基本儀器使用培訓-PPT課件

1、質(zhì)檢科基本檢驗儀器使用pH計使用概述：pH值是水溶液中氫離子活度的方便表示方法。pH值定義為水溶液中氫離子活度的負對數(shù)，即pH=lgaH+。但氫離子活度卻難以由實驗準確測定，為實用方便，溶液的pH值規(guī)定為由下式測定： E-Es pH=pH - K式中 E為含有待測溶液（pH）的原電池電動勢，V;Es為含有標準緩沖液（pHs）的原電池電動勢，V;k為與溫度（t，）有關(guān)的常數(shù)。 k=0.05916+0.000198(t25)pH計使用緩沖液：（亦可購買成套試劑包進行稀釋）3.1.草酸鹽標準緩沖液：精密稱取在543干燥45小時的草酸三氫鉀12.71g，加水使溶解并稀釋至1000ml。3.2.苯二甲酸

2、鹽標準緩沖液：精密稱取在1155干燥23小時的鄰苯二甲酸氫鉀10.12g，加水使溶解并稀釋至1000ml。3.3.磷酸鹽標準緩沖液：精密稱取在1155干燥23小時的無水磷酸氫二鈉3.55g與磷酸二氫鉀3.40g，加水使溶解并稀釋至1000ml。3.4.硼砂標準緩沖液：精密稱取硼砂3.81g(注意避免風化)，加水使溶解并稀釋至1000ml，置聚乙烯塑料瓶中，密塞，避免空氣中二氧化碳進入。pH計使用電極：測定PH值時需選擇適宜的對氫離子敏感的電極與參比電極組成電池。常用的對氫離子敏感的電極（簡稱指示電極）有PH 玻璃電極、氫電極、醌-氫醌電極與銻電極等；參比電極有甘汞電極、銀-氯化銀電極等。最常用

3、的電極為玻璃電極與飽和甘汞電極?，F(xiàn)已廣泛使用將指示電極與參與電極組合一體的復合電極。pH計使用玻璃電極的電位隨溶液中的氫離子濃度變化而發(fā)生變化，稱為指示電極；甘汞電極為參比電極，具有穩(wěn)定的已知電位，作為測定時的標準。玻璃電極是在一支厚玻璃管下端接一個特殊材料玻璃球膜，其下端薄膜的厚度約為0.2mm，球中裝有已知PH值的緩沖液，并有一個電極電位已知的參比電極（常用氯化銀）作為內(nèi)參比，電極的導線絕緣電阻必須大于玻璃膜電阻103以上，否則易引起漏電，使讀數(shù)不穩(wěn)。甘汞電極是由汞、甘汞糊和氯化鉀溶液組成。電極電位隨氯化鉀濃度不同可分為三種，即飽和甘汞電極，1mol/L甘汞電極與0.1mol/L甘汞電極。

4、它們的電極電位各不相同，而且受溫度影響，特別是飽和甘汞電極受影響最大，但由于制備簡單，目前仍是最實用的參比電極。pH計使用操作方法：由于各酸度計的精度與操作方法有所不同，應嚴格按各儀器說明書與注意事項進行操作，并遵從下列規(guī)范。測定之前，按各品種項下的規(guī)定，選擇兩種標準緩沖液（PH相差約三個單位），使供試液的PH值之間。開機通電預熱數(shù)分鐘，調(diào)節(jié)溫度補償至室溫（有的可能不需調(diào)零），選擇與供試液PH值較接近的標準緩沖液進行校正（定位），使儀器讀數(shù)與標示PH值一致，再用另一種標準緩沖液進行核對，誤差應不大于0.02pH單位。如大于此偏差，則應仔細檢查電極，如已損壞，應更換；否則，應調(diào)節(jié)斜率，使儀器讀數(shù)

5、與第二種標準緩沖液的標示PH 值相符合。重復上述定位與核對操作，直至不需調(diào)節(jié)儀器，讀數(shù)與兩標準緩沖液的標示PH值相差不大于0.02pH 單位。按規(guī)定取樣或制備樣品，置小燒杯中（使樣品溫度成室溫），用純化水淋洗電極數(shù)次，并用濾紙吸干，將電極浸入供試液中，輕搖供試液平衡穩(wěn)定后，進行讀數(shù)。pH計使用標準緩沖液的標準pH值(見表)：如果某些酸度計沒有溫度補償裝置時，應查閱下表。pH計使用注意點：1.所用酸度計的精密度和準確度應符合要求，每年檢定一次。2.取與供試液的pH值較接近的第一種標準緩沖液對儀器進行校正（定位）。3.儀器定位后，再用第二種標準緩沖液核對儀器示值，誤差應不大于0.02pH單位。若大

6、于此偏差，則應小心調(diào)節(jié)斜率，使示值與第二種標準緩沖液的表列數(shù)值相符。重復上述定位與斜率調(diào)節(jié)操作，至儀器示值與標準緩沖液的規(guī)定數(shù)值相差不大于0.02pH單位。否則，須檢查儀器或更換電極后，再行校正至符合要求。pH計使用4.每次更換標準緩沖液和供試液前，應用純水充分洗滌電極，然后用濾紙角將水吸盡，也可用所換標準緩沖液或供試液洗滌。5.供試液的pH值大于9時，應選用適宜的無鈉誤差的玻璃電極進行測定。有些電極反應速度較慢，尤其測定某些弱電解質(zhì)（如水）時，必須將供試液輕搖均勻，平衡穩(wěn)定后再進行讀數(shù)。6.對弱緩沖液或無緩沖作用溶液的pH值測定，除另有規(guī)定外，先用苯二甲酸鹽標準緩沖液校正儀器后測定供試液，并

7、重取供試液再測，直至pH讀數(shù)在1分鐘內(nèi)改變不超過0.05為止；然后再用硼砂標準緩沖液校正儀器，再按上述方法測定；兩次pH值的讀數(shù)相差應不超過0.1，取兩次讀數(shù)的平均值為其pH值。7.配制標準緩沖溶液和溶解供試品的水，應是新沸過并放冷的純化水，其pH值應為5.57.0。8.標準緩沖液一般可保存23個月，但發(fā)現(xiàn)有渾濁、發(fā)霉或沉淀等現(xiàn)象時，不能繼續(xù)使用。9.儀器讀數(shù)開關(guān)、玻璃電極的導線插頭與電極架均應保持干燥，潮濕易引起漏電，接觸不良易使讀數(shù)不穩(wěn)。注意操作環(huán)境溫度，溫度對電極電位影響較大，溫度補償調(diào)節(jié)鈕的緊固螺絲是經(jīng)過校準的，切勿使其松動，否則應重新校準。10.新玻璃電極應在水中浸泡24小時后再用，

8、以穩(wěn)定其不對稱電位，降低電阻，平時浸泡在水中，下次使用時可以很快平衡使用（復合電極宜浸泡在3mol/L氯化鉀溶液中）。玻璃電極球泡中的緩沖液不應有氣泡，應與內(nèi)參比電極接觸。在電極架上應高于甘汞電極，以免觸及容器。甘汞電極中應充滿飽和氯化鉀溶液，不得有氣泡隔斷溶液，鹽橋中應保持有少量氯化鉀晶體，但不可結(jié)塊堵塞陶瓷滲出孔。玻璃電極的球膜極易破損，切勿觸及硬物。有時破損后從外觀辨別不出來，可用放大鏡仔細觀察，或用不同的緩沖液核對其電極響應。有時雖未破損，但玻璃球膜內(nèi)的溶液發(fā)生混濁，電極響應值不符合要求，即不可再用。pH計使用11.復合電極應在使用一年后進行更換，并做好標記。12.堿性的PH緩沖液，配

9、制后應分裝在若干個50ml聚乙烯瓶中，瓶蓋嚴密蓋緊，在冰箱中冷藏保存，目的是防止反復開啟瓶塞，使二氧化碳進入標準溶液后形成碳酸，降低其pH值。使用時，取出1小瓶緩沖溶液，放置室溫后，倒出適量于小燒杯中備用。緩沖液使用后不得再倒回原瓶中，以免污染。13.每天第一個分析員使用pH計時，應更換新鮮的緩沖液校準儀器；且每次使用，需選擇適宜的緩沖液進行儀器校準。紫外分光光度計概述 有機化合物分子結(jié)構(gòu)中如含有共軛體系、芳香環(huán)等發(fā)色基團，均可在紫外區(qū)（200400nm）或可見光區(qū)（400800nm）產(chǎn)生吸收。通常使用的紫外可見分光光度計的工作波長范圍為190900nm。 單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時，在一定

10、的濃度范圍內(nèi)被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度（光路長度）成正比，其關(guān)系如下式： A=lg1/T=ECL E為吸收系數(shù)，采用的表示方法是E1%1cm，其物理意義為當溶液濃度為1（g/ml），液層厚度為1cm時的吸光度數(shù)值；式中A為吸光度；T為透光率；C為100ml溶液中所 含被測物質(zhì)的重量（按干燥品或無水物計算），g；L為液層厚度，cm。紫外分光光度計3.儀器的校準與鑒定波長：由于溫度變化對機械部分的影響，儀器的波長經(jīng)常會略有變動，因此除應定期對所用的儀器進行全面校正檢定外，還應于測定前校正測定波長。常用汞燈中的較強譜線，或用儀器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線進行校正，

11、鈥玻璃，也可作波長校正用，但因來源不同或隨著時間的推移會有微小的變化，使用時應注意。吸光度的準確度：吸光度的準確度可用重鉻酸鉀的硫酸溶液檢定。雜散光的檢查可按下表所列的試劑和濃度，配制成水溶液，置1cm石英吸收池中，在規(guī)定的波長處測定透光率，應符合表中的規(guī)定。碘化鈉 亞硝酸鈉紫外分光光度計對溶劑的要求含有雜原子的有機溶劑，通常均具有很強的末端吸收。因此，當作溶劑使用時，它們的使用范圍均不能小于截止使用波長。例如甲醇、乙醇的截止使用波長為205nm。另外，當溶劑不純時，也可能增加干擾吸收。因此，在測定供試品前，應先檢查所用的溶劑在供試品所用的波長附近是否符合要求，即用1cm石英吸收池盛溶劑，以空

12、氣為空白（即空白光路中不置任何物質(zhì)）測定其吸光度。溶劑和吸收池的吸光度，在220240nm范圍內(nèi)不得超過0.40，在241250nm范圍內(nèi)不得超過0.20，在251300nm范圍內(nèi)不得超過0.10，在300nm以上時不得超過0.05。紫外分光光度計測定法測定時，除另有規(guī)定外，應以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照，采用1cm的石英吸收池，在規(guī)定的吸收峰波長2nm以內(nèi)測試幾個點的吸光度，或由儀器在規(guī)定波長附近自動掃描測定，以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確，除另有規(guī)定外，吸收峰波長應在該品種項下規(guī)定的波長2nm以內(nèi)，并以吸光度最大的波長作為測定波長。一般供試品溶液的吸光度讀數(shù)，以在0.30.7

13、之間為宜。儀器的狹縫波帶寬度應小于供試品吸收帶的半寬度的十分之一，否則測得的吸光度會偏低；狹縫寬度的選擇，應以減小狹縫寬度時供試品的吸光度不再增加為準，由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測定供試品的吸光度后應減去空白讀數(shù)，或由儀器自動扣除空白讀數(shù)后再計算含量。當溶液的pH值對測定結(jié)果有影響時，應將供試品溶液的pH值和對照品溶液的pH值調(diào)成一致。紫外分光光度計注意點：1.測定前，應先檢查所用的溶劑，在測定供試品所用波長附近是否符合要求，并不得有干擾吸收峰。具體做法可用1cm石英吸收池盛溶劑，以空氣為空白(即空白光路中不置任何物質(zhì))，測定其吸收度，應符合下列表中的規(guī)定。每次測定時應采用同一廠

14、牌批號，混合均勻的同批溶劑。2.除另有規(guī)定外，測定時應以配制供試品溶液的同瓶溶劑為空白對照，采用1cm的石英吸收池，并在規(guī)定的吸收峰波長2nm以內(nèi)處再測幾個點的吸收度，以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確。紫外分光光度計3.除另有規(guī)定外，吸收峰波長應在該品種項下規(guī)定的波長2nm以內(nèi)。否則應考慮該試樣的真?zhèn)?、純度以及儀器波長的準確度，并以吸收度最大的波長作為測定波長。4.一般供試品溶液的吸收度讀數(shù)，以在0.30.7之間為宜。儀器的狹縫波帶寬度應小于供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度會偏低。棱鏡分光儀器常用狹縫實際寬度表示，一般在0至2或3mm范圍內(nèi)可調(diào)。光柵分光儀器常用單色光的譜帶寬表示狹縫

15、寬度。一般在0至5mm范圍內(nèi)可調(diào)。狹縫寬度的選擇，應以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準。紫外分光光度計5.由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測定供試品的吸收度后應減去空白讀數(shù)再計算含量。6.取吸收池時，拿毛玻璃的兩面，透光面要用擦鏡紙由上而下擦凈干凈，檢視應無殘留溶劑，為防止溶劑揮發(fā)后溶質(zhì)殘留在池子的透光面上，可先用醮有空白溶劑的擦鏡紙擦拭，然后再用干擦鏡紙拭凈。使用后及時用水或測定溶劑沖洗干凈，晾干后，防塵保存。所用吸收池，使用前應先配對試驗并用被測溶液沖洗23次，以保證被測溶液濃度不變。紫外分光光度計7.測定供試品吸收度，應重復讀取23次，取其接近值計算含量。8.用作鑒別和檢

16、查項目的方法，分別按各品種項下的方法進行，鑒別項下吸收度讀數(shù)的范圍可根據(jù)配制供試品溶液的準確度及制劑的實際含量確定。9.儀器的光柵，反射鏡絕對不能擦試，否則將損壞儀器光學表面，增加雜散光。10.試驗中所用的量瓶和移液管均應經(jīng)檢定校正，洗凈后使用。紫外分光光度計11.使用的石英吸收池必須潔凈。當吸收池中裝入同一溶劑，在規(guī)定波長測定各吸收池的透光率，如透光率相差在0.3%以下者可配對使用，否則必須加以校正。12.裝樣品溶液的體積以池體積的4/5為度，使用揮發(fā)性溶液時應加蓋。吸收池放入樣品室時應注意放入方向相同。13.一般情況下，供試品測定需要做平行試驗2份，平行操作，每份結(jié)果對平均值的偏差應在0.

17、5%以內(nèi)，做鑒別可取樣品1份。旋光儀使用注意1.每次測定前應以溶劑作空白校正，測定后，再校正一次，以確定在測定時零點有無變動；如第2次校正時發(fā)現(xiàn)零點有變動，則應重新測定旋光度。2.配置溶液即測定時，均應調(diào)節(jié)溫度至200.5（或各藥品項下規(guī)定的溫度）。3.供試的液體或固體物質(zhì)的溶液應充分溶解，供試液應澄清。4.物質(zhì)的比旋度與測定光源、測定波長、溶劑、濃度和溫度等因素有關(guān)。因此，表示物質(zhì)的比旋度時應注明測定條件。旋光儀5.通電開機之前應取出儀器樣品室內(nèi)的物品，各示數(shù)開關(guān)應置于規(guī)定位置。先用交流供電使鈉光燈預熱啟輝，啟輝后光源穩(wěn)定約20 分鐘后再進行測定，讀數(shù)時應轉(zhuǎn)換至直流供電。不讀數(shù)時間如果較長，可置于交流供電，以延長鈉光燈的壽命。連續(xù)使用時，儀器不宜經(jīng)常開關(guān)。6.溫度對物質(zhì)的旋光度有一定影響，測定時應注意環(huán)境溫度，必要時，應對供試液進行恒溫處理后再進行測定（如使用帶恒溫循環(huán)水夾層的測定管）。旋光儀7.測定應使用規(guī)定的溶劑。供試液如不澄清，應濾清后再用；加入測定管時，應先用供試液沖洗數(shù)次；如有氣泡，應使其浮于測定管凸頸處；旋緊測試管螺帽時，用力不要過大，以免產(chǎn)生應力，造成誤差；兩端