GMS-六胺銀-真菌講課稿

1、Good is good, but better carries it.精益求精，善益求善。GMS-六胺銀-真菌-GMS六胺銀-GROCOTTS改良法目的：鑒別真菌。原理：真菌細(xì)胞壁的粘多糖成分被氧化形成醛基。醛基與硝酸銀反應(yīng)，再將銀還原成可見的金屬形式。對(duì)照：含有真菌的組織。由曲霉病和肺結(jié)核病的組織塊是首選的。固定：10%甲醛技術(shù)：4-5m石蠟切片。設(shè)備：酸清洗玻璃器皿，染色缸，微波爐。試劑：2%鉻酸：三氧化鉻Chromiumtrioxide10.0gm蒸餾水Distilledwater500.0ml混合溶解，保存期6個(gè)月。警告：腐蝕性酸，可能致癌，避免接觸和吸入。1%偏重亞硫酸鈉Sodiu

2、mMetabisulfite:偏重亞硫酸鈉Sodiummetabisulfite5.0gm蒸餾水Distilledwater500.0ml混合溶解，保存期6個(gè)月。5%硼砂：四硼酸鈉Sodiumborate5.0gm蒸餾水Distilledwater100.0ml混合溶解，保存期6個(gè)月。六胺銀備用液：3%六亞甲基四胺Methenamine(四氮六甲圜hexamethylenetetramine)100.0ml5%硝酸銀Silvernitrate5.0ml混合，盛于酸清洗過(guò)的棕色瓶中，冷藏，保存期3個(gè)月。警告：腐蝕性，可能致癌。工作液：六胺銀備用液StockSilverMethen.25.0ml蒸

3、餾水Distilledwater25.0ml5%硼砂Borax2.5ml使用前新鮮配制，用后丟棄。0.5%氯化金：氯化金Goldchloride0.5gm蒸餾水Distilledwater100.0ml混合溶解，盛于酸清洗過(guò)的瓶中，冷藏，保存期1年。警告：避免接觸和吸入。0.2%亮綠：亮綠LightgreenSFyellow.0.2gm蒸餾水Distilledwater100.0ml冰醋酸Glacialaceticacid0.2ml混合溶解。保存期6個(gè)月。警告：避免接觸和吸入。安全：穿戴手套、護(hù)目鏡和白大衣。保持所有打開蓋的熱溶液于通風(fēng)櫥中。避免接觸和吸入染料和化學(xué)品。鉻酸：對(duì)皮膚和粘膜有腐蝕

4、性，高度毒性，影響靶器官為腎。致癌物質(zhì)。偏重亞硫酸鈉：侵入途徑為攝入，能引起胃腸道不適，對(duì)皮膚、眼睛和粘膜有刺激性。硝酸銀：劇烈的皮膚和眼睛刺激，氧化劑。攝入將導(dǎo)致嚴(yán)重的胃腸道不適?？赡苤掳嚎梢傻哪[瘤發(fā)生因素。硫代硫酸鈉：攝入毒性。能引起胃刺激，接觸對(duì)皮膚、眼睛和呼吸系統(tǒng)有刺激性。亮綠SFYellowish：可能致癌。程序：1.脫蠟至無(wú)水酒精。2.*2%鉻酸微波高火45seconds，放置5minutes。3.流水沖洗蒸餾水稍洗。4.1%偏重亞硫酸鈉溫室1minute。5.流水沖洗，蒸餾水稍洗3changes。6.*六胺銀工作液微波高火70seconds，在熱溶液中搖動(dòng)玻片，直至組織應(yīng)呈褐紙

5、袋色。7.蒸餾水稍洗2changes。8.0.5%氯化金1minute或直至灰色。9.蒸餾水稍洗。10.5%Hypo,3minutes.11.流水沖洗，蒸餾水稍洗。12.亮綠液1minute.13.蒸餾水稍洗。14.脫水、透明和封固。*傳統(tǒng)方法：5%鉻酸60C水浴1hour。銀液：60C水浴1hour或直至棕色。結(jié)果：真菌：黑色背景：綠色注意：1.如果鉻酸變褐色是需要更換，傳統(tǒng)方法5%鉻酸勝于2%，高濃度的鉻酸容易在微波處理時(shí)引起組織掉片。2.如果微生物不變黑色，檢查：a.鉻酸是否新鮮。b.偏重亞硫酸鈉是否新鮮。c.硼砂是否新鮮f。3.如果銀液出現(xiàn)混蝕或在染色缸上出現(xiàn)銀鏡時(shí)，重新配制溶液。參考

6、文獻(xiàn)：SheehanD,HrapchakB,TheoryandpracticeofHistotechnology,2ndEd,1980,pp243-246,BattellePress,OhioLunaL,ManualofHistologicStainingMethodsoftheAFIP,3rdEd,1968,pp230-231,McGraw-Hill,NYCrookham,J,Dapson,R,HazardousChemicalsintheHistopathologyLaboratory,2ndED,1991,Anatech程序卡GMS-METHENAMINESILVER,GROCOTTS,

7、MODIFIED對(duì)照：含有真菌的組織。由曲霉病和肺結(jié)核病的組織塊是首選的。技術(shù)：4-5m石蠟切片。程序：1.脫蠟至無(wú)水酒精。2.*2%鉻酸微波高火45seconds，放置5minutes。3.流水沖洗蒸餾水稍洗。4.1%偏重亞硫酸鈉溫室1minute。5.流水沖洗，蒸餾水稍洗3changes。6.*六胺銀工作液微波高火70seconds，在熱溶液中搖動(dòng)玻片，直至組織應(yīng)呈褐紙袋色。7.蒸餾水稍洗2changes。8.0.5%氯化金1minute或直至灰色。9.蒸餾水稍洗。10.5%Hypo,3minutes.11.流水沖洗，蒸餾水稍洗。12.亮綠液1minute.13.蒸餾水稍洗。14.脫水、透

8、明和封固。*傳統(tǒng)方法：5%鉻酸60C水浴1hour。銀液：60C水浴1hour或直至棕色。結(jié)果：真菌：黑色背景：綠色安全：所有打開蓋的熱溶液于通風(fēng)櫥中。避免接觸和吸入染料和化學(xué)品。2%鉻酸：三氧化鉻Chromiumtrioxide10.0gm蒸餾水Distilledwater500.0ml混合溶解，保存期6個(gè)月。警告：腐蝕性酸，可能致癌，避免接觸和吸入。1%偏重亞硫酸鈉:偏重亞硫酸鈉Sodiummetabisulfite5.0gm蒸餾水Distilledwater500.0ml混合溶解，保存期6個(gè)月。5%硼砂：四硼酸鈉Sodiumborate5.0gm蒸餾水Distilledwater100.

9、0ml混合溶解，保存期6個(gè)月。六胺銀備用液：3%六亞甲基四胺Methenamine(四氮六甲圜hexamethylenetetramine)100.0ml5%硝酸銀Silvernitrate5.0ml混合，盛于酸清洗過(guò)的棕色瓶中，冷藏，保存期3個(gè)月。警告：腐蝕性，可能致癌。工作液：六胺銀備用液StockSilverMethen.25.0ml蒸餾水Distilledwater25.0ml5%硼砂Borax2.5ml使用前新鮮配制，用后丟棄。0.5%氯化金：氯化金Goldchloride0.5gm蒸餾水Distilledwater100.0ml混合溶解，盛于酸清洗過(guò)的瓶中，冷藏，保存期1年。警告：

10、避免接觸和吸入。0.2%亮綠：亮綠LightgreenSFyellow.0.2gm蒸餾水Distilledwater100.0ml冰醋酸Glacialaceticacid0.2ml混合溶解。保存期6個(gè)月。5%硝酸銀備用液：硝酸銀Silvernitrate25.0gm蒸餾水Distilledwater500.0ml用酸清洗過(guò)的瓶。冷藏，保存期6個(gè)月。警告：腐蝕性，可能致癌。日期：技師：使用限期：3%六亞甲基四胺六亞甲基四胺Methenamine30.0gm蒸餾水Distilledwater1000.0ml用酸清洗過(guò)的瓶。冷藏，保存期6個(gè)月。警告：避免接觸和吸入。日期：技師：使用限期：1%偏重亞硫

11、酸鈉：偏重亞硫酸鈉Sodiummetabisulfite5.0gm蒸餾水Distilledwater500.0ml混合溶解，保存期6個(gè)月。警告：避免接觸和吸入。日期：技師：使用限期：1%偏重亞硫酸鈉日期：技師：六胺銀備用液：3%六亞甲基四胺(四氮六甲圜hexamethylenetetramine)100.0ml5%硝酸銀Silvernitrate5.0ml混合，盛于酸清洗過(guò)的棕色瓶中，冷藏，保存期3個(gè)月。警告：腐蝕性，可能致癌。日期：技師：使用限期：5%硼砂：四硼酸鈉Sodiumborate5.0gm蒸餾水Distilledwater100.0ml混合溶解，保存期6個(gè)月。日期：技師：使用限期：2%鉻酸：三氧化鉻Chromiumtrioxide10.0gm蒸餾水Distilledwater500.0ml混合溶解，保存期6個(gè)月。警告：腐蝕性酸，可能致癌，避免接觸和吸入。日期：技師：使用限期：2%鉻酸日期：技師：0.5%氯化金：氯化金Goldchloride0.5gm蒸餾水Distilledwater100.0ml混合溶解，盛