CTC在腫瘤診療中的應(yīng)用教學(xué)文案課件

1、循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)在液體活檢中的特殊意義Circulating Tumor Cells韓世強(qiáng)Cancer Res. 2003;63: 3805-11. Breast Cancer Res. 2009;11:R46. Am J Pathol. 2011;178:989-96.循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC）1869年 Aust Med J，Ashworth最早 在轉(zhuǎn)移性癌癥患者血液中觀察到；存在于外周循環(huán)的各類腫瘤細(xì)胞統(tǒng)稱；來(lái)自原發(fā)灶、轉(zhuǎn)移灶或不明部位。大多數(shù)CTC在外周血循環(huán)中會(huì)發(fā)生凋亡，只有少數(shù)CTC才能夠形成轉(zhuǎn)移 “液態(tài)活檢”的標(biāo)記物CTCctDNA(cfDNA)主要指來(lái)自于抗凝的外周血全血，完

2、整的腫瘤細(xì)胞主要指來(lái)自于抗凝血外周血的血漿，片段化的DNA片段一般認(rèn)為來(lái)源于腫瘤原發(fā)灶/轉(zhuǎn)移灶腫瘤瘤細(xì)胞凋亡/壞死釋放的DNA片段活細(xì)胞，一般不宜長(zhǎng)期保存提取純化后的核酸，可以保存可以用于細(xì)胞學(xué)形態(tài)、結(jié)構(gòu)分析；也可以分析細(xì)胞DNA、RNA、蛋白質(zhì)等各類標(biāo)志物一般用于DNA突變監(jiān)測(cè)、甲基化等DNA修飾相關(guān)分析用于病情評(píng)價(jià)、預(yù)后判斷，腫瘤早期診斷潛力不明確用于個(gè)體化治療，腫瘤早期診斷潛力相對(duì)明確還有miRNAs，Peptides， Exosomes（外泌體），Secretomes（分泌物質(zhì)組）等。組織活檢的局限性很多腫瘤患者無(wú)法進(jìn)行手術(shù)穿刺受檢者嚴(yán)重的不合適穿刺自身的臨床風(fēng)險(xiǎn)某些腫瘤解剖位置不便進(jìn)

3、行穿刺腫瘤的異質(zhì)性阿拉伯醫(yī)生Albucasis （936-1013）及其發(fā)明的外科手術(shù)器械Folia Histochem Cytobiol. 2009年47卷2期191-7頁(yè) 但我的一些病友只是定期做CT檢查，并不抽血，是怎么回事呢？如果您朋友的腫瘤對(duì)常見(jiàn)標(biāo)志物都不敏感，那我就沒(méi)辦法抽血查腫瘤了，只能等腫瘤長(zhǎng)到直徑0.5 cm以上再借助CT或MRI檢查發(fā)現(xiàn)。但等腫瘤長(zhǎng)大到肉眼能看到時(shí)，治療效果就很差了。CTC“液體活檢”Breast Cancer：N Engl J Med 351:781-791,2004Prostate Cancer : Lancet Oncol 10:233-239, 20

4、09Colorectal Cancer: J Clin Oncol 26:3213-3221, 2008獲取CTC需要解決的技術(shù)問(wèn)題從紅細(xì)胞和白細(xì)胞中富集惡性腫瘤細(xì)胞將惡性腫瘤細(xì)胞與紅細(xì)胞、白細(xì)胞、正常上皮細(xì)胞、造血干細(xì)胞等區(qū)分開(kāi)來(lái)每10mL血液中可能僅含有幾個(gè)到幾十個(gè)循環(huán)腫瘤細(xì)胞，而10mL血液中含有的白細(xì)胞約有1億個(gè)，紅細(xì)胞有500億個(gè)。三種技術(shù)過(guò)濾法ISET: Isolation by Size of Epithelial Tumor cells8m孔徑過(guò)濾膜，漏檢體積較小的腫瘤細(xì)胞敏感性低梯度密度法腫瘤細(xì)胞和單核細(xì)胞密度小于1.077g/mlCTC純度低，混入較多白細(xì)胞腫瘤細(xì)胞會(huì)遷移至

5、血漿層，而聚集后容易下沉聚蔗糖-泛影葡胺(Ficoll-Hypaque)對(duì)細(xì)胞有毒性免疫磁珠法腫瘤細(xì)胞表面抗原CTC純度低，混入較多白細(xì)胞不能有效排除細(xì)胞碎片假陽(yáng)性和假陰性高Cell Search-免疫磁珠+流式細(xì)胞分析+化學(xué)發(fā)光CTC檢測(cè)的臨床應(yīng)用CTC數(shù)量變化通過(guò)跟蹤血液中CTC的數(shù)量變化，監(jiān)測(cè)腫瘤動(dòng)態(tài)、評(píng)估預(yù)后和治療效果CTM數(shù)量變化通過(guò)跟蹤血液中CTC的數(shù)量變化，監(jiān)測(cè)腫瘤動(dòng)態(tài)、評(píng)估預(yù)后CTC型別變化通過(guò)跟蹤血液中CTC的型別變化，監(jiān)測(cè)腫瘤動(dòng)態(tài)、評(píng)估預(yù)后和治療效果CTC實(shí)時(shí)個(gè)體化治療CTC基因即時(shí)檢測(cè)，指導(dǎo)腫瘤實(shí)時(shí)個(gè)體化治療CTC臨床應(yīng)用一：評(píng)估預(yù)后11治療前一個(gè)周期后N Engl J

6、Med 2004;351:781-91.對(duì)于原發(fā)性肺癌患者，CTC計(jì)數(shù)在有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的肺癌患者中有顯著升高，相關(guān)性優(yōu)于CEA。CTC臨床應(yīng)用二：評(píng)估復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移Clin Cancer Res 2009;15(22)45-male-ESCC（食管鱗狀細(xì)胞癌）12w，CT-骨和皮下轉(zhuǎn)移104w，PET-CT顯示復(fù)發(fā)CTC可動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)，及早發(fā)出腫瘤轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)預(yù)警，結(jié)合血清標(biāo)志物，能更準(zhǔn)確預(yù)測(cè)疾病進(jìn)展。World J Gastroenterol.2015,21(25):7921-8.CTC臨床應(yīng)用二：動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移CTC檢測(cè)的臨床應(yīng)用CTC數(shù)量變化通過(guò)跟蹤血液中CTC的數(shù)量變化，監(jiān)測(cè)腫瘤動(dòng)態(tài)、

7、評(píng)估預(yù)后和治療效果CTM數(shù)量變化通過(guò)跟蹤血液中CTM的數(shù)量變化，監(jiān)測(cè)腫瘤動(dòng)態(tài)、評(píng)估預(yù)后CTC型別變化通過(guò)跟蹤血液中CTC的型別變化，監(jiān)測(cè)腫瘤動(dòng)態(tài)、評(píng)估預(yù)后和治療效果CTC實(shí)時(shí)個(gè)體化治療CTC基因即時(shí)檢測(cè)，指導(dǎo)腫瘤實(shí)時(shí)個(gè)體化治療循環(huán)腫瘤微栓子(CTM)Hui L et al., PLos one, 2013. 循環(huán)腫瘤微栓子又稱循環(huán)腫瘤細(xì)胞團(tuán)，一般由3個(gè)及以上腫瘤細(xì)胞組成。CTM成瘤能力強(qiáng)于單個(gè)CTCCell. 2014, 158: 11101122.CTM的成瘤、轉(zhuǎn)移能力是單個(gè)CTC的23-50倍CTM與預(yù)后評(píng)估J Clin Oncol. 2012;30: 525-32.CTC升高對(duì)于判斷遠(yuǎn)處

8、轉(zhuǎn)移的敏感性達(dá)71%，特異性達(dá)83%CTC計(jì)數(shù)和血清CEA水平在不同切點(diǎn)的診斷價(jià)值CTC檢測(cè)的臨床應(yīng)用CTC數(shù)量變化通過(guò)跟蹤血液中CTC的數(shù)量變化，監(jiān)測(cè)腫瘤動(dòng)態(tài)、評(píng)估預(yù)后和治療效果CTM數(shù)量變化通過(guò)跟蹤血液中CTC的數(shù)量變化，監(jiān)測(cè)腫瘤動(dòng)態(tài)、評(píng)估預(yù)后CTC型別變化通過(guò)跟蹤血液中CTC的型別變化，監(jiān)測(cè)腫瘤動(dòng)態(tài)、評(píng)估預(yù)后和治療效果CTC實(shí)時(shí)個(gè)體化治療CTC基因即時(shí)檢測(cè)，指導(dǎo)腫瘤實(shí)時(shí)個(gè)體化治療CTC分型更精確地評(píng)估療效 Yu M et al., Science , 2013, 339: 580-584.CTC表型轉(zhuǎn)換與病情進(jìn)展相關(guān) Yu M et al., Science , 2013, 339: 5

9、80-584.CTCs檢測(cè)的臨床應(yīng)用CTC數(shù)量變化通過(guò)跟蹤血液中CTC的數(shù)量變化，監(jiān)測(cè)腫瘤動(dòng)態(tài)、評(píng)估預(yù)后和治療效果CTM數(shù)量變化通過(guò)跟蹤血液中CTC的數(shù)量變化，監(jiān)測(cè)腫瘤動(dòng)態(tài)、評(píng)估預(yù)后CTC型別變化通過(guò)跟蹤血液中CTC的型別變化，監(jiān)測(cè)腫瘤動(dòng)態(tài)、評(píng)估預(yù)后和治療效果CTC實(shí)時(shí)個(gè)體化治療CTC基因即時(shí)檢測(cè)，指導(dǎo)腫瘤實(shí)時(shí)個(gè)體化治療CTC指導(dǎo)實(shí)時(shí)個(gè)體化治療CTCs用于檢測(cè)EGFR突變N Engl J Med 2008;359:366-77.sensitivity:96%, specificity:100%CTC用于檢測(cè)肺癌ALK重排J Clin Oncol 2013;31:2273-81.CTC用于檢測(cè)乳腺癌HER2擴(kuò)增吻合率: 97%特異性:100%PNAS. 2004;101:9393-8. 9位患者，原發(fā)灶為HER2擴(kuò)增陰性，疾病進(jìn)展之后檢測(cè)CTC發(fā)現(xiàn)HER2擴(kuò)增陽(yáng)性，對(duì)其中4位采取含赫賽汀治療方案，3位患者疾病緩解。CTC檢測(cè)追蹤乳腺癌患者HER2擴(kuò)增狀態(tài)PNAS. 2004;101:9393-8.CTC的臨床應(yīng)用方向CTC檢測(cè)6、指導(dǎo)用藥3、術(shù)后監(jiān)控1、預(yù)后評(píng)估2、療效監(jiān)測(cè)5、早期篩查4、輔助診斷小 結(jié)個(gè)體化治療時(shí)代腫瘤實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的實(shí)現(xiàn) 需要突破性技術(shù)對(duì)CTC進(jìn)行分離、分型和分析，將腫瘤狀態(tài)實(shí)時(shí)監(jiān)