艾滋病實驗室生物安全防護課件

1、艾滋病實驗室生物安全防護第1頁，共19頁。規(guī)范性文件醫(yī)務人員艾滋病病毒職業(yè)暴露防護工作指導原則（試行）中華人民共和國衛(wèi)生部，2004年5月31日頒布，2004年6月1日起實施。實驗室生物安全通用要求GB 19489-2008，2009年7月1日起實施。微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則（WS 233-2002）中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準，2002-12-03發(fā)布，2003-08-01實施。Guidelines for the Safe Transport of Infectious Substances and Diagnostic Specimens.WHO 1997.消毒技術(shù)規(guī)范（20

2、02年版）中華人民共和國衛(wèi)生部2002-11-15發(fā)布，2003-04-01起實施。第2頁，共19頁。HIV的生物危害人類免疫缺陷病毒（HIV）屬第二類病原微生物，是高致病性病原微生物。我國將病原微生物分為四類，第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。第3頁，共19頁。HIV相關檢測的生物安全級別HIV抗體檢測（包括篩查和確證實驗）、抗原檢測和相關的免疫學檢測應在符合級生物安全實驗室（BSL-2）要求的艾滋病檢測實驗室中進行。HIV分離培養(yǎng)、濃縮、中和試驗、細胞培養(yǎng)及研究工作及其它需要應用活病毒的研究工作，應在級生物安全實驗室（BSL-3）中進行。HIV核酸提取和檢測均應在符合級生物

3、安全實驗室（BSL-2）要求的艾滋病檢測實驗室中進行。HIV病毒株應保存在符合級生物安全實驗室（BSL-3）要求的艾滋病實驗室；HIV陽性樣品，包括全血、血清、血槳和其他組織（液）、核酸提取物應保存在符合BSL-2要求的艾滋病實驗室。第4頁，共19頁。生物安全保證措施建立安全制度培訓和管理個人保健和防護安全操作使用利器注意事項第5頁，共19頁。安全制度實驗室主任是實驗室安全的第一責任人，對實驗室工作和環(huán)境的安全負責，負責制定全面的實驗室安全管理制度并監(jiān)督落實。艾滋病檢測實驗室應建立下列安全制度：實驗室的安全工作制度或安全標準操作程序（S-SOP）；意外事故處理預案，內(nèi)容包括應急處理、登記和報告

4、、調(diào)查和處理；信息安全及保密制度：與HIV/AIDS檢測相關的所有資料均應嚴格保密，包括送檢單、檢測記錄、樣品登記、報告單及工作人員年度檢測結(jié)果等，不得對無關人員透露檢測結(jié)果。第6頁，共19頁。培訓和管理進行全員安全培訓并強化“普遍性防護原則”安全意識，所有的血液、未固定的組織和組織液樣品，均應視為有潛在的傳染性，都應以安全的方式進行操作。安全培訓，包括上崗前培訓和復訓，并接受管理人員的監(jiān)督。新上崗人員必須接受安全教育和培訓，使他們清楚實驗室工作的潛在危險，通過考核等方式確認他們具備安全操作的能力后方可單獨工作。必須對新調(diào)入人員、外來合作、進修和學習的人員進行生物安全培訓，經(jīng)實驗室主任批準后，

5、方可進入實驗室。生物安全培訓和監(jiān)督應有客觀詳實的記錄。第7頁，共19頁。個人保健和防護遇有手部皮膚有開放性傷口及其他不適于工作的情況，應暫停工作。皮膚的微小傷口、擦傷、皸裂等，應用防水敷料嚴密覆蓋。應提供充足的防護服、一次性乳膠手套、口罩、帽子和覆蓋足背的工作鞋。清潔的防護服和其他個人防護用品置于實驗室清潔區(qū)內(nèi)存放。實驗室應設置應急沖洗眼睛裝置。工作人員上崗前必須進行HIV、HBV、HCV等抗體檢測，接種乙肝疫苗。每年對工作人員采血檢測HIV抗體，血清應長期保留。進實驗室工作前要摘除首飾，修剪長的帶刺的指甲，以免刺破手套。嚴禁在實驗室內(nèi)進食、飲水、吸煙和化妝。第8頁，共19頁。個人保健和防護實

6、驗操作時應穿合適的防護服、戴手套和口罩、穿實驗室專用的工作鞋。如接觸物的傳染性大、應戴雙層手套；含有HIV的液體（樣品或病毒培養(yǎng)液）有可能噴濺時，應戴防護眼鏡、穿防水（如塑料）圍裙。工作完畢，先脫去手套，再脫去防護服，用肥皂和流動水洗手。穿過的污染的防護服應及時放入污物袋中，消毒后方可洗滌或廢棄。操作過程中，如發(fā)現(xiàn)防護服被污染應立即更換，如手套破損，應立即丟棄、洗手并換上新手套。不能用戴手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等。不要將手套清洗或消毒后再次使用。禁止使用口腔吸液管，必須使用移液器來操作實驗的所有液體。第9頁，共19頁。安全操作試劑及樣品的管理設立專門儲存陽性血清、質(zhì)控品的

7、血清庫和/或毒種庫，上鎖并專人管理。對存放試劑和有毒有害物質(zhì)的區(qū)域應進行監(jiān)控，冷藏柜、冰箱、培養(yǎng)箱和存放生物試劑、化學危險品、放射性物質(zhì)的容器，置于工作人員視線之外的地點時應上鎖。實驗室的清潔和消毒工作完畢應對工作臺面消毒，推薦用0.10.2%的次氯酸溶液消毒；用消毒液清洗后要干燥20min以上；操作過程中如有樣品、檢測試劑外濺，應及時消毒。如有大量高濃度的傳染性液體濺出，在清潔之前應先用1%的次氯酸鈉溶液浸泡，然后戴上手套擦凈。第10頁，共19頁。安全操作樣品的采集和處理采集血液樣本時要注意安全，應使用一次性注射器，戴手套，謹慎操作，防止血液污染雙手。應小心防止被針頭和其它利器刺傷。離心樣品

8、時要使用密閉的罐和密封頭，防止離心時液體溢出或在超/高速離心時形成氣溶膠。第11頁，共19頁。安全操作樣本的帶入、帶出和操作不得將非實驗室物品帶入實驗室。收樣人員應接受過處理感染源方面的訓練并穿戴合適的防護服；實驗室應具有處理感染源的設備并準備好可消毒的容器。打開樣品容器時要小心，防止內(nèi)容物潑濺。核對樣品與送檢單，檢查樣品管有無破損和溢漏。如發(fā)現(xiàn)溢漏應立即將尚存留的樣品移出，對樣品管和盛器進行消毒，同時要按照程序報告有關負責人。要檢查樣品的狀況，記錄有無嚴重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃疸等情況。如樣本不能接收，應用安全方式廢棄，并通知送樣人。第12頁，共19頁。安全操作樣本的帶入、帶出和操

9、作常規(guī)處理血液、體液樣品可在工作臺上進行，如樣品有可能濺出，則應戴手套、口罩和防護眼鏡，在生物安全柜中操作。 樣品轉(zhuǎn)送其他實驗室時，應防止對工作人員、患者或環(huán)境造成污染。被污染或可能污染的材料在帶出實驗室前應進行消毒。用后的包裹應進行消毒。用于國際空運的樣品要按照國際空運協(xié)會（IATA）的規(guī)則進行包裝和標記，并提交相應的資料。第13頁，共19頁。使用利器注意事項應盡量避免在實驗室使用針頭、刀片、玻璃器皿等利器，以防刺傷。如果必須使用，在處理或清洗時應采取措施防止刺傷或劃傷，并應對用過的物品進行消毒。應使用安全針具采血，如蝶形真空針，自毀性針具等，以降低直接接觸血液和刺傷的危險性。應將用過的銳器

10、直接放入耐穿、防滲漏的利器盒，用過的針頭應直接放入堅固的容器內(nèi)，消毒后廢棄。禁止將使用后的一次性針頭重新套上針頭套。禁止用手直接接觸使用過的針頭、刀片等利器。第14頁，共19頁。污染物處理應按照實驗室生物安全通用要求（GB 19489-2004）和消毒技術(shù)規(guī)范（2002年版）處置實驗室廢棄物。艾滋病實驗室產(chǎn)生的所有廢棄物，包括不再需要的樣品、培養(yǎng)物和其它物品，均應視為感染性廢棄物，應置于專用的密封防漏容器中，安全運至消毒室，經(jīng)高壓消毒后再進行處理或廢棄。第15頁，共19頁。艾滋病檢測實驗室常用的消毒方法物理消毒方法高壓蒸汽消毒，121，保持1520min; 干燥空氣烘箱消毒（干烤消毒），140

11、，保持23h?；瘜W消毒方法含氯消毒劑（次氯酸鈉，含有效氯20005000mg/L）75%乙醇2%戊二醛艾滋病檢測實驗室物品常用的消毒方法廢棄物缸：5000mg/L 次氯酸鈉。生物安全柜工作臺面和儀器表面：75%乙醇。溢出物：5000mg/L次氯酸鈉。污染的臺面和器具：2000mg/L 次氯酸鈉，也可以用過氧化氫或過氧乙酸。器械可用2%戊二醛消毒。第16頁，共19頁。意外事故處理皮膚、粘膜污染：按職業(yè)暴露處理原則進行。衣物污染：盡快脫掉污染的衣物，進行消毒處理。污染物潑濺：小范圍污染物潑濺，應立即進行消毒處理和清洗。發(fā)生大范圍污染物潑濺事故時，應立即通知實驗室主管領導和安全負責人到達事故現(xiàn)場，查

12、清情況，確定消毒的程序。發(fā)生空氣污染時：可采用低溫蒸汽甲醛氣體對空氣進行消毒，但甲醛有致癌作用，不宜用于生物安全柜和實驗室的常規(guī)空氣消毒。第17頁，共19頁。意外事故處理如果發(fā)生重大潑濺事故，應采取以下措施進行：從污染處疏散人員，但要防止污染擴散；控制污染擴散，鎖門并禁止人員進入；通知實驗室主管領導、安全負責人等，查清情況，確定消毒處理的程序；必要時可進行生物安全柜和/或?qū)嶒炇业牡蜏卣羝兹怏w消毒，此時生物安全柜和/或?qū)嶒炇冶仨毭荛]，人員必須離開。溢漏處可用經(jīng)消毒劑浸泡的吸水物質(zhì)覆蓋；消毒劑作用1015分鐘后，移走吸水性物質(zhì)，用消毒劑沖洗，用水清洗。第18頁，共19頁。意外及事故的登記、報告和檢測對重大意外和事故必須進行登記，職業(yè)暴露應填寫“艾滋病職業(yè)暴露人員個案登記表”。內(nèi)容包括：意外和事故發(fā)生的時間、地點及詳細經(jīng)過；如發(fā)生職業(yè)暴露還包括暴露方