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1、名詞解釋1細(xì)胞工程:指以生物細(xì)胞或組織為研究對(duì)象,按照人們的意愿進(jìn)行工程學(xué)操作,從而改變 生物性狀,以獲得生物產(chǎn)品,為人類生產(chǎn)和生活服務(wù)的科學(xué)。2去分化(脫分化):在某些特定條件下,分化細(xì)胞的表型不穩(wěn)定,基因活動(dòng)模式發(fā)生可逆 的變化,細(xì)胞脫離原狀態(tài)回復(fù)到分生狀態(tài)3再分化:脫分化細(xì)胞失去分化特征,但在某些特定條件誘導(dǎo)下,可再次開(kāi)始新的分化發(fā)育 進(jìn)程,最終形成各種組織、器官或胚狀體等。4污染:在組織培養(yǎng)過(guò)程中,培養(yǎng)基和培養(yǎng)材料滋生雜菌,導(dǎo)致培養(yǎng)失敗的現(xiàn)象。5褐變:是指組織培養(yǎng)中,由于材料被切割而使多酚氧化酶活化將組織中的酚類物質(zhì)氧化形 成棕褐色的醍類物質(zhì),并向培養(yǎng)基中擴(kuò)散,抑制培養(yǎng)物生長(zhǎng)甚至導(dǎo)致其

2、死亡的現(xiàn)象。6玻璃化:也稱超水化作用,是離體培養(yǎng)過(guò)程中試管苗發(fā)生形態(tài)、生理和代謝異常的現(xiàn)象。7植物細(xì)胞培養(yǎng):在離體條件下對(duì)植物單個(gè)細(xì)胞或小的細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)并使其增殖的技術(shù)。8看護(hù)培養(yǎng):在培養(yǎng)中用一塊活躍生長(zhǎng)的愈傷組織來(lái)哺育單細(xì)胞,從而使其正常分裂、增殖 的方法。9植物原生質(zhì)體:是指除去細(xì)胞壁后裸露的具有生命活力的原生質(zhì)團(tuán)。10條件培養(yǎng)法:在進(jìn)行花粉培養(yǎng)時(shí),利用預(yù)先培養(yǎng)過(guò)花藥的液體培養(yǎng)基,或加入失活的花 藥提取物的合成培養(yǎng)基進(jìn)行花粉培養(yǎng)的方法。11植物胚胎培養(yǎng):是指在無(wú)菌條件下,對(duì)植物的胚及胚器官如子房、胚珠和胚乳進(jìn)行離體 培養(yǎng)的技術(shù)。12種質(zhì):指親代通過(guò)生殖細(xì)胞或體細(xì)胞直接傳遞給子代并決定固有

3、生物性狀的遺傳物質(zhì)。13種質(zhì)保存:指利用天然或人工創(chuàng)造的適宜環(huán)境,借以保存種質(zhì)資源,使個(gè)體中所含有的 遺傳物質(zhì)保持其遺傳完整性,并且有強(qiáng)的生活力,能通過(guò)繁殖將其遺傳特性傳遞下去。14種質(zhì)資源的離體保存:指對(duì)離體小植株、器官、組織、細(xì)胞或原生質(zhì)體等材料,采用限 制、延緩或停止其生長(zhǎng)的處理措施使之保存,在需要時(shí)可重新恢復(fù)其生長(zhǎng),并再生植株的方 法。15同核體:由同一個(gè)生物個(gè)體的親本細(xì)胞融合形成的含有同型細(xì)胞核的融合細(xì)胞。16異核體:由不同種屬或同一種屬的不同個(gè)體的親本細(xì)胞發(fā)生融合所形成的含有不同細(xì)胞 核的融合細(xì)胞。17胚胎移植:對(duì)優(yōu)秀雌性動(dòng)物進(jìn)行超數(shù)排卵處理,在其發(fā)情配種后一定時(shí)間內(nèi)從其生殖道 取

4、出早期胚胎,移植到同期發(fā)情的普通雌性動(dòng)物生殖道的相應(yīng)部位,讓其生產(chǎn)后代的技術(shù)。18胚胎工程:指以動(dòng)物胚胎為研究對(duì)象而產(chǎn)生的一系列技術(shù)操作,如胚胎移植、胚胎冷凍 技術(shù)、胚胎分割、體外胚胎生產(chǎn)、動(dòng)物克隆、性別控制機(jī)基因?qū)氲取?9超數(shù)排卵:在動(dòng)物發(fā)情周期的適當(dāng)時(shí)期,用促性腺激素進(jìn)行處理,誘發(fā)其卵巢上有大量 卵泡同時(shí)發(fā)育并排卵,稱為超數(shù)排卵,簡(jiǎn)稱超排。20胚胎回收:也稱采卵,把胚胎從供體的生殖道中沖洗出來(lái),提供移植或其他胚胎工程研 究應(yīng)用。21體外受精:指把成熟卵母細(xì)胞或未成熟卵母細(xì)胞經(jīng)體外成熟培養(yǎng)后,與體內(nèi)或體外獲能 的精子在體外條件下完成受精的過(guò)程。22試管動(dòng)物:體外受精胚胎移植到母體后獲得的動(dòng)

5、物。23胚胎分割:采用顯微操作系統(tǒng)將步哺乳動(dòng)物附植前的胚胎分成若干個(gè)具有繼續(xù)發(fā)育潛力 部分的生物技術(shù)。24胚胎融合:通過(guò)顯微操作使2枚或2枚以上的受精卵或胚胎發(fā)育成為一枚胚胎的技術(shù),由此發(fā)育而成的個(gè)體稱為嵌合體。25動(dòng)物性別控制:通過(guò)對(duì)動(dòng)物的正常生殖過(guò)程進(jìn)行人為干預(yù),使成年雌性動(dòng)物產(chǎn)出人們期 望性別后代的一門生物技術(shù)。26克?。涸谏飳W(xué)中,是由一個(gè)細(xì)胞或個(gè)體以無(wú)性繁殖方式產(chǎn)生遺傳物質(zhì)完全相同的一群 細(xì)胞或一群個(gè)體;在動(dòng)物繁殖學(xué)中,不通過(guò)精子和卵子的受精過(guò)程產(chǎn)生遺傳物質(zhì)完全相同新 個(gè)體的一門胚胎生物技術(shù)。27干細(xì)胞:是指具有無(wú)限或較長(zhǎng)期的自我更新能力,并能產(chǎn)生至少一種高度分化子代細(xì)胞 的細(xì)胞。2

6、8轉(zhuǎn)基因動(dòng)物:是指通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)將目的基因?qū)肷臣?xì)胞、早期胚胎干細(xì)胞、早期胚 胎,使之整合到受體細(xì)胞的基因組中,經(jīng)發(fā)育而產(chǎn)生的個(gè)體。29轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的常用技術(shù):原核期胚胎顯微注射技術(shù)、反轉(zhuǎn)錄病毒技術(shù)、慢病毒載體技術(shù)、 精子載體技術(shù)、體細(xì)胞核移植轉(zhuǎn)基因技術(shù)、胚胎干細(xì)胞介導(dǎo)技術(shù)。30染色體工程:指人們按照一定的設(shè)計(jì),有計(jì)劃地合成、添加、替換、削減或易位單條染 色體或染色體片段,對(duì)生物染色體組或染色體結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造,以定向改變物種遺傳特性的新 技術(shù)。填空1動(dòng)物細(xì)胞工程實(shí)驗(yàn)室的組成:無(wú)菌操作室、培養(yǎng)室、細(xì)胞學(xué)鑒定室、制備室、儲(chǔ)藏室、清 洗滅菌室2植物細(xì)胞工程實(shí)驗(yàn)室的組成:培養(yǎng)室、溫室3常用的高壓蒸汽滅菌

7、鍋有:立式、臥式、手提式4常用的濾器有:不銹鋼濾器、玻璃漏斗式濾器和微孔濾膜濾器。5CO2培養(yǎng)箱可以提供CO2的濃度是:5%作用是:保持培養(yǎng)液的pH穩(wěn)定6細(xì)胞冷凍最常用的方法是:液氮冷凍保存法7玻璃器皿的清洗順序:浸泡、刷洗、酸洗、沖洗8愈傷組織的形成大致可分為:誘導(dǎo)期、分裂期、分化期9根據(jù)組織學(xué)外觀特征及再生方式,將愈傷組織分成兩類:胚型愈傷組織和非胚型愈傷組 織10離體無(wú)性繁殖類型:腋生枝型、不定芽型、體細(xì)胞胚型和原球莖型。11離體培養(yǎng)中三大技術(shù)難題:污染、褐變、玻璃化12病毒在植株體內(nèi)的擴(kuò)散方式有:胞間連絲:植物細(xì)胞間短距離移動(dòng)維管束輸導(dǎo)組織 系統(tǒng):長(zhǎng)距離轉(zhuǎn)移。13病毒在植株個(gè)體間的傳播

8、分為:介體傳播:是借助生物體的活動(dòng)進(jìn)行的傳播非介體 傳播包括自然接觸、汁液傳播、嫁接傳播、花粉傳播等。14脫除植物病毒的方法:物理方法、化學(xué)方法和生物學(xué)方法物理法脫除病毒中常用:熱處理生物學(xué)法脫除病毒常采用:莖尖分生組織培養(yǎng)15指示植物檢測(cè)病毒時(shí)可采用:汁液感染法、嫁接法16病毒檢測(cè):方法有指示植物法、血清學(xué)法、電鏡檢測(cè)法和分子生物學(xué)檢測(cè)法。17無(wú)病毒苗的保存:離體保存和隔離保存繁殖方法:實(shí)驗(yàn)室離體快繁和田間隔離繁殖。18用于植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的主要有:懸浮培養(yǎng)和固定化培養(yǎng)。植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)有:成批培養(yǎng)、連續(xù)培養(yǎng)和半連續(xù)培養(yǎng)。19細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí),可采用物理或化學(xué)方法實(shí)現(xiàn)同步化物理方法包括:

9、分選法和冷處理法 化學(xué)方法包括:饑餓法和抑制法。20植物細(xì)胞常用的固定方法有:包埋法和吸附法。21原生質(zhì)體分離:機(jī)械分離和酶解分離,現(xiàn)在主要用酶解分離方法。22原生質(zhì)體的純化方法:過(guò)濾離心法、漂浮法和界面法。23原生質(zhì)體融合過(guò)程:原生質(zhì)體接觸、質(zhì)膜融合、細(xì)胞質(zhì)融合和核融合。24誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合時(shí),除了形成雜種細(xì)胞外,還出現(xiàn)異核體、同核體、非對(duì)稱雜種和細(xì) 胞質(zhì)雜種等不同的融合產(chǎn)物。25花藥培養(yǎng)時(shí),選取處于單核期的花藥培養(yǎng)效果較好。26花藥預(yù)處理方法有:溫度預(yù)處理、化學(xué)預(yù)處理和物理預(yù)處理27為了得到可育的純合二倍體植株,需要把單倍體植株的染色體組加倍,常采用秋水仙素 處理。28花粉培養(yǎng)是以單個(gè)花粉

10、粒作為外植體進(jìn)行離體培養(yǎng),需將其從花藥中分離出來(lái),一般采 用機(jī)械擠壓法、自然散落法和機(jī)械游離法來(lái)分離花粉細(xì)胞。29植物胚胎培養(yǎng):是指在無(wú)菌條件下,對(duì)植物的胚及胚器官如子房、胚珠和胚乳進(jìn)行離體 培養(yǎng)的技術(shù)。它包括胚培養(yǎng),胚珠培養(yǎng),子房培養(yǎng).廣義還包括胚乳培養(yǎng),離體授粉。30依據(jù)剝離胚的發(fā)育時(shí)期不同,可將胚培養(yǎng)分為成熟胚培養(yǎng)和幼胚培養(yǎng)。31幼胚培養(yǎng)的關(guān)鍵技術(shù)是:幼胚剝離。幼胚培養(yǎng)中,常見(jiàn)的生長(zhǎng)方式為:胚性發(fā)育、早熟萌發(fā)和愈傷組織32胚乳培養(yǎng)取材的最佳時(shí)期是:旺盛生長(zhǎng)期。花藥培養(yǎng)時(shí),選取處于單核期的花藥培養(yǎng)效 果較好。33植物種質(zhì)資源保存的方式:原生境保存和非原生境保存。34種質(zhì)離體保存包括常溫限制

11、生長(zhǎng)保存、低溫保存、超低溫保存三種方法。35根據(jù)體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)器皿中是否能貼附于支持物生長(zhǎng)的特性,可分為貼附型生 長(zhǎng)細(xì)胞和懸浮型生長(zhǎng)細(xì)兩大類,其中貼附型細(xì)胞大致又可分為成纖維細(xì)胞型、上皮細(xì)胞型、 游走細(xì)胞型和多形細(xì)胞型四類。36動(dòng)物細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí),在細(xì)胞生存全過(guò)程中,經(jīng)歷原代培養(yǎng)期、傳代期、衰退期三個(gè) 階段。37常用的動(dòng)物細(xì)胞原代培養(yǎng)方法:組織塊培養(yǎng)法和分離細(xì)胞培養(yǎng)法。38采用消化分散法分離動(dòng)物細(xì)胞時(shí),常用的消化液為:胰蛋白酶,使用濃度通常為:0.25%。39動(dòng)物細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的基本原則是:慢凍快融。40細(xì)胞冷凍最常用的方法是:液氮冷凍保存法41常用的誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的副黏液病毒科病

12、毒為:仙臺(tái)病毒。42人工誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有:病毒誘導(dǎo)融合、化學(xué)誘導(dǎo)融合和電融合。43雜交瘤技術(shù)的基本原理是將(骨髓瘤細(xì)胞)與(淋巴細(xì)胞)融合,獲得雜交瘤細(xì)胞。44動(dòng)物性別控制途徑:XY精子分離技術(shù)、胚胎性別鑒定法45胚胎移植的基本程序:供體與受體的選擇、供體超數(shù)排卵、受體同期發(fā)情、胚胎回收、 胚胎檢測(cè)及質(zhì)量鑒定、胚胎移植46根據(jù)細(xì)胞分化潛能大小,可將干細(xì)胞分為(全能干細(xì)胞)、(三胚層多能干細(xì)胞)、(單胚 層多能干細(xì)胞)和(單能干細(xì)胞)。47根據(jù)細(xì)胞來(lái)源不同,可將干細(xì)胞分為(胚胎性干細(xì)胞)和(成體干細(xì)胞)兩類。48轉(zhuǎn)基因動(dòng)物新發(fā)展方向:動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器、血液生物反應(yīng)器、膀胱生物反應(yīng)器。4

13、9動(dòng)物染色體工程主要包括:?jiǎn)伪扼w育種、多倍體育種、染色體的顯微操做技術(shù)、人工染 色體技術(shù)。50人工染色體主要有酵母人工染色體、細(xì)菌人工染色體、哺乳動(dòng)物人工染色體。51 染色體加倍是一種動(dòng)物多倍體育種技術(shù),可通過(guò)物理方法、化學(xué)方法和生物學(xué)的方法來(lái) 實(shí)現(xiàn)。物理方法包括溫度休克法和水靜壓法;化學(xué)方法是利用秋水仙素和細(xì)胞松弛素B等化學(xué)物質(zhì)通過(guò)抑制細(xì)胞分裂而獲得同源多倍 體,生物學(xué)方法是主要通過(guò)動(dòng)物雜交獲得異源多倍體,多倍體動(dòng)物具有生存能力強(qiáng)、生長(zhǎng)速度 快等特點(diǎn),而且還具有較好的經(jīng)濟(jì)性狀和潛在的理論研究?jī)r(jià)值。簡(jiǎn)答題1.以升汞消毒為例簡(jiǎn)述從外植體消毒到接種的過(guò)程超凈工作臺(tái):紫外燈照射20-30 min,關(guān)

14、閉后,打開(kāi)風(fēng)機(jī)10 min,開(kāi)始操作。接種人員:洗凈雙手,在緩沖室換好消毒的工作服,戴口罩,換拖鞋。操作前:用酒精棉球擦拭雙手、工作臺(tái)、裝有培養(yǎng)基的培養(yǎng)器皿及放外植體的燒杯。接種工具:用酒精擦拭接種工具,然后在酒精燈火焰上進(jìn)行灼燒滅菌。外植體:75%乙醇浸泡30 s,再用0.1%的升汞中浸泡5-10 min,必要時(shí)可進(jìn)行攪動(dòng), 使植物材料與消毒劑有良好的接觸,然后用無(wú)菌水沖洗3-5次。接種:培養(yǎng)瓶瓶口在酒精燈火焰附近,并在接種前后灼燒瓶口。(夾取外植體時(shí)用力要 適當(dāng),用力過(guò)大外植體易受到傷害;用力過(guò)小外植體易脫落。)接種外植體時(shí),不能碰到培 養(yǎng)瓶瓶口。將消毒后的培養(yǎng)材料迅速放入培養(yǎng)瓶,包好瓶口

15、。操作期間應(yīng)經(jīng)常用70%乙醇 擦拭工作臺(tái)和雙手,接種工具要反復(fù)滅菌,防止交叉污染。結(jié)束:清理和關(guān)閉超凈工作臺(tái)。2 .常用的植物激素有哪些?作用是什么?生長(zhǎng)素類:促進(jìn)細(xì)胞伸長(zhǎng)生長(zhǎng)和分裂的作用,用于誘導(dǎo)愈傷組織形成和根的分化。常 用的生長(zhǎng)素有:(2,4-D)、(IAA)、(IBA)、(NAA)細(xì)胞分裂素類:促進(jìn)細(xì)胞分裂、誘導(dǎo)愈傷組織或器官分化、促進(jìn)側(cè)芽增殖,抑制根的 分化。常用的細(xì)胞分裂素有:6-BA、KT、ZT、2ip赤霉素:主要添加GA3,促進(jìn)幼苗莖的伸長(zhǎng)生長(zhǎng),促進(jìn)胚狀體發(fā)育成小植株。在植物組織培養(yǎng)中,器官發(fā)生的方式有先分化產(chǎn)生芽,芽伸長(zhǎng)后在幼莖的基部長(zhǎng)根,形成完整植株。先分化產(chǎn)生根,再?gòu)母?/p>

16、基部長(zhǎng)出不定芽,形成完整植株。愈傷組織的不同部位分別形成根和芽,然后二者的維管組織再相連,形成完整植株。體細(xì)胞胚胎來(lái)源直接從外植體上產(chǎn)生體細(xì)胞胚胎;由愈傷組織產(chǎn)生(內(nèi)部、表面);懸浮培養(yǎng)中由胚 性細(xì)胞復(fù)合體表面產(chǎn)生;由懸浮培養(yǎng)中游離的單細(xì)胞產(chǎn)生;由單倍體細(xì)胞產(chǎn)生;人工種子的結(jié)構(gòu)如何?具有良好發(fā)育的體細(xì)胞胚,并能發(fā)育成正常完整植株:廣義的體細(xì)胞胚由組織培養(yǎng) 中獲得的體細(xì)胞胚即胚狀體、愈傷組織、原球莖、不定芽、頂芽、腋芽或小鱗莖等繁殖體組 成。人工胚乳,一般由含有供應(yīng)胚狀體養(yǎng)分的膠囊組成,養(yǎng)分包括礦質(zhì)元素、維生素、 碳源及激素等。膠囊之外的包膜稱之為人工種皮,有防止機(jī)械損傷及水分干燥等保護(hù)作用。人

17、工種子的制備胚狀體的誘導(dǎo)及同步化;人工胚乳的制備;人工種皮的制備;人工種子的包埋; 人工種子的貯存與萌發(fā)離體無(wú)性繁殖一般分為哪幾個(gè)階段?簡(jiǎn)述其操作的一般程序。答:離體無(wú)性繁殖一般可分為5個(gè)階段。供體植株的準(zhǔn)備:供體植株應(yīng)生長(zhǎng)旺盛、健壯、無(wú)病蟲(chóng)害,并盡可能生長(zhǎng)在干凈的環(huán)境中。無(wú)菌培養(yǎng)物的建立:獲得無(wú)菌材料并誘導(dǎo)外植體生長(zhǎng)和發(fā)育。包括從供體植株上采取外 植體進(jìn)行消毒、接種及啟動(dòng)外植體生長(zhǎng)等程序。培養(yǎng)物增殖:通過(guò)反復(fù)培養(yǎng)使獲得的數(shù)量有限的嫩枝、芽苗、胚狀體、原球莖等培養(yǎng)物的 總量增加。生根培養(yǎng):將增殖階段形成的無(wú)根芽苗轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上誘導(dǎo)產(chǎn)生不定根,獲得健壯 的具有根、芽、莖的完整小植株。試管苗的

18、移栽及鑒定:將具根試管苗轉(zhuǎn)移到土壤中,使其從離體培養(yǎng)逐步適應(yīng)溫室或田 間生長(zhǎng)環(huán)境。鑒定主要包括商品性狀、健康狀況、遺傳穩(wěn)定性和農(nóng)藝性狀的鑒定。簡(jiǎn)述通過(guò)莖尖分生組織培養(yǎng)獲得無(wú)病毒植株的一般程序。供體植株的選擇:選擇生長(zhǎng)健康、感病程度輕的植株莖尖分生組織的分離:在解剖鏡下分離出適合大小的莖尖,并進(jìn)行簡(jiǎn)單的消毒處理莖尖分生組織的培養(yǎng):方法有固體培養(yǎng)和濾紙橋液體培養(yǎng),常采用無(wú)機(jī)離子濃度低和銨 鹽、鉀鹽濃度高的培養(yǎng)基,進(jìn)行恒溫光照培養(yǎng)。病毒檢測(cè):方法有指示植物法、血清學(xué)法、電鏡檢測(cè)法和分子生物學(xué)檢測(cè)法。無(wú)病毒苗的保存和繁殖:保存的方法有離體保存和隔離保存,繁殖方法有實(shí)驗(yàn)室離體快 繁和田間隔離繁殖。植物單

19、細(xì)胞的分離1)由完整的植物器官中分離單細(xì)胞:從完整的植物器官中分離單細(xì)胞可以采用機(jī)械法或 酶解法。葉肉是分離單細(xì)胞的最好材料2)由愈傷組織中分離單細(xì)胞:從培養(yǎng)的未分化且疏松易碎的愈傷組織中分離單細(xì)胞。植物原生質(zhì)體融合方法有哪些?1)無(wú)機(jī)鹽誘導(dǎo)融合2)高pH值-高鈣法3)聚乙二醇誘導(dǎo)融合4) PEG-高PH-高鈣5) 電融和花藥培養(yǎng)和花粉培養(yǎng)的區(qū)別是什么?1)花藥培養(yǎng):指用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將發(fā)育到一定階段的花藥剝離下來(lái)(切去花絲部 分),接種到培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),最終形成完整植株的過(guò)程。2)花粉培養(yǎng):又稱小孢子培養(yǎng),或游離小孢子培養(yǎng),指在無(wú)菌條件下,將花粉從花藥 中游離出來(lái),使其成為分散或游離態(tài),

20、發(fā)育成單倍體植株。3)就培養(yǎng)材料而言,花藥培養(yǎng)屬于器官培養(yǎng),花粉培養(yǎng)屬于細(xì)胞培養(yǎng)利用秋水仙素誘導(dǎo)花粉植株染色體加倍的方法有哪些?1)小苗處理法:將花粉植株幼苗整體浸泡于一定濃度的無(wú)菌秋水仙素溶液中。2)莖尖 處理法:將秋水仙素均勻涂抹在單倍體植株的頂芽或腋芽上。3)培養(yǎng)基處理法:將秋水仙 素加入培養(yǎng)基中來(lái)培養(yǎng)單倍體外植體或細(xì)胞。簡(jiǎn)述成熟胚的培養(yǎng)過(guò)程。將受精后成熟或未成熟種子或果實(shí),用70%-75%酒精表面消毒消毒幾秒到幾十秒用0.1%升汞溶液或飽和漂白粉溶液消毒5-15min,無(wú)菌水反復(fù)沖洗3次無(wú)菌操作臺(tái)上,直接或在解剖鏡下剝?nèi)∨呓臃N在培養(yǎng)基上,常規(guī)培養(yǎng)簡(jiǎn)述幼胚培養(yǎng)的基本程序。1)取材:取子房,一般取球形胚至魚(yú)雷形胚,培養(yǎng)成功率較高。2)常規(guī)表面消毒3)幼胚剝離:是幼胚培養(yǎng)的關(guān)鍵技術(shù),解剖鏡下,取胚珠、去珠被、取出完整幼胚,注 意剝離時(shí)要保濕、無(wú)菌、操作迅速4)接種培養(yǎng):幼胚剝離后立即接種到培養(yǎng)基上培養(yǎng),一般采用看護(hù)培養(yǎng)。簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)的一般過(guò)程(1)取材:在無(wú)菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種組織細(xì)胞,經(jīng)過(guò)一定的處理后接入培養(yǎng)器皿中;(2)原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng):原代培養(yǎng)主要采用組織塊培養(yǎng)法和分散細(xì)胞培養(yǎng)法;貼壁細(xì)胞的傳代大都采用酶消化法來(lái)進(jìn)行;(3)細(xì)胞純化:自然純化法和人工純化法(酶消化法、機(jī)械刮除法、反復(fù)貼壁法、克隆法、 流式細(xì)胞儀技術(shù)等);(4)細(xì)胞的凍存復(fù)蘇及運(yùn)輸:細(xì)胞

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