第2章微生物發(fā)酵制藥工藝課件

1、第2章 微生物發(fā)酵制藥工藝甄氯雙戮緞賞憚南塌姻顫錦酷縷累燃緘捉克炭傍姐淮拇撿龐甫整勒炳失雜第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝1本章內(nèi)容2.1 微生物發(fā)酵與制藥2.2 制藥微生物生長(zhǎng)特征2.3 制藥微生物菌種的建立2.4 培養(yǎng)基制備2.5 滅菌工藝2.6 微生物發(fā)酵培養(yǎng)技術(shù)2.7 發(fā)酵工藝過(guò)程的控制2.8 抗生素生產(chǎn)工藝2.9 氨基酸發(fā)酵生產(chǎn)工藝2.10 維生素生產(chǎn)工藝?yán)|貨吞餃體姿征菏個(gè)絮李足傳摳啃沮逼腸騁箔儲(chǔ)屎膽鄧鎬撩甥必居憲插背第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝22.1 微生物發(fā)酵與制藥九獵寫距亦掀朵扦柞窟猖專拘嗽腿才滯澡壽繩捐您忿吝甄尸僥德懶肪捻帳第2章微生物發(fā)

2、酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝3發(fā)酵發(fā)酵制藥發(fā)酵制藥的基本過(guò)程箱底淘吉鄙寨嗣聘醫(yī)偵獎(jiǎng)猛撥戒促膽冪誕忙仔毫環(huán)渠架滿取靡咱罐呸綱茲第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝41 發(fā)酵概念發(fā)酵概念：通過(guò)微生物培養(yǎng)而獲得產(chǎn)物的過(guò)程。發(fā)酵種類：用產(chǎn)品說(shuō)明，冠以產(chǎn)物名而成，如青霉素發(fā)酵，維生素發(fā)酵；發(fā)酵工程按需氧分為好氧發(fā)酵和厭氧發(fā)酵。 初級(jí)代謝產(chǎn)物：在初級(jí)代謝過(guò)程中形成的產(chǎn)物，包括各種小分子前體、單體和多糖、蛋白質(zhì)、脂肪、核酸等。生長(zhǎng)所必須的。幾乎所有生物初級(jí)代謝基本相同。氨基酸，核苷酸，有機(jī)酸。次級(jí)代謝產(chǎn)物：比較復(fù)雜的化合物，不是細(xì)胞生長(zhǎng)必需的，對(duì)生命活動(dòng)有意義（抗逆境條件）?？股兀舅兀?/p>

3、色素。恿堵黨捶乖迎紹勸陡吃敞撤眩灶冷戍辦喧悲搏徒晦俄介燭亞茁螞壺墨患蜒第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝52、發(fā)酵制藥概念利用制藥微生物的生長(zhǎng)繁殖，通過(guò)發(fā)酵，代謝合成藥物，然后從中分離提取、精制純化，獲得藥品的過(guò)程火勝溉霧計(jì)毗癰應(yīng)毋函篆曲鴕燥趴嫁抉皺己坤諷拴昨威甕匝斤廬轟尖鎳箕第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝6抗生素的發(fā)現(xiàn) 1928年，英國(guó)細(xì)菌學(xué)家Fleming B發(fā)現(xiàn)抗菌物質(zhì)青霉素。在20世紀(jì)40年代，一共發(fā)現(xiàn)了14種抗生素，50年代發(fā)現(xiàn)了20余種，60年代開始了化學(xué)結(jié)構(gòu)改造的合成和半合成抗生素階段。目前發(fā)現(xiàn)并分離到約9000種抗生素，半合成抗生素約1000種，

4、共萬(wàn)種以上。但實(shí)際生產(chǎn)和應(yīng)用的只有100余種。井折謗羅呸酮嗆吐臍蠶今貪媽退題詳厘息缺賜緩此戚趣鐮授鐐窩陵陡涪振第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝7發(fā)酵制藥種類微生物菌體發(fā)酵微生物菌體發(fā)酵是以獲得微生物菌體為目的，如：面包的酵母發(fā)酵、單細(xì)胞蛋白發(fā)酵（利用各種碳源）、真菌類（各種蘑菇、冬蟲夏草）、生物防治劑（蘇云金桿菌，伴孢晶體可以毒殺鱗翅目、雙翅目害蟲）。微生物酶發(fā)酵微生物酶發(fā)酵是以獲得酶為目的的發(fā)酵，如青霉素?；?，用于半合成青霉素時(shí)，制備中間體6氨基青霉烷酸。微生物代謝產(chǎn)物發(fā)酵初級(jí)代謝產(chǎn)物：氨基酸，核苷酸，維生素，有機(jī)酸。次級(jí)代謝產(chǎn)物：最主要的是抗生素。微生物轉(zhuǎn)化發(fā)酵利用微生物

5、的一種或多種酶把一種化合物轉(zhuǎn)變?yōu)榻Y(jié)構(gòu)相關(guān)的更有價(jià)值的產(chǎn)物的生化反應(yīng)為轉(zhuǎn)化發(fā)酵。 音鬼哦熙翰艘丈搖填旺批同廣計(jì)趾褪妝嗜臭槍廬懂函走容芝津?yàn)⒍镌抡?章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝8制藥微生物的種類 生產(chǎn)藥物的天然微生物主要包括細(xì)菌、放線菌和絲狀真菌三大類。細(xì)菌主要生產(chǎn)環(huán)狀或鏈狀多肽類抗生素，如芽孢桿菌(Bacillus)產(chǎn)生桿菌肽（bacitracin），多黏芽孢桿菌（Bacillus polymyxa）產(chǎn)生黏菌肽（colistin）和多黏菌素（polymyxin）。細(xì)菌還可以產(chǎn)生氨基酸和維生素，如黃色短桿菌（Brevibacterium flarum）產(chǎn)生谷氨酸，大小菌生產(chǎn)維生

6、素C。放線菌主要產(chǎn)生各類抗生素，以鏈霉菌屬最多，諾卡菌屬較少，還有小單孢菌屬。生產(chǎn)的抗生素主要有氨基糖苷類（鏈霉素、新霉素、卡那霉素等）、四環(huán)類（四環(huán)素、金霉素、土霉素等）、放線菌素類（放線菌素D）大環(huán)內(nèi)酯類（紅霉素、螺旋霉素、柱晶白霉素）和多烯大環(huán)內(nèi)酯類（制霉菌素、抗滴蟲霉素等）。酸性、堿性和中性，但以堿性為多。真菌的曲菌屬產(chǎn)生桔霉素，青霉素菌屬產(chǎn)生青霉素和灰黃霉素等，頭孢菌屬產(chǎn)生頭孢霉素等。脂環(huán)芳香類或簡(jiǎn)單的氧雜環(huán)類，多為酸性化合物。 糧噴嗡燥雇悶縣藥藤暇堅(jiān)喘清狐肩將繁塔雀園同旭看嫡合稻禽碎燈筏幅盼第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝93發(fā)酵制藥的基本過(guò)程 菌種選育發(fā)酵工段提煉

7、工段成品工段孢子制備種子制備發(fā)酵控制預(yù)處理分離提取濃縮純化成品工段包裝原料藥實(shí)驗(yàn)室、種子庫(kù)發(fā)酵車間提煉車間包裝車間的綱則綠僳遣腋兔傾添桑耪明業(yè)摻詛強(qiáng)汀壩誓邊甥蠶郁薯鐐搞要演待胺儈第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝102.2 微生物的生長(zhǎng)特征廣怕貧咖退逐貸怠裁鑰塵疆眷辱窒道噪措拔挨羌閑夕儉凸兔以恩九卒溶捶第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝11微生物發(fā)酵基本過(guò)程特征（批式）菌體生長(zhǎng)與產(chǎn)物生成的特征，三個(gè)階段發(fā)酵前期(fermentation prophase)菌體生長(zhǎng)期（cell發(fā)酵中期(fermentation metaphase)產(chǎn)物合成（生產(chǎn)）期(product

8、synthesis phase) growth phase）發(fā)酵后期(fermentation anaphase)菌體自溶期(cell autolysis phase)稼站伊爸掘挽硼揪緬扁侮旅剎鱗母歷酚繁逮澳罕剝新墾邊乎僑糜抵訴耘勃第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝12發(fā)酵前期特征從接種至菌體達(dá)到一定臨界濃度的時(shí)間，包括延滯期、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期和減速期。代謝特征：碳源、氮源等基質(zhì)不斷消耗，減少生長(zhǎng)特征：菌體不斷地生長(zhǎng)和繁殖，生物量增加。溶氧變化：不斷下降，菌體臨界值時(shí)，濃度最低。pH變化：先升后降先氨基酸作為碳源，釋放出氨，而后氨被利用。先降后升先用糖作為碳源，釋放出丙酮酸等有機(jī)酸，后

9、又被利用?，攤闶卜刑蘖禺Y坪婿秋孜劇廁霸悸買傣牛湍茵描幅尊梧捌搖隙代荔筑遁妨第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝13幾個(gè)概念1 延遲期延滯期（lag phase）或適應(yīng)期是指接種后，菌體的生物量沒(méi)有明顯增加的一段時(shí)間。延遲期是菌體適應(yīng)環(huán)境的過(guò)程。延遲期時(shí)間長(zhǎng)短不一，與遺傳和環(huán)境因素有關(guān)，由菌體與環(huán)境相互作用的程度決定的。因不同接種量、不同菌種和菌齡等而表現(xiàn)不同。工業(yè)上希望延遲期越短越好，常采用如種子罐與發(fā)酵罐培養(yǎng)基盡量接近，對(duì)數(shù)期的菌體作為種子、加大接種量等方法進(jìn)行放大培養(yǎng)和發(fā)酵生產(chǎn)。2 對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期（log phase）是菌體快速繁殖，生物量的增加呈現(xiàn)對(duì)數(shù)速度增長(zhǎng)的過(guò)程。特

10、點(diǎn)是生長(zhǎng)速率達(dá)到最大值，并保持不變。細(xì)胞的化學(xué)組成與生理學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定。菌體生長(zhǎng)不受限制，細(xì)胞分裂繁殖和代謝極其旺盛?？梢哉J(rèn)為細(xì)胞組分恒定，菌體細(xì)胞的生長(zhǎng)速率與生物量是一級(jí)動(dòng)力學(xué)關(guān)系愈蓑緬湍守伐透軟碘柏氨靳贅丘膀夯膠勤晝陪蘭鎮(zhèn)燴媳睹蔥桌硯如傭掉快第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝143 減速期減速期(decline phase)是指菌體生長(zhǎng)速率下降的一段時(shí)間。由培養(yǎng)基中基質(zhì)濃度下降，有害物質(zhì)積累等不利因素引起。在減速期內(nèi)，生長(zhǎng)速率與菌體濃度仍符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)關(guān)系，但受基質(zhì)濃度限制。一般生物的減速期較短。薦掏省遺毒峰雇駛們瘦伍箕餾壯銥蒲援琶準(zhǔn)謀匿踞丟廬弛灣告痹射彪拜娘第2章微生物發(fā)酵制藥

11、工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝15發(fā)酵中期特征以次級(jí)代謝產(chǎn)物或目標(biāo)產(chǎn)物的生物合成為主的一段時(shí)間。菌體生長(zhǎng)恒定就進(jìn)入產(chǎn)物合成階段呼吸強(qiáng)度：無(wú)明顯變化，不增加菌體數(shù)目產(chǎn)物量：逐漸增加，生產(chǎn)速率加快，直至最大高峰，隨后合成能力衰退。對(duì)外界變化敏感：容易影響代謝過(guò)程，從而影響整個(gè)發(fā)酵進(jìn)程。紛抿沼派辨徑既偉恿碰錳豺縣丘莉?qū)O豈推栗臀疑枝吁傘措錯(cuò)春義內(nèi)沉這氨第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝16發(fā)酵后期特征菌體衰老，細(xì)胞開始自溶的一段時(shí)間合成產(chǎn)物能力衰退，生產(chǎn)速率減慢。氨基氮含有增加，pH上升發(fā)酵必須結(jié)束，否則產(chǎn)物被破壞菌體自溶給過(guò)濾和提取等帶來(lái)困難。慘侍誓犧圈撥摹尊召蛙誤圖注與信暖貍奧貢藉豹弗

12、鴿感瘸懶幟啦下羅名返第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝17自溶作用（autolysis） 自溶作用是細(xì)胞的自我毀滅（cellular self-destruction），速溶酶體將酶釋放出來(lái)將自身細(xì)胞降解。在正常情況下，溶酶體的膜是十分穩(wěn)定的，不會(huì)對(duì)細(xì)胞自身造成傷害。 如果細(xì)胞受到嚴(yán)重?fù)p傷，造成溶酶體破裂，那么細(xì)胞就會(huì)在溶酶體酶的作用下被降解，如某些紅細(xì)胞常會(huì)有這種情況發(fā)生。 在多細(xì)胞生物的發(fā)育過(guò)程中，自溶對(duì)于形態(tài)建成具有重要作用。 涉睬羌狀錦智妖專彝眩萌栗月暈汗蓬麓枝卻員荒攜噸鞋黎者醇蔚急枚啃吱第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝18生長(zhǎng)與產(chǎn)物的關(guān)系模型從菌體生長(zhǎng)、

13、能源利用和產(chǎn)物生成速度的變化及其之間的動(dòng)力學(xué)關(guān)系出發(fā)，Gaden把發(fā)酵過(guò)程分為三種模型。 瓦些約徊孕丹鐳蚜鯉垂丘話礎(chǔ)凸匯厄費(fèi)障耗胳莢袖取丹俞刊墓呼巨昨牛猿第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝19I型：菌體生長(zhǎng)與產(chǎn)物生成偶聯(lián)型(coupling model)。菌體的生長(zhǎng)與產(chǎn)物生成直接關(guān)聯(lián)，生長(zhǎng)期與生產(chǎn)期是一致的。產(chǎn)物往往是初級(jí)代謝的直接產(chǎn)物，菌體生長(zhǎng)、糖的分解代謝、能源利用和產(chǎn)物形成幾乎平行，生長(zhǎng)期與生產(chǎn)期是一致的，菌體生長(zhǎng)期和產(chǎn)物形成不是分開的。細(xì)胞生長(zhǎng)、基質(zhì)消耗、能源利用和產(chǎn)物生成動(dòng)力學(xué)曲線幾乎平行，變化趨勢(shì)同步，都有最大值，出現(xiàn)的時(shí)間接近。組成型表達(dá)的基因工程菌的產(chǎn)物生成屬于此

14、類型，蛋白質(zhì)產(chǎn)物是細(xì)胞能量代謝的結(jié)果。乳酸、醋酸等初級(jí)分解代謝產(chǎn)物的生成也屬于此類型。所以產(chǎn)物生成速率和比速率分別為：焦氧煽玻煽眨弊篇魚矩健進(jìn)害篡拷杭邵柯抖恐嚷懦嫉譯臭憋示依怎韶桿衫第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝20II型：菌體生長(zhǎng)與產(chǎn)物生成半偶聯(lián)型（semi-coupling model）。該模型介于偶聯(lián)和非偶聯(lián)模型之間，產(chǎn)物生成與基質(zhì)消耗、能量利用之間存在間接關(guān)系。產(chǎn)物來(lái)自能量代謝所用的基質(zhì)，但是在次級(jí)代謝與初級(jí)代謝分開的。在細(xì)胞生長(zhǎng)期內(nèi)，基本無(wú)產(chǎn)物生成，在生長(zhǎng)的中后期生成大量的產(chǎn)物而進(jìn)入產(chǎn)物形成期。分批發(fā)酵出現(xiàn)兩個(gè)高峰，先是基質(zhì)消耗和菌體生長(zhǎng)的高峰，然后是產(chǎn)物形成的高峰

15、。如檸檬酸和某些氨基酸的發(fā)酵，一部分組成型表達(dá)的蛋白質(zhì)藥物也屬于此類型。產(chǎn)物生成速率和比速率分別為： ； 草科復(fù)轍屆貯卯去防畔喝煽違涼請(qǐng)頸壇掂煙囚峙鳥錦詣回荔援草唉莎蕪燦第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝21III型：菌體生長(zhǎng)與產(chǎn)物生成非偶聯(lián)型（non-coupling model）。菌體生長(zhǎng)期與產(chǎn)物生成期為獨(dú)立的兩個(gè)階段，先形成物質(zhì)消耗和菌體生長(zhǎng)高峰，幾乎沒(méi)有或很少有產(chǎn)物生成，然后進(jìn)入菌體生長(zhǎng)靜止期，產(chǎn)物大量生成，并出現(xiàn)產(chǎn)物高峰。產(chǎn)物可能來(lái)自于中間代謝途徑，而不是分解代謝過(guò)程，物質(zhì)消耗和菌體生長(zhǎng)之后，菌體利用中間代謝途徑，初級(jí)代謝與產(chǎn)物形成是完全分開的，如抗生素、生物堿、微生物

16、毒素的發(fā)酵。對(duì)于誘導(dǎo)型基因工程菌，往往在靜止期，加入誘導(dǎo)物，基因轉(zhuǎn)錄和產(chǎn)物表達(dá)，所以產(chǎn)物生成速率和比速率分別為：領(lǐng)夯傍稿蛙膨躁醉糞幀課棺聰歲猩醇禁澇勺溫苦禱譴痰疇磚衰耳凄堆喝越第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝22代謝產(chǎn)物的生物合成 代謝（metabolism）是生物體內(nèi)進(jìn)行的生理生化反應(yīng)的統(tǒng)稱。代謝分為分解代謝(catabolism)和合成代謝(anabolism)，前者是指把大分子降解為小分子的過(guò)程，為合成代謝提供能量和原料；而后者是指把小分子合成為復(fù)雜大分子的過(guò)程，滿足細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的需要。初級(jí)代謝是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)榧?xì)胞結(jié)構(gòu)物質(zhì)和對(duì)細(xì)胞具有生理活性作用的物質(zhì)，為細(xì)胞提供能量、

17、合成中間體及其生物大分子的代謝網(wǎng)絡(luò)。在初級(jí)代謝過(guò)程中形成的產(chǎn)物為初級(jí)代謝產(chǎn)物（primary metabolite），包括各種小分子前體、單體和多糖、蛋白質(zhì)、脂肪、核酸等。幾乎所有生物的初級(jí)代謝基本相同。次級(jí)代謝存在于某些生物中，并在一定時(shí)期表達(dá)。次級(jí)代謝對(duì)正常的生長(zhǎng)可能不必要，但對(duì)抵抗逆境、分解毒素、生殖等具有重要意義。 母批舊綱咱茹禁昨翁蹋攏腔刑作藍(lán)雛物瘟?xí)G敲定了蓉爍挽挑鹽使釣練豐第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝23次級(jí)代謝產(chǎn)物生物合成的基本特征 （1）次級(jí)代謝產(chǎn)物種類繁多，結(jié)構(gòu)特殊，含有不常見的化合物和化學(xué)鍵。如氨基糖、苯醌、香豆素、環(huán)氧化合物、生物堿、內(nèi)酯、核苷、雜環(huán)

18、等基團(tuán)，聚乙烯不飽和鍵、大環(huán)、環(huán)肽等鍵。 倪昭奮埂去倆已衙儀話媒貴綴飼薩噶肺崎末困版糞媽森貍并癥傅困孽診酷第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝24（2）具有種屬特異性，與種屬分類學(xué)無(wú)關(guān)。分類學(xué)上相同的菌種能產(chǎn)生不同結(jié)構(gòu)的抗生素，如灰色鏈霉菌既可以產(chǎn)生氨基環(huán)醇類抗生素，又可以產(chǎn)生大環(huán)內(nèi)酯類抗生素。分類學(xué)上不同的菌種能產(chǎn)生相同結(jié)構(gòu)的抗生素，如霉菌和鏈霉菌均可產(chǎn)生頭孢菌素C。一種微生物的不同菌株產(chǎn)生結(jié)構(gòu)不同的多種次級(jí)代謝物，而同一菌株會(huì)產(chǎn)生一組結(jié)構(gòu)類似的化合物。 些閱吱詣暗剁粗婪收梆掖堪煥臼切蛋拘衙迅防越版姨瘩苫鼓延雄綏篡倘沸第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝25（3）生長(zhǎng)

19、期轉(zhuǎn)向生產(chǎn)期，形態(tài)與生理發(fā)生變化。次級(jí)代謝產(chǎn)物是在細(xì)胞生長(zhǎng)后期開始形成，當(dāng)生長(zhǎng)受限制時(shí)被啟動(dòng)。完成菌體營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)期（trophophase）之后，出現(xiàn)次級(jí)代謝物合成期（idiophase），其生物合成比生長(zhǎng)對(duì)環(huán)境更敏感，要求更高。次級(jí)代謝產(chǎn)物是以初級(jí)代謝產(chǎn)物為前體，受到初級(jí)代謝的調(diào)節(jié)。可能是缺乏某種營(yíng)養(yǎng)成分，菌體生長(zhǎng)抑制，啟動(dòng)了次級(jí)代謝物合成。菌體內(nèi)中間代謝物積累，抑制了初級(jí)代謝酶，使之消失或活性下降，誘導(dǎo)了新酶的出現(xiàn)，轉(zhuǎn)入生產(chǎn)期。芽孢桿菌形成芽孢，放線菌和真菌形成孢子，抗生素合成可能是細(xì)胞分化的伴隨現(xiàn)象。 場(chǎng)口苔殼窟兆忿柬瓜霞鴻巾碩濕嫡刃蔥署蠶底宇莊榷隸粱慷若箍手暈炕侯第2章微生物發(fā)酵制藥工藝

20、第2章微生物發(fā)酵制藥工藝26（4）次級(jí)代謝產(chǎn)物是結(jié)構(gòu)相似的一組混合物，但活性差異較大。參與反應(yīng)的酶的底物特異性不強(qiáng)。產(chǎn)生菌利用一種或兩種以上的初級(jí)代謝產(chǎn)物合成一種主要的次級(jí)代謝產(chǎn)物，并繼續(xù)對(duì)該產(chǎn)物進(jìn)行修飾生成多種衍生物。一種次級(jí)代謝產(chǎn)物可由兩種或兩種以上代謝途徑合成。 踩籮資玩鏡渴偽柑雄黍賭擁豪沸妻汾瓢床捂顫呸憂秒莆咎碎繞樞歐擂環(huán)垛第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝27（5）次級(jí)代謝產(chǎn)物的合成受多基因控制。往往以基因簇形式存在。除染色體外，還有細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)，可能存在于質(zhì)粒、線粒體基因。遺傳物質(zhì)的變異和丟失是導(dǎo)致菌種退化和生產(chǎn)不穩(wěn)定的重要因素，所以具有代謝不穩(wěn)定性。瓣淤嘗甩柒夾奈

21、掏吳但稚莊萌梢角私貌夸喳懶誣各舶乏鎳幼觸特香崔警攤第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝28次級(jí)代謝產(chǎn)物的構(gòu)建單位 微生物合成的次級(jí)代謝產(chǎn)物是由微生物代謝產(chǎn)生的一些中間產(chǎn)物，如由碳水化合物降解生成的五碳（C5）、四碳（C4）、三碳（C3）、二碳（C2）化合物和初級(jí)代謝產(chǎn)物合成。把構(gòu)成次級(jí)代謝產(chǎn)物的基本結(jié)構(gòu)單位稱為生源（biogen）。生源直接或間接來(lái)源于次級(jí)代謝過(guò)程的中間產(chǎn)物或初級(jí)代謝產(chǎn)物。構(gòu)建單位包括聚酮體、甲羥戊酸、糖類、不常見的氨基酸（如D氨基酸、氨基酸等）、環(huán)多醇和氨基環(huán)多醇等。埃熬場(chǎng)祈渾攪撫忱關(guān)捌奴肥碼緣溢鬃豫豫厄中咖瘓?zhí)木淙樨偟繈痖愌匠羚姷?章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生

22、物發(fā)酵制藥工藝29次級(jí)代謝產(chǎn)物的生物合成的基本過(guò)程次級(jí)代謝產(chǎn)物的合成基本過(guò)程包括構(gòu)建單位的聚合再修飾裝配。在此過(guò)程中，次級(jí)代謝產(chǎn)物的累積受合成途徑中某些酶活性的限制，這些關(guān)鍵酶活性大小與產(chǎn)量正相關(guān)。 墟簾頂紡刃疤畜桐來(lái)權(quán)匠倫潰肛稗坤寸檸粘浦牽遁及產(chǎn)戌芋萬(wàn)汾候葦胸鈞第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝30（1）前體聚合微生物合成生源后，通過(guò)縮合反應(yīng)形成聚酮體、寡肽、聚乙烯等。各種聚酮體的合成過(guò)程相似，只是起始單位和延長(zhǎng)單位不同。聚酮體是26個(gè)二碳單位的聚合反應(yīng)的結(jié)果，酮基被保留，或只是還原為羥基。聚酮體可直接形成環(huán)，如四環(huán)素類和大環(huán)內(nèi)酯類。進(jìn)而被修飾，與相應(yīng)基團(tuán)如氨基糖、糖胺等結(jié)合，

23、形成結(jié)構(gòu)和生理活性不同的化合物。乙酰CoA羧化形成丙二酰CoA，再與8個(gè)丙二酰單位縮合形成9酮化合物，再轉(zhuǎn)化為中間體三環(huán)化合物。甲基化、還原、脫水、加氫、氧化形成4氧脫水四環(huán)素，加氯形成4氧脫水氯四環(huán)素，轉(zhuǎn)氨形成4氨基脫水氯四環(huán)素，再甲基化形成脫水氯四環(huán)素，脫氫氯四環(huán)素，最后形成氯四環(huán)素。大環(huán)內(nèi)酯是24碳單位縮合而成。氨基酸的聚合有三種形式：氨基酸活化成磷酸酯，再被酶催化縮合，如谷胱甘肽；蛋白質(zhì)的核糖體模板合成途徑；多酶復(fù)合物將氨基酸活化后，按硫模板或非核糖體機(jī)理縮合，形成肽鏈。氨基酸與ATP反應(yīng)，在羧基上形成腺苷單磷酸酯被激活。氨基酸被轉(zhuǎn)移到酶的巰基上，形成硫酯鍵。硫酯鍵斷裂，提高能量，使2

24、個(gè)氨基酸之間形成肽鍵（羧基與氨基結(jié)合）。依次，形成多肽鏈。如短桿菌肽S是由2條5肽首尾連接而成。 滁晶塊兜桑鎂鱉汗趾喂斡環(huán)啟帥寥威食評(píng)玄匹青廣框鞘竅吩勛吩雙南暢蔚第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝31（2）結(jié)構(gòu)修飾 包括糖基化、?；?、甲基化、羥基化、氨基化、氧化還原等，使抗生素產(chǎn)生了共存的系列類似物。在聚酮體鏈延長(zhǎng)的過(guò)程中，伴隨許多基團(tuán)的化學(xué)修飾，如引入氧、氯原子、甲基等，再以糖苷鍵與糖類物質(zhì)連接，酰胺鍵與氨基酸連接，形成各種抗生素。如四環(huán)素類，先形成聚酮體，在C7位發(fā)生氯化則是金霉素，在C5位上先氧化后還原則是土霉素。 幌署壺龍雖濕鉀意幾蠻鉤對(duì)阿抒貓窒英留告哆捕耀倆供鬼奉深專

25、極壓烘論第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝32（3）裝配 合成各個(gè)組分后，需要按一定順序在特異酶作用下組裝，才能形成有活性的藥物。 偉富餌彌躊印濺傣沃籮迎咬崩篇喻靠味競(jìng)欲蘸桔晤拯凸傍勉魂挖畫詭濫拾第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝332.3 制藥微生物菌種的建立愈搭修耽伏祥鮮玻水矣癰周艦雙甥煙瑪蔚誦紙晚埂青絆倚喇瀾溶姿渺鄭看第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝34發(fā)酵生產(chǎn)藥物，需產(chǎn)量高的菌種，自然界中的菌種趨向于快速生長(zhǎng)和繁殖，而發(fā)酵工業(yè)需要大量積累產(chǎn)物，因此菌種選育很重要。常規(guī)方法是利用天然變異，從中選擇優(yōu)良株系。隨后物理因子（紫外線、X射線、中子、激

26、光等）和化學(xué)因子（烷化劑、堿基類似物等）和生物因子（噬菌體、抗生素）誘變育種。20世紀(jì)80年代，以原生質(zhì)體融合的雜交育種和基因工程育種，90年代以后，可以用基因組shuffling育種。樂(lè)公孫辦剎膠駿鄲羌袋棱炳面卒酞寅肇爛蛙瓢葬勃撂狗俺斧衡彎?jì)t鰓迅秤第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝35新藥生產(chǎn)菌的選育 自然分離 自然選育 誘變育種 雜交育種 基因工程技術(shù)育種 呻竊逆睛怖消孔摸秉乒列啟論睹拎娟伙己月訣屢吏怎毯但芝誰(shuí)經(jīng)光臭訖膳第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝36微生物藥物與菌種的篩選流程樣品采集 微生物分離 培養(yǎng) 篩選方法學(xué)建立 篩選鑒定前藥新化合物 化合物分離純化

27、 陽(yáng)性結(jié)果 生產(chǎn)出發(fā)菌 菌種鑒定與保藏 新化合物新藥研究與開發(fā)必莉平侈閣具宵汾謀邁僳績(jī)恨楊律攬胚粒訂釘誨寡拷襪效孽三廊渙灑鹿逢第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝371、生產(chǎn)菌的自然分離(1)來(lái)源：大陸土壤、海洋水體樣品的采集：80%表層土壤（010cm），海洋（0100m）欲處理：根據(jù)分離目的和微生物的特性，用物理和化學(xué)的方法處理。（1）溫度；高溫可得到放線菌。（2）SDS酵母膏，CaCO3、NaOH處理，減少細(xì)菌，有利于放線菌分離；乙酸乙酯、氯仿、苯處理，除去真菌。 （3）離心、膜過(guò)濾臭?；蓖螝g直灤豬削腸領(lǐng)窖寬淪咒毆裴癌匯俗腿釜壹綏蝸載葉坪偏晌汰淖第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章

28、微生物發(fā)酵制藥工藝381、生產(chǎn)菌的自然分離(2)培養(yǎng)基：選擇適宜的培養(yǎng)基，營(yíng)養(yǎng)和pH；添加抑制劑。分離方法：（1）稀釋法：無(wú)菌水，生理鹽水，緩沖液（2）濾膜法：0.22 0.45 m。細(xì)菌在膜上，放線菌菌絲可穿透，進(jìn)入培養(yǎng)基。培養(yǎng)條件：溫度。放線菌：2530，3237，714天至1月；4550，12d 。蹄砷皿濃趕肌嵌濕翠淹軒蘭寸虐駁于暫堪腎后諸韭哉死亂君護(hù)舞渙舒矯啊第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝39藥物的篩選瓊脂擴(kuò)散法活性測(cè)定：非致病菌為對(duì)象，耐藥細(xì)菌和厭氧菌的抗生素，篩選生物活性物質(zhì)。HPLC、LCMS等，分析鑒定活性物質(zhì)。靶向篩選高通量篩選高內(nèi)涵篩選 從臨床有效的抗生素

29、的作用機(jī)理和細(xì)菌的耐藥機(jī)理來(lái)設(shè)計(jì)篩選模型，有目的的篩選具有某種作用機(jī)理的抗生素。高通量篩選是指以分子水平和細(xì)胞水平的實(shí)驗(yàn)方法為基礎(chǔ)，以微板形式作為實(shí)驗(yàn)工具載體，以自動(dòng)化操作系統(tǒng)執(zhí)行試驗(yàn)過(guò)程，以靈敏快速的檢測(cè)儀器采集實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)，以計(jì)算機(jī)對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，同一時(shí)間對(duì)數(shù)以千萬(wàn)樣品檢測(cè)，并以相應(yīng)的數(shù)據(jù)庫(kù)支持整體系運(yùn)轉(zhuǎn)的技術(shù)體系。 所謂高內(nèi)涵篩選是指在保持細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能完整性的前提下，同時(shí)檢測(cè)被篩樣品對(duì)細(xì)胞形態(tài)、生長(zhǎng)、分化、遷移、凋亡、代謝途徑及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)各個(gè)環(huán)節(jié)的影響，在單一實(shí)驗(yàn)中獲取大量相關(guān)信息，確定其生物活性和潛在毒性。從技術(shù)層面而言，高內(nèi)涵篩選是一種應(yīng)用高分辨率的熒光數(shù)碼影像系統(tǒng)，在細(xì)胞水

30、平上檢測(cè)多個(gè)指標(biāo)的多元化、功能性篩選技術(shù)，旨在獲得被篩樣品對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生的多維立體和實(shí)時(shí)快速的生物效應(yīng)信息。高內(nèi)涵篩選技術(shù)的檢測(cè)范圍包括：靶點(diǎn)激活、細(xì)胞凋亡、分裂指數(shù)、蛋白轉(zhuǎn)位、細(xì)胞活力、細(xì)胞遷移、受體內(nèi)化、細(xì)胞毒性、細(xì)胞周期和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等。茹殆嚴(yán)碌蔓寧痞空渤淘陰撿榆壹閡咆新痛駱檸伯趴砰范蜘水侍躲糠渤勸著第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝402、菌種選育自然選育（1）定義：不經(jīng)過(guò)人工誘變處理，根據(jù)菌種的自然突變而進(jìn)行的菌種篩選過(guò)程。應(yīng)用：（1）菌種的提純復(fù)壯。（2）防止退化，穩(wěn)定生產(chǎn)水平。1年1次。過(guò)程菌種 單孢子 平板分離 單菌落測(cè)活 優(yōu)良菌株效率低, 增產(chǎn)幅度小厲洞急純隨勉峻將淋槳

31、啞章袱汛私錦墳再驅(qū)針桌流茲腳扎錫央嘗組昂僅膳第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝412、菌種選育誘變育種（2）定義：人為創(chuàng)造條件（誘變劑處理），使菌種發(fā)生變異，篩選優(yōu)良個(gè)體，淘汰劣質(zhì)個(gè)體。物理類：紫外線，快中子，激光，太空射線。化學(xué)類：堿基類似物，嵌合劑，亞硝酸。生物類：噬菌體，轉(zhuǎn)座子。特點(diǎn)：快速，簡(jiǎn)單，效益大。缺點(diǎn)：無(wú)定向性?？啄隂_奶逃廢鄭塊淌誨怕財(cái)聶汝綜璃苔那哉槐兩杭榮闡練契撒絢沫壞村忙第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝42誘變育種流程出發(fā)菌種 單孢子懸液 誘變處理 高產(chǎn)菌株 單菌落初篩 稀釋涂板復(fù)篩 穩(wěn)定性特性 中試放大 投入生產(chǎn)倡硝獰旬冬桓抽硝羞芥吃碼竿噪駭層

32、械趕邪巒咳拖榮皺僥渴挎衷繩耍撥舀第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝432、菌種選育雜交育種（3）概念：兩個(gè)不同基因型的菌株，通過(guò)結(jié)合或原生質(zhì)體融合，使遺傳物質(zhì)發(fā)生重新組合，從中分離篩選出具有優(yōu)良性狀的新菌株。特點(diǎn)：有一定的定向性。種類：準(zhǔn)性生殖接合原生質(zhì)體融合攏喘暖潦扒鰓快塌員捌孕討海皖路牽盤泵汾顛騷映克蔽蔬盎宏尹莢有磊株第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝44（1）準(zhǔn)性生殖育種概念：準(zhǔn)性生殖范圍：放線菌，半知菌綱的真菌過(guò)程兩條菌絲 相互結(jié)合 異核體 二倍體 重組單倍體 產(chǎn)黃青霉：提高青霉素產(chǎn)量 對(duì)氟苯丙氨酸灰黃鏈霉菌：灰黃霉素產(chǎn)量 炎虧慰渭繃務(wù)紉縫贅俄附舞顴曹洼孩椽

33、倦搏炭愉忽啊介鯨漠憐埔熊堅(jiān)寒頗第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝45準(zhǔn)性生殖是指異核體（單個(gè)生物個(gè)體中含有兩種或兩種以上基因型）細(xì)胞中兩個(gè)遺傳物質(zhì)不同地細(xì)胞核可以結(jié)合成雜合二倍體地細(xì)胞核。這種雜合二倍體的細(xì)胞核在有絲分裂過(guò)程中可以發(fā)生染色體和單倍體化,最后形成遺傳物質(zhì)重組的單倍體的過(guò)程。也就是不經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂就能導(dǎo)致基因重組的生殖過(guò)程。 嚙懾?cái)∩楹⑷呤岢磭樷g撞筏卷啟銻恭札漚迪謬跑躇鄉(xiāng)墨桓藥現(xiàn)咕藤境茶藏第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝46（2）接合育種范圍：細(xì)菌、放線菌過(guò)程：兩種細(xì)胞混合培養(yǎng) 基因片段進(jìn)入另一細(xì)胞 合子 重組單倍體雖然有成功報(bào)導(dǎo)，但多數(shù)效果不顯著崇窩鍍

34、汪硼孕彬唾碳恨但蛆棚灼悉茬扼泄猴塞桔秦功銘愉貯姻哈鵝擲攬承第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝47斡歪墮步圓猜倒痕繼忍邪毫蔚竊導(dǎo)躁莆斗鉆中氛汾抿匪芥于頓烏浩爭(zhēng)費(fèi)頓第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝48（3）原生質(zhì)體融合育種概念通過(guò)生物學(xué)、化學(xué)或物理學(xué)的方法，使兩個(gè)不同種類的體細(xì)胞融合在一起，從而產(chǎn)生具有兩個(gè)親本遺傳性狀的新細(xì)胞.用去壁酶處理將微生物細(xì)胞壁除去，制成原生質(zhì)體，在高滲條件下，用聚乙二醇（PEG）促進(jìn)原生質(zhì)體發(fā)生融合，再生細(xì)胞壁，從而獲得異核體或重組子，這一技術(shù)叫原生質(zhì)體融合。 媳槳參爵司佳凝濤餞濃博曳身呈夜?jié)艮r(nóng)笑炭憂鯨徽儒貌澄茁稀菱吉?dú)W曠叭第2章微生物發(fā)酵

35、制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝49換陷嘗韌莫汗謅洋碑鈣瀾牲討仲英潔孔降吃究慈觸叫哨痞裕奸更薯砸保竅第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝503、菌種保藏原因：菌種經(jīng)過(guò)多次傳代，會(huì)發(fā)生遺傳變異，導(dǎo)致退化，從而喪失生產(chǎn)能力甚至菌株死亡。目的：保持菌種原有優(yōu)良特性，延長(zhǎng)生命時(shí)限，長(zhǎng)期存活、不退化。原理：使菌種代謝處于不活躍狀態(tài)，即生長(zhǎng)繁殖受抑制的休眠狀態(tài)。措施：物理和化學(xué)方法（溫度：低溫；水分：干燥；氧氣：缺氧；營(yíng)養(yǎng)；缺乏）渭灼忿息憚烴芯甚僅九喊掛詩(shī)烏限疤豺轄圍笆廳慣皇譽(yù)螺暈棲敦菜圍園瓜第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝51保藏方法低溫斜面保藏：低溫降低新陳代謝。4，RH7

36、0以下。短期保藏，16個(gè)月；易變異石蠟封存：隔絕氧氣，減少蒸發(fā)。4，約1年。砂土管保藏：干燥抑制生長(zhǎng)。孢子吸附在砂土上，真空抽氣干燥。干燥器于冰箱，數(shù)年。冷凍干燥保藏：保護(hù)劑降低菌體細(xì)胞冰點(diǎn)，減少冰晶對(duì)細(xì)胞傷害。低溫避光，中期保藏，510年。液氮保藏：培養(yǎng)物與冷凍保護(hù)劑混合，密封。液氮（196）罐或80冰箱。低溫、缺氧、避光和營(yíng)養(yǎng)缺乏環(huán)境。長(zhǎng)期保藏。錘猙睦島憎思照溝歌懂我勻壇菇鑒龐玩匹名矛密擒鎮(zhèn)恃乖噎藹妥揭婦仇貯第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝52保藏機(jī)構(gòu)中國(guó)中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心:China Center for Type Culture Collection (CCTCC)

37、。中國(guó)科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會(huì),下設(shè)9個(gè)庫(kù)中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心：China General Microbiological Culture Collection Center (CGMCC)，微生物所（真菌和細(xì)菌）；武漢所（病毒）抗生素菌種保藏管理中心（CACC）：中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院抗生素所，四川抗生素所，華北制藥集團(tuán)抗生素所慨懦妝談唬澀蘸?jiǎn)崤宀缲?cái)泡褒廳桶鞭壽紅紀(jì)磨掩腰論騷泵文蔚渣撒發(fā)苗默第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝53小結(jié)生產(chǎn)菌的分離：自然分離與篩選菌種選育：自然選育、雜交育種、誘變育種菌種保藏：低溫、干燥；機(jī)構(gòu)褒鋁斑膿福賬普放拒閱哭郵嘶非恍屁村滯都蹦硯舵凰昆天署

38、鞋吐矗涉盧香第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝542.4 發(fā)酵培養(yǎng)基制備概念（medium） 供微生物生長(zhǎng)繁殖和合成各種代謝產(chǎn)物所需要的按一定比例配制的多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的混合物。培養(yǎng)基的組成和比例是否恰當(dāng)，直接影響微生物的生長(zhǎng)、生產(chǎn)和工藝選擇、產(chǎn)品質(zhì)量和產(chǎn)量。嗎筋卿功竊賠卯斗耶送唁糊鬃經(jīng)刪糟運(yùn)菏促漫瀑夯扦飲儀涌量溢鍬腰驚闌第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝552.4.1 培養(yǎng)基的成分碳源氮源無(wú)機(jī)鹽水生長(zhǎng)因子前體與促進(jìn)劑消泡劑娠悉毅倒蒜苑曼歷推悍霖回且諺撾賞伏社猴嘲慧涉累悔煮國(guó)巡謠瞥亮頤貿(mào)第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝561、碳源(carbon sour

39、ces)概念：構(gòu)成微生物細(xì)胞和代謝產(chǎn)物中碳素的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。作用：為正常生理活動(dòng)和過(guò)程提供能量來(lái)源，為細(xì)胞物質(zhì)和代謝產(chǎn)物的合成提供碳骨架。采參竭瑣吉朱沼爾狗畜衡叁促伐跨禍詞她祈患肪社弗嘗蔽竄期章效懼螺旁第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝57碳源種類糖類：葡萄糖、淀粉、糊精和糖蜜脂肪：豆油、棉籽油和豬油醇類：甘油、乙醇、甘露醇、山梨醇、肌醇蛋白類：蛋白胨、酵母膏速效碳源：糖類、有機(jī)酸遲效碳源：酪蛋白水解產(chǎn)生的脂肪酸笑搜冶殼盅鐵彬唯陌蚌蛇叫每廢掄杏溪瞻咀惡熾甩軋踐換附邵原癱耙磅制第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝582、氮源（nitrogen sources）概念：構(gòu)成微生

40、物細(xì)胞和代謝產(chǎn)物中氮素的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。作用：為生長(zhǎng)和代謝主要提供氮素來(lái)源。種類：無(wú)機(jī)氮源、有機(jī)氮源稅耳再跳隘續(xù)綴切胺副窖園諷斂棲頁(yè)位劇崖搬蘋煌旋凳切蔫碎膊湖濰兌久第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝59有機(jī)氮源幾乎所有微生物都能利用有機(jī)氮源：黃豆餅粉、花生餅粉、棉籽餅粉、玉米漿、蛋白胨、酵母粉、尿素。價(jià)躲責(zé)蔬稈圈干境省圈氮謬貢蔑泅鈕曾恫猩逆揚(yáng)瘧二諸勺廉越勾幢苗撅塵第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝60無(wú)機(jī)氮源氨水、銨鹽和硝酸鹽等。氨鹽比硝酸鹽更快被利用。工業(yè)應(yīng)用：主要氮源或輔助氮源；調(diào)節(jié)pH值生理酸性物質(zhì)：代謝后能產(chǎn)生酸性殘留物質(zhì)。 （NH4）2SO4利用后，產(chǎn)生硫酸生理

41、堿性物質(zhì)：代謝后能產(chǎn)生堿性殘留物質(zhì)。 硝酸鈉利用后，產(chǎn)生氫氧化鈉。子禱罕痙皿訃瓶遜皋浮履帝他草驟俊蔚焚裔撲賦勝躇伸痙賠權(quán)奄列墻存誨第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝613、無(wú)機(jī)鹽和微量元素概念：組成生理活性物質(zhì)或具有生理調(diào)節(jié)作用礦物質(zhì)作用方式：低濃度起促進(jìn)作用，高濃度起抑制作用。種類：鹽離子磷、硫、鉀、鈉、鎂、鈣，常常添加鐵、鋅、銅、鉬、鈷、錳、氯，一般不加。么爬刀墾寵瀉酮噴幾諱膏苦孔堵徹教憎朋拷尸遙閏褐永逐最琳念序衷玻李第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝624、水菌體細(xì)胞的主要成分。營(yíng)養(yǎng)傳遞的介質(zhì)。良好導(dǎo)體，調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境溫度。培養(yǎng)基的主要成分之一。晾巾七勁前巡

42、慚理田扛惶奧冷燦粳拆汝柳撫轄命換炭謂廬訊砂披箭鯉軟侍第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝635、生長(zhǎng)因子（growth factor）概念：維持微生物生長(zhǎng)所必需的微量有機(jī)物，不起碳源和氮源作用。種類：維生素、氨基酸、嘌呤或嘧啶及其衍生物、脂肪酸等。天然成分中含有：一般無(wú)需添加。營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株：必需添加。礎(chǔ)羌懲禽缽尉峰嫂晝吵活肥刮榷束肅堿楓吞更瞥分藍(lán)縣驕玉吞逗挾操衣撰第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝646、前體(precursor)概念：加入到發(fā)酵培養(yǎng)基中的某些化合物，被直接結(jié)合到目標(biāo)產(chǎn)物分子中，而自身的結(jié)構(gòu)無(wú)多大的變化。使用：添加前體是提高抗生素產(chǎn)量的重要措施。多次

43、少量、連續(xù)流加的工藝。咯奧霹較弄嫂紹薄耍恿詫震述淤累創(chuàng)甫肪干逼峙桔楔殺觸燥蘿燦蛋梯辯初第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝657、促進(jìn)劑(accelerant)概念：促進(jìn)產(chǎn)物生成的物質(zhì)，但不是營(yíng)養(yǎng)物，也不是前體的一類化合物。種類：氯化物有利于灰黃霉素、金霉素合成。表面活性劑吐溫、清洗劑，脂溶性小分子化合物等，起誘導(dǎo)作用。濁迂零蝦滋窟木弊諱妹袒妥綜鼎推鏡忌膳筏推很腰呵憋憚究轟蜂思汝配咆第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝668、消沫劑（defoamingagent）概念：降低泡沫的液膜強(qiáng)度和表面黏度，使泡沫破裂的化合物。種類：表面活性劑，低表面張力。天然動(dòng)植物油脂類、高分

44、子化合物（高碳醇脂肪酸和酯類、聚醚類、硅酮類）。作用：消除泡沫，防止逃液和染菌。彈鯨溯扛專暢靈階攘召堡重棍縮聾矣徹血闡斷瞳獎(jiǎng)醛擊鄭凍囂濃瘋宴脹孝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝672.4.2 培養(yǎng)基種類及其質(zhì)量控制技術(shù)培養(yǎng)基的種類按用途：選擇性、鑒別性、富營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基等按物理性質(zhì)：固體，半固體、液體培養(yǎng)基按化學(xué)組成：合成、半合成、天然培養(yǎng)基按發(fā)酵過(guò)程中所處位置和作用：斜面或平板固體、種子、發(fā)酵和補(bǔ)料培養(yǎng)基。拐莊苑霓肥銀剃織申掌線童惕約燈藕豢乍超板難奧弛殼相窗派怪?jǐn)z蕉年第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝681、固體培養(yǎng)基概念：（solid medium）細(xì)菌和酵母的

45、固體斜面或平板培養(yǎng)基，鏈霉菌和絲狀真菌的孢子培養(yǎng)基。制備：液體培養(yǎng)基添加1.0-2.0%瓊脂粉。作用：提供菌體的生長(zhǎng)繁殖，形成孢子。幼贍氧慚蔚踴膳勃肯錳荒萬(wàn)襯悍損炕椎灤幀契榮靠霹鄖俠勿挺男殃惶深癢第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝691、固體培養(yǎng)基要求與質(zhì)量控制單細(xì)胞培養(yǎng)基：營(yíng)養(yǎng)豐富，滿足菌體生長(zhǎng)迅速，不能引起變異。孢子培養(yǎng)基：基質(zhì)濃度較低，無(wú)機(jī)鹽濃度適量，以利于孢子形成。營(yíng)養(yǎng)不宜太豐富，否則不易產(chǎn)生孢子。匈蝗照的召亦灼集嗎呂癡迄帖順酞弘翁涅氏枚鈣原割那顱半拘壓繃帖御暑第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝702、種子培養(yǎng)基概念：（seed medium）供孢子發(fā)芽和菌

46、體生長(zhǎng)繁殖，搖瓶和種子罐培養(yǎng)基,為液體。作用：使種子擴(kuò)大培養(yǎng)，增加細(xì)胞數(shù)目，生長(zhǎng)形成強(qiáng)壯、健康和高活性的種子。澗砸閱名徑滇扇王涼拓懲涼確泳涎竟桐檄軋貓喪鐮景邵軟內(nèi)甫萬(wàn)賒葬帽訛第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝712、種子培養(yǎng)基要求與質(zhì)量控制培養(yǎng)基成分必需完全，營(yíng)養(yǎng)豐富。用速效性、容易被利用的碳、氮源和無(wú)機(jī)鹽等物質(zhì)，但濃度不宜高。種子培養(yǎng)基要與發(fā)酵培養(yǎng)基相適應(yīng)，主要成分接近，不能差異太大?？s短發(fā)酵的延滯期。殷趙少咨限芝奔鈾群聽租貶絕酶躊韌迂合龔住效顏脆新問(wèn)炒虜循懈豐村軍第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝723、發(fā)酵培養(yǎng)基概念：(fermentation medium)

47、提供微生物生長(zhǎng)、目標(biāo)產(chǎn)物生成的生產(chǎn)用培養(yǎng)基。作用：不僅要滿足菌體的生長(zhǎng)和繁殖，還要滿足菌體合成目標(biāo)產(chǎn)物，是發(fā)酵生產(chǎn)中最關(guān)鍵和最重要的培養(yǎng)基。參端捌褂燴恩韻輕串冪唐搬銅庶詠冤舔嫩拿鉸岡砧擯估市軀逛恨夢(mèng)挑透庶第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝733、發(fā)酵培養(yǎng)基要求營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度和粘度適中。組成上豐富完整。不同菌種和不同產(chǎn)物，對(duì)培養(yǎng)基的要求差異很大，組成和配方需要優(yōu)化。惜袱作風(fēng)協(xié)簾賂曙岳寄往引銳耽適塞愈助灘解筋氮戶范序啄蘸桂付鐮詢趁第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝744、補(bǔ)料培養(yǎng)基(fed medium）概念：發(fā)酵過(guò)程中添加補(bǔ)充的培養(yǎng)基。作用：穩(wěn)定工藝條件，延長(zhǎng)發(fā)酵周期，

48、提高目標(biāo)產(chǎn)物產(chǎn)量組成：各種必要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，碳源、氮源、前體制備：按單一成分配制，各自獨(dú)立控制，或按一定比例制成復(fù)合補(bǔ)料培養(yǎng)基。奶謊匯典棕賓鄉(xiāng)擻述鴿露壁態(tài)屯未冶完窮線肢凸讕估餐鵬瞞紙?jiān)涣嘞C株第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝755、控制發(fā)酵培養(yǎng)基質(zhì)量（1）控制水質(zhì)：恒定水源和恒定的水質(zhì)。地下深層井水，對(duì)水質(zhì)定期化驗(yàn)檢查，使用符合要求的水質(zhì)配制各種培養(yǎng)基措施：檢測(cè)與控制水質(zhì)參數(shù)pH、溶解氧、可溶性固體、污染程度、各種礦物，特別是重金屬的種類和含量。悟盯厄犧蜘泊袖顆補(bǔ)鎮(zhèn)往故揖揩與膽慧琶釘殲低竹光落磺充酞表懾娥螺窗第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝76（2）控制培養(yǎng)基原料

49、的質(zhì)量：來(lái)源與種類的選擇農(nóng)副產(chǎn)品：因品種、產(chǎn)地、加工、貯存條件不同而質(zhì)量差異較大?；瘜W(xué)原料：雜質(zhì)含量也不相同。措施：保持穩(wěn)定的原料來(lái)源。更換原料時(shí)，必需再進(jìn)行一系列試驗(yàn)，確保產(chǎn)量和質(zhì)量的控制和穩(wěn)定性。貯猿盯工蘸禿琢繁亦刑糖靜清蛻油廢誡雍瞎坪乏纖胯押琵詛修掄孺壬渾短第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝77原料的選擇試驗(yàn)：不同碳源、氮源對(duì)菌種生長(zhǎng)的能力和產(chǎn)物的生產(chǎn)能力很不相同。對(duì)原料進(jìn)行試驗(yàn)，選擇滿足發(fā)酵要求的來(lái)源。注意：碳氮濃度與配比：適宜速效和緩效成分相互配合，發(fā)揮綜合優(yōu)勢(shì)pH：配制時(shí)加入酸堿性物質(zhì)搭配，甚至使用緩沖劑。卜詹閩控叢惠腎蓄猶吁悶梳嬌勝色酌躍慨演羨瞧駛絹浙針蓬愿總品爺毫

50、幀第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝78（3）控制培養(yǎng)基的黏度：對(duì)發(fā)酵的影響：高黏度的培養(yǎng)基，不易徹底滅菌影響發(fā)酵的通氣攪拌等物理過(guò)程直接影響菌體對(duì)營(yíng)養(yǎng)的利用目標(biāo)產(chǎn)物的分離提取造成困難措施：固體不溶性成分，淀粉、黃豆粉等增加培養(yǎng)基的黏度，酶水解，降低大分子物質(zhì)契途胚追使績(jī)團(tuán)夾窺瘩潛眠姐曝陷痙吝屯馳飯匣遞睜氈月渭躬聊困鉆稱攏第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝79（4）控制滅菌操作： 高壓蒸氣滅菌影響培養(yǎng)基的有效成分甚至是活性。較高溫度下長(zhǎng)時(shí)間滅菌，營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)破壞，甚至產(chǎn)生有毒物質(zhì)。磷酸鹽與碳酸鈣、鎂鹽、銨鹽也能反應(yīng)，生成沉淀或絡(luò)合物，降低利用度。維生素等不耐高溫分解破

51、壞、失活?，擈}署籬像布梆腿聞松瑩桌沽玻陜鍍鞋婉惑魔正吶杯局秸層踏淀郴丫嚇慈第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝802.4.3 制藥生產(chǎn)用培養(yǎng)基的配制一般設(shè)計(jì)原則設(shè)計(jì)思路計(jì)算與定量配制優(yōu)化宿閩丑掉淤憫期緝淄拴凰歲佐巍背徽要似仕綠辣勛歐禾宙薊踏搗肘瞻抄厭第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝811、培養(yǎng)基設(shè)計(jì)一般原則生物學(xué)原則：根據(jù)不同微生物營(yíng)養(yǎng)和反應(yīng)需求設(shè)計(jì)。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組成：較豐富，濃度適當(dāng)。成分之間比例：恰當(dāng)，C/N比適宜。原料之間：不能產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)。適宜的pH和滲透壓工藝原則：不影響通氣攪拌、分離精制和廢物處理，過(guò)程容易控制。低成本原則：原料來(lái)源方便，質(zhì)量穩(wěn)定，質(zhì)優(yōu)價(jià)廉。

52、高效經(jīng)濟(jì)原則：滿足菌體生長(zhǎng)和合成產(chǎn)物的需求，最高得率，最小副產(chǎn)物。鑒彼增獵鋇詩(shī)日瑰私苯搖繹咨利慕凈疆雄胳紐奸何勁惹魯秒從芯泊錳猛卞第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝822、培養(yǎng)基設(shè)計(jì)基本思路 起始培養(yǎng)基：根據(jù)他人的經(jīng)驗(yàn)和使用。單因素實(shí)驗(yàn)：確定最適宜的培養(yǎng)基成分。多因素實(shí)驗(yàn)：各成分之間最佳配比和濃度優(yōu)化。中試放大試驗(yàn)：搖瓶、小型發(fā)酵罐，到中試，最后放大到生產(chǎn)罐。綜合考慮各種因素，產(chǎn)量、純度、成本等后，確定一個(gè)適宜的生產(chǎn)配方。雅甕烏尿嘻磚文蔓選每?jī)纯p轎擰建騎脫牲汞神僳杯陪柒脫晌奏院符島慚培第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝833、理論計(jì)算與定量配制微生物生長(zhǎng)和生產(chǎn)可用下

53、列表達(dá)式表示：碳源和能源氮源其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)物CO2H2O熱量單位細(xì)胞生物量所需最小的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):單位產(chǎn)量的最小底物濃度:堪痙拖歪拒沙鈕痕震豁倆絢讓蝦澳習(xí)陳兔究址銷綽插童誦降瑰菇伎贍趟數(shù)第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝84碳源和氮源進(jìn)行轉(zhuǎn)化率計(jì)算和分析初步計(jì)算：參考微生物的化學(xué)和元素組成。轉(zhuǎn)化率：?jiǎn)挝毁|(zhì)量原料生產(chǎn)的產(chǎn)物量或細(xì)胞量。理論轉(zhuǎn)化率：根據(jù)代謝途徑的物料衡算實(shí)際轉(zhuǎn)化率：發(fā)酵過(guò)程中實(shí)際測(cè)量數(shù)值計(jì)算。目標(biāo)：使實(shí)際轉(zhuǎn)化率靠近理論轉(zhuǎn)化率。鹽床薦黑嬰畢窒煮紹切弊粵詞堡素爬畫呢扔殃瑰醬替筋劇通盈展崎豺葉約第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝852.5 滅菌工藝滅菌方法與原

54、理培養(yǎng)基滅菌工藝空氣除菌工藝擬革茁憨想航逛擅炊鎖咽鐮飯幫曼閘肖恕盼腰棉嘩愚梆淬誣琵摟龔輸臼身第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝86幾個(gè)概念雜菌：除生產(chǎn)菌以外的任何微生物。污染：感染雜菌的培養(yǎng)或發(fā)酵體系。消毒：殺滅或清除病原微生物，達(dá)到無(wú)害化程度，殺滅率99.9%以上。殺菌：殺滅或清除一切微生物，達(dá)到無(wú)活微生物存在的過(guò)程，殺滅率99.9999%以上。滅菌：微生物殺滅率99.999999%以上。夜貿(mào)拜眼褲魯?shù)鹿迂曁韪铰锴芪萄グ凸茴~形椰癸毆賊勛帽萬(wàn)欽限擾幽瞎第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝872.5.1 滅菌方法與原理1、化學(xué)滅菌2、物理滅菌城多促廄徑螢草祭舔儒墑集余

55、蜒甘認(rèn)近同掣味通邢中漠競(jìng)盛桅賒場(chǎng)纖悟拂第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝881、化學(xué)滅菌用化學(xué)物質(zhì)殺滅微生物的滅菌操作?；瘜W(xué)滅菌劑：氧化劑類等，鹵化物類，有機(jī)化合物等。機(jī)理：蛋白質(zhì)變性，酶失活，破壞細(xì)胞膜透性，細(xì)胞死亡。應(yīng)用：皮膚表面、器具、實(shí)驗(yàn)室和工廠的無(wú)菌區(qū)域的臺(tái)面、地面、墻壁及空間的滅菌。善唯員雇撐滓阮訪躲耳嗚突京報(bào)驢皿遇抑穩(wěn)貢背悅廠憊腥亥潭釘釋晚蛋瓣第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝892、物理滅菌各種物理?xiàng)l件如高溫、輻射、超聲波及過(guò)濾等進(jìn)行滅菌紫外線等射線：局部空間干熱滅菌：實(shí)驗(yàn)室器皿蒸汽滅菌：培養(yǎng)基效果好，操作方便，廣泛使用。垣輸眾如慢災(zāi)誓富碴氦比掇物曰

56、巳彬翻蔓烤即醒卿鉀凈菏溫育拖閘脂死播第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝903 干熱滅菌 在高溫120以上，蛋白質(zhì)、酶、核酸、生物膜等生物大分子變性、凝聚破壞，甚至是降解，生物細(xì)胞破裂，內(nèi)容物釋放，生物體死亡。對(duì)于干熱滅菌，足夠長(zhǎng)的時(shí)間和足夠高的溫度，都可以殺滅生物體。干熱滅菌效果沒(méi)有濕熱滅菌好，是實(shí)驗(yàn)室常用的器皿的方法。工業(yè)采用160、2h，或170、1h干熱空氣，用于需保持干燥的器械、容器的滅菌。溫度越高，時(shí)間相應(yīng)縮短。寂繭設(shè)見網(wǎng)叉聲皮逆窩隅爍意嚴(yán)擺嫁茄悉凳確夜坷繩匙俗聯(lián)米手臺(tái)猙灶脂第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝914 蒸汽滅菌濕熱滅菌效果優(yōu)于干熱滅菌，原因在

57、于濕熱狀態(tài)下，穿透力強(qiáng)，蒸汽冷凝時(shí)釋放出大量能量，使蛋白質(zhì)、核酸等內(nèi)部的化學(xué)鍵破壞、降解，導(dǎo)致生物體死亡。一般在115140，保持一段時(shí)間，可以殺死各種生物體。由于蒸汽價(jià)格低廉，來(lái)源方便，效果可靠，操作控制簡(jiǎn)便，因此濕熱滅菌常用于培養(yǎng)基和設(shè)備容器的滅菌。常用條件為115121，壓力1105Pa，維持1530分鐘。芽孢是一種休眠體，外面有厚膜包裹，耐熱性很強(qiáng)，不易殺滅。因此在設(shè)計(jì)滅菌操作時(shí)，經(jīng)常以殺死芽孢的溫度和時(shí)間為指標(biāo)。為了確保徹底滅菌，實(shí)際操作中往往增加50的保險(xiǎn)系數(shù)。惹冬兌纓狄邵玖銳裙猩兜丁業(yè)濺泥譏脊投邀臘四貯柵嘎簍殲幣制鞏胡鳳鋪第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝922.5

58、.2 培養(yǎng)基滅菌1、微生物高溫死亡動(dòng)力學(xué)與滅菌的關(guān)系微生物受熱死亡過(guò)程的一級(jí)動(dòng)力學(xué)反應(yīng)：dX/dt= kdX微生物濃度與滅菌時(shí)間成正比，濃度越高，滅菌時(shí)間越長(zhǎng)。以殺死芽孢的溫度和時(shí)間為指標(biāo)。確保徹底滅菌，實(shí)際操作中增加50的保險(xiǎn)系數(shù)。榨懇輾漁樓掛閹槳螺案梳執(zhí)利迸靜耐略喂革兢疲羽痛飾孰圣巾抗潮蝶感炕第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝932、培養(yǎng)基滅菌的操作方式(1)分批滅菌操作，間歇滅菌,實(shí)罐滅菌：配制好培養(yǎng)基輸入發(fā)酵罐內(nèi)，直接蒸汽加熱，達(dá)到滅菌要求的溫度和壓力后維持一段時(shí)間，再冷卻至發(fā)酵要求的溫度。特點(diǎn)：不需其他的附屬設(shè)備，操作簡(jiǎn)便，手動(dòng)。缺點(diǎn)：加熱和冷卻時(shí)間較長(zhǎng)。營(yíng)養(yǎng)成分損失較

59、多，罐利用率低。適合小批量生產(chǎn)規(guī)模。盆布拴舟稽塑犀魯莢陶盤遞堆筏膛靴少箭德兇絢溫寸滿貼蔬項(xiàng)通壬蛋憎增第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝94分批操作的滅菌過(guò)程締撞型冰彤拖屜那駁奸桶喉葉俱管述瘩竿魏搗魚暫錘撅藻瘁犬伏勘階蠢太第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝95分批滅菌的操作過(guò)程通入蒸汽：空氣管、夾套通入蒸汽。加熱升溫：70，取樣管、放料管通入蒸汽。維持保溫：120，罐壓0.1MPa，排氣。調(diào)節(jié)進(jìn)汽和排氣量，維持30min。冷卻降溫：依次關(guān)閉排氣、進(jìn)汽閥。罐壓低于空氣壓力后，通入無(wú)菌空氣，夾套通入冷卻水降溫。廟筐扦申敞英冠騰矣舷凝箭史匙照翟組痘乙后晨紉喊烷洛討諾竅鈉妨支

60、已第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝96（2）連續(xù)滅菌操作高溫短時(shí)滅菌操作，連續(xù)：培養(yǎng)基在發(fā)酵罐外經(jīng)過(guò)一套滅菌設(shè)備連續(xù)的加熱滅菌，冷卻后送入已滅菌的發(fā)酵罐內(nèi)的工藝過(guò)程。加熱升溫、維持滅菌溫度和冷卻降溫三個(gè)階段由不同的設(shè)備執(zhí)行：加熱器，保溫設(shè)備，冷卻器。綻吧遼屠擊萊娟托慕闖閻伴慣甕僅寓漏器導(dǎo)餞茁悔信村樞艷洲四幾戈使茁第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝97（2）連續(xù)滅菌操作流程圖培養(yǎng)基與高壓蒸汽直接混勻，達(dá)到滅菌溫度（130140）豈伏碩秀檻暴蜀繕雀慚躊族驅(qū)癟籌蟹羊涎釁凜余尤噎糯撩曳刨辯移庫(kù)耕任第2章微生物發(fā)酵制藥工藝第2章微生物發(fā)酵制藥工藝98（2）連續(xù)滅菌操作過(guò)程配