提取過程以及原理

1、關(guān)于提取過程及原理第一張，PPT共十八頁，創(chuàng)作于2022年6月DNA 提取過程及原理鹽溶法（萃?。?1研磨破壞細(xì)胞壁和細(xì)胞膜，使核蛋白被釋放出來。 （從細(xì)胞中分離得到的DNA是與蛋白質(zhì)結(jié)合的DNA，其中還含有大量RNA， 即核糖核蛋白。） 2利用DNA不溶于0.14mol/L 的NaCl溶液而RNA能溶于0.14mol/L 的NaCl溶液這一性質(zhì),將DNA核蛋白和RNA核蛋白從樣品破碎細(xì)胞液中分開。第二張，PPT共十八頁，創(chuàng)作于2022年6月3 分離得到核蛋白后，還需進(jìn)一步將蛋白等雜質(zhì)除去。去除蛋白的方法有 3種： 用含辛醇或異戊醇的氯仿振蕩核蛋白溶液，使其乳化，然后離心除 去變性蛋白質(zhì)。用這

2、種方法處理時，蛋白質(zhì)停留在水相和氯仿相中間，而 DNA則溶于上層水相，用兩倍體積的95%乙醇溶液可將DNA鈉鹽沉淀出來。第三張，PPT共十八頁，創(chuàng)作于2022年6月 用 十二烷基硫酸鈉(SDS)等去污劑使蛋白質(zhì)變性，從而使其與核酸分離 用苯酚處理，然后離心分層。DNA溶于上層水相，蛋白變性后則停留在酚層內(nèi)， 吸出上層水相，加入兩倍體積的95%乙醇即可得到白色纖維狀DNA沉淀。第四張，PPT共十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第五張，PPT共十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第二部分第六張，PPT共十八頁，創(chuàng)作于2022年6月核酸電泳第七張，PPT共十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第八張，PPT共十八頁，創(chuàng)作于

3、2022年6月第九張，PPT共十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第十張，PPT共十八頁，創(chuàng)作于2022年6月TAE是使用最廣泛的緩沖系統(tǒng)。其特點(diǎn)是超螺旋在其中電泳時更符合實(shí)際相對分子質(zhì)量（TBE中電泳時測出的相對分子質(zhì)量會大于實(shí)際分子質(zhì)量），且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩沖液快約10%，電泳大于13kb的片段時用TAE緩沖液將取得更好的分離效果，此外，回收DNA片段時也易用TAE緩沖系統(tǒng)進(jìn)行電泳。TAE的缺點(diǎn)是緩沖容量小，長時間電泳（如過夜）不可選用，除非有循環(huán)裝置使兩極的緩沖液得到交換。第十一張，PPT共十八頁，創(chuàng)作于2022年6月TBE的特點(diǎn)是緩沖能力強(qiáng)，長時間電泳時可選用TBE，并且當(dāng)用于電泳小于1kb的片段時分離效果更好。TBE用于瓊脂糖凝膠時易造成高電滲作用，并且因與瓊脂糖相互作用生成非共價(jià)結(jié)合的四羥基硼酸鹽復(fù)合物而使DNA片段的回收率降低，所以不宜在回收電泳中使用。TPE的緩沖能力也較強(qiáng)，但由于磷酸鹽易在乙醇沉淀過程中析出，所以也不宜在回收DNA片段的電泳中使用。第十二張，PPT共十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第十三張，PPT共十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第十四張，PPT共十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第十五張，PPT共十八頁，創(chuàng)作于2022年6月第十六張，PPT共十八頁，創(chuàng)作