)溶劑中,所以可以采用萃取的方法進(jìn)行提取()(7)胡蘿卜素粉碎后可直接進(jìn)行萃取()(8)水溶性和水不溶性有機(jī)溶劑都可以用于提取胡蘿卜素()(9)蒸餾法的實(shí)驗(yàn)原理是利用水將芳香油溶解
13、出來,再把水蒸發(fā)掉,剩余的就是芳香油()(10)影響萃取效率的因素除了萃取劑的性質(zhì)和使用量之外,還有原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、萃取的溫度和時(shí)間等()題組一植物芳香油提取方法的比較1用蒸餾法提取玫瑰油的有關(guān)敘述中,錯(cuò)誤的是()A蒸餾溫度高,水和玫瑰油揮發(fā)得就容易,所以在高溫下蒸餾效果好一些B為了(wi le)充分蒸餾玫瑰油,應(yīng)該在較低溫度(wnd)下延長蒸餾時(shí)間C在乳濁液分離(fnl)的時(shí)候,為了有利于水和油層分開,向乳濁液中加入氯化鈉,增加鹽的濃度D水和油層分開后,應(yīng)在初提取的玫瑰油中加入適量的無水硫酸鈉吸去殘留的水,放置過夜,經(jīng)過濾除去固體硫酸鈉后,就可以得到玫瑰油答案A解析蒸餾溫度
14、太高、時(shí)間太短,玫瑰油的品質(zhì)就比較差,如果要提高品質(zhì),需要在較低溫度下延長蒸餾時(shí)間。向乳濁液中加入氯化鈉,增加鹽的濃度,有利于水和油分層,通過分液漏斗排去下層的水,得到初提取的玫瑰油,再加入適量的無水硫酸鈉吸去殘留的水,放置過夜,經(jīng)過濾除去固體硫酸鈉后,就可以得到玫瑰油。2某同學(xué)設(shè)計(jì)的提取玫瑰精油的實(shí)驗(yàn)流程如圖所示,據(jù)圖分析不正確的是() eq x(原料)eq x(水蒸氣蒸餾)eq x(油水混合物)eq x(分離油層)eq x(除水)eq x(玫瑰油)A在步中使用水氣蒸餾更簡便易行B在操作時(shí)可向蒸餾燒瓶中加入幾片碎瓷片防止暴沸C提取精油時(shí),向混合物中加入NaCl更利于油水分層D加入無水Na2S
15、O4,再用過濾法可除去分離的油層中的水分答案A解析由于玫瑰精油難溶于水,易溶于有機(jī)溶劑,因此在步中使用水中蒸餾更簡便易行;在操作時(shí)可向蒸餾燒瓶中加入幾片碎瓷片,目的是防止暴沸;提取精油時(shí),為了使油水分層更徹底,要向油水混合物中加入NaCl;分離的油層還含有一定的水分,需加入無水Na2SO4,再用過濾方法將其除去。植物有效成分的提取的三種方法比較提取方法水蒸氣蒸餾法壓榨法有機(jī)溶劑萃取法實(shí)驗(yàn)原理利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來通過機(jī)械加壓,壓榨出果皮中的芳香油使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中,蒸發(fā)溶劑獲得芳香油方法步驟水蒸氣蒸餾分離油層除水過濾石灰水浸泡、漂洗壓榨、過濾、靜置再次過濾粉碎、干燥萃
16、取、過濾濃縮適用范圍適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取適用范圍廣,要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小,能充分浸泡在有機(jī)溶劑中優(yōu)點(diǎn)簡單易行,便于分離生產(chǎn)成本低,易保持原料原有的結(jié)構(gòu)和功能出油率高,易分離局限性水中蒸餾會(huì)導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解等問題分離較為困難,出油率相對(duì)較低使用的有機(jī)溶劑處理不當(dāng)會(huì)影響芳香油的質(zhì)量題組二胡蘿卜素提取實(shí)驗(yàn)的操作(cozu)分析3作為萃取(cuq)胡蘿卜素的有機(jī)溶劑,哪一項(xiàng)不符合實(shí)驗(yàn)(shyn)要求()A能充分溶解色素 B與水混溶C對(duì)人無毒 D易與產(chǎn)品分離答案B解析作為萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑應(yīng)該具有較高的沸點(diǎn),能夠充分溶解胡蘿卜素
17、,并且不與水混溶。此外,還需要考慮萃取效率、對(duì)人的毒性、是否易燃、有機(jī)溶劑是否能從產(chǎn)品中完全除去、會(huì)不會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量等問題。4下圖為胡蘿卜素粗品的鑒定實(shí)驗(yàn)裝置示意圖,請據(jù)圖回答下列問題:(1)胡蘿卜素粗品鑒定的方法名稱是_。(2)的作用是_,常用_,如果層析液沒及會(huì)導(dǎo)致_。(3)A、B、C、D四點(diǎn)中,屬于提取樣品的樣點(diǎn)是_。(4)該層析的目的是_。(5)在胡蘿卜素的萃取過程中,一般采用水浴加熱,而避免明火加熱,這是因?yàn)開。答案(1)紙層析法(2)防止層析液揮發(fā)石油醚胡蘿卜素溶解在層析液中,使鑒定失敗(3)B和C(4)把胡蘿卜素分離開,便于鑒定(5)有機(jī)溶劑都是易燃物,直接使用明火加熱容易引起燃
18、燒、爆炸解析(ji x)胡蘿卜素粗品的鑒定(jindng)常用紙層析法,圖示裝置為紙層析裝置,其中為玻璃蓋,其作用在于防止層析(cn x)液揮發(fā)。是色譜容器,是濾紙,是U形扣,是樣品原點(diǎn)。是溶劑,常用石油醚,因?yàn)樗哂蟹悬c(diǎn)高、能充分溶解胡蘿卜素、不與水混溶等優(yōu)點(diǎn)。如果層析液沒及樣品原點(diǎn),會(huì)導(dǎo)致胡蘿卜素溶解于層析液中,達(dá)不到鑒定的目的。胡蘿卜素粗品鑒定過程中的5個(gè)易錯(cuò)點(diǎn)(1)層析時(shí)沒有選擇干凈的濾紙,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象不明顯。為了防止操作時(shí)對(duì)濾紙的污染,應(yīng)盡量避免用手直接接觸濾紙,可以戴手套進(jìn)行操作。(2)點(diǎn)樣時(shí)點(diǎn)樣圓點(diǎn)太大(直徑大于2 mm),導(dǎo)致最終在濾紙上形成一條線,無法辨認(rèn)被提取的色素。點(diǎn)樣圓
19、點(diǎn)的直徑應(yīng)為2 mm。(3)將點(diǎn)好樣的濾紙卷成筒狀,卷紙時(shí)不能將濾紙兩邊相互接觸,以避免由于毛細(xì)管現(xiàn)象導(dǎo)致溶劑沿濾紙兩邊的移動(dòng)加快,溶劑前沿不齊,影響結(jié)果。(4)層析液沒及樣品原點(diǎn),色素溶解于層析液中,造成實(shí)驗(yàn)失敗。層析液不可沒及樣品原點(diǎn),以免色素溶解于層析液中,使鑒定失敗。(5)沒有設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)樣品作對(duì)照。層析液中是否提取到胡蘿卜素,可通過與標(biāo)準(zhǔn)樣品中的胡蘿卜素作對(duì)比予以確認(rèn)??键c(diǎn)三DNA的粗提取與鑒定1實(shí)驗(yàn)原理(1)DNA與蛋白質(zhì)在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同溶解規(guī)律2 mol/L NaCl溶液0.14 mol/L NaCl溶液DNA溶解析出蛋白質(zhì)NaCl溶液物質(zhì)的量濃度從2 mol/L
20、逐漸降低的過程中,溶解度逐漸增大部分發(fā)生鹽析沉淀溶解(2)DNA不溶于酒精(jijng)溶液,但是細(xì)胞中的某些(mu xi)蛋白質(zhì)則溶于酒精,利用(lyng)這一原理可將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。(3)DNA二苯胺沸水浴加熱,藍(lán)色。2操作流程材料的選?。哼x用DNA含量相對(duì)較高的生物組織破碎細(xì)胞(以雞血為例):雞血細(xì)胞加蒸餾水用玻璃棒攪拌用紗布過濾收集濾液eq 去除雜質(zhì):利用DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,通過控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì)DNA的析出:將處理后的溶液過濾,加入與濾液體積相等的、冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液DNA的鑒定:在溶有DNA的溶液中加入二苯胺試劑,混合均勻
21、后將試管在沸水中加熱5 min,溶液變成藍(lán)色思維診斷(1)進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)時(shí),加入洗滌劑后用力進(jìn)行快速、充分的研磨(2013江蘇,4A)()(2)洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度(2012江蘇,18A)()(3)將制備的含有DNA的濾液加入6075 的恒溫水浴箱中保溫1015 min,可以將DNA析出()(4)本實(shí)驗(yàn)可以用哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞作實(shí)驗(yàn)材料()(5)實(shí)驗(yàn)中兩次使用蒸餾水的目的不同()題組DNA的粗提取與鑒定過程分析1“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中,操作正確的是()A取制備好的雞血細(xì)胞液510 mL注入燒杯中,迅速加入物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L
22、的NaCl溶液20 mL,同時(shí)用玻璃棒沿同一方向快速攪拌5 min,可使血細(xì)胞破裂,釋放出DNAB整個(gè)DNA提取過程中,兩次加蒸餾水的目的都是為了降低溶液中NaCl的濃度,使DNA分子的溶解度達(dá)到最低,析出DNA分子C整個(gè)(zhngg)DNA提取(tq)操作中,兩次加入(jir)2 mol/L的NaCl溶液,目的都是使DNA盡可能多地溶解在NaCl溶液中DDNA鑒定操作中,只要向溶有DNA的NaCl溶液中加入4 mL的二苯胺試劑,即可出現(xiàn)藍(lán)色答案C解析取制備好的雞血細(xì)胞液注入燒杯中,迅速加入蒸餾水并用玻璃棒沿同一方向攪拌,使血細(xì)胞破裂,將DNA釋放出來;整個(gè)DNA提取過程中,使用兩次蒸餾水,第
23、一次是使血細(xì)胞吸水漲破,釋放DNA,第二次是用來稀釋NaCl溶液,使DNA析出;在DNA鑒定操作中,DNA遇二苯胺試劑呈藍(lán)色需在沸水浴條件下完成。2做DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)時(shí),實(shí)驗(yàn)材料用雞血而不用豬血的原因是()A雞血的價(jià)格比豬血的價(jià)格低B豬的成熟紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核,不易提取到DNAC雞血不凝固,豬血會(huì)凝固D用雞血提取DNA比用豬血提取操作簡便答案B解析DNA是生物的遺傳物質(zhì),主要存在于細(xì)胞核內(nèi)。生物實(shí)驗(yàn)材料的選擇原則:一是容易獲得,二是實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象明顯。做DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)材料不選豬血是因?yàn)椴溉閯?dòng)物成熟的紅細(xì)胞無細(xì)胞核,不易提取到DNA,而鳥類、爬行類等動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞有細(xì)胞核,實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象
24、明顯。DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中的“2、3、4”加蒸餾水2次加到雞血細(xì)胞液中,使血細(xì)胞吸水漲破;加到含DNA的2 mol/L的NaCl溶液中,使NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度下降到0.14 mol/L,使DNA析出用紗布過濾3次過濾血細(xì)胞破裂液,得到含細(xì)胞核物質(zhì)的濾液;濾取0.14 mol/L的NaCl溶液中析出的DNA(黏稠物);過濾溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液用NaCl溶液4次加2 mol/L的NaCl溶液,溶解提取的細(xì)胞核物質(zhì);用0.14 mol/L的NaCl溶液使DNA析出;用2 mol/L的NaCl溶液,溶解濾取的DNA黏稠物;用2 mol/L的NaCl溶液,溶解絲狀物用于鑒
25、定DNA網(wǎng)絡(luò)(wnglu)構(gòu)建要語強(qiáng)記(qin j)1無論是菊花的組織培養(yǎng)還是(hi shi)月季的花藥培養(yǎng),其理論基礎(chǔ)都是植物細(xì)胞的全能性。2植物組織培養(yǎng)包括脫分化和再分化等過程,培養(yǎng)過程除了需要各種營養(yǎng)物質(zhì)外,還需要植物激素的調(diào)節(jié)。3產(chǎn)生花粉植株的途徑有兩條:一種是花粉通過胚狀體階段發(fā)育為植株;另一種是花粉在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先形成愈傷組織,再將其誘導(dǎo)分化成植株。4DNA在NaCl溶液中的溶解度隨著NaCl溶液濃度的改變而改變,在物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L時(shí)的溶解度最小。探究高考明確考向1(2014江蘇,16)下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述,錯(cuò)誤的是()A酵母和菜花均可作為提
26、取DNA的材料BDNA既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸餾水C向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?,可見玻棒上有白色絮狀物DDNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱,冷卻后變藍(lán)答案C解析A項(xiàng),原則上含DNA的生物材料都可作為提取DNA的材料,只是DNA含量高的材料成功的可能性更大。B項(xiàng),DNA在2 mol/L的NaCl溶液和蒸餾水中溶解度都較大。C項(xiàng),向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?,雞血細(xì)胞會(huì)吸水破裂,玻棒攪拌會(huì)加快血細(xì)胞的破裂,但在蒸餾水中不會(huì)析出DNA。D項(xiàng),DNA溶液加入二苯胺試劑后需沸水浴加熱,待冷卻后變藍(lán)色。2(2013重慶,5)某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉,其技術(shù)路線為“取材消毒愈傷
27、組織培養(yǎng)出芽生根移栽”。下列有關(guān)敘述,錯(cuò)誤的是()A消毒的原則(yunz)是既殺死材料表面的微生物,又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞(xbo)的傷害B在愈傷組織培養(yǎng)中加入(jir)細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑,可獲得染色體加倍的細(xì)胞C出芽是細(xì)胞再分化的結(jié)果,受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控D生根時(shí),培養(yǎng)基通常應(yīng)含萘乙酸等生長素類調(diào)節(jié)劑答案B解析消毒劑的使用既要?dú)⑺啦牧媳砻娴奈⑸?,又要防止傷害組織細(xì)胞,影響組織培養(yǎng),A項(xiàng)正確;植物細(xì)胞融合是指經(jīng)纖維素酶和果膠酶處理后得到的原生質(zhì)體的誘導(dǎo)融合,帶有細(xì)胞壁的愈傷組織細(xì)胞不能誘導(dǎo)融合形成染色體加倍的細(xì)胞,B項(xiàng)錯(cuò)誤;出芽和生根都是細(xì)胞再分化的結(jié)果,其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá),C項(xiàng)正確;萘乙
28、酸為生長素類似物,可誘導(dǎo)愈傷組織生根,D項(xiàng)正確。3(2010課標(biāo)全國卷,37)下列是與芳香油提取相關(guān)的問題,請回答:(1)玫瑰精油適合用水蒸氣蒸餾法提取,其理由是玫瑰精油具有_的性質(zhì)。蒸餾時(shí)收集的蒸餾液_(是、不是)純的玫瑰精油,原因是_。(2)當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料量一定時(shí),蒸餾過程中,影響精油提取量的主要因素有蒸餾時(shí)間和_。當(dāng)原料量等其他條件一定時(shí),提取量隨蒸餾時(shí)間的變化趨勢是_。(3)如果蒸餾過程中不進(jìn)行冷卻,則精油提取量會(huì)_,原因是_。(4)密封不嚴(yán)的瓶裝玫瑰精油保存時(shí)最好存放在溫度_的地方,目的是_。(5)某植物花中精油的相對(duì)含量隨花的不同生長發(fā)育時(shí)期的變化趨勢如圖所示。提取精油時(shí)采摘
29、花的最合適時(shí)間為_天左右。(6)從薄荷葉中提取薄荷油時(shí)_(能、不能)采用從玫瑰花中提取玫瑰精油的方法,理由是_。答案(1)易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定不是玫瑰精油與水蒸氣一起蒸餾出來,所得到的是油水混合物(2)蒸餾(zhngli)溫度在一定的時(shí)間內(nèi)提取(tq)量隨蒸餾時(shí)間的延長而增加,一定(ydng)時(shí)間后提取量不再增加(3)下降部分精油會(huì)隨水蒸氣揮發(fā)而流失(4)較低減少揮發(fā)(5)a(6)能薄荷油與玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)相似解析由于玫瑰精油易揮發(fā),難溶于水,化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,因此可以用水蒸氣蒸餾法提取,冷卻后必然含有水;蒸餾的提取效果與蒸餾的溫度與蒸餾的時(shí)間有關(guān),隨著蒸餾時(shí)間的延長,原料中含有的精油
30、減少,提取的量也會(huì)減少直至再也提不出精油。蒸餾過程中,如果不冷卻,提取后的混合液溫度較高,由于精油易揮發(fā),其中的含量會(huì)降低;保存時(shí),環(huán)境溫度應(yīng)較低為好,防止精油揮發(fā);第(5)小題為信息題,主要考查學(xué)生的讀圖、識(shí)圖及圖文轉(zhuǎn)化能力,根據(jù)圖像可知,玫瑰精油在蓓蕾期、開放期之間花的含量較高,應(yīng)在此時(shí)采收;由于薄荷精油與玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)相似,可以采用相同的提取方法。4(2013山東,34)胡蘿卜素是一種常用的食用色素,可分別從胡蘿卜或產(chǎn)胡蘿卜素的微生物菌體中提取獲得,流程如下:(1)篩選產(chǎn)胡蘿卜素的酵母菌R時(shí),可選用_或平板劃線法接種。采用平板劃線法接種時(shí)需先灼燒接種環(huán),其目的是_。(2)培養(yǎng)酵母菌R
31、時(shí),培養(yǎng)基中的蔗糖和硝酸鹽可分別為酵母菌R的生長提供_和_。(3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí),干燥過程應(yīng)控制好溫度和_以防止胡蘿卜素的分解;萃取過程中宜采用_方式加熱以防止溫度過高;萃取液濃縮前需進(jìn)行過濾,其目的是_。(4)紙層析法可用于鑒定所提取的胡蘿卜素。鑒定過程中需用胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品作為_。答案(1)稀釋涂布平板法殺滅接種環(huán)上的微生物(2)碳源氮源(3)干燥時(shí)間水浴加熱濾去萃取后的不溶物(4)(實(shí)驗(yàn))對(duì)照解析(1)接種微生物的方法主要是稀釋涂布平板法和平板劃線法,接種過程為了避免其他雜菌的污染,要做無菌操作,所以接種前需對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌。(2)蔗糖主要提供碳源,當(dāng)然也可以作為能源物質(zhì),硝酸鹽
32、含氮元素,可提供氮源。(3)溫度過高、干燥時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致胡蘿卜素分解;由于萃取劑往往有揮發(fā)性,直接加熱時(shí)揮發(fā)出來的有機(jī)溶劑遇明火易爆炸;萃取后需將原料中不溶于萃取劑的成分濾去。(4)提取出來的胡蘿卜素往往不是純的,用胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品主要起一個(gè)對(duì)照的作用。練出高分1植物激素(j s)中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化(fnhu)和再分化的關(guān)鍵性因素。按照不同順序使用(shyng)這兩類激素,會(huì)得到不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。若先使用生長素,后使用細(xì)胞分裂素,實(shí)驗(yàn)結(jié)果是()A有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化B細(xì)胞既分裂也分化C細(xì)胞分化頻率提高D有利于細(xì)胞分化,但細(xì)胞不分裂答案A解析植物組織培養(yǎng)過程中,細(xì)胞分
33、裂素和生長素的使用順序不同,培養(yǎng)的結(jié)果不同。先使用生長素,后使用細(xì)胞分裂素,有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化;先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長素,細(xì)胞既分裂也分化;兩者同時(shí)使用,細(xì)胞分化頻率提高。2下圖為利用體細(xì)胞誘變育種技術(shù)獲得抗除草劑白三葉草新品種的過程,下列敘述錯(cuò)誤的是()A該育種過程所依據(jù)的原理有基因突變和植物細(xì)胞的全能性B過程和所涉及的培養(yǎng)基中,不同植物生長調(diào)節(jié)劑的濃度比例不同C白三葉草愈傷組織和胚狀體的細(xì)胞中DNA和RNA種類相同D過程通常采用的篩選方法是向白三葉草幼苗噴灑除草劑答案C解析誘變育種所依據(jù)的原理是基因突變,植物組織培養(yǎng)所依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。過程和所得到的產(chǎn)物不同,因
34、此培養(yǎng)基中不同植物生長調(diào)節(jié)劑的濃度比例不同。白三葉草愈傷組織和胚狀體的細(xì)胞中DNA相同,但RNA種類不完全相同。過程通常采用的篩選方法是向白三葉草幼苗噴灑除草劑。3如圖為某二倍體植株花藥中未成熟的花粉,在適宜培養(yǎng)基上形成完整植株的過程。下列有關(guān)敘述正確的是()A過程(guchng)表示(biosh)脫分化,過程(guchng)表示再分化B過程需要照光C過程說明花粉細(xì)胞具有全能性D通過過程獲得的完整植株自交后代不會(huì)發(fā)生性狀分離答案C解析A錯(cuò)誤,過程表示脫分化,過程表示再分化。B錯(cuò)誤,通常幼小植株形成后才需要照光。C正確,通過過程,花粉細(xì)胞形成了完整的植株,體現(xiàn)了花粉細(xì)胞的全能性。D錯(cuò)誤,通過過程
35、獲得的完整植株是單倍體,高度不育。4下表是關(guān)于DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中所使用的材料、操作及其作用,表述正確的是()試劑操作作用A檸檬酸鈉溶液與雞血混合防止DNA凝固B蒸餾水與雞血細(xì)胞混合保持細(xì)胞形狀C蒸餾水加入溶解有DNA的NaCl中析出DNA絲狀物D冷卻的酒精過濾后的DNA加入其中產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)答案C解析檸檬酸鈉溶液的作用是防止血液凝固;蒸餾水與雞血細(xì)胞混合,蒸餾水的作用是讓紅細(xì)胞吸水漲破;蒸餾水加入溶解有DNA的NaCl中,此時(shí)蒸餾水的作用是降低NaCl溶液濃度至0.14 mol/L,從而析出DNA絲狀物;將粗提取之后的DNA加入到冷卻的酒精中以純化析出DNA絲狀物。5下列操作中,對(duì)D
36、NA的提取量影響較大的是()使雞血細(xì)胞在蒸餾水中充分破裂,釋放出DNA等核物質(zhì)攪拌時(shí),要用玻璃棒沿一個(gè)方向輕緩攪動(dòng)在析出DNA黏稠物時(shí),要緩緩加蒸餾水,直至溶液中黏稠物不再增多在用酒精沉淀DNA時(shí),要使用冷酒精,甚至再將混合液放入冰箱中冷卻在DNA的溶解和再溶解時(shí),要充分?jǐn)嚢鐰 BC D答案(d n)C解析(ji x)充分(chngfn)釋放出核中的DNA分子,使進(jìn)入濾液中的DNA量盡量多;是讓DNA充分沉淀,保證DNA的量;的原理同;在所述的操作中,可以保證DNA分子的完整性,但不影響提取量。6下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述中,正確的是()A用雞血作為材料,原因是雞血紅細(xì)胞有細(xì)胞
37、核,其他動(dòng)物紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核B用不同濃度的NaCl溶液進(jìn)行DNA粗提取,原因是DNA在其中溶解度不同C用酒精進(jìn)行提純,原因是DNA溶于酒精,蛋白質(zhì)不溶于酒精D用二苯胺試劑進(jìn)行鑒定,原因是DNA溶液中加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色答案B解析只有哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核,A選項(xiàng)錯(cuò)誤;DNA不溶于酒精,蛋白質(zhì)溶于酒精,所以可用冷卻的酒精來對(duì)DNA進(jìn)行提純,C選項(xiàng)錯(cuò)誤;DNA溶液中加入二苯胺試劑后要在水浴加熱的情況下才能出現(xiàn)藍(lán)色,D選項(xiàng)錯(cuò)誤。7提取茉莉精油的正確步驟是()A鮮茉莉花清水水蒸氣蒸餾除水分離油層茉莉油B鮮茉莉花清水水蒸氣蒸餾油水混合物分離油層除水茉莉油C鮮茉莉花清水除水水蒸氣蒸餾油水混合物分
38、離油層茉莉油D鮮茉莉花清水分離油層除水水蒸氣蒸餾茉莉油答案B解析用水蒸氣蒸餾法提取茉莉精油時(shí),應(yīng)先將新鮮的茉莉花與清水共沸進(jìn)行蒸餾,然后在得到的油水混合物中加入氯化鈉使之分層,然后進(jìn)行分液,為除去茉莉油中仍存在的水分,可加入無水硫酸鈉,過濾后可以得到較純的茉莉油。8下列關(guān)于植物芳香油提取的原料、相應(yīng)精油的名稱及適宜的提取方法的敘述中,不正確的是()A玫瑰花、玫瑰精油、壓榨法B橘皮、橘皮油、壓榨法C胡蘿卜、胡蘿卜素、萃取法D薰衣草莖葉、薰衣草油、蒸餾法答案A解析由于玫瑰精油揮發(fā)性較強(qiáng),從玫瑰花中提取玫瑰精油可采用蒸餾法。9萃取(cuq)前往往要將胡蘿卜烘干,粉碎(fn su),并且原料(yunl
39、io)顆粒越小越好,這樣做的目的是()A讓胡蘿卜盡快溶解成胡蘿卜素B讓原料與萃取劑充分接觸,提高萃取效率C讓原料顆粒盡快溶于萃取劑中D節(jié)省萃取劑的使用量答案B解析這樣做的目的是讓原料形成盡量小的顆粒,以便原料顆粒能與萃取劑發(fā)生充分的接觸,保證萃取的徹底性,提高萃取的效率。10提取胡蘿卜素和提取玫瑰油時(shí)都需要加熱,但用萃取法提取胡蘿卜素時(shí),采用的是水浴加熱法,而用水蒸氣蒸餾法提取玫瑰油時(shí)是直接加熱。其原因是()A前者需要保持恒溫,后者不需要恒溫B前者容易蒸發(fā),后者不容易蒸發(fā)C胡蘿卜素不耐高溫,玫瑰油耐高溫D前者燒瓶里含有機(jī)溶劑,易燃易爆,后者是水答案D解析萃取法提取胡蘿卜素利用的原理是胡蘿卜素易
40、溶于有機(jī)溶劑的特點(diǎn),因?yàn)橛袡C(jī)溶劑為易燃物,應(yīng)避免明火加熱防止爆炸,應(yīng)采用水浴加熱的方法。水蒸氣蒸餾法提取玫瑰油利用水蒸氣將揮發(fā)性強(qiáng)的玫瑰油攜帶出來,直接加熱燒瓶中的熱水,不易爆炸。11下圖表示菊花的嫩枝和月季的花藥離體培養(yǎng)過程,請據(jù)圖回答下面的問題。(1)對(duì)菊花來說,要選取_的嫩枝來進(jìn)行組織培養(yǎng)。對(duì)月季來說,適宜花粉培養(yǎng)的時(shí)期是_期。為確定該花粉是否處于該時(shí)期,最常用的方法是_。(2)在培養(yǎng)嫩枝組織和花粉的培養(yǎng)基中都要加入一定的植物激素,常用的植物激素有_。(3)某同學(xué)在培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上感染了幾種(j zhn)細(xì)菌。若在以尿素為唯一(wi y)氮源的培養(yǎng)基中加入_指示劑培養(yǎng)(piyng)
41、幾種菌后,指示劑變紅就可以鑒定其中含有能夠分解尿素的細(xì)菌。為了避免微生物對(duì)培養(yǎng)造成影響,所以在進(jìn)行接種時(shí)應(yīng)注意_。接種室要消毒只要戴口罩,操作時(shí)便可說話外植體可預(yù)先用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精浸泡,取出后用無菌水沖洗后,再用0.1%的氯化汞溶液消毒,并用無菌水沖洗干凈接種操作要在酒精燈火焰旁進(jìn)行接種完畢應(yīng)立即蓋好瓶蓋A BC D(4)月季的花藥培養(yǎng)與菊花的嫩枝組織培養(yǎng)不同,從植物產(chǎn)生的途徑來說,花粉植株產(chǎn)生的途徑除了圖中所示外,還可以通過_階段發(fā)育而來,這兩種發(fā)育途徑的差別主要取決于_。(5)不同植物對(duì)各種條件的要求往往不同,進(jìn)行菊花組織培養(yǎng)一般將溫度控制在_,并且對(duì)光照的控制為_。答案(1)生長
42、旺盛單核醋酸洋紅法(2)細(xì)胞分裂素和生長素(3)酚紅C(4)胚狀體培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比(5)1822每天12小時(shí)光照解析(1)因?yàn)樯L旺盛的嫩枝生理狀況好,容易誘導(dǎo)脫分化和再分化,所以對(duì)菊花來說,要選取生長旺盛的嫩枝來進(jìn)行組織培養(yǎng);對(duì)月季來說,適宜花粉培養(yǎng)的時(shí)期是單核期,因?yàn)樵趩魏似?,?xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期,花藥培養(yǎng)成功率最高。確定該花粉發(fā)育時(shí)期最常用的方法是醋酸洋紅法。(2)決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例,特別是生長素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要,因此在培養(yǎng)嫩枝組織和花粉的培養(yǎng)基中都要加入細(xì)胞分裂素和生長素。(3)若在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)幾種菌后,指示劑變紅就可以鑒定其中含有能夠
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