《微生物檢驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)》課件

1、課程內(nèi)容第一單元 微生物學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)第三單元 培養(yǎng)基及器皿準(zhǔn)備第二單元 消毒、滅菌方式第四單元 微生物檢驗(yàn)基本方法1第1頁，共68頁。 第一單元 微生物學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)微生物在生物界地位一微生物定義及特點(diǎn)二微生物分類三影響微生物生長繁殖的因素四2工廠需要控制的微生物五第2頁，共68頁。生物分類系統(tǒng)病毒界原核生物界真菌界(真核)真核原生界動(dòng)物界植物界病毒細(xì)菌酵母菌霉菌藻類原生動(dòng)物微生物微生物并非生物分類學(xué)上的名詞， 所有個(gè)體微小的低等生物通稱微生物在生物界地位3地位最低第3頁，共68頁。微生物小簡低微生物定義及特點(diǎn) 個(gè)體 結(jié)構(gòu) 進(jìn)化4第4頁，共68頁。微生物定義及特點(diǎn)微生物分布廣、種類多代謝強(qiáng)、繁殖快體

2、積小、面積大適應(yīng)強(qiáng)、易變異5第5頁，共68頁。1974年第8版：2000種1994年第9版4500種分類單位：界、門、綱、目、科、屬、種伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊(cè)微生物分類6第6頁，共68頁。微生物非細(xì)胞形態(tài)細(xì)胞形態(tài)病毒原核生物真核生物細(xì)菌、支原體、衣原體藍(lán)細(xì)菌藻類原生動(dòng)物微生物分類霉菌、酵母菌7第7頁，共68頁。細(xì) 菌1、細(xì)菌特點(diǎn)2、細(xì)菌分類3、細(xì)菌形態(tài)4、細(xì)菌結(jié)構(gòu)-染色5、菌落形態(tài)9、細(xì)菌繁殖6、影響菌落因素8、細(xì)菌芽孢7、細(xì)菌結(jié)構(gòu)10、細(xì)菌生長周期第8頁，共68頁。 原核生物：呈單細(xì)胞無核膜二分裂方式繁殖 9細(xì)菌特點(diǎn)第9頁，共68頁。細(xì)菌呼吸類型分代謝類型分細(xì)胞結(jié)構(gòu)（染色）分形態(tài)分球狀、桿狀、螺

3、旋狀自養(yǎng)型 、異養(yǎng)型需氧、厭氧、兼性厭氧G+、G-革蘭氏染色是鑒別細(xì)菌種類的重要方法細(xì)菌分類10第10頁，共68頁。11球狀弧形或螺旋形桿狀 細(xì)菌形態(tài)11第11頁，共68頁。G+G-細(xì)菌結(jié)構(gòu)（染色）12第12頁，共68頁。 單個(gè)細(xì)菌 顯微鏡觀察細(xì)菌菌落單個(gè)細(xì)胞繁殖肉眼可見細(xì)菌與菌落13第13頁，共68頁。a.大?。篵.形態(tài)：c.隆起度：d.菌落邊緣：e.表面性狀：f.表面光澤：g.顏色透明度：細(xì)菌的菌落形態(tài)14第14頁，共68頁。同種菌落特征相似生長環(huán)境鄰近菌落細(xì)胞空間位置不同影響菌落特征的因素：影響菌落形態(tài)因素15第15頁，共68頁?；窘Y(jié)構(gòu)：細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核質(zhì)特殊結(jié)構(gòu)：莢膜、鞭毛

4、、菌毛、芽孢細(xì)菌結(jié)構(gòu)16第16頁，共68頁。芽 孢原因條件惡劣營養(yǎng)損失過程17第17頁，共68頁。一個(gè)細(xì)菌 一個(gè)芽孢 一個(gè)芽孢 一個(gè)營養(yǎng)體芽孢特點(diǎn)：壁厚密，折光強(qiáng)，不易著色，耐熱，耐殺菌劑，不易殺滅，在高酸中不易萌發(fā)芽 孢18第18頁，共68頁。小測試滅菌是否徹底判定標(biāo)準(zhǔn)？化驗(yàn)室滅菌條件？芽孢是否被殺滅濕熱 121 、20-30分干熱 160 、 2小時(shí)19第19頁，共68頁。20Nt = N0 x 2nn = 繁殖代數(shù)t = 培養(yǎng)時(shí)間N0 = 細(xì)菌起始數(shù)Nt = 細(xì)菌生長 t時(shí)間后數(shù)量 細(xì)菌繁殖個(gè)細(xì)菌分鐘繁殖代，小時(shí)后有幾個(gè)？20第20頁，共68頁。微生物數(shù)量 時(shí)間衰亡期穩(wěn)定期對(duì)數(shù)生長期延緩

5、期細(xì)菌生長周期細(xì)菌能否無限繁殖下去？21第21頁，共68頁。2、霉菌菌體結(jié)構(gòu) 3、 霉菌生長繁殖4、霉菌菌落形態(tài)霉菌1、霉菌個(gè)體形態(tài)霉菌第22頁，共68頁。霉菌個(gè)體形態(tài)、結(jié)構(gòu)絲狀真菌，一般多細(xì)胞，由營養(yǎng)體與繁殖體構(gòu)成結(jié)構(gòu)：個(gè)體形態(tài)：23細(xì)胞質(zhì)第23頁，共68頁。24無性繁殖 （為主） 有性繁殖厚垣孢子分生孢子胞囊孢子接合孢子子囊孢子擔(dān)孢子TM-00027:36霉菌繁殖24第24頁，共68頁。霉菌菌落菌落形態(tài)：大，疏松，絨毛狀，絮狀，蜘蛛網(wǎng)狀，初期無色，后期產(chǎn)生孢子有顏色25第25頁，共68頁。2、酵母菌菌體結(jié)構(gòu) 3、酵母菌生長繁殖4、酵母菌菌落形態(tài)酵母菌1、酵母菌個(gè)體形態(tài)酵母菌第26頁，共68

6、頁。個(gè)體形態(tài)：多數(shù)單細(xì)胞，卵圓、球形、橢圓形酵母菌個(gè)體形態(tài)、結(jié)構(gòu)27第27頁，共68頁。有性繁殖：產(chǎn)生子囊和子囊孢子無性繁殖（為主）酵母菌繁殖生長周期同細(xì)菌芽殖（普遍） 裂殖28第28頁，共68頁。酵母菌菌落菌落：大而厚，濕潤、粘稠、易被挑起，多呈乳白色，少數(shù)為紅色（如紅酵母）29第29頁，共68頁。小結(jié)定義特點(diǎn)分類細(xì)菌微生物形態(tài)結(jié)構(gòu)繁殖30第30頁，共68頁。因素營養(yǎng)溫度pH滲透壓其他水份 影響微生物生長繁殖的因素31第31頁，共68頁。營 養(yǎng)32第32頁，共68頁。0 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0aw:不腐敗霉菌和酵母球菌G-G+干燥食品火腿等熟奶酪醬牛奶、飲料濃縮奶蕃茄醬甜煉乳

7、蕃茄醬水 份aw0.9，大部分細(xì)菌受到抑制霉菌、酵母菌的孢子和芽孢菌強(qiáng)G+ G- cb33第33頁，共68頁。34aw用來衡量有多少水分可以用來生長aw =pp0p = 實(shí)際水蒸氣壓p0= 純水蒸氣壓0 aw 1水 份34第34頁，共68頁。種類 最低 最佳 最高嗜熱菌 4045 5575 6090嗜溫菌 515 3045 3547低溫菌 -55 2530 3035 嗜冷菌 -55 1215 1520 對(duì)溫度適應(yīng)能力分溫 度35第35頁，共68頁。36酸度(pH值)4.6pH0 2 4 6 7 9 14原料奶、純牛奶細(xì)菌霉菌酵母TM-00027:54PH4.6 高酸產(chǎn)品PH4.6 低酸產(chǎn)品酸性

8、乳飲料36第36頁，共68頁。厭氧菌好氧菌兼性厭氧菌微氧菌 氣 體37第37頁，共68頁。 滲透壓等滲壓高滲壓代謝活動(dòng)正常進(jìn)行代謝活動(dòng)呈抑制狀態(tài)甚至死亡低滲壓細(xì)胞吸水過分膨大破裂38第38頁，共68頁。原奶微生物39控制產(chǎn)品無微生物 細(xì)菌總數(shù)：耐熱芽孢嗜冷菌實(shí)際需要控制的微生物第39頁，共68頁。細(xì)菌總數(shù)主要：G+球菌（微球菌、鏈球菌）危害：加快產(chǎn)酸；蛋白不穩(wěn)定；貨架縮短來源：牛體、擠奶用具、盛乳容器第40頁，共68頁。耐熱芽孢主要：G+桿菌 （蠟狀、枯草、梭狀、棒狀）危害：質(zhì)量缺陷；有致病性；食物中毒來源：土壤、水、塵埃、飼料第41頁，共68頁。嗜冷菌42主要： G-桿菌 （假單胞菌占50%

9、）危害：釋放蛋白酶、脂肪酶；產(chǎn)生苦味；變質(zhì)來源：擠奶、儲(chǔ)奶設(shè)備；運(yùn)輸、加工、儲(chǔ)藏污染；巴氏殺菌后污染第42頁，共68頁。控制措施奶站車間衛(wèi)生好，清洗消毒要做到巴氏殺菌不能少，超高溫處要有效凈化處理很主要，過濾能夠除芽孢 巴氏消毒：殺滅90細(xì)菌、全部病原菌高壓蒸汽滅菌：殺滅全部微生物 管路嚴(yán)密無死角，產(chǎn)品質(zhì)量絕對(duì)高第43頁，共68頁?；仡?微生物學(xué)基本知識(shí)微生物定義微生物特點(diǎn)微生物分類聯(lián)系實(shí)際影響因素44第44頁，共68頁。 消毒、滅菌概念一 熱力滅菌二 化學(xué)消毒三第二單元 消毒、滅菌方式45第45頁，共68頁。消毒、滅菌概念概念殺死所有微生物包括芽孢和繁殖體殺死病原微生物阻止或抑制微生物生長繁

10、殖無活的微生物滅菌消毒防腐無菌46第46頁，共68頁。滅菌和消毒前提條件：清洗干凈!消毒、滅菌清洗47第47頁，共68頁。滅菌（消毒）類型溫度與時(shí)間殺菌范圍滅菌物品干熱滅菌火焰滅菌火焰灼燒全部微生物耐熱物品、接種環(huán)、試管口等熱空氣滅菌160 2 h玻璃器皿、金屬用具、等耐熱物品濕熱滅菌高壓蒸汽滅菌法12115-30min培養(yǎng)基、生理鹽水、玻璃器皿等11515-20min熱力滅菌48第48頁，共68頁。微生物蛋白變性代謝故障死亡高溫?zé)崃缇?9第49頁，共68頁。濕熱滅菌優(yōu)點(diǎn)水蒸汽穿透力強(qiáng)蒸汽凝結(jié)成水，放出潛熱，提高物體溫度濕熱滅菌比干熱效果好菌體蛋白質(zhì)吸收水分易凝固50第50頁，共68頁。

11、類別名稱常用濃度應(yīng)用范圍作用機(jī)理醇類乙醇70-75皮膚、體溫計(jì)、器械消毒脫水、蛋白質(zhì)變性表面活性劑新潔爾滅0.05-1皮膚、器械消毒破壞細(xì)胞膜、改變通透性酸類乳酸0.33-1mol/L空氣消毒 /氧化劑過氧乙酸0.2-0.5%（需嚴(yán)格控制濃度）塑料、玻璃、紡織原料及人造纖維制品；也適用于食品表面消毒（水果、蔬菜、蛋類）和環(huán)境地面消毒與蛋白質(zhì)活性基團(tuán)反應(yīng)，酶失活氯制劑漂白粉（次氯酸鈣）0.5-1.2%飲用水、廠房和用具，澄清溶液可用水果和蔬菜消毒殺死細(xì)菌芽孢鹵素氯氣0.2-1ppm飲用水消毒同上酚類來蘇爾1-2手、皮膚消毒同上3-5器械、地面消毒化學(xué)消毒51第51頁，共68頁。病原微生物蛋白酶類

12、細(xì)胞破裂溶解變性沉淀系統(tǒng)破壞破壞細(xì)胞膜殺死對(duì)非病原微生物不能全部殺死消毒防腐劑作用原理52第52頁，共68頁。紫外線消毒原理菌體吸收紫外線損壞核酸中DNA致死空氣紫外線照射產(chǎn)生臭氧殺死菌體53第53頁，共68頁?；仡?消毒、滅菌方式概念種類選用54第54頁，共68頁。 玻璃器皿清洗、包扎 培養(yǎng)基分類及制備一二第三單元 培養(yǎng)基及器皿準(zhǔn)備55第55頁，共68頁。新器皿未污染 已污染 有油圬 用過的載玻片玻璃器皿清洗、包扎清洗包扎56第56頁，共68頁。培養(yǎng)基化學(xué)成分用途物理狀態(tài)半固體液體固體增殖鑒別選擇半合成合成天然基礎(chǔ)加富厭氧特殊 培養(yǎng)基分類及制備57第57頁，共68頁。容器選擇狀態(tài)觀察pH驗(yàn)證滅菌存放注意事項(xiàng) 培養(yǎng)基制備58第58頁，共68頁?；仡櫜Ａ髅笄逑磁囵B(yǎng)基分類及制備培養(yǎng)基及器皿準(zhǔn)備59第59頁，共68頁。 接種、培養(yǎng)一生化反應(yīng)實(shí)驗(yàn)四 血清學(xué)實(shí)驗(yàn)五動(dòng)物實(shí)驗(yàn)六第四單元 微生物檢驗(yàn)基本方法 制片、染色、觀察二 增菌實(shí)驗(yàn)三60第60頁，共68頁。一個(gè)親代細(xì)胞 一個(gè)菌落檢樣 培養(yǎng)基接種和培養(yǎng)接種純培養(yǎng)分離培養(yǎng)純培養(yǎng)過程61第61頁，共68頁。獲得單個(gè)菌落傾注涂布劃線1.斜線法 2.曲線法 3.方格法 4.放射法 5.四格法62第62頁，共68頁。染色、制片、鏡檢染色方法單染法復(fù)染法苯胺黑美蘭染色革蘭氏染色63第63頁，共68頁。染色原理革蘭氏染色色差增大，