數(shù)字PCR培訓(xùn)考試試題

1、數(shù)字PCR培訓(xùn)考試試題單選題1.PCR發(fā)展有三個階段，第三階段是（）A.相對定量B.定性檢測C.絕對定量(正確答案)2.根據(jù)（）以及陽性微滴的比例，分析軟件可計算給出待檢靶分子的濃度或拷貝數(shù)。A.笛卡兒定理B.泊松分布原理(正確答案)C.卡爾丹公式D.海倫公式3.對于數(shù)字PCR技術(shù)，當檢測到的有效液滴數(shù)占生成液滴數(shù)的比例應(yīng)至少大于_時，定量結(jié)果是準確可靠的。（）A20%B50%C72%(正確答案)D99%4.數(shù)字PCR和熒光定量PCR(qPCR)的不同點的描述，錯誤的是（）A.兩者有不同的熒光化學原理和反應(yīng)條件(正確答案)B.dPCR將核酸分子隨機分配進大量獨立的反應(yīng)體系C.dPCR直接給出拷

2、貝數(shù)濃度，qPCR間接給出Cq值D.dPCR是終點熒光檢測，qPCR是實時熒光檢測5.數(shù)字PCR和熒光定量PCR(qPCR)定量方式的比較，錯誤的是（）A.dPCR是直接定量，qPCR是間接定量B.dPCR不依賴外部參照和標準品C.dPCR的動態(tài)范圍大于qPCR(正確答案)D.qPCR的動態(tài)范圍大于dPCR6.關(guān)于數(shù)字PCR的數(shù)學計算，說法錯誤的是（）A.每個微滴中靶標序列的平均拷貝數(shù)CPD=-ln(1-P)B.上述公式中，P為陰性微滴的比例(正確答案)C.反應(yīng)體系的拷貝數(shù)濃度(copy/L)C=CPD/VD.上述公式的V為微滴的平均體積7.使用新羿生物樣本制備儀，30微升體系可制備多少液滴？

3、（）A.1萬B.2萬C.3萬D.不少于5萬(正確答案)8.關(guān)于新羿TD-1數(shù)字PCR系統(tǒng)對樣本的準確定量，下列說法錯誤的是（）A.推薦靶標核酸分子在微滴中的平均含量小于5個拷貝。B.應(yīng)保證每個微滴里不含或者只含有一個靶標核酸分子。(正確答案)C.軟件根據(jù)陰性微滴的比例和泊松分布概率密度函數(shù)準確計算靶分子的濃度。D.為了提高極低拷貝條件下檢測準確性和靈敏度，可以增加樣品的重復(fù)檢測次數(shù)，利用軟件功能進行合并分析。9.關(guān)于新羿生物探針法數(shù)字PCR微液滴生成，下列說法不正確的有（）A.先準備反應(yīng)體系，其中含有引物、探針、樣品及反應(yīng)預(yù)混液，然后將30l上述反應(yīng)體系加入微液滴生成芯片對應(yīng)的孔內(nèi)。B.反應(yīng)體

4、系制備完成，需放置在冰上，最好在1小時內(nèi)完成液滴生成。C.DropMaker樣本制備儀可在3分鐘內(nèi)將8個樣品分別制備成50000個微滴。D.如果制備樣品數(shù)不足8個，必須用水或緩沖液補足至8個。(正確答案)10.關(guān)于新羿生物TD-1數(shù)字PCR系統(tǒng)的下列描述中，不正確的是（）A.不需要配制標準品，不依賴標準曲線B.不依賴Cq值轉(zhuǎn)換，直接定量C.檢測靈敏度低至1拷貝靶標核酸分子，動態(tài)范圍達5個數(shù)量級D.樣本必須為DNA，不能直接對RNA分子定量(正確答案)11.關(guān)于數(shù)字PCR技術(shù)，下列說法錯誤的是（）A.dPCR以油包水微滴作為微PCR反應(yīng)器B.油包水微滴之間彼此是獨立的C.每個微滴要么不含靶標序列

5、，要么僅含有1個拷貝的靶標序列(正確答案)D.油包水微滴體積的均一性對于定量結(jié)果準確性很重要12.關(guān)于新羿數(shù)字PCR實驗過程中對PCR擴增儀的要求，下面說法錯誤的是（）A微滴PCR擴增對PCR儀無特殊要求B推薦使用帶有溫度梯度的PCR儀，便于反應(yīng)條件優(yōu)化C基本上與普通PCR擴增程序無異D升降溫速度在5/s為宜(正確答案)13.下面哪種檢測屬于三級出生缺陷防治檢測：（）A.新生兒耳聾基因突變篩查(正確答案)B.成年人婚前遺傳病篩查C.游離DNA檢測胎兒耳聾基因突變D.孕前隱性遺傳病攜帶者篩查14.以下哪一項不是微液滴數(shù)字PCR的技術(shù)優(yōu)勢（）A.高靈敏度、高特異性B.真正意義上的絕對定量，可統(tǒng)計突

6、變率C.可以發(fā)現(xiàn)未知突變(正確答案)D.實驗數(shù)據(jù)分析便捷多選題15.假陽性(FalsePositive)的來源包括（）A.樣本間交叉污染、氣溶膠(正確答案)B.非特異性擴增(正確答案)C.生化反應(yīng)的隨機性(正確答案)D.樣本的來源及類型16.對于EGFRT790M的液體活檢，采血需要注意（）A.采血至少8ml(正確答案)B.顛倒混勻充分，避免劇烈震蕩血樣(正確答案)C.嚴格血液質(zhì)控，嚴格避免溶血(正確答案)D.全血4儲存，保存期不超過5天E.及時對全血進行血漿分離或采用streck管保存(正確答案)17.目前的研究發(fā)現(xiàn)ctDNA陽性檢出率與哪些因素有關(guān)（）A.癌癥分期(正確答案)B.手術(shù)后檢測

7、時間(正確答案)C.用藥(靶向/放化療)干預(yù)(正確答案)D.采血量、保存和提取方法(正確答案)E.一天內(nèi)的采血時間點(早、中、晚)，年齡、性別(正確答案)18.確保液體活檢可靠性的關(guān)鍵是嚴格的質(zhì)控，必須做到（）A.使用專用的采血管(正確答案)B.使用專用的cfDNA提取試劑盒(正確答案)C.使用穩(wěn)定可靠的dPCR檢測試劑盒(正確答案)D.嚴格設(shè)置對照，包括陽性對照、陰性對照、NTC對照(正確答案)19.新羿TD-1數(shù)字PCR系統(tǒng)有效避免交叉污染的措施有（）A.微滴一旦生成，核酸分子就穩(wěn)定包裹在每個微滴中，外界的核酸分子無法進入微滴，而微滴中的核酸分子也不能逃逸到外界。(正確答案)B.微液滴生成

8、芯片和微液滴檢測芯片上8個通道彼此獨立不交叉。(正確答案)C.微液滴在8聯(lián)排管中生成加蓋密封墊之后，無需手工移液，PCR擴增、微液滴檢測均無開蓋操作，全程封閉。(正確答案)D.微液滴檢測后進入微液滴檢測芯片廢液池，不進入生物芯片分析儀，與其他批次樣本無交叉污染可能性。(正確答案)20.新羿TD-1數(shù)字PCR系統(tǒng)相對于微孔芯片式數(shù)字PCR的優(yōu)勢在于（）A.運行成本低(正確答案)B.能實現(xiàn)高通量，自動化(正確答案)C.可采用普通96孔板PCR儀進行擴增(正確答案)D.提高檢測靈敏度的潛力更大(正確答案)21.新羿TD-1數(shù)字PCR系統(tǒng)運行使用所需消耗品包括（）A.微液滴生成芯片、微液滴檢測芯片及相

9、應(yīng)密封墊(正確答案)B.SuperMix/MasterMix預(yù)混液或一步法RTPCR預(yù)混液(正確答案)C.微液滴生成油和微液滴檢測油(正確答案)D.8聯(lián)排管、8聯(lián)排管蓋(正確答案)E.96孔PCR板和鋁膜22.對cfDNA樣品進行分子檢測的挑戰(zhàn)與難點主要集中在（）A.可擴增的核酸片段含量低(正確答案)B.含有各種PCR擴增的抑制劑(正確答案)C.血樣的保存及純化(正確答案)D.核酸分子的高度片段化(正確答案)23.腫瘤領(lǐng)域是目前數(shù)字PCR主要的應(yīng)用熱點之一，數(shù)字PCR可檢測的腫瘤分子標志物包括（）A.堿基突變(正確答案)B.缺失或拷貝數(shù)變異(CNV)(正確答案)C.microRNA/lncRN

10、A(正確答案)D.基因融合/甲基化程度(正確答案)24.對于病毒的檢測，數(shù)字PCR的優(yōu)勢包括（）A.無需標準品即可絕對定量(正確答案)B.可實現(xiàn)病毒載量的實時監(jiān)測(正確答案)C.對于耐藥突變毒株檢測靈敏度更高(正確答案)D.適合檢測序列變異性大的病毒25.液體活檢(LiquidBiopsy)，對于癌癥病人的個性化醫(yī)療過程的多個環(huán)節(jié)具有重要意義，包括（）A.早期診斷(正確答案)B.轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)或進展的風險評估(正確答案)C.療效實時監(jiān)測(正確答案)D.用藥靶點和耐藥機制的鑒定(正確答案)E.幫助探明腫瘤在病人中的轉(zhuǎn)移過程(正確答案)26.數(shù)字PCR不依賴標準物質(zhì)絕對定量特點，在病原微生物檢測的意義在

11、于（）A.用于標準物質(zhì)的標定，具有計量學意義(正確答案)B.缺乏參考物質(zhì)時，對病原微生物的定量檢測(正確答案)C.提供客觀、量化的可操作性強的判斷閾值(正確答案)D.可在不同實驗室之間直接比較定量結(jié)果(正確答案)27.數(shù)字PCR與二代測序(NGS)比較，下列說法正確的是（）A.數(shù)字PCR(dPCR)可絕對定量，靈敏度更高、成本更低(正確答案)B.數(shù)字PCR(dPCR)數(shù)據(jù)無需復(fù)雜的生物信息學分析(正確答案)C.數(shù)字PCR(dPCR)無需建庫，可避免測序過程中文庫構(gòu)建中引入的偏差(正確答案)D.在腫瘤的精準醫(yī)療實踐中，dPCR與NGS是很好的互補平臺(正確答案)28.數(shù)字PCR在醫(yī)學檢驗領(lǐng)域涉及

12、的應(yīng)用包括（）A.腫瘤分子標志物的定量檢測(正確答案)B.遺傳疾病的檢測(正確答案)C.病原微生物的檢測(正確答案)D.器官移植的早期排異風險預(yù)測(正確答案)29.腫瘤的液態(tài)活檢對于個性化用藥的意義主要在于（）A.可實現(xiàn)無創(chuàng)或微創(chuàng)條件下的檢測(正確答案)B.一定程度上解決組織活檢中存在的異質(zhì)性問題(正確答案)C.可實現(xiàn)腫瘤的重復(fù)檢測，為療效評估和復(fù)發(fā)進展預(yù)測提供信息(正確答案)D.微小殘留病的監(jiān)測(正確答案)30.數(shù)字PCR在PCR終點檢測熒光信號，與qPCR相比具有如下優(yōu)勢（）A.對PCR擴增效率變異敏感度相對降低(正確答案)B.對PCR抑制劑的耐受度相對提高(正確答案)C.不再需要標準品(

13、正確答案)D.不易受干擾，重復(fù)性更好(正確答案)31.目前可在數(shù)字PCR平臺上開展的液態(tài)活檢樣品包括（）A.血漿(正確答案)B.口腔拭子(正確答案)C.腦脊液(正確答案)D.胸水(正確答案)32.新羿生物TD-1數(shù)字PCR可以實現(xiàn)和qPCR測試實驗的無縫對接，下列說法正確的是（）A.dPCR測試實驗的設(shè)計原則可比照qPCR，但是更為嚴格和復(fù)雜B.TagMan、MolecularBeacon等探針方法均適用于dPCR(正確答案)C.新羿生物TD-1數(shù)字PCR兼容EvaGreen染料法(正確答案)33.數(shù)字PCR的操作流程包括（）A.微液滴生成(正確答案)B.微液滴擴增(正確答案)C.微液滴檢測(

14、正確答案)D.數(shù)據(jù)分析(正確答案)34.數(shù)字PCR用于單基因病無創(chuàng)產(chǎn)前檢測的優(yōu)勢：（）A：檢測周期短(正確答案)B：操作流程和數(shù)據(jù)分析簡易(正確答案)C：更低成本檢測(正確答案)D：可以檢測未知基因突變35.數(shù)字PCR在疾病檢測種可兼容多種復(fù)雜類型樣本，如血液、尿液、唾液、口腔拭子等，其原因是：（）A：檢測靈敏度高，對模板量要求低(正確答案)B：通過微流控芯片分割成不同微液滴，獨立進行反應(yīng)，抗干擾能力強(正確答案)C：對PCR抑制劑具有較強耐受性(正確答案)D：定量穩(wěn)定性好(正確答案)36.目前，微滴式數(shù)字PCR的市場應(yīng)用有哪些？（）A.拷貝數(shù)變異分析(正確答案)B.稀有突變檢測(正確答案)C

15、.基因表達分析(正確答案)D.測序文庫定量(正確答案)37.新羿生物生物芯片分析儀采用的“準共焦”光路系統(tǒng)的原理是：（）A.激光在“離焦”的狀態(tài)下激發(fā)微液滴，以獲取更強的熒光(正確答案)B.激光在“共焦”的狀態(tài)下激發(fā)微液滴，以獲取更強的熒光C.液滴熒光在“離焦”的狀態(tài)下被采集，以獲得更低的背景噪聲D.液滴熒光在“共焦”的狀態(tài)下被采集，以獲得更低的背景噪聲(正確答案)38.與熒光成像法相比，“準共焦”熒光檢測系統(tǒng)具備哪些特點：（）A.可采用熒光收集效率更高的物鏡(正確答案)B.具備更高的靈敏度(正確答案)C.具備更高的信噪比(正確答案)D.同一時刻檢測液滴數(shù)目更多39.相比其他現(xiàn)有方法，新羿生物數(shù)字PCR系統(tǒng)采用的基于分水嶺的液滴熒光自動分類算法具備哪些特點：（）A.可廣泛適應(yīng)各種assay(正確答案)B.分類正確率更高(正確答案)C.