電大動(dòng)物檢疫技術(shù)二

1、主要(zhyo)內(nèi)容：第四章 動(dòng)物檢疫基本技術(shù)動(dòng)物(dngw)檢疫技術(shù)二共三十六頁第一節(jié) 臨診檢疫技術(shù)一、群體(qnt)檢疫群體檢疫是指對(duì)待檢動(dòng)物群體進(jìn)行的現(xiàn)場檢疫。 (一)群體檢疫的組織 1.群體劃分 同場、同圈(舍)；同一產(chǎn)地來源的；同車、同船、同機(jī)運(yùn)輸?shù)膭潪橐蝗?。在畜群過大時(shí),要適當(dāng)分群,以利于檢查。2.檢疫順序 大群小群；幼年成年；種用畜群其它用途的；健康染病畜群。共三十六頁(二)群體檢疫的方法和內(nèi)容1.靜態(tài)觀察 靜態(tài)觀察是在動(dòng)物安靜休息,完全保持自然狀態(tài)下,觀察其站立、睡臥姿勢；精神狀態(tài)；營養(yǎng)程度和呼吸、反芻等基本生理活動(dòng)現(xiàn)象。注意有無(yu w)異常站立、睡臥姿勢,有無(yu w)

2、咳嗽、喘息、呻吟、流涎、嗜睡、孤立一隅等反常現(xiàn)象。2.動(dòng)態(tài)觀察 經(jīng)靜態(tài)觀察之后,將被檢動(dòng)物驅(qū)趕起來,觀察其自然活動(dòng)和驅(qū)趕活動(dòng)。重點(diǎn)看起立、運(yùn)動(dòng)的姿勢與步態(tài)；精神狀態(tài)。共三十六頁3.飲食觀察 目的在于檢查動(dòng)物的食欲和口腔疾病。可以觀察動(dòng)物自然采食飲水動(dòng)作,亦可有意少給食物看其搶食行為。從中發(fā)現(xiàn)不食不飲、少食少飲、吞咽困難和退槽、嘔吐、流涎等可疑患病動(dòng)物。二.個(gè)體檢疫個(gè)體檢疫是對(duì)群體檢疫時(shí)檢出的可疑病態(tài)動(dòng)物進(jìn)行詳細(xì)(xingx)和系統(tǒng)的臨診檢查。共三十六頁（一）個(gè)體檢疫的方法和內(nèi)容1.視診 (1)看精神狀態(tài)健康動(dòng)物靜止時(shí)安靜,行動(dòng)時(shí)靈活,對(duì)各種外界刺激敏感。(2)看營養(yǎng)程度營養(yǎng)狀況：肌肉的豐滿度、

3、皮下脂肪的蓄積量、被毛狀況三方面觀察。(3)看姿勢(zsh)與運(yùn)動(dòng)觀察動(dòng)物站立、睡臥的姿勢是否自然,運(yùn)動(dòng)時(shí)動(dòng)作是否靈活而協(xié)調(diào)。(4)看皮膚被毛(5)看可視黏膜(6)看排泄物 (7)看呼吸與反芻共三十六頁2.觸診 （1）耳根、角根、鼻端、四肢末端（2）體表皮膚（3）體表淋巴結(jié)3.聽診(tngzhn) 4.測體溫 健康動(dòng)物：早晨溫度較低,午后略高,波動(dòng)范圍在0.51之間。豬：38-39.5，牛：37.5-39.5，羊：38-39.5，禽：40-42。共三十六頁 臨床(ln chun)檢疫個(gè)體(gt)檢疫群體檢疫群檢正常 抽檢群檢異常個(gè)體檢查靜態(tài)觀察食態(tài)觀察動(dòng)態(tài)觀察共三十六頁三.各種動(dòng)物臨診檢疫特點(diǎn)

4、（一）豬的臨診檢疫特點(diǎn)1.健康豬 站立平穩(wěn),不斷走動(dòng)拱食,并發(fā)出“吭吭”聲。對(duì)外界刺激敏感,遇人接近表現(xiàn)警惕性凝視。睡臥常取側(cè)臥,四肢伸展,頭側(cè)地，呼吸均勻；爬臥時(shí)后腿屈于腹下。排泄物正常。體溫正常。被毛整齊光亮。起立敏捷,行動(dòng)靈活,走跑時(shí)搖頭擺尾或上卷尾。遇驅(qū)趕,隨群(suqn)前進(jìn),不斷發(fā)出叫聲。餓時(shí)叫喚,飲喂時(shí)搶食,大口吞咽有響聲且響聲清脆,全身鬃毛隨吞食而顫動(dòng)。共三十六頁2.病豬 精神萎靡,離群獨(dú)立,全身顫抖或頭頸歪斜。蜷臥,不愿起立。被毛粗亂無光,鼻盤干燥,眼有分泌物,肷窩凹陷。行動(dòng)遲緩,步態(tài)踉蹌,跛行或出現(xiàn)神經(jīng)癥狀。食欲下降(xijing),懶于上槽,或只吃幾口就退槽,有些只聞而不

5、食,亦有的食欲廢絕。排泄物異常。多有體溫異常。共三十六頁(二)牛的臨診檢疫特點(diǎn)1.健康牛 站立平穩(wěn),神態(tài)安靜。睡臥時(shí)常呈膝臥姿勢,四肢彎曲。全身被毛平整(pngzhng)有光澤,鼻鏡濕潤,眼、嘴及肛門周圍干凈。反芻有力，正常噯氣，呼吸平穩(wěn)。肉用牛垂肉高度發(fā)育；乳用牛乳房清潔,泌乳正常。排泄物、體溫正常健康牛走起路來精力充沛,腰背靈活,四肢有力,搖耳甩尾,自由自在。飲食中爭搶飼料,咀嚼有力,采食時(shí)間長,采食量大。放牧中喜采食高草,常甩頭用力扯斷。運(yùn)動(dòng)后飲水不咳嗽。共三十六頁2.病牛 精神沉郁,頭頸低伸,拱背彎腰或有異常體態(tài)。睡臥時(shí)四肢伸開,橫臥或曲頸側(cè)臥,嗜睡,久臥不起或起立困難。被毛粗亂。反芻

6、遲緩或停止。排泄物異常。體溫、呼吸多異常。運(yùn)動(dòng)時(shí)常跛行掉隊(duì)(dio du)或不愿行走。飲食時(shí)表現(xiàn)厭食或不食,或采食緩慢,咀嚼無力。出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)后飲水咳嗽。共三十六頁(三)羊的臨診檢疫(jiny)特點(diǎn)1.健康羊 站立平穩(wěn),乖順。被毛整潔。呼吸平穩(wěn)。常于飽腹后合群臥地休息，反芻。遇炎熱相互把頭藏于對(duì)方腹下避暑。走起路來精神活潑,合群不掉隊(duì)；放牧中雖很分散,但不離群。山羊活潑機(jī)敏,喜攀登,善跳躍,好爭斗,尤其是羔羊和幼齡羊。飼喂時(shí)互相爭食，放牧?xí)r常邊走邊吃草,邊走邊排糞，排泄物正常。食后肷窩臌起。共三十六頁2.病羊 精神萎靡不振,常獨(dú)臥一隅,遇人接近不起不走。不反芻。排泄物異常。呼吸異常。被毛粗亂,脫毛

7、,皮膚干裂。行走搖擺,或出現(xiàn)異常運(yùn)動(dòng),異常姿勢。食欲不振或停食(tng sh),食后肷窩仍下陷。山羊喜臥懶動(dòng)，多有體溫異常。共三十六頁(四)家禽的臨診檢疫特點(diǎn)1.健康家禽 神態(tài)活潑,反應(yīng)敏銳。站立時(shí)伸頸昂首翹尾,且常高收一肢,目光伶俐,時(shí)常側(cè)視。臥時(shí)頭疊放在翅內(nèi)。冠、髯紅潤,羽絨豐滿光亮,排列勻稱?？诒菨崈?呼吸正常(zhngchng),排泄物正常(zhngchng)。體溫正常(zhngchng)。平養(yǎng)雞行動(dòng)敏捷,步態(tài)穩(wěn)?。圾?、鵝陸地行走穩(wěn)健,水中游牧自如,放牧?xí)r不掉隊(duì)。健康家禽啄食連續(xù),食欲旺盛,食量大,嗉囊飽滿。2.病禽 精神萎靡,縮頸垂翅,閉目似睡。冠、髯蒼白或紫黑,喙、蹼色澤變暗。有的

8、頭頸部腫脹,眼、鼻等天然孔有異常分泌物。羽絨蓬亂無光。行動(dòng)遲緩,跛行或有肢翅麻痹及其它神經(jīng)癥狀。食欲減退或廢絕,嗉囊空虛。排泄物異常。多有體溫異常。共三十六頁第二節(jié) 病理學(xué)檢查技術(shù)一、病理剖檢檢查技術(shù)（一）對(duì)動(dòng)物尸體剖檢的要求1、剖檢前檢查 剖檢前仔細(xì)檢查尸體體表特征(tzhng)及天然孔有無異常，以排除炭疽等惡性傳染病?；继烤也〉膭?dòng)物及其尸體，禁止剖檢。若懷疑動(dòng)物死于炭疽，先采取耳尖血液涂片鏡檢，排除炭疽后方可剖檢。共三十六頁2、剖檢時(shí)間 剖檢進(jìn)行的越早越好，最好在白天(bi tin)進(jìn)行剖檢。3、剖檢地點(diǎn) 病理解剖室或；在野外或其它檢疫現(xiàn)場剖檢時(shí)，應(yīng)選地勢高燥并遠(yuǎn)離居民區(qū)、畜舍及交通要道的

9、地方進(jìn)行。4、剖檢數(shù)量 家禽：5只以上；大中動(dòng)物至少剖檢3頭。5、剖檢術(shù)式 6、安全防護(hù) 工作人員的安全防護(hù)工作；防止環(huán)境污染。常用的消毒液有：1%2%硼酸、0.1%新潔爾滅、5%碘酊、70%酒精等共三十六頁（二）外部檢查1檢查尸體變化尸僵、尸斑、尸腐、血液凝固(nngg)2檢查皮膚、被毛及營養(yǎng)狀況3檢查天然孔（三）內(nèi)部檢查1、皮下檢查 2、內(nèi)臟器官的檢查對(duì)有病變和病變嚴(yán)重的器官要重點(diǎn)檢查，分辯病理變化特點(diǎn)，判定病變性質(zhì)。3、口腔、鼻腔和頸部器官的檢查 共三十六頁第三節(jié) 檢疫材料的采集一采集原則1適時(shí)采集 2典型采樣 典型采樣要求樣品具有(jyu)代表性。動(dòng)物活體采樣選擇典型動(dòng)物即未經(jīng)藥物治療

10、、病狀典型的動(dòng)物，這對(duì)細(xì)菌性傳染病的檢查尤其重要。選擇典型材料A、采集病原體可能在其中含量最高的材料。B、在采取病料前，對(duì)動(dòng)物可能患某種疫病作出初步診斷，側(cè)重采集該病原體常侵害的部位。共三十六頁從動(dòng)物尸體采樣采集有病變的組織、器官或病變最明顯、最典型的部位。供病理組織切片的樣品，應(yīng)連帶部分健康組織。淋巴結(jié)、心、肝、脾、肺、腎，不論有無病變，一般均應(yīng)采取。 3合理采樣 動(dòng)物群體發(fā)病，至少采取5頭（只）動(dòng)物的病料。每一種樣品應(yīng)有足夠的數(shù)量，除確保本次實(shí)驗(yàn)(shyn)用量外，以備必要的復(fù)檢用。4無菌采樣共三十六頁二供病原學(xué)檢查材料的采集、處理1、供微生物學(xué)檢查材料的采集、處理（1）血液采血部位：頸靜

11、脈或尾靜脈或耳靜脈；家禽從翅靜脈或心臟。死亡動(dòng)物從右心房采血。采血量： 10ml（大、中動(dòng)物）； 35ml（小動(dòng)物和家禽）。全血抗凝：EDTANa2、枸櫞酸鈉、肝素。枸櫞酸鈉不宜(by)用于病毒血樣。10ml血液+4%枸櫞酸鈉溶液1ml或0.1%肝素1ml或EDTANa21520。 病毒樣品：1ml血樣=青霉素+鏈霉素各5001000IU，以抑制血源性或在采血過程中污染的細(xì)菌。共三十六頁（2）分泌物和滲出液口腔、鼻腔、喉氣管、泄殖腔及陰道分泌物：用滅菌的棉球蘸取。咽食道分泌物：采前禁食12h，食道探子刮取。乳汁：清洗乳房并消毒棄去最初擠出的幾把乳汁擠出的1020ml乳汁。尿液：排尿時(shí)采集或用導(dǎo)

12、尿管采取，常取3050ml。水泡液、水腫液、關(guān)節(jié)囊液，胸腹腔滲出液：用注射器抽取，至少采取1ml。膿汁：已破口的膿皰(nn po)，用棉球蘸??；未破口的用注射器吸取。過于濃稠不好抽取時(shí)，可切開膿皰(nn po)，用棉球蘸取。共三十六頁保存與送檢分泌物和滲出液采集放入滅菌容器密封外貼標(biāo)簽冷藏送檢。病毒性病料的保存：含抗生素的PH7.27.4磷酸鹽緩沖液、50甘油(n yu)磷酸鹽緩沖液、50甘油(n yu)生理鹽水。細(xì)菌性病料的保存：30甘油磷酸鹽緩沖液、30甘油生理鹽水、滅菌液體石蠟。共三十六頁2、供寄生蟲檢查材料的采集、處理（1）血液多從耳靜脈采集，立即制成涂片標(biāo)本。（2）陰道分泌物用棉拭子

13、擦拭采?。?）糞便直腸采集或采集新排出的糞便。（4）被寄生蟲寄生的組織、器官組織、器官常連帶(lindi)寄生蟲一并采集，放入510福爾馬林溶液中。 共三十六頁（5）皮膚刮下物螨病病料：在病變皮膚和健康皮膚交界處采集。（6）寄生蟲體表寄生蟲：用手或鑷子捏取或把附有蟲體的羽毛剪下70酒精、甘油酒精或5福爾馬林容液中。體內(nèi)寄生蟲：小型線蟲用毛筆(mob)將蟲體挑出 生理鹽水洗凈70酒精、甘油酒精或巴氏夜固定。大型蠕蟲像蛔蟲、棘頭蟲、絳蟲用510福爾馬林溶液固定。共三十六頁四供病理組織學(xué)檢查材料的采集、處理1.選材 應(yīng)選擇病變部位(bwi)與健康部位(bwi)交界處的組織作為檢材。較重要的病變要多取

14、幾塊，以展示病變的發(fā)展過程。若同一器官有不同的病變，分別采取。2.采集 供切片時(shí)用的組織塊大小為1.5cm1.5cm0.5cm，3.固定 供石蠟切片用的組織塊切好后，用清水輕輕沖洗血污，立即浸入固定液中。但胃腸、膽囊、膀胱等組織不要用水沖洗。共三十六頁第四節(jié) 病原學(xué)檢查技術(shù)一、細(xì)菌性傳染病病原(bngyun)檢查（一）顯微鏡檢查法1.病料處理將病料涂成薄而均勻的涂片室溫下自然干燥若為細(xì)菌培養(yǎng)物涂片火焰固定常用的染色方法有：革蘭氏染色法、美藍(lán)染色法、瑞氏染色法和姬姆薩染色法。2.顯微鏡檢查 染色水洗后的涂片標(biāo)本吸水紙吸干（切勿磨擦）或在酒精燈火焰的遠(yuǎn)端烘干滴加香柏油用油浸鏡觀察細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)和染

15、色特性。共三十六頁（二）培養(yǎng)檢查法1固體培養(yǎng)基上菌落性狀的檢查 其菌落的大小、形狀(xngzhun)、色澤、表面性狀、透明度、邊緣性狀等因菌種而異。因此，菌落特征是鑒別細(xì)菌的重要依據(jù)。2.液體培養(yǎng)基上液體性狀的觀察 細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中生長可使液體出現(xiàn)混濁、沉淀、液面形成菌膜以及液體變色、產(chǎn)氣等現(xiàn)象。（三）動(dòng)物試驗(yàn)最常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有：小鼠、大鼠、豚鼠和家兔。共三十六頁二病毒性傳染病病原檢查（一）病毒(bngd)分離培養(yǎng)1.樣品處理 2.病毒分離培養(yǎng) （1）雞胚接種痘病毒：絨毛尿囊膜接種，用912日齡雞胚；雞新城疫病毒：絨毛尿囊腔接種，用910日齡雞胚；流行性乙型腦炎病毒：卵黃囊內(nèi)接種，用68日齡

16、雞胚。（2）動(dòng)物組織培養(yǎng)在病毒分離培養(yǎng)中廣泛采用的是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。（3）動(dòng)物接種共三十六頁（二）病毒檢查方法1.包涵體檢查 狂犬病、偽狂犬病、犬瘟熱病毒病毒的包涵體2.病毒培養(yǎng)(piyng)性狀觀察 雞新城疫病毒：雞胚全身皮膚有出血點(diǎn)雞痘病毒：產(chǎn)生痘斑病變。細(xì)胞病變有：細(xì)胞變形皺縮，胞漿內(nèi)出現(xiàn)顆粒，核濃縮，核裂解或細(xì)胞裂解，出現(xiàn)空泡。3.病毒形態(tài)學(xué)觀察 有直接電鏡觀察和免疫電鏡技術(shù)。4.病毒核酸檢測 最常用的檢測方法是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。共三十六頁三寄生蟲病病原檢查（一）蟲卵檢查法1直接涂片鏡檢2集卵法檢查 ：水洗沉淀、飽和鹽水漂?。ǘ┫x體檢查法1.蠕蟲蟲體檢查法 （1）成蟲檢查法：肉眼(ruy

17、n)觀察其形態(tài)特征。（2）幼蟲檢查法：低倍鏡下觀察液體中活動(dòng)的幼蟲。共三十六頁第六節(jié) 免疫學(xué)檢查技術(shù)一、血清學(xué)檢測技術(shù)血清學(xué)檢測技術(shù)種類繁多，可利用抗原抗體中已知的任何一方去檢測未知的另一方，以達(dá)到(d do)檢疫目的。（一）凝集反應(yīng)1直接凝集反應(yīng) 布氏桿菌病和豬傳染性萎縮性鼻炎：平板凝集和試管凝集反應(yīng)；雞白痢、雞支原體?。喝桨迥磻?yīng)。共三十六頁2間接凝集反應(yīng) 間接凝集反應(yīng)若用已知抗原吸附在載體來鑒定抗體，稱為正向間接凝集反應(yīng)。主要用于豬細(xì)小病毒病、豬偽狂犬病、牛日本血吸蟲病、豬喘氣病等的檢測。間接凝集反應(yīng)若用已知抗體吸附在載體上來(shngli)鑒定抗原，稱為反向間接凝集試驗(yàn)。主要用于

18、豬傳染性水泡病與豬口蹄疫檢測。共三十六頁（二）沉淀反應(yīng)1.環(huán)狀沉淀反應(yīng)（阿司克里氏反應(yīng)）常用于炭疽(tnj)病的診斷和皮張?zhí)烤?tnj)檢疫。2.瓊脂擴(kuò)散反應(yīng)是馬傳染性貧血病、雞馬立克氏病、雞傳染性支氣管炎、雞傳染性喉氣管炎及雞傳染性法氏囊病常用的診斷方法。（三）標(biāo)記抗體技術(shù)根據(jù)抗原抗體結(jié)合的特異性和標(biāo)記分子的敏感性而建立的診斷檢測技術(shù)，稱為標(biāo)記抗體技術(shù)。共三十六頁1.酶標(biāo)記抗體技術(shù)有免疫酶染色法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ ELISA）。主要特點(diǎn)：簡便、快速(kui s)、敏感、易于標(biāo)準(zhǔn)化、適合大批樣品檢測。是豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸綜合癥、豬弓形蟲病、豬囊蟲病、豬旋毛蟲病以及牛白血病、禽白血病等疫病診斷的農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方法。2.熒光標(biāo)記抗體技術(shù)又稱免疫熒光技術(shù)（IFT）主要用于抗原的定位、定性。該技術(shù)的主要特點(diǎn)是：特異性強(qiáng)、敏感性高、檢測速度快。(四)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CFT）共三十六頁共三十六頁內(nèi)容摘要主要內(nèi)容：第四章 動(dòng)物檢疫基本技術(shù)。剖檢進(jìn)行的越早