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1、怎樣鑒別異型淋巴細胞主要內(nèi)容物品準備標本處理涂片染色顯微鏡觀察報告結(jié)果一、物品準備準備干凈的玻片、推片瑞氏染液、待檢EDTA抗凝全血計時器顯微鏡計數(shù)器二、樣本處理血涂片的制備:1、制作血涂片的載玻片要求清潔、干燥、中性、無油膩;2、距載玻片一端約1cm處滴EDTA抗凝全血30ul;3、將推片放置于血滴的前端,緊挨血滴,使其順推片邊緣散開;4、調(diào)整好推片與載玻片的夾角,使其約呈30度角,均勻向前推片。影響涂片厚薄的因素有:血滴大小、推片與載玻片間的夾角,推片速度、血細胞比容。制備涂片時,血滴越大、角度越大、推片速度越快,血膜越厚,反之越薄。血細胞比容增高、血液粘度較高時,應(yīng)采用小血滴、小角度、慢
2、推,可得滿意結(jié)果;血細胞比容減低、血液較稀時,應(yīng)采用大血滴、大角度、快推。 血涂片的好壞直接影響到細胞的鑒別。 一張良好的血涂片,要求厚薄適宜、頭體尾明顯、細胞分布均勻、血膜邊緣整齊、兩端和兩邊留有一定空隙。三、涂片染色 1、滴入瑞氏染液I液數(shù)滴蓋滿標本,30秒; 2、再加入瑞氏染液II液與I液比例為1:1,染13分鐘; 3、用流水沖洗涂片。注意事項:1、血涂片干透后火焰固定,否則細胞在染色過程中容易脫落。2、沖洗時應(yīng)以流水沖洗,不能先倒掉染液,以防燃料沉著在血涂片上。沖洗時間不能過久,以防脫色。如血涂片上有燃料顆粒沉積,可滴加甲醇,然后立即用流水沖洗。3、染色過淡可以復(fù)染,復(fù)染時應(yīng)先加緩沖液
3、然后加染液。染色過深可用流水沖洗或浸泡,也可用甲醇脫色。4、染色的深淺與血涂片中細胞數(shù)量、血膜厚度、染色時間、染液濃度、PH值密切相關(guān),可根據(jù)情況適當糾正。四、顯微鏡觀察由于各種白細胞體積大小不等,在血涂片中分布很不均勻,一般體積較小的淋巴細胞在頭、體部分布較多,而尾部和兩側(cè)以中性粒細胞核單核細胞較多,異常大的細胞常在片尾末端出現(xiàn)。一般認為細胞分布在片頭至片尾的3/4區(qū)域比較均勻,因此分類時最好選擇在體尾交界處,且必須按一定方式有規(guī)律地移動視野。需在油鏡下觀察。先調(diào)粗螺旋找到視野,再調(diào)動細螺旋慢慢找到較為清晰的視野。 在病毒或過敏原等因素刺激下,外周血淋巴細胞增生并發(fā)生異常形態(tài)變化,稱異型淋巴
4、細胞或“Downey”細胞。已知此種細胞屬T淋巴細胞,其形態(tài)的變異是因增生亢進,甚至發(fā)生母細胞化的結(jié)果。根據(jù)細胞形態(tài)可分為三型。2 I型空泡型III型幼稚型 II型不規(guī)則型分型細胞中等大小,細胞 多呈圓形或部分不規(guī)則 形或阿米巴型,胞質(zhì)嗜 堿性強,呈深藍色,含 有大小不等的空泡或呈 泡沫狀,無顆粒或有少 數(shù)顆粒,胞核偏位,呈 橢圓形,腎形或分葉形, 染色質(zhì)粗糙,呈粗網(wǎng)狀 或成堆排列。 I型(泡沫型或漿細胞型) 細胞胞體較I型大, 形態(tài)不規(guī)則,胞質(zhì)量 多,呈淺灰藍色,但 靠胞膜邊緣處較深染 且不整齊,無空泡, 可有少數(shù)天青胺藍顆 粒,胞核呈圓形、橢 圓型或不規(guī)則形,染 色質(zhì)較I型細致,亦呈 網(wǎng)狀。型(不規(guī)則型或單核細胞樣型) 細胞直徑 15um18um,形態(tài)不規(guī)則,胞質(zhì)呈藍色,可有分布較均勻的小空泡,一般無顆粒,胞核圓形或卵圓形,可見核仁1個2個,染色質(zhì)細致、均勻,呈網(wǎng)狀排列,無濃集現(xiàn)象。型(幼稚型或幼淋巴細胞樣型) 異型淋巴細胞除I、II、III型三個類型外,有時也可見到少數(shù)組織細胞樣的難以歸類的異型淋巴細胞。 異型淋巴細胞 異型淋巴細胞增多主要見于傳染性單核細胞增多癥、病毒性肝炎、流行性出血熱、濕疹等病毒性疾病和過敏性疾病。正常人血片中可偶見此種細胞。一般病毒感染異型淋巴細胞 10%,因此二者可依據(jù)異
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