第五章血型與輸血學(xué)檢驗

1、第五章血型與輸血學(xué)檢驗KEY POINTS 1.The introduction about blood group, blood group antibodies and the clinical valuation of different blood cell markers.2.The measurement of ABO antigen/antibody, Rh antigen/antibody, irregular antibody and HLA antigen, the testing of blood cell and serum markers under differen

2、t clinical conditions.3.Reasonable transfusion and blood component therapy is the sign of modern transfusion, the traditional and non-traditional clinical application of different blood components.4.The testing of blood cell and serum markers before and after stem cell transplantation.5.The technolo

3、gy and application about autologous transfusion, therapeutic hematopheresis and therapeutic blood components exchange, the testing needed to prevent adverse effects of blood transfusion before transfusion.血型、血型抗原與抗體第一節(jié) 紅細胞血型第二節(jié) 紅細胞血型檢測技術(shù)第三節(jié) 白細胞血型第四節(jié) 血小板血型第五節(jié) 新生兒溶血病第六節(jié) 臨床輸血第七節(jié) 發(fā)展趨勢主 要 內(nèi) 容血型、血型抗原與抗體 血

4、型 是人類血液的主要特征之一，表達了血液各種成分的遺傳性狀。血型抗原分類 1.紅細胞血型抗原: ABO、 Rh、 MNS 等 2.白細胞血型抗原:CD 、HLA等 3.血小板血型抗原:HPA等 4.其他血型抗原血型抗原完全抗體(complete antibody) 在血型抗原物質(zhì)刺激下可形成，與紅細胞生理鹽水懸液混合后能引起紅細胞凝集的特異性抗體。 血型抗體不完全抗體(low-order antibody) 只可使紅細胞致敏而不能使紅細胞凝集的抗體。 血型抗體與紅細胞的表面抗原結(jié)合后，產(chǎn)生血管內(nèi)或血管外溶血。血型抗體(Blood group antibody) 在血型抗原物質(zhì)刺激下可形成的免疫

5、球蛋白。紅細胞血型抗體可分為完全抗體和不完全抗體。第一節(jié) 紅細胞血型是紅細胞上的遺傳性標志。 包括ABO、 Rh、MNS 、 P、 Lutheran、 Kell等。一、ABO血型系統(tǒng) 1901年，Landsteiner發(fā)現(xiàn)了人類的第一個血型系統(tǒng)ABO血型系統(tǒng)，含抗原成分不同將人的紅細胞分成A、B、O和AB四種血型。ABO血型合成 血型物質(zhì)存在的臨床應(yīng)用： a. 測定唾液中的血型物質(zhì)輔助鑒定血型； b.中和ABO血型系統(tǒng)中的“天然抗體” ； c. 預(yù)測胎兒ABO血型等。發(fā)生及分布:胎兒在56周已可測出，表達相對穩(wěn)定。存在于多種細胞的細胞膜和其他體液中。ABO血型分布及存在的意義ABO血型系統(tǒng)獨特

6、的性質(zhì)1.血清存在反應(yīng)強的抗體。2. 組織細胞及各種體液中存在著ABH物質(zhì)。ABO亞型紅細胞上的A抗原1.孟買型：無ABH抗原,血清中有其抗體2.B（A）型和A（B）型：紅細胞上同時存在B抗原和很弱的A抗原，容易誤判為AxB型。 其他特殊類型的ABO亞型 ABO血型的遺傳二、Rh 血型系統(tǒng)概述 抗Rh抗體一般指抗-D。Rh血型抗原及抗體 1. Rh抗原：含D、C、E、c和e五種，D抗原性最強。 2.Rh抗體：主要通過輸血或妊娠免疫而產(chǎn)生。Rh抗體臨床意義：引起輸血反應(yīng)或新生兒溶血病。 亮谷絲蘇甘絲胺酸蘇胺酸谷胺酸亮胺酸甘胺酸亮谷絲蘇甘絲胺酸蘇胺酸谷胺酸亮胺酸甘胺酸Rh血型引起的新生兒溶血三、其

7、它血型. P血型系統(tǒng): P抗原除存在于紅細胞，還存在于纖維母細胞和淋巴細胞上。通常不引起新生兒溶血病和溶血性輸血反應(yīng)。. Kell血型系統(tǒng)： 主要抗原是K和k，引起嚴重溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血病。 . Kidd血型系統(tǒng)：抗原為Jka，Jkb 。第二節(jié) 紅細胞血型檢測技術(shù)凝集反應(yīng)（agglutination）沉淀反應(yīng)（precipitation） 溶血反應(yīng)（hemolysis） 一、凝集反應(yīng) 二、沉淀反應(yīng)三、溶血反應(yīng)（hemolysis）一、紅細胞血型鑒定ABO血型鑒定 Rh血型鑒定MN血型鑒定ABO血型鑒定3結(jié)果判定正定型（細胞定型）抗-A 抗-B 抗-A，B反定型（血清定型）AC BC O

8、C檢測結(jié)果 + + O+ + + A + + + B+ + + AB（二） Rh血型鑒定1原理: （1）單克隆混合試劑檢測法 用Rh各抗血清（IgM+IgG型）試劑通過凝集反應(yīng)對紅細胞上Rh抗原進行鑒定。 （2）酶介質(zhì)檢測法 酶介質(zhì)可破壞紅細胞表面的唾液酸，降低紅細胞表面負電荷，減少細胞間的靜電排斥力，使細胞間的距離縮小，有利于IgG型小分子特異性Rh血型抗體與紅細胞上的Rh抗原反應(yīng)，形成肉眼可見的凝集。返回（三）MN血型鑒定1原理: 用IgM類特異性抗M、抗N單克隆血清來鑒定紅細胞上有無相應(yīng)的M抗原和/或N抗原?？?M抗-N血型基因型MNMNMMNNMN二、交叉配血實驗 概念分類 1.“主側(cè)

9、”配血 2.“次側(cè)”配血 3.自身對照二、交叉配血實驗技術(shù)1.鹽水介質(zhì)法 2.酶介質(zhì)法 3.抗人球蛋白介質(zhì)法 二、交叉配血實驗技術(shù)4.凝聚胺法5.微柱凝膠免疫技術(shù) 第三節(jié) 白細胞血型1. 包括紅細胞血型抗原2.白細胞本身所特有的血型抗原3.人類白細胞抗原（HLA）一、HLA系統(tǒng)基因、抗原結(jié)構(gòu)HLA基因型: 位于6號染色體短臂6p區(qū)域。HLA抗原 .分為HLA-類分子 .HLA-類分子HLA抗原臨床應(yīng)用HLA多態(tài)性的研究;器官和骨髓移植前組織相容性配型;親子鑒定;HLA與某些疾病的關(guān)聯(lián);遺傳學(xué)方面。二、HLA系統(tǒng)抗原的檢測方法.HLA血清學(xué)技術(shù)(微量淋巴細胞毒試驗)分型血清中含有的抗特定HLA抗

10、原的細胞毒抗體與待檢淋巴細胞膜表面的HLA抗原結(jié)合后，在補體的參與下?lián)p傷細胞膜，經(jīng)伊紅或臺盼藍染色后，觀察細胞是否被染色，了解細胞損傷、死亡的情況。二、HLA系統(tǒng)抗原的檢測方法.HLA的分子生物學(xué)檢測：PCR-SSP（ PCR序列特異性引物）PCR-RFLP（PCR限制性片段長度多態(tài)性）PCR-SBT（PCR-直接測序分型 ）三、粒細胞血型分布：中性粒細胞、嗜堿性粒細胞、嗜酸性粒細胞。分類：. HNA-1抗原：目前發(fā)現(xiàn)的唯一具有多態(tài)性的粒細胞抗原系統(tǒng)。. HNA-2抗原：其中HNA-2 a具有臨床意義。 .HNA-3抗原：其中HNA-a表達于淋巴細胞、血小板、內(nèi)皮細胞、脾臟、腎臟、胎盤細胞，是

11、粒細胞聚集因子，與輸血相關(guān)性肺損傷相關(guān)。(一)粒細胞抗原抗體檢測方法1. 血清學(xué)方法：a.粒細胞凝集試驗b.單克隆抗體特異性粒細胞抗原捕獲試驗c.粒細胞免疫熒光試驗d.流式細胞術(shù)2. DNA分型技術(shù): PCR-RFLP、PCR-SSP等。（二）粒細胞抗體的臨床應(yīng)用.新生兒同種免疫粒細胞減少癥2. 非溶血性發(fā)熱性輸血反應(yīng)3. 輸血相關(guān)性肺損傷4. 粒細胞輸注無效5. 自身免疫性粒細胞減少癥第四節(jié) 血小板血型一、血小板同種抗體同種血小板抗體一般由輸血、妊娠或骨髓移植等免疫刺激而產(chǎn)生。最常見的抗體是HRA-lb和5b抗體。這和相應(yīng)HPA抗原在群體中的分布頻率有關(guān)。二、血小板血型抗原和抗體的臨床應(yīng)用1

12、.新生兒同種免疫性血小板減少性紫癜 2.輸血后紫癜 3.血小板輸注無效三、血小板輸注的適應(yīng)證及禁忌證1預(yù)防性血小板輸注: (1)各種慢性血小板生成不良性疾病。 (2)血小板低下并伴有導(dǎo)致血小板破壞或消耗增加的因素存在。2治療性血小板輸注: （1）血小板生成減少引起的出血 （2）大量輸血所致的血小板稀釋性減少 （3）脾腫大 （4）感染和彌散性血管內(nèi)凝血 （DIC） （5）特發(fā)性血小板減少性紫癜（ ITP） （6）藥物引起的免疫性血小板低下 （7）血小板功能異常所致嚴重出血（二）禁忌證1.血栓性血小板減少性紫癜（TTP）2.溶血尿毒綜合征（HUS）(HIT)四、特制血小板制劑的臨床應(yīng)用1.移除大部

13、分血漿的血小板2.洗滌血小板3.少白細胞血小板4.輻照血小板5.冰凍血小板第五節(jié) 新生兒溶血病(一)ABO新生兒溶血病 ABO-HDN是由于母嬰血型不合，母體的IgG抗A(B)經(jīng)過胎盤進入胎兒血循環(huán)破壞胎兒紅細胞所引起。(二) Rh血型引起的新生兒溶血二、實驗室檢查直接抗人球蛋白試驗游離試驗:是檢測新生兒血清中的血型抗體。釋放試驗:與直接抗球蛋白相同，也是檢測新生兒紅細胞上是否存在免疫抗體。三、新生兒溶血病治療與預(yù)防1.藥物治療與血漿置換2. 提早分娩3. 宮內(nèi)換血4.光照治療與換血療法5.預(yù)防第六節(jié) 臨床輸血一、全血輸血（一）適應(yīng)證 1心功能不全或心力衰竭及嬰幼兒、老年人慢性病體質(zhì)。 2需要

14、長期或反復(fù)輸血的患者，如再障等患者。（二）禁忌證 1心功能不全或心力衰竭的貧血患者。 2需要長期或反復(fù)輸血患者，如再生障礙性貧血等患者。 3對血漿蛋白已致敏或?qū)ρ獫{內(nèi)某種反應(yīng)原敏感的患者。 4因以往輸血或妊娠已產(chǎn)生白細胞或血小板抗體的患者。 5血容量正常的慢性貧血患者。 6可能施行骨髓移植及其它器官移植的患者。二、成分輸血概念適應(yīng)證1補充血容量 2提高攜氧能力3補充凝血因子，糾正出血4調(diào)節(jié)免疫機能，提高機體抵抗力 5維持膠體滲透壓 6有害物質(zhì)的排除（換血或血漿置換） 禁忌證: 無明確的輸血適應(yīng)證就是禁忌證。成分輸血的優(yōu)點1制劑容量小，純度高，治療效果好2針對性強，不良反應(yīng)少3減少輸血傳播性疾病

15、的發(fā)生4便于保存，使用方便5一血多用，節(jié)約血液資源三、自體輸血概念優(yōu)點 1. 避免經(jīng)輸血傳播的疾病。 2. 避免同種異體輸血產(chǎn)生的同種免疫反應(yīng)。 3. 反復(fù)放血可刺激紅細胞再生，促進患者術(shù)后造血速度加快。 4. 避免異體血液對受血者免疫功能的抑制。 5. 緩解血源緊張的矛盾。自體輸血種類根據(jù)血液來源和保存方法主要分為： 1.貯存式自體輸血 2.稀釋式自體輸血 3.回收式自體輸血四、干細胞移植（二）移植流程. 供者選擇與受者移植前的準備：組織配型。. 預(yù)處理預(yù)處理：超劑量化療或放療。. 移植物處理： (1)骨髓和異體外周血造血干細胞的處理：去除骨髓中的紅細胞、ABO血型凝集原等。 (2)自體移植

16、物的處理：體外凈化自體移植物。.移植物的輸注：靜脈滴注，但不能超過3 h。. 植活的檢測：靠檢測受者血細胞和免疫學(xué)的標記。（三）移植并發(fā)癥及其防治1. 感染2. 移植物抗宿主?。℅VHD3. 巨細胞病毒（CMV）感染及相關(guān)性間質(zhì)性肺炎（CMV-IP）4. 肝靜脈阻塞病（VOD）5. 出血性膀胱炎6. 移植復(fù)發(fā)7. 其他并發(fā)癥五、血液單采和置換治療性血液成分單采術(shù)1. 治療性紅細胞單采術(shù)2. 治療性白細胞單采術(shù)3. 治療性血小板單采術(shù)治療性血液成分置換術(shù) 1. 治療性血漿置換術(shù)2. 治療性紅細胞置換術(shù)六、輸血不良反應(yīng).概念：.分類：.按輸血反應(yīng)發(fā)生的時間，輸血不良反應(yīng)可分為急性反應(yīng)和遲發(fā)性反應(yīng)。.按輸血反應(yīng)發(fā)生的機制，輸血不良反應(yīng)可分為免疫性反應(yīng)和非免疫性反應(yīng)。七、常見輸血不良反應(yīng)1. 溶血反應(yīng)：（1）急性溶血性輸血反應(yīng)（AHTR) （2）遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)（DHTR) 2. 非溶血性發(fā)